乳腺癌患者MTA1、USP28和Ezrin蛋白表达情况及临床意义.pdf

58 医药前沿 2024年1月 第14卷第2期 临床医学乳腺癌患者 MTA1、USP28 和 Ezrin 蛋白表达情况及临床意义石碧霞（江苏大学附属武进医院 乳腺外科 江苏 常州 213000）【摘要】目的：探究乳腺癌患者癌组织肿瘤转移基因 1（MTA1）、泛素特异性蛋白酶 28（USP28）和埃兹蛋白（Ezrin）表达情况及临床意义。方法：选取 2018 年 1 月2021 年 1 月江苏大学附属武进医院收治的 60 例乳腺癌患者，取其乳腺癌组织与癌旁正常组织（距病灶 3 cm），比较癌组织与癌旁正常组织 MTA1、USP28、Ezrin 蛋白的表达情况，并分析乳腺癌组织 MTA1、USP28、Ezrin 蛋白表达情况与病理特征及预后的关系。结果：癌组织中 MTA1、USP28、Ezrin 表达率高于癌旁组织，差异有统计学意义（P 0.05）。期乳腺癌患者 MTA1、USP28、Ezrin 阳性率高于期患者，差异有统计学意义（P 0.05）；淋巴转移患者 MTA1、USP28、Ezrin 阳性率高于淋巴未转移患者，差异有统计学意义（P 0.05）。MTA1、USP28、Ezrin 阳性表达病死率高于阴性表达，差异有统计学意义（P 0.05）。结论：乳腺癌患者癌组织 MTA1、USP28、Ezrin 的阳性率高于癌旁组织，且其表达情况与肿瘤分期、淋巴转移及预后关系密切。三者均可能成为判断乳腺癌预后的敏感标志物。【关键词】乳腺癌；肿瘤转移基因 1；泛素特异性蛋白酶 28；埃兹蛋白；表达水平；临床意义【中图分类号】R739.81【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2024）02-0058-03乳腺癌是病死率极高的恶性肿瘤，严重危害女性生命安全1。但目前缺乏判断该肿瘤预后的敏感指标物，对针对性生物靶向治疗指导有限，故寻找理想的生物标志物以帮助乳腺癌患者作早期诊断和治疗至关重要。肿瘤转移基因 1（metastasis-associated gene 1,MTA1）是一类能够调制肿瘤细胞迁移、侵袭、凋亡过程的基因，与肿瘤是否发生远处转移关系密切2。泛素特异性蛋白酶28（ubiquitin specific protease 28,USP28）在细胞的免疫应答、炎症反应等功能中发挥着重要作用，能够抑制细胞凋亡与调控基因表达3。埃兹蛋白（Ezrin）主要负责连接细胞骨架与细胞膜，能维持细胞正常形态及转导功能4。有研究表明，MTA1、USP28、Ezrin 的异常表达可能与肿瘤细胞的浸润、转移等恶化程度有关5。但目前关于 MTA1、USP28、Ezrin 的表达情况在乳腺癌患者病情评估中的研究结果尚少，为了更加准确高效评估乳腺癌预后，本研究随机选取60例乳腺癌患者为研究对象，探究 MTA1、USP28、Ezrin 的表达及临床意义，现报道如下。1 资料与方法1.1 一般资料选取 2018 年 1 月2021 年 1 月江苏大学附属武进医院收治的 60 例乳腺癌患者，年龄 21 70 岁，平均年龄（48.276.13）岁。纳入标准：（1）均成功接受乳腺切除术；（2）符合乳腺癌病理诊断标准6；（3）初次确诊为乳腺癌；（4）临床资料齐全；（5）对本研究内容知悉且自愿加入。排除标准：（1）患有其他恶性肿瘤；（2）患有其他乳腺疾病；（3）存在严重自身免疫缺陷；（4）精神异常。本研究经医院伦理委员会审批通过。1.2 方法取患者的乳腺癌组织与癌旁正常组织（距病灶 3 cm），检测癌组织与癌旁组织 MTA1、USP28、Ezrin 表达情况。MTA1、USP28、Ezrin 检测方法：采用免疫组织化学法对 MTA1、USP28、Ezrin 进行检测，对检测组织进行石蜡包埋和切片，再行脱蜡、水化、热修复、去除内源性过氧化氢酶处理，采用浓度为 3%羊血清封闭120 min，以 1 100 的稀释比例注入 MTA1 单克隆抗体、USP28 单克隆抗体、兔抗人 Ezrin 多克隆抗体，4 低温孵育 12 h 后二抗室温孵育 60 min，再行显色与复染（试剂盒购自于上海申启生物科技有限公司）。染色强度评分标准：无染色为 0 分，浅黄色为 1 分，棕褐色为 2 分；采用 5 个高倍视野显微镜各计数 100 个细胞评估染色面积占比，染色面积评分标准：25%为 0 分，25%染色面积 50%为 1 分，50%为 2 分。染色强度得分与染色面积得分之积 2 判定为阳性7。于患者出院后每隔 1 个月进行定期电话随访，记录患者的生存状态及生存时间，随访至 2023 年 10 月，随访终点为患者出现死亡或随访时间结束。1.3 统计学方法使用 SPSS 22.0 统计软件进行数据处理。符合正态分布的计量资料采用均数 标准差（x s）表示，比较采用 t 检验；计数资料采用频数和百分率 n（%）表示，组间比较采用2检验。以P0.05为差异有统计学意义。2 结果2.1 癌组织与癌旁组织 MTA1、USP28 及 Ezrin 表达情况比较癌组织中 MTA1、USP28 及 Ezrin 阳性率高于癌旁组织，差异有统计学意义（P 0.05），见表 1。医药前沿 2024年1月 第14卷第2期 临床医学 59表 1 癌组织与癌旁组织 MTA1、USP28 及 Ezrin 表达情况比较 n（%）组别份数MTA1USP28Ezrin阳性阴性阳性阴性阳性阴性癌旁组织6021（35.00）39（65.00）23（38.33）37（61.67）26（43.33）34（56.67）癌组织6042（70.00）18（30.00）39（65.00）21（35.00）43（71.67）17（28.33）214.7378.5439.855P 0.0010.0030.0022.2 MTA1、USP28 及 Ezrin 表达情况与乳腺癌患者临床特征的关系期乳腺癌患者 MTA1、USP28 及 Ezrin 阳性率高于期患者，差异有统计学意义（P 0.05）；淋巴转移患者 MTA1、USP28 及 Ezrin 阳性率高于未发生淋巴转移患者，差异有统计学意义（P 0.05），见表 2。表 2 MTA1、USP28 及 Ezrin 表达情况与乳腺癌患者临床特征的关系病理特征例数MTA1USP28Ezrin阳性（n=42）阴性（n=18）t/2P阳性（n=39）阴性（n=21）t/2P阳性（n=43）阴性（n=17）t/2P年龄（x s，岁）6045.125.3847.965.401.8720.06646.735.8445.665.790.6520.51748.766.0149.355.990.3430.733是否绝经 n（%）1.0080.3150.8770.3491.3720.241是2113（61.90）8（38.10）12（57.14）9（42.86）17（80.95）4（19.05）否3929（74.36）10（25.64）27（69.23）12（30.77）26（66.67）13（33.33）肿瘤直径 n（%）1.2120.2711.1780.2780.7640.382 2 cm3724（64.86）13（35.14）26（70.27）11（29.73）28（75.68）9（24.32）2 cm2318（78.26）5（21.74）13（56.52）10（43.48）15（65.22）8（34.78）肿瘤分期 n（%）5.3900.0205.8620.01510.5870.001期3319（57.58）14（42.42）17（51.52）16（48.48）18（54.55）15（45.45）期2723（85.19）4（14.81）22（81.48）5（18.52）25（92.59）2（7.41）淋巴结转移n（%）4.5640.0336.7820.0095.1020.024是2825（89.29）3（10.71）23（82.14）5（17.86）24（85.71）4（14.29）否3217（53.13）15（46.88）16（50.00）16（50.00）19（59.38）13（40.63）分子分型 n（%）4.5100.1053.9610.1381.0250.599LuminaA/B4132（78.05）9（21.95）30（73.17）11（26.83）31（75.61）10（24.39）HER-2 阳性52（40.00）3（60.00）2（40.00）3（60.00）3（60.00）2（40.00）三阴性148（57.14）6（42.86）7（50.00）7（50.00）9（64.29）5（35.71）2.3 MTA1、USP28 及 Ezrin 表达情况与乳腺癌患者生存预后的关系随访至 2023 年 10 月，无失访病例，60 例患者中死亡 9 例，9 例患者均为 MTA1、USP28 及 Ezrin 阳性表达。MTA1、USP28 及 Ezrin 阳性表达病死率高于阴性表达，差异有统计学意义（P 0.05），见表 3。表3 不同MTA1、USP28及Ezrin表达情况乳腺癌患者的病死率n（%）标志物例数死亡2PMTA14.5380.033阳性429（21.43）阴性180（0.00）USP285.7010.017阳性399（23.08）阴性210（0.00）Ezrin4.1860.041阳性439（20.93）阴性170（0.00）3 讨论肿瘤治疗技术的不断革新使乳腺癌患者的生存率与生存质量显著提升，但仍缺乏能准确评估乳腺癌疗效与病程的有效生物标志物，不利于监测病情发展和辅助判断疾病。故探寻能准确反映患者病情及评估乳腺癌预后的标志物对于降低乳腺癌患者病死率十分重要。本研究结果发现，癌旁组织 MTA1、USP28 及 Ezrin阳性率低于癌组织（P 0.05），提示 MTA1、USP28及 Ezrin 可能参与乳腺癌的发生与发展。究其原因：MTA1 能够去除组蛋白的乙酰基，参与癌细胞的异常增殖、分化等过程。同时，MTA1 能促进肿瘤血管的生成和癌细胞 RNA 的转录，癌细胞增殖，并为肿瘤生长提供血供支持，故在乳腺癌组织中呈高阳性表达。本研究结果与刘崇等8的研究结果一致。有研究显示，在食管癌、肾癌等恶性肿瘤中，癌组织的泛素特异性蛋白酶阳性表达占比显著高于癌旁组织9-10，而该结论在本研究中再60 医药前沿 2024年1月 第14卷第2期 临床医学次得到验证，考虑可能与 USP28 通过去泛素化活性参与肿瘤细胞的形成与代谢，增强肿瘤信号传递与转录调节，从而促进肿瘤基因的表达有关，导致乳腺癌发病和恶化。有研究表明，Ezrin 在正常组织中会丧失其正常生理功能，而在癌细胞中则广泛弥散于细胞膜与细胞质11，在本研究中，乳腺癌组织的 Ezrin 阳性表达率同样高于癌旁组织，考虑与肿瘤细胞中已存在 Ezrin 亚型细胞定位改变有关12。本研究结果显示，期乳腺癌患者，MTA1、USP28及 Ezrin 阳性率高于期患者，差异有统计学意义（P 0.05）；淋 巴 转 移 患 者，MTA1、USP28 及Ezrin 阳性率高于淋巴未转移患者，差异有统计学意义（P 0.05）；且高 MTA1、USP28 及 Ezrin 阳性表达患者病死率高于阴性表达者（P 0.05）。上述结果提示MTA1、USP28 及 Ezrin 均可能是导致癌细胞发生恶化与转移的重要因子。究其原因：目前关于 MTA1 在乳腺癌转移与浸润中确切作用机制尚不明确，有研究结果表示，可能与组蛋白去乙酰转录抑制相关，MTA1 具有负调节转化生长因子 将 Smad 蛋白家族转导至细胞核蛋白的功能，降低 Smad 下游蛋白基因表达，进而使肿瘤细胞发生脉管浸润与淋巴转移13。USP28 参与下游基因的调控，且 USP28 通过去泛素化能提升 c-myc 蛋白稳定性，而 c-myc 蛋白在维持稳定的肿瘤细胞增殖分化中起着不容忽视的作用，所以高 USP28 阳性表达可使癌细胞发生扩散与转移，破坏正常组织器官结构与功能，造成感染、休克甚至死亡14。Ezrin 可作用于细胞受体，促进肿瘤细胞的完整连接、信号转导及黏附，从而抑制乳腺癌细胞的凋亡，增强乳腺癌细胞的转移与浸润，进而促进乳腺癌病情的发展15。而肿瘤细胞的不断浸润与转移会破坏正常器官结构与功能，造成感染、出血、坏死等危害，是造成恶性肿瘤患者死亡的主要原因。综上所述，乳腺癌患者癌组织 MTA1、USP28 及Ezrin 的阳性率相较于癌旁组织更高，且其表达情况与肿瘤分期、淋巴转移及预后关系密切。三者均可能成为判断乳腺癌预后的敏感标志物。【参考文献】1 冷婕，邱国春，张菠，等乳腺癌中心体调控蛋白 SEC23B 在肿瘤浸润转移中的作用及其机制研究 J中国癌症杂志，2023,33(2):152-161.2 吴海滨，赵爱国，苗雅云，等甲状腺乳头状癌组织中肿瘤转移相关基因 1、叉头翼螺旋转录因子 3 水平变化与临床病理特征及淋巴转移的关系 J陕西医学杂志，2023,52(5):613-617.3 丁长钰，龙宇鹏，杨永军，等氯喹通过上调泛素-蛋白酶体相关分子表达抑制 LPS 活化巨噬细胞的实验研究 J第三军医大学学报，2016,38(10):1111-1115.4 畅华，张雪，李白雪，等小干扰 RNA 下调埃兹蛋白表达对子宫内膜癌 HEC-1B 细胞凋亡及增殖的影响 J中国综合临床，2019,35(3):255-259.5 周敏，郝宇，付萍，等中国女性成年期体质量指数及增重量与肥胖相关乳腺癌风险标志物的关联研究J 四川大学学报（医学版），2023,54(5):978-984.6 付丽，唐小燕应重视乳腺癌的精准病理诊断 J中华医学杂志，2022,102(10):687-689.7 王清，袁勇，陆建荣，等免疫组织化学法与荧光原位杂交技术检测 861 例乳腺癌 HER-2 表达的一致性分析 J现代肿瘤医学，2021,29(10):1672-1676.8 刘崇，毛晓韵，金锋MTA1 在乳腺癌 MDA-MB-231 和 MDA-MB-435 s细胞系的表达及与ER甲基化的关系J解剖科学进展，2015,21(3):233-235,240.9 金一鸣，高娜，门学千，等泛素特异性蛋白酶 2、微 RNA-432-5p在食管癌组织中表达及临床意义 J安徽医药，2023,27(5):945-949.10 郑巳年，崔晓波，陈嘉瑜，等泛素特异性蛋白酶 4 对透明细胞肾细胞癌细胞增殖能力的影响 J浙江医学，2023,45(15):1592-1597.11 杨小林非小细胞肺癌患者埃兹蛋白、血管抑制蛋白 1 的表达与微血管密度的相关性研究 J标记免疫分析与临床，2019,26(2):259-263.12 杨亮，许文婷，赵倩，等腋窝淋巴结转移与无转移乳腺浸润性导管癌患者癌组织中差异表达蛋白的筛选与验证 J山东医药，2019,59(29):5-8.13 孙芳洲，王劲松，李春晓，等肿瘤转移相关基因 1 对宫颈癌 HeLa 细胞放疗敏感性的作用及机制 J中华肿瘤杂志，2022,44(9):962-967.14 周方方，朱晓华，荣欣欣，等泛素特异蛋白酶 20 在乳腺癌组织中的表达及其临床意义 J川北医学院学报，2017,32(5):659-661,665.15 方玲玉，侯令密，陈艳茹，等乳腺癌组织中 USP20 与 Ezrin 表达的相关性及临床意义 J现代肿瘤医学，2023,31(15):2850-2854.