洁净室区沉降菌检测基础标准操作专项规程.docx

名称：洁净室（区）沉降菌测试标准操作规程共 6 页编号：SOP-QC-002版本号：00起草:日期：变更原因：审核:日期：同意:日期：实施日期：颁发部门：质量确保部分发部门：质量总监、质量确保部、质量控制部目标 制订标准洁净室（区）沉降菌测试方法，指导沉降菌测试工作。范围适适用于洁净室（区）沉降菌测定和验证。责任QC微生物室检验员负责洁净室（区）沉降菌测试，QC主管和QA部门负责对测试数据进行统计分析。程序1. 定义 1.1. 菌落：微生物培养后，由一个或多个微生物繁殖而形成微生物集落，简称CFU。1.2. 沉降菌：经过自然沉降原理搜集在空气中活微生物粒子，经过专用培养基，在适宜条件下让其繁殖到可见菌落数。1.3. 动态测试：洁净室（区）已处于正常生产状态设备在指定方法下进行，而且有指定人员根据规范操作状态。2. 测试方法2.1. 测试过程2.1.1. 设备和培养基：恒温培养箱、购置预灌装TSA平皿或自制TSA平皿。2.2. 测试条件2.2.1. 洁净室（区）温度和相对湿度应和其生产及工艺要求相适应（无特殊要求时，温度在1826，相对湿度在45%65%为宜）。2.2.2. 风速、压差应在合格范围内。2.2.3. 动态测试。2.3. 测试方法2.3.1. 将准备好培养皿按采样点要求放置或放在沉降架上（约1.0m）。将采样台面取样位置或采样辅助设施表面消毒，打开培养皿，将培养皿盖置于已消毒位置，将培养皿置于培养皿盖上，使培养基表面充足暴露后，将培养皿盖盖上后倒置。2.3.2. 在每一只培养皿上标识好具体取样位置及取样日期，将全部培养皿在QC微生物室进行培养观察。2.4. 培养观察计数2.4.1. 全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中培养，在2025培养箱中培养3天，3035培养箱中培养2天后观察计数。2.4.2. 每批培养基应有阴性对照试验，检验培养基础身是否污染。可每次选定2只培养皿作对照培养。2.5. 计算2.5.1. 平均菌落数= M11号培养皿菌落数M22号培养皿菌落数Mnn号培养皿菌落数n培养皿总数2.5.2. 结果判定2.5.2.1. 最终止果采取平均值。但每个碟菌落数亦不得多于标准要求。2.5.2.2. 如有一个碟菌落数超出标准要求，平均却符合要求，也以不合格论。2.5.2.3. 静态测试时，若某洁净室（区）内平均菌落数超出评定标准，则必需对此区域优异行消毒，然后重新采样两次，测试结果均须合格。2.6. 注意事项2.6.1. 若培养皿上有2个或2个以上菌落重合，可分辨时仍以2个或2个以上菌落计数。2.6.2. 采取一切方法预防人为原因对样本污染。2.6.3. 因为细菌种类繁多，差异甚大，计数时通常见透射光于培养皿后面或正面仔细观察，不要漏计培养皿边缘生长菌落，并须注意细菌菌落和培养基沉淀物区分，必需时用显微镜判别。2.6.4. 采样前应仔细检验每个培养皿质量，如发觉变质、破损或污染应剔除。2.6.5. 对于沉降菌测试，符合最少采样点数时，还必需符合最小培养皿数。最少采样点数和最少培养皿见附表。2.7. 日常监控2.7.1. 对于沉降菌监控，宜设定纠偏限和警戒限 ，以确保洁净室（区）微生物浓度受到控制。应定时检测以检验微生物负荷和消毒剂效力，并做趋势分析。静态动态监控全部能够采取此方法。2.7.2. 对于沉降菌取样频次。假如出现下列情况应考虑修改，在评定以下情况后，也应确定其它项目标检测频次：2.7.2.1. 连续超出纠偏限和警戒限2.7.2.2. 停工时间比估计长2.7.2.3. 关键区域内发觉污染存在2.7.2.4. 在生产期间，空气净化系统进行任何重大维修2.7.2.5. 日常操作统计反应出倾向性数据2.7.2.6. 消毒规程改变2.7.2.7. 引发生物污染事故等2.7.2.8. 当生产设备有重大维修或增加设备时2.7.2.9. 当洁净室（区）结构或区域分布有重大变动时2.8. 洁净车间采样点分布图详见洁净区洁净度监控管理规程。2.9. 微生物试验室采样点分布图详见微生物试验室环境测试规程。相关文件和统计序号文件/统计名称文件/统计编号备注1沉降菌测试统计SOP-QC-002a-002洁净区洁净度监控管理规程SMP-QA-0153微生物试验室环境测试规程SMP-QA-031变更 /修订统计：原版本生效日期此次变更/修订原因、依据及具体变更内容附图： 最少采样点数目面 积m2洁 净 度 级 别A级 C级D级 10232210 2042220 4082240 1001642100 20040103200 40080206400 100016040131000 4001003280020063注：对于A级单向流洁净室（区），包含A级工作台，面积指是送风口表面积。对于C级以上非单向流洁净室（区），面积指是指房间面积。沉降菌测试统计编号：SOP-QC-002a-00 测试人： 测试日期： 测试时间： 测试依据： 测试等级： 级 生化培养箱型号： 编号：_使用期至：_霉菌培养箱型号：_编号：_使用期至：_培养基批号 ： 起源： 使用期至：_培养条件： 测试标准： 标准要求等级标准警戒限纠偏限培养结果测试区域培养皿号平均结论12阴性对照复核人： 复核日期：