RTPCR引物设计和注意事项专题培训课件.ppt

一、步骤一、步骤1.查找目的基因序列查找目的基因序列目的序列的选择目的序列的选择TNFalpha用全称用全称小鼠的小鼠的TNFalpha序列序列大鼠的大鼠的TNFalpha序列序列一、步骤一、步骤2.在线设计引物在线设计引物一、步骤一、步骤3.在线验证引物在线验证引物二、注意事项二、注意事项1.找对靶序列找对靶序列(要要cDNA，不要，不要gDNA)2.引物的位置引物的位置(5调控区、阅读框、调控区、阅读框、3调控区调控区)3.目的片段的长度目的片段的长度(定量定量100-300，定性，定性300-500bp)4.注意剪接异构体注意剪接异构体(P63为例为例)谢谢！谢谢！