淫羊藿苷对前列腺癌原位移植瘤小鼠肿瘤生长及细胞周期的影响.pdf

中西医结合研究 年月第 卷第期R e s e a r c h o fI n t e g r a t e dT r a d i t i o n a lC h i n e s ea n dW e s t e r nM e d i c i n eA p r ,V o l ,N o d o i:/j i s s n 实 验 研 究 广东省中医药局科研项目(N o )通信作者,C o r r e s p o n d i n ga u t h o r,E m a i l:l h b c o m淫羊藿苷对前列腺癌原位移植瘤小鼠肿瘤生长及细胞周期的影响唐荣志赖海标黄智峰刘毅豪吴惠妃中山市中医院泌尿外科,广东中山 摘要目的探讨淫羊藿苷对前列腺癌原位移植瘤S C I D小鼠肿瘤生长、细胞周期、磷酸酶及张力蛋白同源物(p h o s p h a t a s ea n dt e n s i nh o m o l o g,P T E N)基因表达的影响.方法 只雄性S C I D小鼠,根据随机数字表法随机均分为模型对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,每组 只.采用S C I D小鼠前列腺腺体背外侧包膜内注射人前列腺癌L N C a P细胞株悬液的方法构建前列腺癌原位移植瘤小鼠模型.造模周后,模型对照组予以 氯化钠注射液,低剂量组予以 m g/k g淫羊藿苷,中剂量组予以 m g/k g淫羊藿苷,高剂量组予以 m g/k g淫羊藿苷.灌胃处理次/d,治疗时间为周.在灌胃给药治疗前及治疗周后,分别取各组小鼠只,对比各组肿瘤质量、肿瘤体积、肿瘤抑制率.采用流式细胞学方法检测L N C a P细胞周期,计算各周期比值.采用实时定量P C R检测前列腺肿瘤组织中P T E N mR NA相对含量.结果治疗后,模型对照组肿瘤质量、肿瘤体积较治疗前明显增加(P );中剂量组及高剂量组肿瘤质量、肿瘤体积较治疗前明显降低(P ),且显著低于模型对照组(P ).中剂量组及高剂量组肿瘤抑制率显著高于低剂量组(P ).中剂量组及高剂量组肿瘤细胞S期较治疗前明显增加(P ),且显著高于模型对照组(P );中剂量组及高剂量组肿瘤细胞G/G期较治疗前明显减少(P ),且显著低于模型对照组(P ).中剂量组及高剂量组P T E N mR NA相对含量较治疗前明显增加(P ),且显著高于模型对照组(P ).结论淫羊藿苷可能通过上调P T E N表达、改变细胞周期分布来抑制前列腺癌L N C a P细胞增殖,从而有效抑制前列腺癌原位移植瘤S C I D小鼠肿瘤生长.关键词淫羊藿苷;前列腺癌;磷酸酶及张力蛋白同源物;细胞周期中图分类号R ;R 文献标志码AE f f e c t s o f I c a r i i no nT u m o rG r o w t ha n dC e l lC y c l e i nP r o s t a t eC a n c e rO r t h o t o p i cT r a n s p l a n t a t i o nT u m o rM i c eT AN GR o n g z h i,L A IH a i b i a o,HUAN GZ h i f e n g,L I UY i h a o,WU H u i f e iD e p a r t m e n t o fU r o l o g y,Z h o n g s h a nH o s p i t a l o fT r a d i t i o n a lC h i n e s eM e d i c i n e,Z h o n g s h a n ,C h i n aA b s t r a c t O b j e c t i v e T o i n v e s t i g a t e t h ee f f e c t so f i c a r i i no nt u m o rg r o w t h,c e l l c y c l ea n de x p r e s s i o no fp h o s p h a t a s ea n dt e n s i nh o m o l o g(P T E N)g e n e si nS C I D m i c ew i t hp r o s t a t ec a n c e ro r t h o t o p i c t r a n s p l a n t a t i o nt u m o r M e t h o d s F o r t ym a l eS C I D m i c ew e r er a n d o m l yd i v i d e di n t om o d e lc o n t r o lg r o u p,l o w d o s eg r o u p,m e d i u m d o s eg r o u pa n dh i g h d o s eg r o u pa c c o r d i n g t o t h e r a n d o mn u m b e r t a b l em e t h o d,w i t h m i c e i ne a c hg r o u p M o u s em o d e lo fp r o s t a t e c a n c e r o r t h o t o p i c t r a n s p l a n t a t i o n t u m o rw a s c o n s t r u c t e db y i n j e c t i n gh u m a np r o s t a t e c a n c e rL N C a Pc e l ll i n es u s p e n s i o n i n t ot h ed o r s a l l a t e r a l c a p s u l eo f t h ep r o s t a t eg l a n di nS C I D m i c e A f t e rw e e k so fm o d e l i n g,t h em o d e l c o n t r o l g r o u pw a sg i v e n s o d i u mc h l o r i d e i n j e c t i o n,t h e l o w d o s eg r o u pw a sg i v e n m g/k g i c a r i i n,t h em e d i u m d o s eg r o u pw a sg i v e n m g/k g i c a r i i n,a n dt h eh i g h d o s eg r o u pw a sg i v e n m g/k g i c a r i i n G a v a g e t r e a t 中西医结合研究 年月第 卷第期R e s e a r c h o fI n t e g r a t e dT r a d i t i o n a lC h i n e s ea n dW e s t e r nM e d i c i n eA p r ,V o l ,N o m e n to n c ead a yf o rw e e k s B e f o r ea n da f t e rw e e k so fg a v a g et r e a t m e n t,m i c e i ne a c hg r o u pw e r et a k e na n dc o m p a r e df o r t u m o rm a s s,t u m o rv o l u m e,a n dt u m o r i n h i b i t i o nr a t e F l o wc y t o m e t r yw a su s e dt od e t e c t t h ec e l l c y c l eo fL N C a Pa n dc a l c u l a t e t h er a t i oo f e a c hc y c l e R e a l t i m eq u a n t i t a t i v eP C Rw a su s e dt od e t e c t t h e r e l a t i v ec o n t e n to fP T E NmR NAi np r o s t a t e t u m o r t i s s u e R e s u l t s A f t e r t r e a t m e n t,t u m o rm a s s a n dv o l u m e i n t h em o d e l c o n t r o l g r o u pw e r es i g n i f i c a n t l y i n c r e a s e dc o m p a r e dt ob e f o r et r e a t m e n t(P )T u m o rm a s sa n dv o l u m ei nt h em e d i u m d o s ea n dh i g h d o s eg r o u p sw e r es i g n i f i c a n t l yr e d u c e dc o m p a r e dt ob e f o r et r e a t m e n t(P ),a n dw e r es i g n i f i c a n t l yl o w e r t h a n t h o s e i n t h em o d e l c o n t r o l g r o u p(P )T h e t u m o r i n h i b i t i o nr a t e s i n t h em e d i u m d o s ea n dh i g h d o s eg r o u p sw e r es i g n i f i c a n t l yh i g h e r t h a nt h o s e i nt h e l o w d o s eg r o u p(P )T h eSp h a s eo f t u m o rc e l l s i nt h em e d i u m d o s ea n dh i g h d o s eg r o u p sw a ss i g n i f i c a n t l yi n c r e a s e dc o m p a r e dt ob e f o r et r e a t m e n t(P ),a n dw a s s i g n i f i c a n t l yh i g h e r t h a n t h a t i n t h em o d e l c o n t r o l g r o u p(P )T h eG/Gp h a s eo f t u m o r c e l l si nt h em e d i u m d o s ea n dh i g h d o s eg r o u p sw a ss i g n i f i c a n t l yr e d u c e dc o m p a r e dt ob e f o r et r e a t m e n t(P ),a n dw a ss i g n i f i c a n t l y l o w e r t h a nt h a t i nt h em o d e l c o n t r o lg r o u p(P )T h er e l a t i v ec o n t e n to fP T E N mR NAi nt h em e d i u m d o s ea n dh i g h d o s eg r o u p sw a ss i g n i f i c a n t l yi n c r e a s e dc o m p a r e dt ob e f o r et r e a t m e n t(P ),a n dw a ss i g n i f i c a n t l yh i g h e r t h a nt h a t i nt h em o d e l c o n t r o l g r o u p(P )C o n c l u s i o n I c a r i i nm i g h t i n h i b i t t h ep r o l i f e r a t i o no fp r o s t a t ec a n c e rL N C a Pc e l l sb yu p r e g u l a t eP T E Ne x p r e s s i o na n da l t e rc e l l c y c l ed i s t r i b u t i o n,t h e r e b ye f f e c t i v e l y i n h i b i t t h eg r o w t ho fp r o s t a t ec a n c e ro r t h o t o p i c t r a n s p l a n t a t i o nt u m o r i nS C I Dm i c e K e yw o r d s i c a r i i n;p r o s t a t ec a n c e r;p h o s p h a t a s ea n dt e n s i nh o m o l o g;c e l l c y c l e在男性罹患的肿瘤中,前列腺癌(p r o s t a t i cc a n c e r,P C a)是发病率及死亡率仅次于肺癌的恶性肿瘤,对男性生命健康产生巨大威胁.通过研究前列腺癌原位移植瘤,我们发现前列腺癌细胞株的生长、迁移和侵袭会被淫羊藿苷的生物学活性影响而受到一定程度的抑制.淫羊藿又名仙灵脾、刚前,包括淫羊藿苷、淫羊藿次苷在内的一系列黄酮苷类成分为其主要活性成分,具有增加心脑血管血流量、加强人体造血功能、提升人体免疫功能、促进骨代谢的作用.淫羊藿苷及其代谢产物的细胞毒性不高,其抗肿瘤作用机制表现为通过多种信号通路抑制细胞活力、调控肿瘤细胞凋亡.人第 号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物(p h o s p h a t a s ea n dt e n s i nh o m o l o gd e l e t e do nc h r o m o s o m e,P T E N)基因属抑癌基因,雄激素受体(a n d r o g e nr e c e p t o r,A R)过度表达和P T E N基因缺失可导致前列腺癌的肿瘤细胞无限生长.同时通过调查研究我们发现,正常人的P T E N基因突变率明显低于P C a患者.目前针对前列腺癌裸鼠与P T E N基因相关性的研究鲜有报道,本课题组为弥补这一缺憾,特从P T E N表达等方面入手探究淫羊藿苷对前列腺癌原位移植瘤S C I D小鼠肿瘤生长、细胞周期的影响及可能的作用机制,现报道如下.材料与方法 实验动物S C I D品系小鼠 只,雄性,鼠龄为周,体重()g,购自广东省医学实验动物中心,实验动物许可证号S Y X K(鄂).在基础医学院机能实验中心饲养并进行实验,实验前适应性饲养周,在实验中遵循 R原则,给予动物人道关怀并保证动物的福利.实验和饲养期间,饲料为标准颗粒饲料,自由饮水;动物房自然采光,相对湿度,温度 ;安静通风的动物房内,昼夜规律为 h.本 实 验 经 过 本 院 医 院 伦 理 委 员 会批准(N o ).药品及试剂淫羊藿苷标准品(北京索莱宝科技有限公司);人前列腺癌L N C a P细胞株(南京赛泓瑞生物科技有限公司);无水乙醚、E D T A、胎牛血清(F B S)(杭州昊鑫生物科技股份有限公司);R PM I 细胞培养基(赛默飞公司);P T E N、A R、P S A和磷酸化A R(p A R)检测用试剂盒(北京凯瑞基生物科技有限公司).主要仪器离心 机(南 京 善 本 生 物 科 技 有 限 公 司,T G L R);生物组织自动脱水机(邢台智冠机械科技有限公司,Z T P);光学显微镜(深圳市叁诺西努科技有限公司,EM );电子分析天平(沈阳德克天平仪器有限公司,T P );电泳仪(济南泰医生物技术有限公司,J S p o w e r );转移电泳槽(温州星创自动化设备有限公司,V E ).造模、分组及用药采用随机数字表法将 只S C I D雄性小鼠随机中西医结合研究 年月第 卷第期R e s e a r c h o fI n t e g r a t e dT r a d i t i o n a lC h i n e s ea n dW e s t e r nM e d i c i n eA p r ,V o l ,N o 均分为模型对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,每组 只.采用S C I D小鼠前列腺腺体背外侧包膜内注射人前列腺癌L N C a P细胞株悬液的方法构建前列腺癌原位移植瘤小鼠模型.先将冻存的人前列腺癌L N C a P细胞株于 速融,接种于R PM I 培养液中复苏,培养箱恒温、通C O,培养d,每天换R PM I 培养液次;E D T A消化,离心、弃去上清液,将收集的人前列腺癌L N C a P细胞株用R PM I 培养液调制成 个/m L的细胞悬液备用.S C I D小鼠术前 h禁食不禁水,乙醚麻醉后固定,进行下腹部消毒,然后切开皮肤并分离腹膜,此时充盈的膀胱会向外突出,用无菌棉签将膀胱推向尾端以充分暴露小鼠生殖腺叶状肉红色前列腺腺体,每侧前列腺腺体背外侧包膜内注射 L人前列腺癌L N C a P细胞株.注射造模后还原组织器官并分层缝合皮肤,单笼饲养造模后小鼠.实验操作均为无菌状态下进行,注意避免感染.周后,模型对照组予以 氯化钠注射液灌胃处理,低剂量组予以 m g/k g淫羊藿苷灌胃处理,中剂量组予以 m g/k g淫羊藿苷灌胃处理,高剂量组予以 m g/k g淫羊藿苷灌胃处理.均次/d,治疗时间为周.检测指标在灌胃给药治疗前及治疗周后,分别取各组小鼠只,处死后摘取小鼠前列腺腺体,剥取前列腺上的肿瘤瘤体并编号.每个瘤体用滤纸吸干后称重,获得肿瘤瘤体质量.测量前列腺瘤体的长、短径,每个瘤体各测次后取平均值,通过公式计算获得肿瘤瘤体体积.瘤体体积(长宽高)/.计算各组小鼠肿瘤生长抑制率.肿瘤抑制率(实验组平均瘤重/模型组平均瘤重).采用流式细胞学方法检测L N C a P细胞周期,计算各周期比值.采用实 时 定 量P C R检 测 前 列 腺 肿 瘤 组 织 中P T E N mR NA相对含量.将大鼠前列腺肿瘤瘤体剪碎后加入裂解液,冲打混匀,使用细胞/组织m i R NA提取试剂盒从总样本中提取m i R NA,用T R I z o l试剂提取样品中的总R NA,取gR NA用高效c D NA一链合成 试 剂 盒 逆 转 录 合 成c D NA;根 据 说 明 书,在A B I 系统上使用实时定量P C R扩增预混液进行R T q P C R检测基因表达,a c t i n和U 用作对照,结果通过 c t方法计算.引物序列见表.表引物序列表名称序列(t o)扩增度(b p)P T E N上游引物 G G T C T C G C AG C A T AA C G T GA 下游引物 G T TA G C T C T G G T C G A C C A T T a c t i n上游引物 C A C C C T G G C A C G C C A T A G C C 下游引物 A C C C A T G C C C A C C A T C A C G U 上游引物 C T C G GA T C G G C AG C T C T 下游引物 AA C G C T T C A C G AA T T T G C G T 统计学方法采用S P S S 统计软件进行分析,符合正态分布的计量资料以均数标准差(xs)表示,组内治疗前后比较采用配对样本t检验;多组间比较采用单因素方差分析,组间多重比较采用L S D t检验;以P 提示差异有统计学意义.结果 淫羊藿苷对肿瘤生长的影响治疗后,模型对照组肿瘤质量、肿瘤体积较治疗前明显增加(P ).中剂量组及高剂量组肿瘤质量、肿瘤体积较治疗前明显降低(P ),且显著低于模型对照组(P ).中剂量组及高剂量组肿瘤抑制率显著高于低剂量组(P ).见表、表.表各组肿瘤质量、肿瘤体积比较(n,xs)组别时间肿瘤质量(m g)肿瘤体积(mm)模型对照组治疗前 治疗后 低剂量组治疗前 治疗后 中剂量组治疗前 治疗后 高剂量组治疗前 治疗后 与治疗前比较P ,与模型对照组比较P 中西医结合研究 年月第 卷第期R e s e a r c h o fI n t e g r a t e dT r a d i t i o n a lC h i n e s ea n dW e s t e r nM e d i c i n eA p r ,V o l ,N o 淫羊藿苷对L N C a P细胞周期的影响治疗后,中剂量组及高剂量组肿瘤细胞S期较治疗前明显增加(P ),且显著高于模型对照组(P ).中剂量组及高剂量组肿瘤细胞G/G期较治疗前明显减少(P ),且显著低于模型对照组(P ).见表.淫羊藿苷对P T E N表达的影响治疗后,中剂量组及高剂量组P T E N mR NA相对含量较治疗前明显增加(P ),且显著高于模型对照组(P ).见表.表各组肿瘤抑制率比较(n,xs)组别肿瘤抑制率()模型对照组低剂量组 中剂量组 高剂量组 与低剂量组比较P 表各组L N C a P前列腺癌细胞周期变化(n,xs)组别时间S期G/G期模型对照组治疗前 治疗后 低剂量组治疗前 治疗后 中剂量组治疗前 治疗后 高剂量组治疗前 治疗后 与治疗前比较P ,与模型对照组比较P 表各组前列腺肿瘤组织中P T E N mR NA相对含量比较(n,xs)组别时间P T E N m R NA相对含量模型对照组治疗前 治疗后 低剂量组治疗前 治疗后 中剂量组治疗前 治疗后 高剂量组治疗前 治疗后 与治疗前比较P ,与模型对照组比较P 讨论作为一种多发于老年男性群体、在前列腺上发生的上皮性恶性肿瘤,P C a发病率在全球男性患有的全部恶性肿瘤中排名第二.我国P C a发生率最近几年维持在较快的增长速度,对中国老年男性泌尿系统健康造成了严重威胁.在现代医学背景下,在P C a发病早期,临床上通常使用根治性治疗方法进行治疗,如放射性粒子植入、根治性前列腺切除术、根治性外放射治疗等;而在中期通常使用内分泌治疗结合放疗、手术结合放疗等综合治疗方法;在晚期,几乎所有患者最终都会演变成为激素抵抗性P C a或激素非依赖性P C a,而传统的去势治疗方案包含了手术去势和药物去势种方式.伴随着中医药抗肿瘤研究的一步步发展,中医药治疗P C a的优势也逐渐显现出来.中医药对于抑制P C a骨转移、提高患者生存质量、减弱放化疗不良反应、提高患者免疫功能、增加患者生存期等方面都起到了促进作用.老年男性作为P C a的高发人群,发病的根本原因之一是年老体虚.大量患者在发现时已处于晚期转移阶段,病邪的“长驱直进”由正气大虚所致.作为一种常见的补阳类中药材,淫羊藿中的主要活性有效成分淫羊藿苷,已被证实具有较强的抗肿瘤活性,对常见恶性肿瘤如肺癌、肝癌、胃癌、宫颈癌、乳腺癌等肿瘤细胞均可起到一定的抑制效果,其作用机制主要表现在抑制肿瘤细胞增殖、侵袭、转移,诱导肿瘤细胞凋亡、分化,使得机体免疫力得到增强等,对癌症通路的多个方面均有涉及,证实了中药多通路、多靶点发挥作用的特点.研究 发现,淫羊藿苷抑制前列腺癌L N C a P细胞增殖的机制与P T E N高表达并抑制雄激素受体信号通路中A R的磷酸化而在S期阻滞癌细胞增殖存在紧密的联系;体外实验 也表明,淫羊藿含药血清对于前列腺癌P C 细胞的增殖产生了明显的抑制作用.年,个不同的研究小组发现 号染色体(q )上存在个抑癌基因 P T E N基因.研究 表明,P T E N通过使细胞内蛋白酪氨酸去磷酸,从而加速细胞凋亡进程,调控细胞周期和改变细胞黏附力,从而对肿瘤细胞生长、转移产生抑制作用.近些年 的 研 究 表 明 在 前 列 腺 癌 患 者 的 病 理 组 织 中P T E N也存在异常表达的情况,马东升等 对前列腺癌组织中P T E N抑癌基因蛋白表达的检测发现,在良性前列腺增生中P T E N基因蛋白表达显著高于P C a,P T E N蛋白表达阳性率与肿瘤细胞分化程度、临床分中西医结合研究 年月第 卷第期R e s e a r c h o fI n t e g r a t e dT r a d i t i o n a lC h i n e s ea n dW e s t e r nM e d i c i n eA p r ,V o l ,N o 型呈现负相关.W a n gL等 认为前列腺癌G l e a s o n评分与P T E N蛋白呈负相关,前列腺癌G l e a s o n评分分时,这种相关性更为明显,甚至可造成P T E N表达缺失;同时也与患者预后密切相关,P C a患者预后越 好,其P T E N蛋 白 表 达 水 平 越 高;由 此 可 推 论P T E N表达的缺失是P C a不良预后的病理标志物.本研究结果显示,中剂量组及高剂量组P T E N mR NA相对含量较治疗前明显增加,且显著高于模型对照组;提示淫羊藿苷促进了前列腺肿瘤组织中P E T N高表达.增殖失控是恶性肿瘤的重要特征之一.细胞分化周期中,肿瘤增殖与G/G期、S期周期紊乱存在显著相关性.细胞凋亡、分化与增殖失控会受到G/G期、S期周期紊乱的影响,进而诱发肿瘤无限制分化、增殖甚至恶化、转移的产生.因此恶性肿瘤生长最基本的生物学特征就是细胞周期调控的紊乱,也就是肿瘤细胞失控性增殖.本研究结果显示,中剂量组及高剂量组肿瘤质量、肿瘤体积较治疗前明显降低,且显著低于模型对照组.中剂量组及高剂量组肿瘤抑制率显著高于模型对照组.中剂量组及高剂量组肿瘤细胞S期较治疗前明显增加,且显著高于模型对照组;中剂量组及高剂量组肿瘤细胞G/G期较治疗前明显减少,且显著低于模型对照组.提示淫羊藿苷对前列腺L N C a P细胞增殖起到了抑制作用.综上所述,淫羊藿苷可能通过上调P T E N表达、改变细胞周期分布来抑制前列腺癌L N C a P细胞增殖,从而有效抑制前列腺癌原位移植瘤S C I D小鼠肿瘤生长.参考文献何华琼,饶红,郑君,等淫羊藿苷对前列腺癌原位移植瘤模型小鼠雄激素受体信号通路的影响J世界科学技术中医药现代化,():栾玉玲,陈皖晴,冯煜淫羊藿苷调控髓源抑制细胞功能抑制 大 肠 癌 转 移 的 研 究 J中 成 药,():Y a nY,H u a n gH I n t e r p l a ya m o n gP I K/AK T,P T E N/F O X Oa n dA Rs i g n a l i n gi np r o s t a t ec a n c e rJ A d vE x pM e dB i o l,:D i n gY,L iN,D o n gB,e ta l C h r o m a t i nr e m o d e l i n gA T P a s eB R G a n dP T E N a r es y n t h e t i cl e t h a li np r o s t a t ec a n c e rJ JC l i nI n v e s t,():李秋洋,周晓东,罗文,等高强度聚焦超声治疗及控制兔肝V X 肿瘤发展的实验研究J中国超声医学杂志,():司海 龙,陈玉,苟涛,等培元 抗 癌 汤 通 过P I K AK T mT O R信号通路调节L e w i s肺癌自噬抑制肿瘤生长和转移的实验研究J北京中医药大学学报,():顾成元,秦晓健,黄永墙,等我国部分省市前列腺癌精准筛查初 步结 果 分析 J中华 医学 杂 志,():S e k h o a c h aM,R i e tK,M o t l o u n gP,e ta l P r o s t a t ec a n c e rr e v i e w:g e n e t i c s,d i a g n o s i s,t r e a t m e n t o p t i o n s,a n da l t e r n a t i v ea p p r o a c h e sJ M o l e c u l e s,():赵杉,黄浩然,王如然,等扶正消瘀方联合常规西医治疗前列腺增生术后湿热瘀毒型前列腺癌的临床研究J河北中医,():齐芸,郑永先淫羊藿苷抗肿瘤作用机制研究进展J中医药导报,():饶红,武福云,何华琼淫羊藿苷对前列腺癌原位移植瘤S C I D小鼠脂肪酸合成酶和L N C a P细胞生物学行为的影响J实用药物与临床,():L e eK S,L e eH J,A h nK S,e t a l C y c l o o x y g e n a s e /p r o s t a g l a n d i nE p a t h w a ym e d i a t e s i c a r i s i d eI I i n d u c e da p o p t o s i s i nh u m a nP C p r o s t a t ec a n c e rc e l l sJ C a n c e rL e t t,():翟 文 静,袁 林,李 洪 昌,等去 泛 素 化 酶O TUD 调 控P T E N肿瘤相关突变体蛋白稳定性的研究J军事医学,():马东升,高溪 媛,阿 依达 娜 居 马别 克,等 P T E N()/P I K AK T m T O R信号传导通路在前列腺癌发生与演变中 的 机 制 J中 国 药 物 与 临 床,():W a n gL,W a n gC,S a r w a rM S,e t a l P T E N k n o c k o u t r e g u l a t e sm e t a b o l i cr e w i r i n ga n de p i g e n e t i cr e p r o g r a mm i n gi np r o s t a t ec a n c e ra n dc h e m o p r e v e n t i o nb yt r i t e r p e n o i du r s o l i ca c i dJ F A S E BJ,():e 刘志斌,靳松,牛亦农苯乙基异硫氰酸酯对良性前列腺上皮细胞增殖凋亡的影响及相关机制研究J首都医科大学学报,():(收稿日期:)