小黑麦种子萌发对四种环境因子的响应.pdf

2024 年 4 月第 45 卷第 2 期湘南学院学报Journal of Xiangnan UniversityApr.,2024Vol.45 No.213小黑麦种子萌发对四种环境因子的响应肖敏1,2，费思恬1，唐翠芳1，宋松泉1,*（1.湘南学院 南岭现代种业研究院，湖南 郴州 423099；2.江西师范大学 生命科学学院，江西 南昌 330022）摘 要：小黑麦是一种生物产量高、环境适应性较强的优质牧草，但同一品种的种子萌发分别对多个环境因子的响应还不够清楚。本文以小黑麦1号和2号种子为材料，研究了环境因子温度、pH、NaCl和聚乙二醇-6000（PEG-6000）对种子萌发及其幼苗生长的影响。结果表明，种子在1035 中的萌发率均达到90%，在pH 48的萌发率为80%以上，但种子萌发率和随后幼苗生长的适宜温度为 2530，适宜 pH 为 56；种子在 50100 mmol/L NaCl 溶液中的萌发率高于 90%，而随后的幼苗生长量随着 NaCl 物质的量浓度的增加而显著降低；种子在质量分数为 10%25%PEG-6000溶液中能够不同程度地萌发，但萌发率和随后的幼苗生长量则随着 PEG-6000 质量分数的增加显著降低。小黑麦 1 号和 2 号种子萌发和萌发后生长的适宜条件为 2530，pH 56，小于 50 mmol/L NaCl 和质量分数 10%PEG-6000。关键词：环境因子；萌发；种子；幼苗生长量；小黑麦中图分类号：TO09 文献标志码：A DOI:10.3969/j.issn.1672-8173.2024.02.003收稿日期：2023-12-23基金项目：郴州国家可持续发展议程创新示范区建设省级专项（2022sfq06）；郴州市人民政府和湘南学院人才项目资助。作者简介：肖敏（2001），女，湖南常德人，硕士研究生，研究方向为种子生物学；通信作者：宋松泉（1957），男，北京海淀区人，教授，博士，研究方向为种子生物学。小黑麦（Triticale）是由小麦属（Triticum）和黑麦属（Secale）物种经属间有性杂交和杂种染色体数加倍而人工合成的新物种，在生产上已育成粮用、饲用和粮饲兼用的小黑麦品种。饲用小黑麦的生物产量高，植株适口性好，为畜禽所喜爱 1,2。小黑麦既可以作为粮食又能够提供大量的秸秆或者优质青草，在很大程度上解决了养殖业遇到的粗饲料、精饲料和青饲料短缺的问题，并且小黑麦的种植还具有成本低、收益大的特点 3。目前，在我国安徽、新疆、甘肃、黑龙江、河北、四川、江苏等地均有种植 3，饲用小黑麦已发展成为我国重要的冬春饲料作物之一，种植面积逐年增加。种子萌发（seed germination）是植物（特别是一年生和二年生植物）生命周期中的起始步骤，是实现种子芯片功能的前提。萌发从种子吸收水分（吸胀作用）开始到伸出胚轴结束，通常是胚根突破周围结构的过程 4。由于种子萌发容易受到机械伤害，以及病害和环境胁迫的影响，种子萌发被认为是植物生活周期中最重要和最脆弱的阶段 5。种子萌发是一个复杂的多步骤过程，在这个过程中，干燥静止的种子迅速恢复代谢活性，细胞伸长，导致种皮破裂、胚根伸出周围结构，形成幼苗，许多内源和外源因子调控种子的萌发 6-8。研究表明，温度 9、盐胁迫 1,10,11 和聚乙二醇（polyethylene glycol,PEG）处理 12 显著地影响小黑麦种子的萌发。但这些研究仅关注不同小黑麦品种的种子萌发对单个因子的响应 3，至于同一品种的种子萌发和萌发后幼苗生长分别对温度、pH、盐胁迫和 PEG 处理的响应则缺少研究。本文以小黑麦 1 号和 2 号种子为材料，研究了温度、pH、NaCl 和 PEG-6000 对同一小黑麦种子萌发和萌发后幼苗生长的影响，试图为扩大小黑麦的种植区域提供参考。1 材料和方法1.1 植物材料小黑麦 1 号（Triticale cv.No.1）和 2 号种子由长沙麦生道生物技术有限公司邝翡婷女士提供。种子的含水量分别为 7.39%和 7.54%，种子在-20 中保存备用。14湘南学院学报2024 年 4 月（第 45 卷）第 2 期1.2 种子萌发试验种子在 1%次氯酸钠溶液中表面消毒 15 min 后，用无菌水冲洗三次。将种子均匀地播种在垫有两层滤纸的培养皿（=90 mm）中，每个培养皿中播种 50 粒种子，加入 5 mL 无菌水或者不同的处理溶液，然后置于不同温度的黑暗的培养箱中萌发，重复 4 次。每隔 12 h 观察一次种子的萌发状态，试验期间保持滤纸充分湿润；萌发 72 h 时，统计萌发率，测量幼苗的生长状态。以胚根长度 2 mm 作为种子萌发的标准。1.3 温度对种子萌发的影响播种后，加入 5 mL 无菌水，然后分别置于 4、10、15、20、25、30、35、40、42、43、45 黑暗培养箱中萌发，72 h 时，统计种子的萌发率和幼苗的生长量。1.4 pH 对种子萌发的影响利用 Na2HPO4-柠檬酸和 Na2HPO4-KH2PO4化学试剂分别配置成 50 mmol/L 的 pH 4、5、6、7、8 的缓冲溶液 13。播种后，分别加入 5 mL 不同 pH 的缓冲液，然后置于 25 和黑暗中萌发。72 h 时，统计种子的萌发率和幼苗的生长量。1.5 NaCl 和 PEG-6000 对种子萌发的影响播种后，分别加入 5 mL 0、50、100、250、500 mmol/L NaCl 溶液或质量分数为 0%、10%、15%、20%、25%的 PEG-6000 溶液，然后置于 25 和黑暗中萌发。72 h 时，统计种子的萌发率和幼苗的生长量。1.6 数据处理与分析所有数据均使用 SPSS 27.0.0 软件包的单一方差分析模型进行处理，平均数差异的显著性分析采用Tukey 多重比较检验（HSD,P=0.05）14。2 结果2.1 温度对种子萌发的影响温度显著影响小黑麦 1 号和 2 号种子的萌发。萌发 72 h 时，小黑麦 1 号种子 1035 的萌发率均达到90%；4042 的萌发率显著降低；4 和 43 的萌发率为 0（图 1）。小黑麦 2 号种子的萌发趋势类似于小黑麦 1 号种子，但对 40 和 42 高温更为敏感（图 1）。例如 40 和 42，小黑麦 1 号种子的萌发率分别为 75.3%和24.0%，而小黑麦2号种子的萌发率分别为44.0%和6.7%。值得注意的是，尽管小黑麦 1 号和 2 号种子 4 萌发 72 h的萌发率为 0，但随着萌发时间的延长，种子 1035 的萌发率均逐渐增加，例如当种子萌发 240 h 时，种子的萌发率均达到 20%以上。然而，随着萌发时间的延长（超过 72 h），种子 40 和 42 的萌发率不再增加，43 持续不萌发。虽然小黑麦 1 号和 2 号的萌发种子 1042 都能形成幼苗，但幼苗的生长量包括根重、芽重、根长和芽长显著不同（P=0.05，表 1）。在种子萌发 72 h 时，幼苗的根重和根长在 25 时的生长量最大，而芽重和芽长在 2530 时达到最大值，低于和高于此范围的温度，生长量都显著下降（P=0.05，表 1）。2.2 pH 对种子萌发的影响小黑麦1号和2号种子分别在pH 4、5、6中萌发72 h时，它们的萌发率均为 90%以上；但小黑麦 1 号和 2 号种子在pH 7 和 8 萌发时，其萌发率明显下降，但萌发率仍然高于 80%（P=0.05，图 2）。尽管小黑麦 1 号和 2 号种子在 pH 48 时能够萌发，但萌发 72 h 的幼苗生长量显著不同（P=0.05，表 2）。小黑麦 1 号种子萌发适宜的 pH 为 5，而 2 号种子适宜的 pH 为 56；当低于和高于适宜的 pH 时，萌发 72 h的幼苗生长量显著降低（P=0.05，表2）。例如，小黑麦1号种子萌发72 h时，pH 4比pH 5萌发的根重、芽重、图 1 小黑麦种子萌发对不同温度的响应注：种子在不同的温度和无菌水（pH 6.2）中萌发 72 h，以胚根长度 2 mm 作为种子萌发的标准。所有的数据为每次重复 50 粒种子、4 次重复的平均值 标准误。柱子上相同的小写字母代表种子在不同的温度之间萌发无显著性差异（HSD,P=0.05）。15根长和芽长分别降低了 61%、75%、54%和 67%；pH 6 比 pH 5 萌发的根重、芽重、根长和芽长分别降低了30%、20%、24%和 19%（表 2）。表 1 小黑麦种子在不同温度中萌发的幼苗生长量品种温度/根重/(mg/plant)芽重/(mg/plant)根长/(cm/plant)芽长/(cm/plant)小黑麦 1 号102.140.29e1.540.03e0.870.04d0.310.01e1511.650.68d4.780.14d2.340.08c0.720.03d2035.292.26ab16.611.82b5.290.19b1.890.14b2539.572.92a23.360.87a7.100.16a2.680.01a3032.041.06b24.271.68a4.960.08b2.680.13a3516.131.04c12.571.08c2.710.21c1.660.10c401.980.67e1.080.45e0.080.03e0.040.02f421.410.43e1.040.29e0.360.07e0.220.02ef小黑麦 2 号101.650.05e1.220.03cd0.770.02e0.270.03ef159.631.20d4.220.33c2.050.13d0.620.04d2023.741.26c10.160.73b4.280.11c1.500.02c2537.880.07a21.530.31a6.020.16a2.400.13b3037.173.10bc23.722.17a5.520.38ab2.690.10a3531.274.35b21.041.59a5.340.13b2.310.13b402.280.83e1.640.50cd0.630.18ef0.340.07e420.580.14e0.410.18d0.190.03ef0.040.01f注：种子在不同的温度和无菌水（pH 6.2）中萌发 72 h。表中的数据为 50 粒种子 4 次重复的平均值 标准误。每列数据后面相同的小写字母代表种子在不同温度下萌发 72 h 的根重、芽重、根长和芽长之间无显著性差异（HSD,P=0.05）。肖敏，费思恬，唐翠芳，等：小黑麦种子萌发对四种环境因子的响应表 2 小黑麦种子在不同 pH 中萌发的幼苗生长量品种pH根重/(mg/plant)芽重/(mg/plant)根长/(cm/plant)芽长/(cm/plant)小黑麦 1 号48.050.67bc1.950.29c2.170.17bc0.430.04b520.570.95a7.720.76a4.680.31a1.300.07a614.476.16ab6.182.69ab3.541.28ab1.050.40a78.390.29bc2.450.14bc2.220.11bc0.450.14b83.580.61c1.520.16c1.090.07c0.260.02b小黑麦 2 号46.381.55c1.970.47b1.630.23c0.380.06b520.091.85a8.221.07a4.570.16a1.420.15a619.761.05a9.291.29a4.630.11a1.510.14a710.850.27b4.080.25b2.390.10b0.610.02b84.710.14c2.490.20b1.220.01c0.360.01b注：种子在不同的 pH 溶液和 25 中萌发 72 h。表中的数据为 50 粒种子 4 次重复的平均值 标准误。每列数据后面相同的小写字母代表种子在不同 pH 溶液中萌发 72 h 的根重、芽重、根长和芽长之间无显著性差异（HSD,P=0.05）。16湘南学院学报2024 年 4 月（第 45 卷）第 2 期2.3 盐（NaCl）胁迫对种子萌发的影响当 NaCl 的物质的量浓度（以下简称浓度）为 50 和 100 mmol/L 时，小黑麦 1 号和 2 号种子的萌发率与对照（0 mmol/L NaCl）类似，萌发率均高于 90%；当 NaCl 的浓度为 250 mmol/L 时，种子的萌发率显著下降，小黑麦 1 号种子萌发（萌发率为 36%）对 NaCl 的敏感性比 2 号种子（萌发率为 64%）高；当 NaCl 的浓度为 500 mmol/L 时，1 号和 2 号种子的萌发率均为 0（P=0.05，图 3）。表 3 小黑麦种子在不同浓度的 NaCl 溶液中萌发的幼苗生长量品种NaCl 浓度/(mmol/L)根重/(mg/plant)芽重/(mg/plant)根长/(cm/plant)芽长/(cm/plant)小黑麦 1 号036.402.51a19.191.38a7.010.15a2.400.02a5020.480.37b15.651.04b5.740.30b1.890.11b10017.860.58b5.540.64c4.180.45c0.840.12c2505.363.68c0.910.09d0.530.08d0.170.01d5000.000.00c0.000.00d0.000.00d0.000.00d小黑麦 2 号038.021.42a21.471.41a6.350.06a2.670.03a5031.493.45b13.181.75b5.620.53a1.950.19b10018.591.61c5.120.98c4.100.10b0.860.14c2501.800.19d0.810.07d0.570.07c0.180.01d5000.000.00d0.000.00d0.000.00c0.000.00d注：种子在不同浓度的 NaCl 溶液和 25 中萌发 72 h。表中的数据为 50 粒种子 4 次重复的平均值 标准误。每列数据后面相同的小写字母代表种子在不同浓度的 NaCl 溶液中萌发 72 h 的根重、芽重、根长和芽长之间无显著性差异（HSD,P=0.05）。图 3 小黑麦种子萌发对 NaCl 胁迫的响应注：种子在不同浓度的 NaCl 溶液和 25 中萌发72 h，以胚根长度 2 mm 作为种子萌发的标准。所有的数据为每次重复 50 粒种子、4 次重复的平均值 标准误。柱子上相同的小写字母代表种子在不同浓度的NaCl 溶液之间萌发无显著性差异（HSD,P=0.05）。图 2 小黑麦种子萌发对 pH 的响应注：种子在不同的 pH 和 25 中萌发 72 h，以胚根长度 2 mm 作为种子萌发的标准。所有的数据为每次重复 50 粒种子、4 次重复的平均值 标准误。柱子上相同的小写字母代表种子在不同的 pH 溶液之间萌发无显著性差异（HSD,P=0.05）。小黑麦 1 号和 2 号种子萌发后的幼苗生长量随着 NaCl 浓度的增加而显著降低（P=0.05；表 3）。例如，当 NaCl 的浓度为 50、100 和 250 mmol/L 时，小黑麦 1 号种子萌发 72 h 的根重分别比对照下降了 44%、51%和 85%，芽重分别比对照下降了 18%、71%和 95%，根长分别比对照下降了 18%、40%和 92%，芽长分别比对照下降了 21%、65%和 93%。小黑麦 2 号种子萌发后的幼苗生长量类似于小黑麦 1 号种子（表 3）。173 讨论3.1 温度对小黑麦种子萌发的影响温度是影响种子萌发的最重要的环境因素 4,15，它可以通过控制种子的吸水速率、酶活性以及细胞分裂等生理过程，来影响种子的萌发速率和萌发率 16,17。通常，低温导致酶活性降低、膜硬化、蛋白质复合物不稳定、活性氧（reactive oxygen species）积累、光合作用损伤和跨膜渗漏。同样，高温引起蛋白质伸展和聚集，膜变得更具流动性，细胞结构包括细胞器和细胞骨架发生变化 15。小黑麦1 号和 2 号种子的适宜萌发温度为 1535，高于或低于该范围的温度，种子的萌发率显著降低（图 1）。这些结果与梁莎等 9 对小黑麦种子萌发的研究结果不同，他们认为小黑麦种子萌发的适宜温度为 2530。然而，我们发现，种子萌发后幼苗生长（植株总重量）的适宜温度与萌发温度也有差异，小黑麦 1 号为 2030，小黑麦 2 号为2535（表 1）。此外，根和芽的适宜生长温度也不同，根重和根长的适宜生长温度为 25，而芽重和芽长的适宜生长温度为 2530（表 1）。最近，Kerbler 和 Wigge 15 提出，温度是一种影响全球植物分布和行为的关键环境信号，真核生物的温度感知机制才刚刚开始被了解。真核生物具有固有的温度依赖性的多分子现象，如 RNA 融化（RNA melting）、光敏色素暗逆转（phytochrome dark reversion）和蛋白质相变（protein phase 2.4 模拟干旱胁迫（PEG-6000）对种子萌发的影响小黑麦 1 号和 2 号种子在 PEG-6000 质量分数为 0 时，萌发率最高，均为 95%。随着 PEG-6000 质量分数的增加，小黑麦 1 号和 2 号种子的萌发率均显著降低；当 PEG 质量分数达到 25%时，小黑麦 1 号种子的萌发率为 6.7%，2 号种子的萌发为 0（P=0.05；表 4）。类似于萌发率的变化，小黑麦 1 号和 2 号种子萌发后的幼苗生长量也随着 PEG-6000 质量分数的增加而显著降低（P=0.05；图 4）。图 4 小黑麦种子萌发对 PEG-6000 的响应注：种子在不同质量分数的 PEG-6000 溶液和25 中萌发 72 h，以胚根长度 2 mm 作为种子萌发的标准。所有的数据为每次重复 50 粒种子、4 次重复的平均值 标准误。柱子上相同的小写字母代表种子在不同质量分数的 PEG-6000 溶液之间萌发无显著性差异（HSD,P=0.05）。肖敏，费思恬，唐翠芳，等：小黑麦种子萌发对四种环境因子的响应表 4 小黑麦种子在不同质量分数的 PEG-6000 溶液中萌发的幼苗生长量品种PEG 质量分数/%根重/(mg/plant)芽重/(mg/plant)根长/(cm/plant)芽长/(cm/plant)小黑麦 1 号033.723.18a16.472.16a5.390.36a1.790.12a105.182.31b1.540.11b2.120.94b0.310.05b151.250.50b0.900.11b0.840.29bc0.190.02bc200.350.11b0.900.04b0.130.04c0.180.02bc250.200.20b0.230.23b0.130.13c0.030.03c小黑麦 2 号044.170.82a27.211.01a7.020.25a2.860.06a107.651.05b1.790.25b3.140.22b0.510.02b151.730.48c0.840.10b0.720.05c0.170.04c200.580.21c0.390.21b0.240.04c0.080.04c250.000.00d0.000.00c0.000.00d0.000.00d注：种子在不同质量分数的 PEG-6000 溶液和 25 中萌发 72 h。表中的数据为 50 粒种子 4 次重复的平均值 标准误。每列数据后面相同的小写字母代表种子在不同质量分数的 PEG-6000 溶液中萌发 72 h 的根重、芽重、根长和芽长之间无显著性差异（HSD,P=0.05）。18湘南学院学报2024 年 4 月（第 45 卷）第 2 期transition）。温度是分子运动（molecular motion）的驱动力之一，能够影响细胞的所有组分。因此，研究种子萌发对温度的感知、转导以及器官间的差异将是今后研究的重要内容。3.2 pH 对小黑麦种子萌发的影响pH 对种子萌发和随后幼苗生长的作用可能是通过影响酶的活性、代谢活动及弱化细胞壁起作用 8,18,19。小黑麦 1 号和 2 号种子萌发的适宜 pH 分别为 5 和 56，萌发率均为 92%以上；当 pH 等于或高于 7 时，种子的萌发率明显下降（图 2）。这表明 pH 会影响小黑麦种子的萌发，以及不同的品种其萌发的适宜 pH 也有所差异。这些结果与李焰焰等 20 的结果类似，他们发现小黑麦中饲 237 种子萌发的适宜 pH 为 3.56.5，当 pH 低于 3.5 时，种子的萌发率显著下降；但他们未研究 pH 高于 6.5 对种子萌发的影响。对于种子萌发后的幼苗生长量，小黑麦 1 号种子的适宜 pH 为 5，2 号种子的适宜 pH 为 56；当 pH 超出此范围，幼苗的生长量显著降低（表 2）。这些结果与李焰焰等 20 的结果有差异；他们观察到小黑麦中饲 237 种子萌发后幼苗生长的适宜 pH 为 6.5，随着 pH 的降低，幼苗的生长量显著下降。有研究 8 发现，拟南芥种子的萌发不是由于胚根本身的延长引起的，而是由于下胚轴以及下胚轴和胚根之间的过渡区的少量细胞伸长引起的。下胚轴伸长不需要表皮和皮层细胞进行新的细胞分裂，而是依赖于胚胎发生结束后已有细胞的伸长 21，而且这种伸长与细胞壁的松弛密切相关 22。扩展蛋白（expansin）的基因表达和活性会在对生长素和 pH 下降的响应过程中被诱导，它们的作用可能是弱化细胞壁聚合物之间的非共价连接，使细胞壁松弛 23。小黑麦1 号和 2 号种子萌发的适宜 pH 为 46，可能是在此 pH 范围内，细胞壁聚合物之间的非共价连接被弱化，从而降低了胚周围结构对胚根伸出的阻力，由此促进种子萌发。3.3 盐胁迫对小黑麦种子萌发的影响盐胁迫是影响植物生长发育的主要逆境因素之一，对植物的伤害作用主要是通过渗透胁迫和离子毒害引起的 1,24,25。小黑麦 1 号和 2 号种子的萌发率在 50 mmol/L NaCl（水势()=-0.248 MPa）和 100 mmol/L NaCl（=-0.495 MPa）浓度时与对照类似，萌发率均高于 90%；但在 250 mmol/L NaCl（=-1.24 MPa）时，种子的萌发率显著下降（图 3）。种子萌发后的幼苗生长量则随着 NaCl 浓度的增加而显著降低（表 3）。这些结果与孟晨等 1 对小黑麦晋饲草 1 号和赵海明等 2 对小黑麦中饲 828 等的研究结果类似。产生这些结果的原因可能是高浓度的 NaCl 溶液本身水势较低，使种子吸水困难；以及高浓度的 Na+抑制蛋白的合成，降低酶的活性，增加膜脂的渗透性和过氧化，从而影响种子的正常生理功能 25,26。值得注意的是，种子萌发对 NaCl 的敏感性小于萌发后幼苗的生长量（图 3，表 3），表明种子萌发和萌发后生长对盐的耐性机制可能不同。3.4 模拟干旱胁迫对小黑麦种子萌发的影响种子萌发所需的最基本的环境因素是水分的可利用性（），它不但影响种子的萌发速率，也影响种群中萌发种子的比例 4,27。如果 太低（例如-1.2 MPa），种子的萌发被抑制；较高时，种子的萌发速率和萌发率增加 4。PEG-6000 是一种高分子渗压剂，其特点是本身不容易穿过细胞膜而进入细胞质，使植物细胞和组织处于水分胁迫 28。PEG-6000 已被用来模拟水分胁迫对小黑麦种子萌发的影响 29,30。我们的研究表明，随着 PEG 质量分数的增加（或者 的下降），小黑麦 1 号和 2 号种子的萌发率和萌发后的幼苗生长量显著降低（图 4，表 4）；但当 PEG-6000 的质量分数为 20%时，小黑麦 1 号和 2 号种子的萌发率仍然分别为 14%和 15.3%（图 4），表明小黑麦种子萌发具有较强的抗水分胁迫的能力。4 结论小黑麦 1 号和 2 号种子 1035 的萌发率均达到 90%，pH 48 的萌发率为 80%以上，但种子萌发和随后幼苗生长的适宜温度为 2530，适宜 pH 为 56；种子在 50100 mmol/L NaCl 溶液中的萌发率高于90%，而随后的幼苗生长量随着 NaCl 浓度的增加而显著降低；种子在质量分数 10%25%的 PEG-6000 溶液中能够萌发，但萌发率和幼苗生长量则随着 PEG-6000 质量分数的增加显著下降。这些结果表明，小黑麦种子的萌发具有较强的环境适应性，本研究结果为扩大小黑麦的种植区域提供了参考。19致谢邝翡婷女士（长沙麦生道生物技术有限公司）为本研究提供种子，并给予建设性讨论，特此致谢。参考文献 1 孟晨,鲁雪莉,王菊英,等.不同类型盐胁迫对小黑麦种子萌发的影响 J.草业学报,2023,32(12):171-180.2 赵海明,石霞,贾文娟,等.饲用小黑麦不同品种耐盐性评价筛选 J/OL 分子植物育种,2023:1-19.(2023-03-29)2024-01-16.https:/ 朱铁霞,高凯,王国成.小黑麦研究进展 J.内蒙古民族大学学报(自然科学版),2011,26(4):433-437.4 BEWLEY J D,BRADFORD K J,HILHORST H W M,et al.Dormancy and the control of germination M/Seeds.New York:Springer,2013:247-297.5 RAJJOU L,DUVAL M,GALLARDO K,et al.Seed germination and vigor J.Annual Review of Plant Biology,2012,63:507-533.6 邓志军,宋松泉,艾训儒,等.植物种子保存和检测的原理与技术 M.北京:科学出版社,2019.7 FAROOQ M A,MA W,SHEN S X,et al.Underlying biochemical and molecular mechanisms for seed germination J.International Journal of Molecular Sciences,2022,23(15):8502.8 SLIWINSKA E,BASSEL G W,BEWLEY J D.Germination of Arabidopsis thaliana seeds is not completed as a result of elongation of the radicle but of the adjacent transition zone and lower hypocotyl J.Journal of Experimental Botany,2009,60(12):3587-3594.9 梁莎,王传旗,苗彦军.温度因子对小黑麦与黑麦种子萌发的影响 J.农村实用技术,2019(6):39-40.10 黄婷,崔文鹤,解山,等.盐分胁迫对小黑麦种子萌发的生理生态性状的影响 J.种子,2010,29(4):9-11.11 周琳,牛明功,陈龙.盐胁迫对黑麦、硬粒小麦和小黑麦发芽的影响 J.河南农业科学,2010,39(1):8-10.12 李会芬,时丽冉,崔兴国,等.不同品种小黑麦萌发期耐旱性比较 J.种子,2011,30(8):23-25.13 胡兴,宋松泉.生物工程实验指南：基本技术实验原理与实践 M.北京:科学出版社,2019.14 IBM Corp.IBM SPSS Statistics for Windows,version 27.0 CP.Armonk,New York,USA,2020.15 KERBLER S M,WIGGE P A.Temperature sensing in plants J.Annual Review of Plant Biology,2023,74:341-366.16 蔺吉祥,李晓宇,张兆军,等.温度与盐碱胁迫交互作用对羊草种子萌发与幼苗生长的影响 J.草地学报,2011,19(6):1005-1009.17 LIU S J,XU H H,WANG W Q,et al.A proteomic analysis of rice seed germination as affected by high temperature and ABA treatment J.Physiologia Plantarum,2015,154(1):142-161.18 徐恒恒,黎妮,刘树君,等.种子萌发及其调控的研究进展 J.作物学报,2014,40(7):1141-1156.19 KRAHMER J,FANKHAUSER C.Environmental control of hypocotyl elongation J.Annual Review of Plant Biology,2024,75:1.1-1.31.20 李焰焰,聂传朋,董召荣.模拟酸雨对小黑麦种子萌发及幼苗生理特性的影响 J.生态学杂志,2005,24(4):395-397.21 PROCKO C,CRENSHAW C M,LJUNG K,et al.Cotyledon-generated auxin is required for shade-induced hypocotyl growth in Brassica rapa J.Plant Physiology,2014,165(3):1285-1301.22 LI L X,GALLEI M,FRIML J.Bending to auxin:Fast acid growth for tropisms J.Trends in Plant Science,2022,27(5):440-449.23 CHEBLI Y,GEITMANN A.Cellular growth in plants requires regulation of cell wall biochemistry J.Current Opinion in Cell Biology,2017,44:28-35.24 LIU M M,PAN T,ALLAKHVERDIEV S I,et al.Crop halophytism:An environmentally sustainable solution for global food security J.Trends in Plant Science,2020,25(7):630-634.25 MELINO V,TESTER M.Salt-tolerant crops:Time to deliver J.Annual Review of Plant Biology,2023,74:671-696.26 Taiz L,Mller I M,Murphy A,et al.Plant Physiology and Development M.7th ed.Oxford:Oxford University Press,2022.27 刘军,宋松泉.水稻种子生物学 M.北京:科学出版社,2024.28 MICHEL B E,KAUFMANN M R.The osmotic potential of polyethylene glycol 6000 J.Plant Physiology,1973,51(5):914-916.29 朱俊刚,王曙光,李晓燕,等.PEG胁迫对六倍体小黑麦幼苗SOD,POD活性及MDA含量的影响 J.中国农学通报,2009,25(18):202-204.30 赵方媛,田新会,杜文华.PEG-6000 模拟干旱胁迫对 15 个小黑麦品系苗期生理特性的影响 J.干旱地区农业研究,2019,37(5):106-113.肖敏，费思恬，唐翠芳，等：小黑麦种子萌发对四种环境因子的响应