14.-妊娠及新生儿的生物化学检验.ppt

14.-妊娠及新生儿的生物化学妊娠及新生儿的生物化学检验掌握掌握:妊娠与相关疾病常用化学指标（妊娠与相关疾病常用化学指标（HCG、E3、Prog、AFP）的检测；胎儿肺成熟度评价）的检测；胎儿肺成熟度评价熟悉熟悉:正常妊娠；临床生化检验项目在妊娠相关正常妊娠；临床生化检验项目在妊娠相关疾病诊治中的应用；产前与新生儿筛查的生物化疾病诊治中的应用；产前与新生儿筛查的生物化学检验学检验了解了解：正常妊娠母体和胎儿的生物化学改变；胎：正常妊娠母体和胎儿的生物化学改变；胎儿纤维连接蛋白、抑制素儿纤维连接蛋白、抑制素A A、妊娠相关血浆蛋白、妊娠相关血浆蛋白测定测定n本章教学要求本章教学要求：2妊娠：是胚胎及胎儿在母体内发育成长的复妊娠：是胚胎及胎儿在母体内发育成长的复杂过程杂过程新生儿期：自分娩出结扎脐带起至出生后满新生儿期：自分娩出结扎脐带起至出生后满2828天天第一节 概述3一、正常妊娠一、正常妊娠（一）妊娠、胚胎和胎儿发育（一）妊娠、胚胎和胎儿发育从末次月经第一天算起，妊娠期通常持续从末次月经第一天算起，妊娠期通常持续280天天（40周），正常分娩发生在周），正常分娩发生在37-42周。全程分周。全程分为为3个时期：个时期：早期妊娠：早期妊娠：0-13周周中期妊娠：中期妊娠：14-27周周晚期妊娠：晚期妊娠：28周以后周以后4567（二）胎盘（二）胎盘 是胎儿与母体之间物质交换的重要器官，是胚是胎儿与母体之间物质交换的重要器官，是胚胎与母体组织的结合体，由胎儿部分羊膜、叶状胎与母体组织的结合体，由胎儿部分羊膜、叶状绒毛与母体部分底蜕膜构成。具有多种功能。绒毛与母体部分底蜕膜构成。具有多种功能。81.1.胎盘的功能胎盘的功能 胎盘具有物质交换、代谢、分泌激素、防御胎盘具有物质交换、代谢、分泌激素、防御以及合成功能，是维持胎儿在子宫内营养发育的以及合成功能，是维持胎儿在子宫内营养发育的重要器官。重要器官。9不转运不转运大多数蛋白质；甲状腺素；大多数蛋白质；甲状腺素；母体母体IgMIgM、IgAIgA；母体和胎儿红细胞母体和胎儿红细胞限制性被动运限制性被动运输输游离甾体类化合物；甾体类硫酸盐；游离甾体类化合物；甾体类硫酸盐；游离脂肪酸游离脂肪酸被动运输被动运输分子量分子量5kD5kD、脂溶性物质；、脂溶性物质；氧氧、二二氧氧化化碳碳；钠钠、氯氯、尿尿素素、乙乙醇醇等等跨细胞膜主动跨细胞膜主动运输运输葡萄糖葡萄糖；多种氨基酸；多种氨基酸；CaCa2+2+受体介导的细受体介导的细胞摄取胞摄取母体母体IgGIgG、胰岛素、胰岛素、低密度脂蛋白、低密度脂蛋白胎盘运输方式胎盘运输方式102.2.胎盘激素胎盘激素妊娠期雌激素妊娠期雌激素75%75%95%95%来源于胎儿来源于胎儿-胎盘复合体胎盘复合体蛋白类激素蛋白类激素 hCGhCG、胎盘催乳素（胎盘催乳素（placental lactogen,PLplacental lactogen,PL）等等 类固醇激素类固醇激素 孕酮（孕酮（ProgProg）、雌酮（）、雌酮（E E1 1）、）、雌二醇（雌二醇（E E2 2）和和雌三雌三醇醇（E E3 3）等等11（三）羊水（三）羊水羊水：羊水：胚胎发育期间羊膜腔内的液体胚胎发育期间羊膜腔内的液体。为。为胎儿在子宫内生活的环境，由胎盘、胎儿胎儿在子宫内生活的环境，由胎盘、胎儿肾脏、肺、皮肤及羊膜等器官产生，体积肾脏、肺、皮肤及羊膜等器官产生，体积和化学组成被控制在一个动态的范围内，和化学组成被控制在一个动态的范围内，其功能是其功能是保护胎儿和减少胎动引起的母体保护胎儿和减少胎动引起的母体不适感。不适感。121.1.羊水的来源羊水的来源早期：由母体血清通过胎膜进入羊膜腔的透析液，早期：由母体血清通过胎膜进入羊膜腔的透析液，类似于细胞外液。类似于细胞外液。中期：胎儿尿可能为羊水重要来源。钠离子浓度中期：胎儿尿可能为羊水重要来源。钠离子浓度和渗透压降低，尿素、肌酐和尿酸浓度增加，羊和渗透压降低，尿素、肌酐和尿酸浓度增加，羊水表面活性蛋白质增加。水表面活性蛋白质增加。2.2.羊水量羊水量 随妊娠时间而不同随妊娠时间而不同 10周周30ml 20周周40ml 38周周1000ml 足月足月800ml133.3.羊水颜色和透明度羊水颜色和透明度妊娠早期妊娠早期(early trimester of pregnancy)：无色或淡黄色、清晰、透明；：无色或淡黄色、清晰、透明；妊娠晚期妊娠晚期(late trimester of pregnancy)：乳白色、清晰或稍混浊。：乳白色、清晰或稍混浊。14二、母体及胎儿的生物化学改变二、母体及胎儿的生物化学改变1、血液学变化、血液学变化2、物质代谢变化、物质代谢变化3、肾功能变化、肾功能变化4、内分泌变化、内分泌变化（一）母体适应（一）母体适应16（二）胎儿功能发育（二）胎儿功能发育妊娠妊娠10周内的人胚称为胚胎，自周内的人胚称为胚胎，自11周称胎儿，周称胎儿，是生长成熟的时期。胚胎和胎儿功能发育主是生长成熟的时期。胚胎和胎儿功能发育主要表现在以下几个方面要表现在以下几个方面1、肺功能：羊水泡沫试验、肺功能：羊水泡沫试验、L/S等等2、肝功能：结合胆红素、肝功能：结合胆红素3、肾功能：葡萄糖、肌酐、肾功能：葡萄糖、肌酐4、血红蛋白、血红蛋白17第二节 妊娠相关的生物化学检验一、妊娠与相关疾病一、妊娠与相关疾病（一）人绒毛膜促性腺激素（一）人绒毛膜促性腺激素（HCG）定义：定义：妇女受精卵移行至子宫内着床后形成胚胎，妇女受精卵移行至子宫内着床后形成胚胎，由由胎盘滋养胎盘滋养层细胞层细胞分泌产生，具有促性腺发育分泌产生，具有促性腺发育的的一种一种糖蛋白糖蛋白激素。激素。结构结构:两个肽链：两个肽链：多肽链（分子量多肽链（分子量1.71.7万）万）多肽链多肽链（分子量（分子量3.23.2万）万）HCGHCG特有特有18检测方法检测方法1、定性检查、定性检查（1）血凝抑制试验和胶乳凝集抑制试验）血凝抑制试验和胶乳凝集抑制试验（2）尿液）尿液HCG定性试验：胶体金法定性试验：胶体金法2、定量检查：、定量检查：时间分辨免疫荧光分析、时间分辨免疫荧光分析、ELISA、化学发光或电化学发光免疫方法、化学发光或电化学发光免疫方法19单克隆抗体胶体金标记免疫层析定性检查单克隆抗体胶体金标记免疫层析定性检查 A:吸水材料，试纸条上端吸水材料，试纸条上端B：吸水材料，试纸条下端：吸水材料，试纸条下端C：金标区（：金标区（金标记金标记鼠鼠IgG、金标记、金标记鼠抗人鼠抗人-HCG单抗单抗）T：测试区：测试区 羊羊抗抗人人HCGHCG多多抗抗R：质控区：质控区 羊抗鼠羊抗鼠IgGIgG抗体抗体20 质控线：质控线：羊抗鼠羊抗鼠IgGIgG抗体抗体+金标记金标记鼠鼠IgGIgG 紫红色紫红色 反应线：反应线：金标记金标记鼠抗人鼠抗人-HCG-HCG单抗单抗+人尿液人尿液HCGHCG抗抗原（有原（有/无）无）+羊羊抗抗人人HCGHCG多多抗抗双抗体夹心法双抗体夹心法21参考区间参考区间HCG 定性：非孕期阴性，妊娠后阳性定性：非孕期阴性，妊娠后阳性定量：定量：6U/L临床意义临床意义1.1.早期妊娠诊断早期妊娠诊断 血清中血清中HCGHCG略高于尿中，略高于尿中，用用ELISAELISA和胶体金标记法，在妊娠后和胶体金标记法，在妊娠后7 71010天即能测出。天即能测出。23242.2.滋养层滋养层细胞细胞肿瘤诊断及预后判断：肿瘤诊断及预后判断：葡萄胎、恶性葡萄胎、恶性 葡萄胎、绒毛膜上皮癌、男性睾丸畸胎瘤等葡萄胎、绒毛膜上皮癌、男性睾丸畸胎瘤等，尿尿HCGHCG，且较正常妊娠妇女明显增高。，且较正常妊娠妇女明显增高。3.3.协助诊断异位妊娠及流产协助诊断异位妊娠及流产（1 1）异位妊娠异位妊娠（宫外孕）（宫外孕）约约5 50%0%尿尿HCGHCG阳性阳性 如果如果4848小时内血清小时内血清HCGHCG升高程度升高程度60%60%，则异位妊娠，则异位妊娠的可能性大，的可能性大，宫外孕血清孕酮水平较低宫外孕血清孕酮水平较低（2 2）不全流产不全流产 H HCGCG持续阳性持续阳性 完全流产完全流产 H HCGCG由阳性转阴性由阳性转阴性25（二）胎盘催乳素（二）胎盘催乳素（PL）胎盘催乳素（胎盘催乳素（PL）也称绒毛膜促生长催乳素）也称绒毛膜促生长催乳素（hCS）。）。hPL也是由也是由胎盘合体滋养层细胞胎盘合体滋养层细胞产生与产生与分泌，分泌后大部分进入绒毛间歇和胎盘血窦，很分泌，分泌后大部分进入绒毛间歇和胎盘血窦，很少出现于胎体内。少出现于胎体内。妊娠妊娠4-5周左右可在血清中检测出周左右可在血清中检测出PL，15-30周迅速周迅速上升，上升，34周达高峰，周达高峰，在分娩前胎盘分泌在分娩前胎盘分泌PL量达量达1-2g/24h，是所有已知人类激素中分泌量最高的激素，是所有已知人类激素中分泌量最高的激素，产后迅速下降，产后产后迅速下降，产后2小时即不能检测出来。小时即不能检测出来。26检测方法检测方法ELISA、CLIA、ECLIA参考区间参考区间未妊娠妇女：未妊娠妇女：0.5mg/L妊娠妊娠22周：周：妊娠妊娠30周：周：妊娠妊娠42周：周：3-8mg/L27临床意义临床意义1、妊娠期、妊娠期PL异常增高：妊娠期糖尿病、母子血异常增高：妊娠期糖尿病、母子血型不合型不合2、PL减低：胎盘功能低下、妊娠期高血压、子减低：胎盘功能低下、妊娠期高血压、子娴前期、子娴、异位妊娠、葡萄胎、先兆流产、娴前期、子娴、异位妊娠、葡萄胎、先兆流产、胎儿宫内发育迟缓、胎儿宫内窒息等胎儿宫内发育迟缓、胎儿宫内窒息等3、葡萄胎患者葡萄胎患者血中血中PL减低，减低，HCG明显升高，明显升高，因此因此HCG/PL 比值比正常妊娠高比值比正常妊娠高100倍倍。28（三）雌三醇（三）雌三醇（E3）E3E3是雌二醇的代谢产物，约占总量是雌二醇的代谢产物，约占总量90%90%的的E3E3来自来自胎儿肾上腺合成的胎儿肾上腺合成的硫酸脱氢表雄酮（硫酸脱氢表雄酮（DHEASDHEAS），其余部分来自胎儿的其余部分来自胎儿的E2E2和母体的和母体的DHEASDHEAS。胎盘合成的胎盘合成的E3E3通过母体血液循环在通过母体血液循环在肝脏肝脏代谢，代谢，和硫酸或葡萄醛酸结合形成结合性和硫酸或葡萄醛酸结合形成结合性E3E3，再经尿，再经尿排出。排出。母体血液中的母体血液中的E3E3以结合和未结合（以结合和未结合（uE3uE3）两种形式存在。胎儿产生的是两种形式存在。胎儿产生的是uE3uE3。29检测方法检测方法ELISA、CLIA、ECLIA、时间荧光免疫分析、时间荧光免疫分析参考区间参考区间未妊娠妇女：未妊娠妇女：妊娠妊娠21周：周：妊娠妊娠35周：周：妊娠妊娠41-42周：周：羊水：，羊水：，2MoM，且羊水胆碱酯酶活性升高，则应考虑脊，且羊水胆碱酯酶活性升高，则应考虑脊柱裂、无脑儿、腹裂、脐膨出的可能。柱裂、无脑儿、腹裂、脐膨出的可能。37二、母体健康评价二、母体健康评价1、妊娠前：血常规、尿常规、妊娠前：血常规、尿常规、ABO血型鉴定、血型鉴定、Rh血型鉴定、红细胞抗体筛查、肝肾功能、人乳头状血型鉴定、红细胞抗体筛查、肝肾功能、人乳头状瘤病毒（瘤病毒（HPV）检测、风疹病毒效价、快速血浆反）检测、风疹病毒效价、快速血浆反应素试验、脱落细胞涂片、淋病奈瑟菌培养、梅毒应素试验、脱落细胞涂片、淋病奈瑟菌培养、梅毒螺旋体检查、衣原体检测、乙肝五项、螺旋体检查、衣原体检测、乙肝五项、HIV、HCV检测、禁忌药物的筛查。检测、禁忌药物的筛查。2、补充叶酸以减少胎儿神经管病变的风险。、补充叶酸以减少胎儿神经管病变的风险。3、妊娠、妊娠24-28周，进行葡萄糖耐量试验来筛查妊娠周，进行葡萄糖耐量试验来筛查妊娠性糖尿病。性糖尿病。4、24-30周筛查妊娠妇女早产的风险。周筛查妊娠妇女早产的风险。38三、胎儿健康评价三、胎儿健康评价包括胎儿成熟度评价和胎儿先天性缺陷的筛查。包括胎儿成熟度评价和胎儿先天性缺陷的筛查。胎儿肺成熟度（胎儿肺成熟度（FLM）评价是目前最主要的评价是目前最主要的胎儿成熟度评价方式，能帮助判断围生期胎胎儿成熟度评价方式，能帮助判断围生期胎儿能否获得最佳生存、对分娩时机选择，降儿能否获得最佳生存、对分娩时机选择，降低低新生儿特发性呼吸窘迫综合征（新生儿特发性呼吸窘迫综合征（IRDS），提高生存率具有重要意义。提高生存率具有重要意义。39卵磷脂鞘磷脂比值（卵磷脂鞘磷脂比值（L LS S）泡沫稳定性实验（泡沫稳定性实验（FSIFSI）荧光偏振荧光偏振(FPA)FPA)薄层小体计数薄层小体计数羊水双饱和磷脂酰胆碱（羊水双饱和磷脂酰胆碱（DSPCDSPC）测定）测定磷脂酰甘油磷脂酰甘油(PG)PG)测定测定胎儿肺成熟度评价试验胎儿肺成熟度评价试验胎儿肺成熟度评价试验胎儿肺成熟度评价试验40卵磷脂（卵磷脂（L）与鞘磷脂（）与鞘磷脂（S）是肺泡表面活性物质）是肺泡表面活性物质的主要成分，可维持肺的稳定性，在胎儿出生后的主要成分，可维持肺的稳定性，在胎儿出生后能保障生命所必需的气体交换。能保障生命所必需的气体交换。薄层层析色谱法（薄层层析色谱法（TLC）（一）卵磷脂（一）卵磷脂/鞘磷脂比值（鞘磷脂比值（L/S）检测方法检测方法参考区间参考区间L/S比值比值2.0 L/S1.49:表示肺脏不成熟，表示肺脏不成熟，IRDS(特发性呼特发性呼吸窘迫综合征吸窘迫综合征)严重；严重；L/S为为1.501.99:表示肺脏发育不够成熟，有表示肺脏发育不够成熟，有IRDS可能；可能；L/S为为2.03.4:表示肺脏已成熟；表示肺脏已成熟；L/S为为3.53.9:表示肺脏肯定成熟；表示肺脏肯定成熟；L/S4.0:表示过熟儿。表示过熟儿。临床意义临床意义羊水中的肺泡表面活性物质饱和磷脂是既亲水又羊水中的肺泡表面活性物质饱和磷脂是既亲水又亲脂的两性界面物质，具有一定的表面张力，其在亲脂的两性界面物质，具有一定的表面张力，其在乙醇中振荡后形成的泡沫可维持数小时，并形成稳乙醇中振荡后形成的泡沫可维持数小时，并形成稳定泡沫层。定泡沫层。而羊水中的蛋白质、胆盐、游离脂肪酸及不饱和而羊水中的蛋白质、胆盐、游离脂肪酸及不饱和磷脂也能形成泡沫，但乙醇能消除这些物质所形成磷脂也能形成泡沫，但乙醇能消除这些物质所形成的泡沫。的泡沫。（二）泡沫稳定指数（二）泡沫稳定指数（FSI）检测方法检测方法在固定体积的未稀释羊水中，逐渐增加在固定体积的未稀释羊水中，逐渐增加乙醇量并混合，在羊水能够支持泡沫稳乙醇量并混合，在羊水能够支持泡沫稳定的情况下，记录所需乙醇的最大体积。定的情况下，记录所需乙醇的最大体积。参考区间参考区间FSI0.47为肺成熟为肺成熟 44（三）荧光偏振（三）荧光偏振（FPA）FPA是目前最普遍使用的定量方法。是目前最普遍使用的定量方法。在羊水中加入荧光染料在羊水中加入荧光染料NBD-卵磷脂（卵磷脂（NBD-PC）时，时，NBD-PC可渗入磷脂形成的微粒和聚集体中，可渗入磷脂形成的微粒和聚集体中，具有表面活性的磷脂含量越高，荧光偏振值越低。具有表面活性的磷脂含量越高，荧光偏振值越低。荧光染料荧光染料PC-16不仅可与脂质微粒结合，也可与不仅可与脂质微粒结合，也可与白蛋白结合，由于羊水中白蛋白含量相对恒定，白蛋白结合，由于羊水中白蛋白含量相对恒定，同样可作为参照，用含磷脂和白蛋白的校正液进同样可作为参照，用含磷脂和白蛋白的校正液进行校正，报告单位为磷脂行校正，报告单位为磷脂/白蛋白（白蛋白（mg/g）45检测方法检测方法TDxFLM II 法、法、NBD-PC法法参考区间参考区间正常妊娠末：正常妊娠末：磷脂磷脂/白蛋白白蛋白70mg/gNBD-PC:0.5%，会降低，会降低P值结值结果。以果。以230mP为明显成熟、为明显成熟、290mP为为不成熟不成熟。u磷脂磷脂/清蛋白（清蛋白（mg/g）临界值是）临界值是70mg/g清清蛋白蛋白。临床意义临床意义（四）薄层小体计数（四）薄层小体计数（LB）LB是肺泡是肺泡II型细胞质中的特殊结构，是肺表面活型细胞质中的特殊结构，是肺表面活性物质在细胞内存储的地方，它通过胞吐作用到性物质在细胞内存储的地方，它通过胞吐作用到达肺泡表面，可进入羊水中，因此在羊水中检测达肺泡表面，可进入羊水中，因此在羊水中检测中可用于评价中可用于评价FLM。检测方法检测方法使用标准血细胞计数仪的使用标准血细胞计数仪的血小板通道血小板通道直接计数。直接计数。48参考区间参考区间LB计数计数50000/ul 临床意义临床意义LB计数计数50000/ul表示胎儿肺成熟表示胎儿肺成熟16000-49000/ul表示过度状态表示过度状态15000 表示胎儿肺不成熟表示胎儿肺不成熟49教学资料整理仅供参考，