微生物学检验肝炎病毒及检验.ppt

微生物学微生物学检验肝炎肝炎病毒及病毒及检验甲型肝炎病毒甲型肝炎病毒q是引起甲型肝炎的病原体是引起甲型肝炎的病原体生物学形状生物学形状属肠道病毒属肠道病毒72型型形态：呈球形形态：呈球形结构：直径结构：直径2732nm,单股正链单股正链RNA，无包膜，无包膜动物模型：黑猩猩对动物模型：黑猩猩对HAV易感易感 细胞培养：原代猕猴肝细胞、猴胚肾细胞，一般不细胞培养：原代猕猴肝细胞、猴胚肾细胞，一般不产生细胞病变产生细胞病变抗原型别单一抗原型别单一抵抗力：抵抗力强，对乙醚抵抗力：抵抗力强，对乙醚、酸、热等较稳定、酸、热等较稳定致病性与免疫性致病性与免疫性q传染源：病人传染源：病人q传染方式：粪口途径传染方式：粪口途径q致病机制：致病机制：在肝细胞内增殖，不直接造成肝细胞损伤，在肝细胞内增殖，不直接造成肝细胞损伤，免疫病理作用导致肝细胞损伤免疫病理作用导致肝细胞损伤q免疫性：免疫性：刺激机体产生抗刺激机体产生抗HAV IgG和和IgM 抗抗HAVIgG对再感染具有免疫力对再感染具有免疫力微生物学检查微生物学检查免疫电镜检测病毒颗粒免疫电镜检测病毒颗粒免疫学方法检测病毒抗原免疫学方法检测病毒抗原检测抗检测抗HAVIgM是确诊甲型肝炎的依据是确诊甲型肝炎的依据 方法：方法：ELISA法和放射免疫测定法和放射免疫测定PCR法：检测病毒核酸法：检测病毒核酸检测抗检测抗HAVIgG主要用于流行病学调查主要用于流行病学调查防治原则防治原则q特异性预防：接种甲型肝炎病毒减毒活疫苗特异性预防：接种甲型肝炎病毒减毒活疫苗q紧急预防：肌肉注射丙种球蛋白紧急预防：肌肉注射丙种球蛋白q一般性预防：加强饮水和食品的卫生监督管一般性预防：加强饮水和食品的卫生监督管理理乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒q是引起乙型肝炎的病原体是引起乙型肝炎的病原体q乙型肝炎易发展为慢性乙肝乙型肝炎易发展为慢性乙肝q乙肝病毒在世界范围内传播乙肝病毒在世界范围内传播q乙肝病毒携带者达乙肝病毒携带者达10以上以上生物学形状生物学形状形态与结构形态与结构大球形颗粒大球形颗粒:又称又称Dane颗粒，是完整的颗粒，是完整的HBV小球形颗粒小球形颗粒:是病毒组装后过剩的衣壳蛋白是病毒组装后过剩的衣壳蛋白管形颗粒：由小球形颗粒串连而成管形颗粒：由小球形颗粒串连而成 乙肝病毒的基因乙肝病毒的基因短链：为正链，长度是长链的短链：为正链，长度是长链的50100长链：为负链，含长链：为负链，含HBV全部遗传信息全部遗传信息 S区区：编码：编码HBsAg和前和前S1抗原和前抗原和前S2抗原抗原 C区区：编码：编码HBcAg和和HBeAg P区区：编码：编码DNA 多聚酶多聚酶 X区区：编码：编码HBxAg(可能与肝癌发生有关可能与肝癌发生有关)乙肝病毒的复制方式乙肝病毒的复制方式吸吸附附、穿穿入入肝肝细细胞胞脱脱壳壳转译外衣壳蛋白转译外衣壳蛋白转译内衣壳蛋白转译内衣壳蛋白前基前基因组因组复制子代核酸复制子代核酸组装组装释放释放HBV的抗原组成的抗原组成 HBsAg:以三种不同形式存在于患者血清中以三种不同形式存在于患者血清中HBsAg亚型的分布有明显地区差异亚型的分布有明显地区差异,并与种族有关并与种族有关血清血清HBsAg是感染是感染HBV的重要标志的重要标志HBsAg刺激机体产生的抗刺激机体产生的抗-HBs是中和抗体是中和抗体,对机体对机体有保护作用有保护作用关于前关于前S1和前和前S2抗原抗原 HBcAg存在于存在于DaneDane颗粒中颗粒中不易在血液中检出不易在血液中检出可在感染的肝细胞表面存在可在感染的肝细胞表面存在刺激机体产生抗刺激机体产生抗-HBc-HBc（IgGIgG、IgMIgM）血清抗血清抗-HBcIgM-HBcIgM的检出，表明病毒在肝细的检出，表明病毒在肝细胞中复制胞中复制 HBeAg存在于存在于DaneDane颗粒中颗粒中游离存在于血液中游离存在于血液中是病毒复制及强传染性的指标是病毒复制及强传染性的指标产生抗产生抗HBeHBe，是预后良好的征象，是预后良好的征象突变株可不产生突变株可不产生HBeAgHBV其他生物学性状其他生物学性状培养培养:黑猩猩是黑猩猩是HBV最敏感的动物模型最敏感的动物模型 细胞培养已获成功细胞培养已获成功抵抗力抵抗力:强强 能耐受低温、紫外线、干燥和一般消毒剂能耐受低温、紫外线、干燥和一般消毒剂10010分钟、高压蒸汽灭菌、分钟、高压蒸汽灭菌、0.5过氧过氧 乙酸乙酸等能使等能使HBV灭活灭活传染源与传播途径传染源与传播途径传染源：乙肝病人、无症状病毒携带者传染源：乙肝病人、无症状病毒携带者传播途径：血液、血制品等途径传播母婴垂直传传播途径：血液、血制品等途径传播母婴垂直传播播临床表现：临床表现：无症状携带者无症状携带者 急性乙肝急性乙肝 慢性乙肝暴发性肝炎慢性乙肝暴发性肝炎 肝外表现：发热、皮疹、血管炎等肝外表现：发热、皮疹、血管炎等致病机制致病机制细胞免疫介导的免疫损伤细胞免疫介导的免疫损伤免疫复合物性的免疫损伤：肝外损伤免疫复合物性的免疫损伤：肝外损伤自身免疫反应的免疫损伤自身免疫反应的免疫损伤病毒变异：逃逸免疫病毒变异：逃逸免疫免疫性免疫性抗抗-HBs：一般于感染后：一般于感染后45月阳转，持续月阳转，持续6个月或数年，是个月或数年，是保护性抗体保护性抗体抗抗-HBc：一般于感染后：一般于感染后35周阳转，无保周阳转，无保护作用，护作用，IgM可作为急性一干的诊断指标，可作为急性一干的诊断指标，IgG是是HBV既往感染的指标既往感染的指标抗抗-HBe：一般在：一般在HBeAg消失时出现，是病消失时出现，是病情开始恢复的征兆情开始恢复的征兆HBV诱导免疫应答对机体的双重作用诱导免疫应答对机体的双重作用免疫保护作用免疫保护作用 抗抗HBS和抗前和抗前S对病毒的中和作用对病毒的中和作用 CTL对细胞内病毒的清除作用对细胞内病毒的清除作用免疫损伤作用免疫损伤作用 肝细胞损伤肝细胞损伤 肝外损伤肝外损伤机体免疫状态与机体免疫状态与HBV感染的转归感染的转归免疫功能正常隐性感染或急性乙肝，病免疫功能正常隐性感染或急性乙肝，病毒被清除毒被清除免疫低下慢性乙肝免疫低下慢性乙肝免疫过强暴发性肝炎免疫过强暴发性肝炎免疫耐受免疫耐受HBV无症状携带无症状携带HBV与原发性肝癌与原发性肝癌流行病学方面流行病学方面动物模型动物模型病毒分子结构病毒分子结构微生物学检查微生物学检查HBV抗原抗体系统的检测抗原抗体系统的检测HBV五项指标五项指标 HBsAg、抗、抗HBs HBeAg、抗、抗HBe 抗抗HBcHBV抗原抗体检测的应用抗原抗体检测的应用乙型肝炎的诊断乙型肝炎的诊断判断传染性判断传染性判断预后判断预后筛选献血员筛选献血员检测疫苗接种效果检测疫苗接种效果流行病学调查流行病学调查HBV抗原抗体检测结果的临床分析抗原抗体检测结果的临床分析HBsAgHBeAg抗抗-HBs抗抗-HBe抗抗-HBc结果分析结果分析 HB V感染或无症状携带感染或无症状携带 急慢性乙肝或无症状携带急慢性乙肝或无症状携带 急慢性乙肝（大三阳）急慢性乙肝（大三阳）趋于恢复（小三阳）趋于恢复（小三阳）既往感染恢复期既往感染恢复期 既往感染或接种过疫苗既往感染或接种过疫苗防治原则防治原则控制传染源，切断传播途径控制传染源，切断传播途径人工自动免疫：人工自动免疫：疫苗（血源性、基因工程疫苗（血源性、基因工程)人工被动免疫：人工被动免疫：高效价人血清球蛋白（高效价人血清球蛋白（HBIgHBIg）丙型肝炎病毒（丙型肝炎病毒（HCV）球形，有包膜，属球形，有包膜，属RNA病毒病毒传染源：病人、病毒携带者传染源：病人、病毒携带者传播途径：输血、注射、性接触等传播途径：输血、注射、性接触等引起丙型肝炎引起丙型肝炎比乙型肝炎更易转为慢性比乙型肝炎更易转为慢性病后免疫力不牢固病后免疫力不牢固ELISA法检测抗法检测抗HCV抗体抗体丁型肝炎病毒（丁型肝炎病毒（HDV）属缺陷病毒，由属缺陷病毒，由HBsAg构成其外壳构成其外壳经输血等途径传播经输血等途径传播只感染只感染HBsAg阳性的人阳性的人与与HBV协同或同时感染协同或同时感染戊型肝炎病毒（戊型肝炎病毒（HEV）球形，无包膜，属球形，无包膜，属RNA病毒病毒传染源：病人传染源：病人传播途径：粪口途径传播途径：粪口途径病情较重，孕妇感染死亡率高病情较重，孕妇感染死亡率高乙肝病毒感染经过与免疫反应关系（隐性感染）乙肝病毒感染经过与免疫反应关系（隐性感染）HBsAg抗抗HBs抗抗HBc(IgG)抗抗HBeHBeAg0 3月月 5月月 8月月 1年年 5年年乙肝病毒感染经过与免疫反应关系（慢性持续性肝炎）乙肝病毒感染经过与免疫反应关系（慢性持续性肝炎）HBsAg抗抗HBc(IgG)抗抗HBe0 3月月 1年年 10年年 20年年 30年年HBeAgHBV基因结构基因结构环状双股不完全闭合环状双股不完全闭合的的DNA长链有长链有4个开放读码个开放读码框架，分别为：框架，分别为：S区区C区区P区区X区区长链长链短链短链DNA聚合酶聚合酶乙肝病毒的复制乙肝病毒的复制乙肝病毒的三种颗粒乙肝病毒的三种颗粒Dane颗粒颗粒核心：双股不完全闭合的核心：双股不完全闭合的DNA 和和DNA 聚合酶聚合酶内衣壳：内衣壳：20面立体对称面立体对称外衣壳：相当于病毒的包膜外衣壳：相当于病毒的包膜Dane结构结构HBV感染的分布感染的分布甲型肝炎病程甲型肝炎病程HAV体内过程体内过程HAV电镜图电镜图HAV病毒结构病毒结构逆转录病毒逆转录病毒逆转录病毒是一组含有逆转录酶的逆转录病毒是一组含有逆转录酶的RNA病毒。病毒。人类免疫缺陷病毒（人类免疫缺陷病毒（HIV）HIV是获得性免疫缺陷综合征（是获得性免疫缺陷综合征（AIDS）的）的病原体病原体HIV属逆转录病毒科，慢病毒属属逆转录病毒科，慢病毒属HIV有有HIV-1和和HIV2两型两型生物学特性生物学特性形态结构：球形，形态结构：球形，RNA病毒，双层衣壳，病毒，双层衣壳，有包膜有包膜HIV的复制的复制HIV的培养的培养:黑猩猩和恒河猴是黑猩猩和恒河猴是HIV感染的感染的动物模型动物模型抵抗力抵抗力:不强不强传染源和传播途径传染源和传播途径传染源传染源:患者和患者和HIV无症状携带者无症状携带者传染途径传染途径 性接触性接触 血液传播血液传播 母婴垂直传播母婴垂直传播致病机制致病机制主要侵犯带有主要侵犯带有CD4分子的细胞分子的细胞(如如TH细胞细胞)HIV对对CD4+T细胞的损伤细胞的损伤 CD4+T细胞减少细胞减少 CD8+T细胞相对增多细胞相对增多 CD4+/CD8+比例倒置比例倒置HIV造成单核细胞损伤造成单核细胞损伤HIV造成神经细胞损伤造成神经细胞损伤HIV引起的免疫应答引起的免疫应答HIV引起的体液免疫与细胞免疫不能有效的引起的体液免疫与细胞免疫不能有效的清除清除HIVHIV的免疫逃逸的免疫逃逸HIV感染导致免疫功能低下感染导致免疫功能低下HIV整合于细胞染色体整合于细胞染色体HIV变异变异HIV损害各种免疫细胞损害各种免疫细胞微生物学检查微生物学检查HIV抗体检测抗体检测 初筛试验初筛试验 确证试验确证试验HIV抗原检测抗原检测核酸检测核酸检测防治原则防治原则广泛的宣传教育广泛的宣传教育建立检测系统建立检测系统加强检疫加强检疫切断传播途径切断传播途径治疗治疗:AZT、3TCRNAP24衣壳蛋白衣壳蛋白P14内膜蛋白内膜蛋白Gp120Gp41包膜蛋白包膜蛋白逆转录酶逆转录酶HIV结构示意图结构示意图HIV复制复制+ssRNA+ssRNA:-ssDNAssDNA:+ssDNA+ssRNA HIV的的Gp120与与细胞表面的细胞表面的CD4结合结合病毒包膜与病毒包膜与细胞膜融合细胞膜融合 病毒病毒进入细胞进入细胞病毒脱壳病毒脱壳 转译转译病毒蛋白病毒蛋白装配装配释放释放HIV复复制制示示意意图图