病原微生物评估综合报告.doc

病原微生物风险评定汇报模板1、 生物风险评定依据1）病原微生物试验室生物安全管理条例2）试验室生物安全通用要求3）人间传染病原微生物名目4）WHO试验室生物安全手册2、生物风险评定要素1）病原微生物特征；2）病原微生物相关试验活动；3）试验活感人员；4）试验活动设施、设备和环境；5）风险认定和评定结论。3 生物风险评定实施3.1病原微生物特征评定1）通常生物学特征：病原微生物起源、基因组及编码、产物形态特征、培养特征、细菌或病毒属别和型别内容或技术判定。2）致病性：临床症状、潜伏期、病程、感染剂量、入侵部位、宿主类型、否产生毒素等。3）感染路径：呼吸道、消化道、血液、媒介、皮肤感染等。4）环境中稳定性：是指其抵御外界环境存活能力，不一样微生物稳定性不一样，对病原微生物稳定性评定除考虑其在自然界中稳定性外，还应考虑其对物理原因和化学消毒剂敏感性。5）致病性和感染剂量：不一样病原致病性不一样，即使同类病原不一样菌（毒）株也有不一样强度致病力；另微生物致病性和被感染者免疫状态、易感性相关；暴露后果取决于病原微生物致病性和机体抵御力；不一样属、种、亚种、型病原微生物，甚至不一样株病原微生物，其致病性各异； 还取决于所感染病原微生物剂量，当大量病原微生物侵袭人体时，潜伏期通常较短，而病情则较为严重；不一样个体被传染后，可产生多种不一样结局。6）传输路径：传输方法包含呼吸道传输、经过水和食物等消化道传输、接触传输、血液传输、母婴垂直传输、媒介传输等；传输结果包含一个病原可有多个传输路径和多个病原能够引发相同症状。7）试验动物研究、试验室感染。8）有效预防和诊疗方法：有效药品、有效疫苗、疾病监测手段、有效预防控制方法手段。3.2病原微生物试验活动评定1）试验活动：是指试验室从事和人病原微生物菌（毒）种、样本相关研究、教学培训、检测等活动。2）试验活动类型包含：标本或样品处理、离心、匀浆、超声、移液操作、锐器使用、生物安全柜使用、医疗废物消毒或高压灭菌处理等。3）试验活动风险影响原因：3a.气溶胶产生：离心、旋转、匀浆、接种环等。b.潜在伤害：注射器等锐器、酒精灯、玻璃器皿等。c.标本浓缩：来自临床、现场、培养、浓缩等。d.毒株和细胞：野毒、减毒、疫苗株、毒素产生等。e.操作指导书。4) 病原微生物动物试验风险原因a.标准试验室废弃物处理程序。b.化学消毒剂选择、配置和使用。c.物理消毒设备使用和维护。d.多种试验材料、器具，尤其是锐器处理。e.动物试验动物及其排泄物处理。5) 废弃物处理风险影响原因:a.标准试验室废弃物处理程序。b.化学消毒剂选择、配置和使用。c.物理消毒设备使用和维护。d.多种试验材料、器具，尤其是锐器处理。e.动物试验动物及其排泄物处理。3.3试验活感人员要求评定1）健康情况和健康历史、耐药和过敏。2）人员资质和心里素质。3）生物安全知识。4）微生物学专业知识。5）操作设施设备技能。6）免疫情况。7）培训情况。8）应急事件处理能力。3.4设施、环境和设备原因要求评定1）生物安全试验室对应等级设施。2）试验室生物安全设备。3）试验室检测相关设备。4）应急设施。5）设施设备管理、维护、校准和检验。3.5风险评定结论（降低风险方法）：1）病原微生物风险分类2）试验活动和对应设施设备要求3）个人防护装备要求4）人员生物安全和专业技术资质要求5）人员健康和素质要求6）预防和诊疗方法要求7）菌（毒）种和试验活动等风险管理要求8）应急预案和方法要求4、生物安全委员会负责审核病原微生物风险评定汇报适宜性和科学性，并做出评定结论。生物因子生物危害评定汇报模板*菌危害评定汇报一、危害程度分类(一)分类等级(二)不一样试验操作生物安全试验室等级要求二、背景资料(一)通常生物学特征1形态染色2培养特征(二)在外界环境稳定性1在自然环境中稳定性和对温度敏感性2对日光和紫外线敏感性3对化学因子敏感性(三)致病性和感染数量 (四)传输路径及暴露后果1传输路径2暴露后后果(五)*菌宿主范围(六)*菌预防、诊疗和诊疗1预防2诊疗3诊疗三、试验室试验活动及其危险性和预防方法(一)试验室试验活动背景资料1试验活动内容2试验包含*菌菌毒种背景资料3试验室*菌感染动物和培养物最高存量(二)可能造成不良后果原因和预防方法1试验样品接收和开启拟采取防护方法：2试验样品涂片拟采取防护方法：3*菌接种培养拟采取防护方法：4*菌培养物和动物器官细菌再分离样品制备拟采取防护方法：5试验样品研磨6*菌攻击拟采取防护方法：7感染动物喂养8感染动物解剖9动物血清标本和未经灭活组织标本采集10病理观察用组织标本采集11试验仪器设备12试验动物病原微生物潜伏感染13培养物和试验废弃物销毁14室内空气、试验用具和操作台面污染15菌种和培养物保藏(三)试验室试验活动危害评定四、工作人员素质五、评定结论附表*菌试验室试验活动风险评定*试验室工作人员个人素质评价表金黄色葡萄球菌生物危害评定汇报一、金黄色葡萄球菌传输和致病 金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在，在空气、水、灰尘及人和动物排泄物中全部可找到。所以，食品受其污染机会很多。金黄色葡萄球菌肠毒素是个世界性卫生问题，在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引发食物中毒占整个细菌性食物中毒33%，加拿大则更多，占45%，中国每十二个月发生这类中毒事件也很多。 金黄色葡萄球菌流行病学通常有以下特点：季节分布，多见于春夏季；中毒食品种类多，如奶、肉、蛋、鱼及其制品。另外，剩饭、油煎蛋、糯米糕及凉粉等引发中毒事件也有报道；上呼吸道感染患者鼻腔带菌率83%，所以人畜化脓性感染部位常成为污染源。 通常说，金黄色葡萄球菌可经过以下路径污染食品：食品加工人员、炊事员或销售人员带菌，造成食品污染；食品在加工前本身带菌，或在加工过程中受到了污染，产生了肠毒素，引发食物中毒；熟食制品包装不严，运输过程受到污染；奶牛患化脓性乳腺炎或禽畜局部化脓时，对肉体其它部位污染。 而肠毒素形成条件包含：存放温度，在37内，温度越高，产毒时间越短；存放地点，通风不良氧分压低易形成肠毒素；食物种类，含蛋白质丰富，水分多，同时含一定量淀粉食物，肠毒素易生成。 金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见病原菌，可引发局部化脓感染，也可引发肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等，甚至败血症、脓毒症等全身感染。 葡萄球菌性菌血症可发生于任何和血管内导管或其它异物相关不足葡萄球菌脓肿或感染,它是严重烧伤病人死亡常见原因。连续性发烧常见,而且可伴有休克。 葡萄球菌性心内膜炎尤其好发于静脉注射给药者和装有些人工心脏瓣膜病人。忽然出现心脏杂音,脓毒性栓子和其它经典体征便可作出可疑诊疗,确诊需依据超声心动图和血培养。 葡萄球菌性骨髓炎关键见于儿童,可引发寒战,发烧和受累骨疼痛,继之出现红肿。关节周围感染常引发关节积液,提醒为化脓性关节炎而不是骨髓炎。白细胞计数常15000/l而且血培养常阳性。X线改变在1014日内不显著,骨质疏松和骨皮质反应甚至更长时间仍不能测出,而放射性核素骨扫描则常能较早出现异常。 现在葡萄球菌性小肠结肠炎很罕见,但若住院病人出现发烧,肠梗阻,腹痛和腹胀,低血压或腹泻,尤其是新近作过腹部手术或接收过抗生素者,可提醒本病。若粪便镜检发觉大片嗜中性白细胞和革兰氏阳性球菌,则可能作出诊疗,但必需排除产毒性艰苦梭状芽胞杆菌感染,这是抗生素相关性结肠炎最常见原因。 金黄色葡萄球菌致病力强弱关键取决于其产生毒素和侵袭性酶：a.溶血毒素：外毒素，分、四种，能损伤血小板，破坏溶酶体，引发肌体局部缺血和坏死；b.杀白细胞素：可破坏人白细胞和巨噬细胞；c.血浆凝固酶：当金黄色葡萄球菌侵入人体时，该酶使血液或血浆中纤维蛋白沉积于菌体表面或凝固，阻碍吞噬细胞吞噬作用。葡萄球菌形成感染易局部化和此酶相关；d.脱氧核糖核酸酶：金黄色葡萄球菌产生脱氧核糖核酸酶能耐受高温，可用来作为依据判定金黄色葡萄球菌；e.肠毒素：金黄色葡萄球菌能产生数种引发急性胃肠炎蛋白质性肠毒素，分为A、B、C、D、E及F五种血清型。肠毒素可耐受100C煮沸30分钟而不被破坏。它引发食物中毒症状是呕吐和腹泻。另外，金黄色葡萄球菌还产生溶表皮素、明胶酶、蛋白酶、脂肪酶、肽酶等。二、金黄色葡萄球菌生物学特征经典金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8m左右，显微镜下呈单个、成双和排列成葡萄串状。金黄色葡萄球菌属于葡萄球菌属，无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜，革兰氏染色阳性衰老、死亡和被白细胞吞噬后菌体革兰染色呈阴性。金黄色葡萄球菌营养要求不高，在一般培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧，最适生长温度3537、最适生长pH7.47.6。 金黄色葡萄球菌有高度耐盐性，可在10-15%NaCl肉汤中生长。可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。甲基红反应阳性，VP反应弱阳性。很多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝酸盐，液化明胶。金黄色葡萄球菌含有较强抵御力，对磺胺类药品敏感性低，但对青霉素、红霉素等高度敏感。三、金黄色葡萄球菌检测和诊疗1.标本采集 采自不一样感染部位多种标本，包含血液、脑脊液、穿刺液；痰液、脓液、创伤分泌物、尿液、粪便和呕吐物等。2.直接涂片镜检 直接涂片检验在正常情况下呈无菌状态体液标本如血液、脑脊液、穿刺液等，若有检出革兰氏阳性，显微镜下呈葡萄状排列、无芽胞、荚膜，直径0.5-1m球菌。即含相关键临床价值。3.分离培养 能够选择一般营养琼脂平板、血平板和高盐甘露醇平板，血平板用葡萄糖肉汤增菌培养基。该菌在一般肉汤中呈均匀快速混浊生长；若接种于琼脂平板上35过夜后可形成直径约23mm厚菌落、湿润有光泽、呈金黄色不透明圆形凸起。若接种于血平板，菌落周围可形成显著透明溶血环。在高甘露醇平板上金黄色葡萄球菌生成淡橙黄色菌落，以此可和其它凝固酶阴性葡萄球菌相判别。4.判别试验（1）血浆凝固酶试验：血浆凝固酶是金黄色葡萄球菌所产生，和其致病力相关一个侵袭性酶，其作用是使血浆中纤维蛋白在菌体表面沉积和凝固以阻碍吞噬细胞吞噬。血浆凝固酶分为结合型和游离型。前者结合在细菌细胞壁上，能直接作用于血浆中纤维蛋白原，使之转化为纤维蛋白，围绕菌体而形成凝块。而游离型血浆凝固酶则在产生后被分泌到菌体外，不能直接作用于纤维蛋白原，但能够激活血浆凝血酶原，使之转化成凝血酶，后者再作用于纤维蛋白原使其转化为纤维蛋白。具体测量方法也所以分为玻片法和试管法两种。玻片法:将待试菌落乳化于玻片上盐水中，经1020S证实无自凝后，用接种环取人或兔血浆一环，和乳化菌液混合，出现凝集者为阳性，另设生理盐水为阴性对照。试管法:吸收0.5mL兔血浆和0.5mL金黄色葡萄球菌肉浸液肉汤二十四小时培养物充足混匀，置37培养，每隔半小时观察一次，连续观察6小时，出现凝固，立即小试管倾斜或倒置时，内容物不流动，判为阳性。（2）耐热核酸酶试验：将二十四小时肉汤培养物沸水浴处理15min，用接种环划线刺种于甲苯胺兰-DNA平板，35培养二十四小时，在刺种线周围出现淡粉色者为阳性。本试验金黄色葡萄球菌为阳性。（3）甘露醇发酵试验 金黄色葡萄球菌可发酵甘露醇。（4）Staphaurex 胶乳凝集试验 是判定金黄色葡萄球菌一个快速、简便商品化直接凝集试验。其基础原理是在纸片上滴加包被有纤维蛋白原和IgG抗体聚苯乙烯胶乳，然后用接种环挑取待判定菌株新鲜培养物加入混匀，若出现凝集块现象即为阳性。5.生化判定 如上述，注意和其它凝固酶阳性葡萄球菌判别关键点：PYR（吡咯烷酮-萘基酰胺试验阴性；VP试验阳性；鸟氨酸脱羧酶试验阴性。6.免疫学方法 用酶联免疫吸附试验和对流免疫电泳方法可检测金葡菌磷壁酸抗体。7.分子生物学方法 包含PFGE脉冲场凝胶电泳和酶切图谱分析等。四、金黄色葡萄球菌防治及生物安全防护一、细菌防治金黄色葡萄球菌控制关键包含：1）预防金黄色葡萄球菌污染食品，预防带菌人群对多种食物污染：定时对生产加工人员进行健康检验，患局部化脓性感染（如疥疮、手指化脓等）、上呼吸道感染（如鼻窦炎、化脓性肺炎、口腔疾病等）人员要临时停止其工作或调换岗位。预防金黄色葡萄球菌对奶及其制品污染：如牛奶厂要定时检验奶牛乳房，不能挤用患化脓性乳腺炎牛奶；奶挤出后，要快速冷至-10以下，以防毒素生成、细菌繁殖。奶制品要以消毒牛奶为原料，注意低温保留。对肉制品加工厂，患局部化脓感染禽、畜尸体应除去病变部位，经高温或其它合适方法处理后进行加工生产。2）预防金黄色葡萄球菌肠毒素生成 应在低温和通风良好条件下贮藏食物，以防肠毒素形成；在气温高春夏季，食物置冷藏或通风阴凉地方也不应超出6小时，而且食用前要根本加热。3）无菌方法(如检验病人前后根本洗手和消毒适用器械)至关关键。已被感染病人应和其它易感病人隔离,患有活动性葡萄球菌感染,即使是局部性感染(如疖)医护人员,在其感染治愈前不得接触病人或器械。无症状鼻腔带菌者,除非所带菌株十分危险或被怀疑为暴发流行传染源,通常无须隔离。诊疗包含脓肿引流,抗生素(重症病人需肠外给药)和全身支持疗法。培养标本应在开始诊疗前或更换抗生素之前获取。抗生素选择和剂量取决于感染部位,疾病严重程度和细菌对药品敏感性。医院取得葡萄球菌和大多数小区取得菌株,通常对青霉素G,氨苄青霉素和抗假单胞菌青霉素有耐药性。大多数菌株对耐青霉素酶青霉素(甲氧苯青霉素,苯甲异噁唑青霉素,乙氧萘青霉素,邻氯青霉素,双氯青霉素),头孢菌素(头孢菌素,头孢唑啉,头孢菌素,头孢拉定,头孢羟唑,头孢西丁和第三代头孢菌素),卡巴培南类(亚胺培南,美罗匹宁),庆大霉素,万古霉素,替考拉宁,林可霉素和氯林可霉素,是敏感。即使头孢菌素和万古霉素全部有效,但通常首选一个耐青霉素酶青霉素。很多葡萄球菌菌株对红霉素,四环素类药品,氨基糖苷类,杆菌肽和氯霉素也敏感,但因有愈加好更安全药可用,故极少使用氯霉素和杆菌肽。现在耐甲氧苯青霉素金黄色葡萄球菌(MRSA)菌株日益增多，这种细菌虽可从小区取得感染病人中分离得到,但多数是从感染静脉吸毒者和重症监护室病人中分离取得。MRSA菌株通常对耐-内酰胺酶青霉素,头孢菌素和卡巴培南类有耐药性。这些细菌对氨基糖苷类和大环内酯类(红霉素,克拉霉素,阿齐霉素,林可霉素和氯林可霉素)耐药性也很普遍。即使亚胺培南-西拉司丁或喹诺酮类对一些MRSA感染是有效,但静脉注射万古霉素为首选。肾功效正常成人通用剂量是每6小时静脉注射500mg 或每12小时静滴注1000mg,最少在1小时内滴完。肾功效受损时,剂量应依据血清中药品浓度加以调整,疗程视感染部位及病人反应而定,但通常为 24周。一些严重或有并发症感染,可能需要静脉给药诊疗68周,然后再口服诊疗1个月或更长时间。可用于替换万古霉素诊疗MRSA感染药品有：TMP-SMZ,成人剂量为TMP1015mg /(kg.d)加SMZ5075mg/(kg.d),分剂口服或肠外给药,每次间隔8小时或12小时,连续24周；利福平(600mg/d)口服或肠外给药；肠外给亚胺培南-西拉司丁(500mg每6小时1次)或美罗匹宁(0.51.0g每8小时1次。但利福平不要单独应用,因为细菌很易产生抗药性。在诊疗异物相关性MRSA感染或浆膜腔MRSA感染时,利福平和氨基糖苷类是有用辅助药品。邻氯青霉素,双氯青霉素,TMP-SMZ,环丙沙星及局部用莫匹罗星(mupirocin)可用于诊疗MRSA带菌状态,但MRSA对这些药品可产生抗药性。抗万古霉素肠球菌(VRE)菌株流行日益增加, 这种菌株在试验室中可将引发抗万古霉素基因转为凝固酶阳性金黄色葡萄球菌菌株,而在感染病人中则转变为凝固酶阴性葡萄球菌分离株。可是这些葡萄球菌很轻易对诊疗这类感染其它药品产生抗药性。杆菌肽,若有话,可试用于诊疗抗万古霉素葡萄球菌感染。对这些病人应严格隔离,以防她们细菌传输。二、细菌生物安全防护依据病原微生物生物试验室生物安全管理条例中相关要求，人间传输微生物名目（待颁布）金黄色葡萄球菌属于三类，BSL-2。相关防护事宜包含：（1）操作要求1、试验时，未经试验室主任同意，限制或严禁进入试验室。2、不许在工作区域饮食、吸烟、清洗隐型眼镜和化妆。食物应存放在工作区域以外专用橱柜或冰箱中。3、全部操作过程应尽可能细心，避免产生和溅出气溶胶。4、对于污染锐器，必需时刻保持高度警惕，包含针、注射器、玻片、加样器等。5、注射和吸收感染材料时，只能使用针头固定注射器或一次性注射器（即注射器和针头是一体）。用过一次性针头必需弯曲、切断、破碎、重新套上针头套、从一次性注射器上去掉，或在丢弃前进行人工处理，要不将之小心放入不会被刺穿、用于搜集废弃锐器容器中。非一次性锐器必需放置在坚壁容器中，转移至处理区消毒，最好高压杀菌。6、打坏器皿不能直接用手处理，必需用其它工具处理，如刷子和簸箕、夹子或镊子。盛污染针头、锐器、碎玻璃容器在倒掉前，应按摄影关要求进行消毒。7、全部培养物、储存物及其它要求废物在释放前，均应使用可行消毒方法进行消毒，如高压灭菌。转移到就近试验室消毒物料应置于耐用、防漏容器内，密封运出试验室。离开该系统进行消毒物料，在转移前应包装，其包装应符合相关法规。8、溅出或偶然事件中，显著暴露于传染源时，要立即向试验室主任汇报。进行合适医学评定、观察、诊疗，保留书面统计。9、按日常程序、在相关传染源工作结束后、尤其是传染源溅出或洒出后、或受到其它传染源污染后，试验室设备和工作台面应该使用有效消毒剂消毒。污染设备在送去修理、维护前，要按摄影关要求消毒；在离开设施转移前，要按摄影关要求打包运输。（2）安全设备1、正确使用和保养生物安全柜、最好是二级生物安全柜、或其它适宜人员防护设施、或物理遏制装置。2、确定可能形成传染性气溶胶或溅出物试验过程，包含离心、研磨、匀浆、猛烈震荡或混匀、超声波破裂、开启装有传染源容器、采集感染标本等。3、包含高浓度或大致积传染源时，若选择密封转头或带安全罩离心机，若转头或安全罩仅在生物安全柜中打开，则可在开放试验室内离心。4、当必需在生物安全柜外处理标本时，需采取面部保护方法（跟镜、口罩、面罩、或其它防溅装置），以免传染源或其它有害物溅或洒到面上。5、在试验室内，必需使用专用防护性外衣、大褂、罩衫或制服。人员到非试验室区域时，防护服必需留在试验室内。防护服能够在试验室内处理，也能够在洗衣房中洗涤，但不能带回家中。6、可能接触潜在传染源、被污染表面或设备时，要戴手套。一次性手套不用清洗、不能反复使用，不能用于接触“洁净”表面（键盘、电话等），也不应该戴着到试验室外。要备有带滑石粉乳胶手套。脱掉手套后，要洗手。淋病奈瑟菌生物危害评定汇报一、淋病奈瑟菌传输和致病淋病奈瑟菌又称淋球菌，是淋病病原菌，人类是本菌唯一天然宿主和传染源。淋病是淋菌性尿道炎简称，是由淋球菌引发泌尿生殖系统化脓性炎性疾病，它是人类很古老，也是目前世界范围内流行很广泛一个性传输疾病。淋病患者是关键传染源，有症状或无症状患者均可经过性接触传输，其中轻症或无症状淋病患者是关键传染源。其传输路径关键包含性交传染，还可经过非性接触传输，如经过接触患者分泌物污染用具（衣裤、床上用具、毛巾、浴盆、马桶等）间接感染；孕妇淋病患者当羊膜破裂，可继发羊膜腔内及胎儿感染；新生儿经过患淋病母体产道时常可引发淋菌性眼炎；另外尚可经过医护人员手和器具引发医源性感染。本病最初多侵犯尿道、宫颈内膜，继而可波及前列腺、精囊、副睾、子宫内膜及输卵管。有时肛门、直肠、咽粘膜、眼结膜也可受染。尚可经血行播散引发菌血症、关节炎、心内膜炎及脑膜炎，可引发死亡或不育、不孕、失明及尿道狭窄等后果。因为本病潜伏期短、传染性强、后果严重，所以它是中国目前关键防治性病之一。二、淋病奈瑟菌生物学特征淋病奈瑟菌属奈瑟菌属，镜下呈肾形，常成双排列，邻近面扁平或稍凹，像两瓣黄豆对在一起，大小0.6m0.8m。革兰氏染色阴性，呈粉红色，美蓝染色呈蓝色。急性炎症期细菌多在患者分泌物少部分中性粒细胞胞浆中，慢性期则多在细胞外，且有些可呈单个球形或四联状。人工培养后形态亦常呈球形、单个、成双或四联排列。淋球菌适于潮湿（相对温度8085）、温暖（35.536.5）、中性偏碱（pH7.27.6）、含510二氧化碳条件下生长。最怕干燥，在完全干燥环境下只能存活12小时，对温度改变敏感，超出38或低于30则不能生长，在培养基上室温放置12天即可死亡，在39 存活13小时，42存活15分钟，50存活5分钟。如在不完全干燥衣裤、被褥、毛巾、玩具上则可存活18二十四小时。通常消毒剂轻易将它杀灭，在 1:4000硝酸银溶液中7分钟死亡，1石炭酸溶液中3分钟内死亡。 淋球菌较为娇嫩，酶系统不完整，初代培养一般培养基不易成功，需在含有动物蛋白培养基上，且含有二氧化碳条件下才能生长。淋球菌在血琼脂培养基孵育二十四小时后，可形成直径0.51mm圆形稍隆起，湿润光滑，半透明，边缘呈花瓣状，有粘性露滴状菌。 淋球菌生化反应不发达，只分解葡萄糖，产酸不产气，不分解麦芽糖及蔗糖。藉助上述生化特征亦可和脑膜炎球菌及其它奈瑟菌相判别。淋球菌能产生氧化酶和过氧化氢酶，在诊疗上有一定意义。三、淋病奈瑟菌试验室检验及其诊疗细菌试验室检验及其它检验（1） 涂片检验：取患者尿道分泌物或宫颈分泌物，作革兰氏染色，在多形核白细胞内找到革兰氏阴性双球菌。涂片对有大量脓性分泌物单纯淋菌性前尿道炎患者，此法阳性率在90%左右，能够初步诊疗。女性宫颈分泌物中杂菌多，敏感性和特异性较差，阳性率仅为50-60%，且有假阳性，所以世界卫生组织推荐用培养法检验女病人。慢性淋病因为分泌物中淋球菌较少，阳性率低，所以要取前列腺按摩液，以提升检出率。咽部涂片发觉革兰氏阴性双球菌不能诊疗淋病，因为其它奈瑟菌属在咽部是正常菌群。另外对症状不经典涂片阳性应作深入检验。（2）培养检验：淋球菌培养是诊疗关键佐证，培养法对症状很轻或无症状男性、女性病人全部是较敏感方法，只要培养阳性就可确诊，在基因诊疗问世以前，培养是世界卫生组织推荐筛选淋病唯一方法。现在国外推荐选择培养基有改良Thayer-Martin（TM）培养基和New York City（NYC）培养基。中国采取巧克力琼脂或血琼脂培养基，均含有抗生素，可选择地抑制很多其它细菌生长。在36，70%湿度，含 5%-10%CO2（烛缸）环境中培养，24-48小时观察结果。培养后还需进行菌落形态，革兰氏染色，氧化酶试验和糖发酵试验等判定。培养阳性率男性 80%-95%，女性80-90%。培养后需依据菌落形态、革兰染色、氧化酶试验和糖发酵试验做出判定。培养阳性率男性为8095，女性为 8090。（3）抗原检测1固相酶免疫试验（EIA）：可用来检测临床标本中淋球菌抗原，在流行率很高地域而又不能作培养或标本需长时间远送时使用，能够在妇女人群中用来诊疗淋球菌感染。2直接免疫荧光试验：经过检测淋球菌外膜蛋白I单克隆抗体作直接免疫荧光试验。但现在在男女二性标本敏感不高，特异性差，加之试验人员判定水平，故该试验尚不能推荐用来诊疗淋球菌感染。（4）基因诊疗1淋球菌基因探针诊疗:淋球菌基因探针诊疗，所用探针有：质粒DNA探针，染色体基因探针和rRNA基因探针。2、淋球菌基因扩增检测 PCR技术和连接酶链反应出现深入提升了检测淋球菌灵敏性，它含有快速、灵敏、特异、简便优点，能够直接检测临床标本中极微量病原体。（5）药敏试验 对培养阳性者可深入用纸片扩散法做药敏试验，或用琼脂平皿稀释法测定药品最小抑菌浓度（MIC），和用纸片酸度定量法检测内酰胺酶（使用 Whatman I号滤纸PP-NG菌株能使其颜色由蓝变黄，阳性为PPNG，阴性为N-PPNG），以确定淋球菌对抗生素敏感性，合理选择用药。四、淋病预防淋病奈瑟菌预防关键点以下：1.避免婚外性行为。2.在性生活中提倡使用避孕套等理化屏障，以预防淋球菌感染。3.预防性使用抗生素可降低感染危险，可应用于已知和淋病患者有性接触者。4.按淋病诊疗方案对病人进行合理诊疗，根本消亡传染源。5.对性伴侣应进行检验和诊疗。6.患者宜注意个人卫生和隔离，不和家人、小孩（尤其女孩）同床、共浴。7.实施对新生儿硝酸银溶液或红霉素溶液预防滴眼要求，预防新生儿淋病性眼炎发生。8.病人需经根本治愈后，方可结婚、生育和安排工作。五、淋病奈瑟菌生物安全防护依据病原微生物生物试验室生物安全管理条例中相关要求，人间传输微生物名目（待颁布）霍乱弧菌属于三类，BSL-2。相关防护事宜包含：（1）操作要求1、试验时，未经试验室主任同意，限制或严禁进入试验室。2、不许在工作区域饮食、吸烟、清洗隐型眼镜和化妆。食物应存放在工作区域以外专用橱柜或冰箱中。3、对于污染锐器，必需时刻保持高度警惕，包含针、注射器、玻片、加样器等。4、注射和吸收感染材料时，只能使用针头固定注射器或一次性注射器（即注射器和针头是一体）。用过一次性针头必需弯曲、切断、破碎、重新套上针头套、从一次性注射器上去掉，或在丢弃前进行人工处理，要不将之小心放入不会被刺穿、用于搜集废弃锐器容器中。非一次性锐器必需放置在坚壁容器中，转移至处理区消毒，最好高压杀菌。5、打坏器皿不能直接用手处理，必需用其它工具处理，如刷子和簸箕、夹子或镊子。盛污染针头、锐器、碎玻璃容器在倒掉前，应按摄影关要求进行消毒。6、全部培养物、储存物及其它要求废物在释放前，均应使用可行消毒方法进行消毒，如高压灭菌。转移到就近试验室消毒物料应置于耐用、防漏容器内，密封运出试验室。离开该系统进行消毒物料，在转移前应包装，其包装应符合相关法规。7、溅出或偶然事件中，显著暴露于传染源时，要立即向试验室主任汇报。进行合适医学评定、观察、诊疗，保留书面统计。8、按日常程序、在相关传染源工作结束后、尤其是传染源溅出或洒出后、或受到其它传染源污染后，试验室设备和工作台面应该使用有效消毒剂消毒。污染设备在送去修理、维护前，要按摄影关要求消毒；在离开设施转移前，要按摄影关要求打包运输。（2）安全设备1、正确使用和保养生物安全柜、最好是二级生物安全柜、或其它适宜人员防护设施、或物理遏制装置。2、确定可能形成传染性溅出物试验过程，包含离心、研磨、匀浆、猛烈震荡或混匀、超声波破裂、开启装有传染源容器、采集感染标本等。3、包含高浓度或大致积传染源时，若选择密封转头或带安全罩离心机，若转头或安全罩仅在生物安全柜中打开，则可在开放试验室内离心。4、当必需在生物安全柜外处理标本时，需采取面部保护方法（跟镜、口罩、面罩、或其它防溅装置），以免传染源或其它有害物溅或洒到面上。5、在试验室内，必需使用专用防护性外衣、大褂、罩衫或制服。人员到非试验室区域时，防护服必需留在试验室内。防护服能够在试验室内处理，也能够在洗衣房中洗涤，但不能带回家中。6、可能接触潜在传染源、被污染表面或设备时，要戴手套。一次性手套不用清洗、不能反复使用，不能用于接触“洁净”表面（键盘、电话等），也不应该戴着到试验室外。要备有带滑石粉乳胶手套。脱掉手套后，要洗手。结核杆菌生物危害评定汇报一、结核杆菌传输和致病结核杆菌通常指结核分枝杆菌和牛分枝杆菌，其中结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis）是引发人类结核病关键病原体。结核分枝杆菌关键传染路径是经呼吸道传输，由排菌肺结核病人在咳嗽、喷嚏或大声说话时随呼吸道分泌物排出到空气中，或排菌肺结核病人随地吐痰经过再生气溶胶(尘埃)，携带结核杆菌，飞扬在空气中，被健康人吸入后发生感染和发病，所以排菌肺结核患者(尤其是痰涂片阳性未经诊疗者)是结核病关键传染源。通常结核病患者痰中结核杆菌越多，传输危险性越大。患者排出飞沫在1-10微米者，在空气中漂浮时间长，传染性越大。患者病变和症状越严重，传染性也越大。周围人群和患者接触越亲密者，受感染机会越多。和患者同处于空气不流通室内亲密接触者，受感染可能性增大。未受结核感染人是结核病易感人群，因为结核病是人畜共患病，哺乳类动物如牛、鹿、猴、猪、猫、狗等也全部能够患结核病。感染结核杆菌后，终生全部有可能发病，发病时间因人而异，通常2个月20年才发病。经典肺结核起病缓慢，病程较长，有低热、倦怠、食欲不振、咳嗽及少许咯血。但多数患者病灶轻微，无显著症状。（1）症状全身症状表现为午后低热、乏力、食欲不振、消瘦、盗汗等。呼吸系统症状通常为干咳或带少许黏液痰；继发感染时，痰呈粘液脓性。约1/3患者有不一样程度咯血，咯血后常有低热。大咯血时可发生失血性休克，偶因血块阻塞大气道引发窒息。病灶炎症累及壁层胸膜时，对应胸壁有刺痛，通常多不猛烈，随呼吸及咳嗽而加重。若并发气胸或大量胸腔积液，呼吸困难症状尤为严重。（2）体征早期病灶小或在肺组织深部，多无异常体征。若病变范围较大，患侧肺部呼吸运动减弱，叩诊呈浊音，听诊时呼吸音减低，或为支气管肺泡呼吸音。因肺结核好发于肺上叶尖后段及下叶背段，故锁骨上下、肩胛区叩诊略浊，咳嗽后偶可闻及湿啰音，对诊疗有参考意义。肺部病变发生广泛纤维化或胸膜粘连增厚时，患侧胸廓常呈下陷、肋间隙变窄、气管移位和叩浊，对侧可有代偿性肺气肿征。二、结核杆菌生物学特征从分类学上看结核杆菌属于裂殖菌纲、放线菌目、分枝杆菌科、分枝杆菌属。结核分枝杆菌正常经典形态是直或稍弯曲、两端钝圆杆菌，菌体长1-4纳米，宽0.3-0.6纳米，无芽胞、无荚膜、无鞭毛，生长发育期间有分枝生长倾向。镜下常呈单个散在或呈“人、V、T、Y”形排列，菌体多时细菌扭集一起呈绳索状、束状或丛状。另外结核杆菌菌体还含有多形态特征，受不良生长条件影响可分别表现为杆菌型 (基础形态)、滤过型、颗粒型和球菌型(L型)4种不一样类型。分枝杆菌生长缓慢，在人工培养基内繁殖一代约需15-20小时，通常需2-4周或更长时间始见菌落生长，甚至有极少数生长极为缓慢者需8周以上才开始有菌落生长。它为专性需氧菌，生长温度范围是35-40，pH 5.5-7.2。培养营养要求较高且特殊，培养基需含鸡蛋、血清、氨基酸、甘油等营养丰富复杂有机物及少许无机盐类。而且结核杆菌伴随环境改变易发生菌落形态、毒力、L型及药品耐药性变异，如在人工培养基上反复连续传代，可产生变异而致毒力降低，三、结核杆菌检测和诊疗（1）细菌试验室检验及其它检验 结核菌检验是确诊肺结核最特异性方法，痰中找到结核菌为确诊肺结核关键依据。涂片抗酸染色镜检快速简便。在中国非经典分枝杆菌尚属少见，故抗酸杆菌阳性，肺结核诊疗基础即可成立。痰菌阳性表明其病灶是开放性，含有传染性。培养法更为正确，尚可作药品敏感试验和菌型判定。但结核菌生长缓慢，培养较为费时，但正确可靠，特异性高。若涂片阴性或诊疗有疑问时，培养尤其关键；而且，培养后可做药品敏感性测定，指导临床用药。PCR技术检测结核菌 DNA快速、简便，并可判定菌型，不足之处是可能出现假阳性或假阴性。 影像学检验胸部X线检验能够发觉肺内病变部位、范围、有没有空洞或空洞大小、洞壁厚薄等。X线对各类结核病透过分不一样，经过X线检验能大致估量结核病灶病理性质，并能早期发觉肺结核，和判定病情发展及诊疗效果，有利于决定诊疗方案。肺结核常见X线表现包含：纤维钙化硬结病灶、浸润性病灶和干酪样病灶等。胸部CT检验对于发觉微小或隐蔽性病变，了解病变范围及病变判别等方面全部有帮助。 结核菌素试验是诊疗结核感染参考指标。使用变应原有旧结核菌素（old tuberculin, OT）和结核菌素纯化蛋白衍化物（purified protein derivative, PPD），现临床多用PPD。皮内注射0.1ml（5IU），硬结平均直径5mm为阳性反应。结核菌素试验有利于判定有没有结核菌感染。若呈强阳性反应，常表示为活动性结核病。结核菌素试验阳性反应仅表示曾有结核感染，并不一定现在患病。结核菌素试验阴性反应除表示没有结核菌感染外，尚需考虑以下情况：结核菌在感染48周后才建立充足变态反应，在这之前，结核菌素试验可呈阴性；应用糖皮质激素等免疫抑制剂，或营养不良、麻疹、百日咳等患者，结核菌素反应亦可临时消失。 其它检验结核病患者血像通常无改变，严重病例常有继发性贫血，急性粟粒型肺结核时白细胞总数减低或出现类白血病反应。血沉增快常见于活动性肺结核。用ELISA法检测患者血清中特异性抗体，可对无痰或痰菌阴性者和肺外结核诊疗提供参考。纤支镜检验对于发觉气管内膜结核、了解有没有肿瘤、吸收分泌物、解除阻塞或作病原菌及脱落细胞检验，和取活组织作病理检验等，全部相关键诊疗价值。浅表淋巴结活检，有利于结核判别诊疗。（2）诊疗和判别诊疗痰结核菌检验不仅是诊疗肺结核关键依据，亦是考评疗效、随访病情关键指标。X线检验是诊疗肺结核必需手段，对早期诊疗、确定病变部位、范围、性质、了解其演变及选择诊疗等均含相关键价值。在临床诊疗中，中国现用分类法包含四部分，即肺结核类型、病变范围及空洞部位、痰菌检验、活动性及转归。肺结核分为五型：型为原发型肺结核；型为血行播散型肺结核；型为浸润型肺结核；型为慢性纤维空洞型肺结核；型为结核性胸膜炎。还应注意将结核病和肺癌、肺炎、支气管扩张、慢性支气管哮喘和其它发烧性疾病如伤寒、败血症、白血病、纵隔淋巴瘤及结节病等进行判别。四、结核杆菌防治及生物安全防护细菌防治依据中国传染病防治法和试验室生物安全通用要求中相关要求，结核病属于乙类传染病，根据乙类传染病进行预防控制。在结核病预防方面要针对传染源、传输路径、易感人群三个步骤，采取以管理和控制传染源为主综合性防治方法，努力做到“早发觉、早汇报、早诊疗”，以利于控制和管理传染源。临床上肺结核化学诊疗标准是早期、规律、全程、适量、联合。整个诊疗方案分强化和巩固两个阶段。中国结核病防治计划指南要求采取统一标准化学诊疗方案。表1国家防痨计划结核病化疗方案疗程 化疗方案6个月 2RHZ/4RH 2ERHZ/4RH或4R2H2