环状RNA在新生儿缺氧缺血性脑病中的作用研究进展.pdf

综述与讲座摘要新生儿缺氧缺血性脑病（hypoxic-ischemicencephalopathy，HIE）是新生儿死亡及儿童伤残的主要原因之一。尽管亚低温治疗已成为常规手段，但目前治疗HIE的方法有限且效果不理想。此外，由于时间和设备的限制，亚低温治疗无法及时应用，治疗后仍存在较高的死亡率或不同程度的神经功能障碍。因此，探索HIE的其他有效治疗方法成为新生儿领域研究的热点和难点。研究证明HIE可引起神经系统在生理、细胞和分子水平上复杂变化，环状RNA（circRNA）在中枢神经系统中高度表达，并参与调节生理和病理生理过程，因此有望成为HIE的潜在治疗靶点。本文综述HIE中cir-cRNA 对不同神经细胞的调控作用，旨在为治疗HIE提供新的理论依据。关键词新生儿缺氧缺血性脑病；环状RNA；神经细胞中图分类号：R722.1文献标志码：A文 章 编 号：1009-2501(2024)04-0466-09doi：10.12092/j.issn.1009-2501.2024.04.016新生儿缺氧缺血性脑病（hypoxic-ischemicencephalopathy，HIE）是由于围生期窒息引起的新生儿脑损伤，是导致新生儿期死亡和儿童伤残的主要原因之一。严重缺氧会导致大脑组织在生理、细胞及分子水平上发生复杂的变化，造成不可逆转的神经损伤，包括脑瘫、听力和视力障碍、记忆困难和认知功能障碍1-4。HIE的发病率在发达国家为1%8%，在欠发达国家可高达26%；在全球范围内HIE的死亡率为10%60%，幸存者中至少有25%存在长期的神经发育后遗症；HIE还占儿童脑瘫的15%28%5-6。HIE的病理生理学机制复杂，治疗措施有限，除了亚低温作为常规神经保护疗法外7，研究显示干细胞、促红细胞生成素、褪黑素、氙气、硫酸镁、胰岛素样生长因子-1、别嘌呤醇、托吡酯等也可能在HIE的治疗中有神经保护作用8-12，尽管这些神经保护策略显示出一定的疗效，但在临床实践中仍面临一些挑战，其中包括治疗时间窗口的确定、剂量的确定、治疗策略的个体化等问题。在亚低温治疗后，仍有44%53%的患儿死亡或留有中度或重度神经功能障碍13。因此HIE的发病机制和防治方法值得进一步研究14。环状 RNA（circRNA）是一类闭合环状的单链RNA分子，由mRNA前体（pre-mRNA）通过可变剪接形成，包括编码和非编码性RNA。与线性RNA相比，circRNA缺乏5端帽结构和3端poly（A），缺乏游离末端，不易被核酸外切酶降解，稳定性更高。circRNA有4种主要功能，包括作为miRNA分子海绵15、作为蛋白质分子海绵调节蛋白质水平16、引发免疫反应17和自身翻译成蛋白质18。越来越多的证据表明circRNA在细胞分化、胰岛素分泌、细胞多能性维持等生命活动中发挥重要作用，参与中枢神经系统疾病19、心肌肥厚20-21、糖尿病22、胃癌23、肝细胞癌24-25等多种疾病的发生发展过程。最新高通量RNA测序和生物信息学分析显示，circRNA与脑部疾病有关26，大多2023-08-25 收稿2023-10-08 修回甘肃省自然科学基金项目（22JR5RA985）；甘肃省卫生行业科研计划项目（GSWSHY2018-63）；兰州大学第二医院萃英科技创新基金（CY2022-BJ-05）党银霞，女，在读硕士研究生，研究方向：新生儿缺氧缺血性脑病的治疗及机制研究。E-mail:王凡，通信作者，女，博士，主任医师，硕士生导师，研究方向：新生儿缺氧缺血性脑病的治疗及机制研究、先天性心脏病的多因素分析研究。E-mail:环状RNA在新生儿缺氧缺血性脑病中的作用研究进展党银霞1，沈富辉1，王生霞1，鲁 霞1，王 凡21兰州大学第二临床医学院；2兰州大学第二医院新生儿科，兰州 730030，甘肃中国临床药理学与治疗学中国药理学会主办CN 34-1206/R，ISSN 1009-2501http:/2024Apr;29(4):466-474466中国临床药理学与治疗学 2024 Apr;29(4)数circRNA在中枢神经系统中高度表达，并参与生理和病理生理过程的调节，对神经发育和疾病进展具有重要意义27-28。有两项研究强调了cir-cRNA在缺氧调节中的作用，一项研究显示，在出生3 d缺氧缺血（P3HI）大鼠中，发现大脑中有98个差异表达的circRNA29，另一项研究表明，在出生10 d缺氧缺血（P10HI）大鼠中，与对照组相比，共有66个circRNA差异表达29。因此，有理由相信circRNA在HIE中扮演着重要的角色。本文综述circRNA在神经系统改变中不同的调控作用，旨为治疗和改善HIE提供新的思路。1circRNA在HIE中对不同神经细胞的调控作用1.1神经元神经元是神经系统最基本单位，具有感受刺激和传导兴奋的能力。新生儿缺血缺氧引起的脑损伤是一个动态过程，1248 h为脑损伤高峰期，在这个过程中，神经元的损伤主要表现为凋亡和坏死，其中凋亡发生较早且持续时间长30。神经元凋亡为HIE继发性脑损伤的主要形式31，因此，研究circRNA调控HIE神经元损伤机制具有重要意义。在2017年的一项研究中，首次对小鼠circS-7/CDR1as进行体内功能丧失研究，发现神经元特异性circRNA调节大脑中的感觉运动门控系统和突触传递，为我们提供了circRNA的生物学功能的新见解32。此外，来自星形胶质细胞的外泌体中的circSHOC2作为miR-7670-3p的海绵，从而上调 sirtuin 1（SIRT1）减少神经元凋亡和神经元损伤，从而调节神经元自噬并改善缺血性脑损伤33。另一研究探讨circHIPK2在神经细胞分化中的作用，该研究发现，在体外，沉默circHIPK2可以促进神经干细胞（NSCs）定向分化为神经元，但对分化为星形胶质细胞没有影响。在体内，经过显微注射的NSCs可以在脑卒中诱导后迁移到缺血半球，si-circHIPK2-NSCs 通过下游精胺氧化酶（SMOX）调控NSCs的分化，增加缺血脑中的神经元可塑性，赋予持久的神经保护，并显著减少功能缺陷34。还有研究发现，circUBE3B 高表达参与七氟醚（SEVO）诱导的人海马神经元（HHNs）损伤，其中SEVO通过损害细胞活力、增强细胞凋亡和炎症产生来诱发 HHN 损伤，而 circUBE3B 敲低可以减轻这种损伤。在其作用机制上，circUBE3B竞争miR-326和髓样分化因子88（MYD88）的结合位点，通过靶向miR-326和调控MYD88表达来调控神经元损伤的发生35。此外，研究发现，circ-NUFIP2在氧糖剥夺（OGD）引起的神经元损伤中表达显著上调。进一步研究发现，circNUFIP2通过调节生长分化因子 11（GDF11）来改善 OGD 引起的神经元细胞损伤，已被证明GDF11在神经系统发育和修复中发挥重要作用，circNUFIP2过表达通过miR-1224-5p，增加GDF11的表达抑制OGD引起的神经元细胞凋亡和氧化应激反应，circNU-FIP2的沉默可以逆转上述效应36。1.2星形胶质细胞星形胶质细胞作为中枢神经系统中最丰富的细胞类型，在调节微环境稳态、参与突触发育、支持营养神经元、形成血脑屏障以及调节神经递质等方面起着重要作用37。然而在某些神经系统疾病中，如缺血性脑卒中38和阿尔茨海默氏症39，星形胶质细胞异常激活可导致其形态异常和增殖速率增强，进而加剧神经功能的缺陷40，并在神经炎症反应过程中具有重要作用41。HIE中星形胶质细胞异常激活可能与脑损伤的程度和进展密切相关。因此，研究和了解星形胶质细胞在这些疾病中的作用机制和调控过程对于预防和治疗这些疾病具有重要意义42-43。已有研究证明，在缺氧诱导的病理条件下，如缺血性损伤44和神经炎症45-46，星形胶质细胞会发生活化47，这种活化与脑损伤的发病机制密切相关48。在脑卒中后，星形胶质细胞从静息状态变为活化状态，导致脑组织严重损伤，形成神经瘢痕，影响受损脑组织的修复49。许多研究证明circRNA能通过多种途径调节星形胶质细胞的活化，一项体外研究发现 circHIPK2 作为内源miR124-2HG的海绵，抑制miR124-2HG的活性，从而增加 sigma 非阿片类细胞内受体 1（SIGMAR1/OPRS1）表达。敲低circHIPK2表达，靶向miR124-2HG和SIGMAR1，通过调节自噬和内质网（ER）应激，可以显著抑制星形胶质细胞活化50。另一项研究报道，多次腹膜内注射脂多糖（LPS）后，小鼠前额叶皮层的circHIPK2和SIGMAR1显著增加，同时升高炎症介质，敲低circHIPK2抑制SIGMAR1表达并改善神经炎症51。在短暂的大脑中动脉闭467Chin J Clin Pharmacol Ther 2024 Apr;29(4)塞（tMCAO）小鼠中风模型中，缺血脑组织的 cir-cHECTD1 水平显著增加，并在急性缺血性中风（AIS）患者的血浆样本中进一步得到验证。敲低circHECTD1 表达可以显著减少 tMCAO 小鼠的梗死区域，减轻神经元缺陷，并改善星形胶质细胞的 活 化。在 机 制 上，circHECTD1 作 为 内 源 性miR142 的海绵抑制 miR142 活性，导致抑制四氯二苯-p-二恶英（TCDD）诱导型聚 ADP-核糖 聚合酶（TIPARP）的表达，进而通过抑制自噬来抑制星形胶质细胞活化52。在氧糖剥夺/再灌注（OGD/R）条件下，circTTC3/miR-372-3p/Toll 样受体 4（TLR4）轴可以促进星形胶质细胞损伤，miR-372-3p 能 够 靶 向 抑 制 细 胞 内 的 TLR4 的 表 达，而circTTC3与miR-372-3p结合后，通过抑制miR-372-3p而促进TLR4的表达，最终诱导星形胶质细胞损伤,并通过miR-372-3p-TLR4轴促进NSCs增殖和分化53。circCNOT6L作为miR-99a-5p海绵，调节丝氨酸蛋白酶抑制剂（SERPINE1）的表达，circCNOT6L 通过 miR99a-5p/SERPINE1 轴减弱星形胶质细胞的细胞凋亡信号，从而减轻OGD/R条件下的脑损伤54。此外，研究还发现circCELF1在OGD/R诱导的星形胶质细胞中上调。敲低circCELF1抑制星形胶质细胞的凋亡和自噬。在体内tMCAO模型研究显示，circCELF1或活化T细胞核因子5（NFAT5）缺陷有助于抑制神经损伤。此外，circCELF1被发现通过招募DDX54来提高NFAT5表达，刺激星形胶质细胞凋亡和自噬55。还有一项研究表明，circBCL11B通过miR-29b-3p/水通道蛋白4（AQP4）轴促进1，2-二氯乙烷（1，2-DCE）引起的星形胶质细胞肿胀，circBCL11B 敲低逆转 1，2-DCE 驱动的AQP4上调并缓解细胞肿胀56。1.3小胶质细胞小胶质细胞是中枢神经系统中的免疫活性细胞和吞噬细胞。在正常条件下，通过适当的吞噬作用维持健康的大脑环境，并释放神经营养因子发挥神经保护作用。然而，在脑缺血缺氧时，小胶质细胞被激活，并通过形态学的改变极化为促炎的 M1 型和抗炎的 M2 型57。炎症反应在HIE中被认为是继发性神经元损伤的主要因素，而活化小胶质细胞通过过度产生促炎细胞因子和神经毒性介质来参与炎症反应，也是脑卒中后神经炎症最重要的细胞成分之一58-61。HIE时，circRNA在小胶质细胞的活化过程中也有一定的调控作用，研究表明，来自缺氧预处理脂肪干细胞（ADSC）的外泌体传递circRPS5，并通过miR-124-3p/去乙酰化酶SIRT7轴减轻急性缺血性中风诱导的脑损伤，并促进M2小胶质细胞/巨噬细胞的极化62。另外，circUSP10 通过靶向miR-152-5p/CD84促进小胶质细胞活化并诱导神经元凋亡63。还有研究发现，circPTK2通过海绵miR-29b调节小胶质细胞诱导的神经元凋亡，并通过circPTK2-miR-29b-SOCS-1-JAK2/STAT3-IL-1轴调节 OGD 激活的小胶质细胞诱导的神经元凋亡64。另外，circARF3 通过海绵 miR-31-5p 使MYD88-NF-B通路失活，缓解OGD介导的脑血管内皮细胞和小胶质细胞诱导的神经炎症损伤，减少神经元凋亡65。1.4NSCsNSCs 是指存在于神经系统中，具有分化不同神经细胞的潜能，其可以产生大量脑细胞组织并进行自我更新66。在脑缺血情况下，NSCs会增殖、迁移和分化，以修复受损的神经功能，因此，NSCs对于损伤后的脑组织再生和修复非常重要67-68。在缺血性脑卒中后的神经再生中，circRNA-102481 起着重要作用，其通过调节 miR-194-5p/HDAC4信号通路来促进神经元再生。研究发现，circRNA-102481的表达在缺血性脑卒中后上调，通过作为miR-194-5p的海绵，减少miR-194-5p对HDAC4基因的抑制作用，从而促进HDAC4的表达和神经再生69。研究发现，另一种circMYO10的表达升高与缺血性脑卒中诱导的神经炎症和神经元凋亡相关。进一步的实验发现，circMYO10通过作为miR-370-3p的海绵，抑制miR-370-3p对ABCA7基因的抑制作用。ABCA7是一种调节细胞膜脂质代谢和神经炎症的关键分子。因此，circ-MYO10/miR-370-3p/ABCA7轴通过调节神经炎症和神经元凋亡的过程，在缺血性中风中发挥重要的调控作用70。另外两个 circRNA（circACBD6 和 circZNF292）也对 NSCs 分化和损伤修复起到重要作用。cir-cACBD6能够促进NSCs向胆碱能神经元的分化，通过作为miR-320-5p的海绵，减少miR-320-5p对OSBPL2基因的抑制作用，从而在促进NSCs分化中起到重要作用；circZNF292 在 OGD/R 诱导的468中国临床药理学与治疗学 2024 Apr;29(4)NSCs中过表达，沉默circZNF292通过上调NSCs中miR-22，促进Wnt/-连环蛋白和PKC/ERK通路的激活，减轻OGD/R诱导的NSCs损伤、炎症反应及细胞凋亡，因此，circZNF292/miR-22 轴在保护NSCs免受缺氧缺血损伤并促进其生存和功能方面发挥着重要作用71-72。2circRNA其他相关作用circRNA不仅在调节神经细胞功能，而且在调控血脑屏障损伤中也发挥着关键作用。血管内皮细胞（VECs）是血脑屏障的重要组成部分，对于保持正常脑血管生理功能有决定性的作用。有研究显示，在人脑血管内皮细胞OGD/R条件下，circMEMO1作为miR-17-5p的海绵，抑制miR-17-5p的活性，从而增强非七激酶子同源物1（SOS1）表达，进而促进ERK/NF-B信号通路的活化，促进氧化应激、炎症反应以及细胞凋亡。敲低 circ-MEMO1通过miR-17-5p/SOS1轴减少人脑VECs的损伤，改善血脑屏障障碍及神经炎症73。另外一项研究中，circDLGAP4 作为内源 miR-143 海绵抑制 miR-143 活性，导致内皮-间充质转化（Endo-MT）抑制，EndoMT有助于血脑屏障破坏，在小鼠tMCAO模型中，circDLGAP4表达的上调显著减轻神经功能缺损，减少梗死面积和血脑屏障损伤74-75。还有研究发现，circFoxO3在脑缺血/再灌注（I/R）和OGD模型中显著上调，通过促进自噬过程来保护血脑屏障免受OGD/R损伤的影响，机制 为 circ-FoxO3 作 用 于 mTOR 和 E2F1 来 抑 制mTORC1活性，从而促进自噬以清除细胞毒性聚集体以提高血脑屏障完整性，证实了circFoxO3在OGD/R损伤中的保护作用76。circRNA 在不同神经细胞 HIE 中的具体分子调控机制见Tab.1。Tab.1Molecular mechanism of circular RNA targeting HIE in different nerve cellsNerve cellsNeuronAstrocytesMicrogliaNeural stem cellsOtherscircRNAcircSHOC2circHIPK2circUBE3BcircNUFIP2circHECTD1circHECTD1circHIPK2circHECTD1circTTC3circCNOT6LcircCELF1circBCL11BcircRPS5circUSP10circPTK2circARF3circ102481circMYO10circACBD6circZNF292circMEMO1circDLGAP4circ-FoxO3circHECTD1microRNAmiR-7670-3p-miR-326miR-1224-5pmiR-133bmiR-27a-3pmiR124-2HGmiR142miR-372-3pmiR99a-5p-miR-29b-3pmiR-124-3pmiR-152-5pmiR-29bmiR-31-5pmiR-194-5pmiR-370-3pmiR-320-5pmiR-22miR-17-5pmiR-143-miR-335Target geneSIRT1SMOXMYD88GDF11TRAF3FSTL1SIGMAR1TIPARPTLR4SERPINE1NFAT5AQP4SIRT7CD84JAK2/STAT3MYD88-NF-BHDAC4ABCA7OSBPL2Wnt/-cateninandPKC/ERKSOS1EndoMTmTOR/E2F1NOTCH2References33343536787950525354555662636465697071727374-757677469Chin J Clin Pharmacol Ther 2024 Apr;29(4)3circRNA与HIE病理生理机制分析与探讨不同类型的神经细胞在应对HIE过程中，其内部的circRNA表达会发生特异性变化，这些改变可能影响细胞功能改变。同一种circRNA在不同类型的神经细胞中也可能有不同的表达水平和 功 能，例 如，circHECTD1 既 可 作 为 内 源 性miR142 的 海 绵 抑 制 miR142 活 性，导 致 抑 制TIPARP的表达，进而抑制自噬来抑制星形胶质细胞活化，从而改善神经炎症反应52；circHECTD1也可作为 miR-335 的海绵，调节 EndoMT，cir-cHECTD1敲低通过miR-335/NOTCH2轴的介导显著 缓 解 血 管 内 皮 细 胞 中 的 EndoMT77。cir-cHECTD1 敲低通过靶向 miR-133b 抑制肿瘤坏死因子受体相关因子3（TRAF3）的表达，从而减轻脑缺血引起的神经元损伤78。还有研究显示，cir-cHECTD1表达在OGD/R处理的神经细胞中增强，作为miR-27a-3p的海绵，抑制miR-27a-3p活性，使FSTL1高表达。敲低circHECTD1改善的OGD/R诱导的神经细胞损伤，降低细胞凋亡79。一个cir-cRNA可能有多个靶向miRNA，可以通过调节多种信号通路以影响神经细胞的功能，对于不同类型脑细胞，它们各自具有自身特异的分子机制和信号传导途径。这意味着特定的circRNA可能在不同类型的细胞中有不同的表达模式和功能。然而，这些可能的机制还需要进一步的研究来证实。HIE 时各神经细胞发生一系列病理生理改变，circRNA可能涉及HIE兴奋毒性、炎症反应、氧化应激、细胞凋亡及血脑屏障损伤等多个方面。而炎症反应、细胞凋亡及血脑屏障损伤是HIE重要组成部分，研究证明circNUFIP2的过表达可以减轻OGD引起的神经元细胞凋亡和氧化应激反应36，circARF3过表达能减少血脑屏障破坏、神经元凋亡和小胶质细胞炎症反应65等等。这在HIE中可能同样存在，circRNA在HIE中的作用的研究还处于初级阶段，很多机制尚不清楚，需要在HIE模型上广泛研究来完善和阐述。4小结与展望尽管当前的研究显示 circRNA 在 HIE 中扮演着重要的角色，但是我们对于其具体作用机制的理解仍然很有限。进一步的研究需要揭示 cir-cRNA与其他分子之间的相互作用以及它如何调节关键的信号通路和细胞功能。考虑到circRNA作为潜在的治疗靶点或临床标志物的潜力，有必要对此进行更深入的研究。面对circRNA合成效率低、安全性不确定以及成本过高等问题，我们仍需要努力找到解决方法。因此，未来我们研究的重心应当集中在circRNA对炎症反应、自噬、内质网应激、细胞凋亡以及神经血管重塑等过程中的作用机制上。此类研究将有助于我们找到HIE新的神经保护策略，成为未来研究领域的一个重要方向。参考文献1 Greco P,Nencini G,Piva I,et al.Pathophysiology of hy-poxicischemic encephalopathy:a review of the pastand a view on the futureJ.Acta Neurol Belg,2020,120(2):277-288.2Vega-Del-Val C,Arnaez J,Casero S,et al.Temporaltrends in the severity and mortality of neonatal hy-poxic-ischemic encephalopathy in the era of hypo-thermiaJ.Neonatology,2021,118(6):685-692.3Disdier C,Stonestreet BS.Hypoxic-ischemic-relatedcerebrovascular changes and potential therapeuticstrategies in the neonatal brainJ.J Neurosci Res,2020,98(7):1468-1484.4 Finder M,Boylan GB,Twomey D,et al.Two-year neu-rodevelopmental outcomes after mild hypoxic in theera of therapeutic hypothermia J.JAMA Pediatr,2020,174(1):48-55.5 魏克伦,刘绍基,钟柏茂.高危新生儿早期处理M.北京:科学出版社,2020:287-295.6 陈兰举,徐加丽,赵武,等.儿科学M.2版.合肥:中国科学技术大学出版社,2017:83-87.7 中华医学会儿科学分会新生儿学组,中华儿科杂志编辑委员会.亚低温治疗新生儿缺氧缺血性脑病专家共识（2022）J.中华儿科杂志,2022,60(10):983-989.8 Huang J,U KP,Yang F,et al.Human pluripotent stemcell-derived ectomesenchymal stromal cells promotemore robust functional recovery than umbilical cord-derived mesenchymal stromal cells after hypoxic-isch-aemic brain damageJ.Theranostics,2022,12(1):143-166.9Zhang Y,Chen D,Wang Y,et al.Neuroprotective ef-470中国临床药理学与治疗学 2024 Apr;29(4)fects of melatonin-mediated mitophagy through nu-cleotide-binding oligomerization domain and leucine-rich repeat-containing protein X1 in neonatal hypoxic-ischemic brain damage J.FASEB J,2023,37(2):e22784.10You Q,Lan XB,Liu N,et al.Neuroprotective strategiesfor neonatal hypoxic-ischemic brain damage:Currentstatus and challenges J.Eur J Pharmacol,2023,957:176003.11孙祎璠,蔡成.新生儿缺氧缺血性脑病治疗研究进展J.中华实用儿科临床杂志,2021,36(8):631-634.12杨欢,石玉红,冉海凤,等.促红细胞生成素的生理功能及生成来源J.中国临床药理学与治疗学,2021,26(4):434-443.13 Thayyil S,Pant S,Montaldo P,et al.Hypothermia formoderate or severe neonatal encephalopathy in low-income and middle-income countries(HELIX):a ran-domised controlled trial in India,Sri Lanka,and Ban-gladeshJ.Lancet Glob Health,2021,9(9):e1273-e1285.14Zhang Q,Jia M,Wang Y,et al.Cell death mechanismsin cerebral ischemia-reperfusion injury J.Neuro-chem Res,2022,47(12):3525-3542.15 Chen X,Lu Y.Circular RNA:Biosynthesis in vitroJ.Front Bioeng Biotechnol,2021,9:787881.16 Huang A,Zheng H,Wu Z,et al.Circular RNA-proteininteractions:functions,mechanisms,and identifica-tionJ.Theranostics,2020,10(8):3503-3517.17Liu CX,Li X,Nan F,et al.Structure and degradation ofcircular RNAs regulate PKR activation in innate immu-nityJ.Cell,2019,177(4):865-880.18Yang Y,Gao X,Zhang M,et al.Novel role of FBXW7 cir-cular RNA in repressing glioma tumorigenesisJ.JNatl Cancer Inst,2018,110(3):304-315.19Jiang L,Li H,Fan Z,et al.Circular RNA expression pro-files in neonatal rats following hypoxic-ischemic braindamageJ.Int J Mol Med,2019,43(4):1699-1708.20Lavenniah A,Luu TDA,Li YP,et al.Engineered circularRNA sponges act as miRNA inhibitors to attenuatepressureoverload-inducedcardiachypertrophyJ.Mol Ther,2020,28(6):1506-1517.21Carrara M,Fuschi P,Ivan C,et al.Circular RNAs:Meth-odological challenges and perspectives in cardiovas-cular diseases J.J Cell Mol Med,2018,22(11):5176-5187.22Fang Y,Wang X,Li W,et al.Screening of circular RNAsand validation of circANKRD36 associated with inflam-mation in patients with type 2 diabetes mellitusJ.Int J Mol Med,2018,42(4):1865-1874.23 Liu X,Abraham JM,Cheng Y,et al.Synthetic circularRNA functions as a miR-21 sponge to suppress gastriccarcinoma cell proliferationJ.Mol Ther Nucleic Ac-ids,2018,13:312-321.24Xie B,Zhao Z,Liu Q,et al.CircRNA has_circ_0078710acts as the sponge of microRNA-31 involved in hepa-tocellular carcinoma progression J.Gene,2019,683:253-261.25 Kristensen LS,Hansen TB,Ven MT,et al.CircularRNAs in cancer:opportunities and challenges in thefieldJ.Oncogene,2018,37(5):555-565.26 Bustelo M,Barkhuizen M,van den Hove DLA,et al.Clinical implications of epigenetic dysregulation inperinatal hypoxic-ischemic brain damageJ.FrontNeurol,2020,11:483.27 Rybak-Wolf A,Stottmeister C,Glaar P,et al.CircularRNAs in the mammalian brain are highly abundant,conserved,and dynamically expressedJ.Mol Cell,2015,58(5):870-885.28 Ven MT,Hansen TB,Ven ST,et al.Spatio-temporalregulation of circular RNA expression during porcineembryonic brain development J.Genome Biol,2015,16:245.29Zhu L,Zhao R,Huang L,et al.Circular RNA expressionin the brain of a neonatal rat model of periventricularwhite matter damage J.Cell Physiol Biochem,2018,49(6):2264-2276.30赵婧,屈艺,母得志.抑制第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源等位基因活性对缺氧缺血神经元凋亡的保护作用J.中华实用儿科临床杂志,2013,28(24):1855-1859.31 Lu YY,Li ZZ,Jiang DS,et al.TRAF1 is a critical regula-tor of cerebral ischaemia-reperfusion injury and neu-ronal deathJ.Nat Commun,2013,4:2852.32 Piwecka M,Glaar P,Hernandez-Miranda LR,et al.Loss of a mammalian circular RNA locus causes miR-NA deregulation and affects brain functionJ.Sci-ence,2017,357(6357):eaam8526.33Chen W,Wang H,Zhu Z,et al.Exosome-shuttled circ-SHOC2 from IPASs regulates neuronal autophagy andameliorates ischemic brain injury via the miR-7670-3p/SIRT1 axisJ.Mol Ther Nucleic Acids,2020,22:471Chin J Clin Pharmacol Ther 2024 Apr;29(4)657-672.34Wang G,Han B,Shen L,et al.Silencing of circular RNAHIPK2 in neural stem cells enhances functional recov-ery following ischaemic stroke J.EbioMedicine,2020,52:102660.35Qian X,Zheng S,Yu Y.CircUBE3B high expression par-ticipates in sevoflurane-induced human hippocampalneuron injury via targeting miR-326 and regulatingMYD88 expression J.Neurotox Res,2023,41(1):16-28.36Mei Z,Huang L,Rao W.CircNUFIP2 overexpression in-duces GDF11 to ameliorate oxygen-glucose depriva-tion-induced hippocampal neuron cell apoptosis andoxidative stress after cerebral ischemiaJ.NeurolRes,2023,45(1):70-80.37 Ranjbar Taklimie F,Gasterich N,Scheld M,et al.Hy-poxia induces astrocyte-derived lipocalin-2 in isch-emic strokeJ.Int J Mol Sci,2019,20(6):1271.38满江,王建平,鲁争芳,等.星形胶质细胞与缺血性脑卒中后炎症反应J.中华行为医学与脑科学杂志,2020,29(9):860-864.39Shao W,Zhang SZ,Tang M,et al.Suppression of neu-roinflammation by astrocytic dopamine D2 receptorsvia B-crystallinJ.Nature,2013,494(7435):90-94.40Randhawa PK,Jaggi AS.A review on potential involve-ment of TRPV1 channels in ischemia-reperfusioninju-ryJ.J Cardiovasc Pharmacol Ther,2018,23(1):38-45.41Shirakawa H,Sakimoto S,Nakao K,et al.Transient re-ceptor potential canonical 3(TRPC3)mediates throm-bin-induced astrocyte activation and upregulates itsown expression in cortical astrocytesJ.J Ne