动物实验技术与方法-(医学生用的生化学习).ppt

肺细胞株肺细胞株 曾芳曾芳 分类：分类：编号、名称、器官来源、疾病来源、癌编号、名称、器官来源、疾病来源、癌/正常正常组织、细胞成分、转染、病理分类、恶性程度、组织、细胞成分、转染、病理分类、恶性程度、有无转移、细胞遗传分析、有无转移、细胞遗传分析、DNA表达谱、培养表达谱、培养方式、表达的癌基因、细胞形态、方式、表达的癌基因、细胞形态、Comments基基因组特点（如哪些基因发生变异以及存在表达因组特点（如哪些基因发生变异以及存在表达异常）、生物安全、受体、抗原表达、实验室异常）、生物安全、受体、抗原表达、实验室目前已有的细胞目前已有的细胞 动物实验技术与方法动物实验技术与方法 在在医医学学教教学学、科科研研和和医医疗疗工工作作中中，不不论论是是从从事事基基础础医医学学还还是是临临床床医医学学或或预预防防医医学学，都都需需要要用用实实验验动动物物来来进进行行各各种种实实验验。通通过过对对动动物物实实验验的的观观察察、分分析析，来来研研究究需需要要解解决决的的问问题题，动动物物实实验验方方法法已已成成为为研研究究工工作作中中必必不不可少的重要手段。可少的重要手段。动物实验动物实验按微生物学控制按微生物学控制标准或微生物净化程度，标准或微生物净化程度，分为四级：分为四级：1.普通动物普通动物(Conventional animal,CV)2.清洁动物清洁动物(Clean animal,CL)3.无特定病原体动物无特定病原体动物(Specific pathogen free animal,SPF)4.无菌动物无菌动物(Germfree animal,GF)和悉生动物和悉生动物(Gnotobiotic animal,GN)实验动物微生物控制分实验动物微生物控制分级级1.普通动物（普通动物（Conventional animal，CV动物）动物）定定 义：义：不带有严重危害动物自身健康和人兽共患病病原体的动物，是在微生物学控制上要求最低的动物。饲养条件：饲养条件：开放系统来来 源：源：经微生物学检查不带有上述病原体的动物，或SPF动物降级。2.清洁动物（清洁动物（Clean animal，CL动物）动物）定定 义：义：除普通动物因排除的病原外，不携带对动物危害大和对科学研究干扰大的病原，又称二级动物。饲养条件：饲养条件：半屏障系统内来来 源：源：SPF动物扩群3.无特定病原体动物（无特定病原体动物（Specific pathogen free animal，SPF）定定 义：义：指不携带特定病原体（细菌、病毒、寄生虫），但带有未知的微生物群的动物。饲养条件：饲养条件：屏障系统内大规模生产/隔离器内保种来来 源：源：将无菌动物/悉生动物转移到屏障系统中饲养繁殖4.无菌动物（无菌动物（Germfree animal，GF）定义：定义：指用现有的实验手段检测，动物的体表体内不携带其它生命体（包括一切微生物和寄生虫）的实验动物。饲养条件：饲养条件：无菌隔离器内来源来源：第一代通过无菌剖腹产术，人工哺乳获得；以后通过无菌动物雌雄交配繁殖或无菌剖腹产术，保姆鼠代奶扩群。4.悉生动物（悉生动物（Gnotobiotic animal，GN）定定 义：义：又称已知菌动物，指体内带有明确的微生物种类的动物。饲养条件：饲养条件：无菌隔离器内来来 源：源：人为将已知的微生物投给无菌动物，使其体内带有已知菌q动物实验前的准备动物实验前的准备q实验动物的抓取和固定实验动物的抓取和固定q实验动物给药方法实验动物给药方法q实验动物的麻醉实验动物的麻醉q实验动物的处死方法实验动物的处死方法q动物的购入动物的购入q动物外观健康检查动物外观健康检查q动物编号标记动物编号标记q动物被毛的去除动物被毛的去除动物实验前的准备动物实验前的准备动物的购入动物的购入动物的购入动物的购入 购购购购入入入入或或或或领领领领取取取取实实实实验验验验动动动动物物物物时时时时，应应应应向向向向供供供供应应应应部部部部门门门门索索索索取取取取所所所所用用用用动动动动物物物物相相相相应应应应等等等等级级级级的的的的质质质质量量量量合合合合格格格格证证证证书书书书，若若若若是是是是购购购购入入入入或或或或领领领领取取取取清清清清洁洁洁洁级级级级以以以以上上上上实实实实验验验验动动动动物物物物，应应应应采采采采用用用用带带带带有有有有空空空空气气气气过过过过滤滤滤滤膜膜膜膜的的的的无无无无菌菌菌菌运运运运输输输输罐罐罐罐或或或或带带带带过过过过滤滤滤滤帽帽帽帽的的的的笼笼笼笼盒盒盒盒运运运运输输输输，并并并并严严严严格格格格检检检检查查查查其其其其密密密密封状况。封状况。封状况。封状况。q皮毛：有无光泽、出血、干燥；皮毛：有无光泽、出血、干燥；q眼：有无眼屎、流泪、白内障、角膜损伤眼：有无眼屎、流泪、白内障、角膜损伤等；等；q耳：有无外伤、耳壳曲折、中耳炎等；耳：有无外伤、耳壳曲折、中耳炎等；q四肢：有无弯曲、脱臼、外伤、关节炎；四肢：有无弯曲、脱臼、外伤、关节炎；q肛门：有无下痢、血便、脱肛等。肛门：有无下痢、血便、脱肛等。动物外观健康检查动物外观健康检查动物外观健康检查动物外观健康检查编号标记编号标记编号标记编号标记 目的：为了分组目的：为了分组目的：为了分组目的：为了分组要求：清晰、耐久、简便、适用要求：清晰、耐久、简便、适用要求：清晰、耐久、简便、适用要求：清晰、耐久、简便、适用颜料标记：颜料标记适应于较大量的大、小鼠等小动颜料标记：颜料标记适应于较大量的大、小鼠等小动颜料标记：颜料标记适应于较大量的大、小鼠等小动颜料标记：颜料标记适应于较大量的大、小鼠等小动物的编号。常用的颜料有物的编号。常用的颜料有物的编号。常用的颜料有物的编号。常用的颜料有5%5%5%5%苦味酸溶液苦味酸溶液苦味酸溶液苦味酸溶液 (黄色黄色黄色黄色)、2%2%2%2%硝酸银溶液硝酸银溶液硝酸银溶液硝酸银溶液 (咖啡色咖啡色咖啡色咖啡色)、0.5%0.5%0.5%0.5%中性品红溶液中性品红溶液中性品红溶液中性品红溶液 (红色红色红色红色)、煤焦油的酒精溶液煤焦油的酒精溶液煤焦油的酒精溶液煤焦油的酒精溶液(黑色黑色黑色黑色)。颜料号的原则是先左后右，。颜料号的原则是先左后右，。颜料号的原则是先左后右，。颜料号的原则是先左后右，从上而下。从上而下。从上而下。从上而下。小鼠和大鼠标号示图小鼠和大鼠标号示图q烙印烙印烙印烙印 用号码烙印钳在兔、豚鼠的耳朵烙号，用号码烙印钳在兔、豚鼠的耳朵烙号，用号码烙印钳在兔、豚鼠的耳朵烙号，用号码烙印钳在兔、豚鼠的耳朵烙号，然后在烙印部位涂上溶在酒精中的黑墨或煤粉。然后在烙印部位涂上溶在酒精中的黑墨或煤粉。然后在烙印部位涂上溶在酒精中的黑墨或煤粉。然后在烙印部位涂上溶在酒精中的黑墨或煤粉。猪等大动物也可用此法在臀部皮肤烙号标记。也猪等大动物也可用此法在臀部皮肤烙号标记。也猪等大动物也可用此法在臀部皮肤烙号标记。也猪等大动物也可用此法在臀部皮肤烙号标记。也有将实验分组编号烙在狗脖套的皮带颈圈上。有将实验分组编号烙在狗脖套的皮带颈圈上。有将实验分组编号烙在狗脖套的皮带颈圈上。有将实验分组编号烙在狗脖套的皮带颈圈上。q纹身纹身纹身纹身 用刺数钳在局部皮肤用刺数钳在局部皮肤用刺数钳在局部皮肤用刺数钳在局部皮肤(兔多在耳朵内侧，兔多在耳朵内侧，兔多在耳朵内侧，兔多在耳朵内侧，猴多在前胸皮肤猴多在前胸皮肤猴多在前胸皮肤猴多在前胸皮肤)刺上号码，再用棉签蘸上墨汁刺上号码，再用棉签蘸上墨汁刺上号码，再用棉签蘸上墨汁刺上号码，再用棉签蘸上墨汁酒精涂沫刺号，多用于猴、兔的编号。酒精涂沫刺号，多用于猴、兔的编号。酒精涂沫刺号，多用于猴、兔的编号。酒精涂沫刺号，多用于猴、兔的编号。q号牌号牌 将不锈钢或铝质号牌固定在狗将不锈钢或铝质号牌固定在狗或猴的链条或颈圈上。兔号牌则固定在或猴的链条或颈圈上。兔号牌则固定在耳朵上。少量动物时也可将号牌挂在笼耳朵上。少量动物时也可将号牌挂在笼具上，但应防止抓取操作后将动物放错具上，但应防止抓取操作后将动物放错笼具而混淆编号。笼具而混淆编号。q毛色毛色 利用动物的毛色将其编号，用于少利用动物的毛色将其编号，用于少量的狗、马、猫、猴等大动物的编号。量的狗、马、猫、猴等大动物的编号。q剪毛剪毛 用剪刀在狗背上剪出号码，此方法用剪刀在狗背上剪出号码，此方法简单，字迹清楚、可靠，便于观察。简单，字迹清楚、可靠，便于观察。q打孔打孔 用打孔器在兔耳上打孔或剪口。用打孔器在兔耳上打孔或剪口。为为了了排排除除动动物物被被毛毛对对实实验验操操作作和和观观察察结结果果的的影影响响，实实验验中中需需要要去去除除或或剪剪短短动物的被毛。动物的被毛。动物被毛的去除动物被毛的去除脱毛剂脱毛剂脱毛剂脱毛剂1)8%NaS 1)8%NaS 1)8%NaS 1)8%NaS NaSNaSNaSNaS 8g+8g+8g+8g+水至水至水至水至100ml100ml100ml100ml；也可用硫化钠；也可用硫化钠；也可用硫化钠；也可用硫化钠8 8 8 8克、淀粉克、淀粉克、淀粉克、淀粉7 7 7 7克、甘油克、甘油克、甘油克、甘油4 4 4 4克、硼砂克、硼砂克、硼砂克、硼砂1 1 1 1克，用自来水加克，用自来水加克，用自来水加克，用自来水加至至至至100ml100ml100ml100ml。常用于兔及小鼠等小型动物的脱毛。常用于兔及小鼠等小型动物的脱毛。常用于兔及小鼠等小型动物的脱毛。常用于兔及小鼠等小型动物的脱毛。上述配制好的溶液上述配制好的溶液上述配制好的溶液上述配制好的溶液5 5 5 57ml7ml7ml7ml可用于可用于可用于可用于 1515151512cm12cm12cm12cm2 2 2 2皮肤皮肤皮肤皮肤的脱毛。的脱毛。的脱毛。的脱毛。2)10%NaS 2)10%NaS 2)10%NaS 2)10%NaS 硫化钠硫化钠硫化钠硫化钠10101010克、氧化钙克、氧化钙克、氧化钙克、氧化钙15151515克，自来水克，自来水克，自来水克，自来水加至加至加至加至100ml100ml100ml100ml。常用于狗、猪等较大动物的皮肤。常用于狗、猪等较大动物的皮肤。常用于狗、猪等较大动物的皮肤。常用于狗、猪等较大动物的皮肤动物的抓取与固定方法动物的抓取与固定方法 q目的：限制动物的活动，持安静状态目的：限制动物的活动，持安静状态 以便正确操作和记录以便正确操作和记录q要求：要求：不损伤实验动物不损伤实验动物 不影响观察指标不影响观察指标 实验者不被动物咬伤实验者不被动物咬伤 保证实验顺利进行保证实验顺利进行小心细致、大胆敏捷，切忌粗暴小心细致、大胆敏捷，切忌粗暴。F一、小鼠一、小鼠 用右手提起小鼠尾巴将其放在鼠笼盖或其它用右手提起小鼠尾巴将其放在鼠笼盖或其它粗糙表面上，在小鼠向前挣扎爬行时，用左手粗糙表面上，在小鼠向前挣扎爬行时，用左手拇指和食指捏住其双耳及颈部皮肤，将小鼠置拇指和食指捏住其双耳及颈部皮肤，将小鼠置于左手掌心、无名指和小指夹其背部皮肤和尾于左手掌心、无名指和小指夹其背部皮肤和尾部，即可将小鼠完全固定。部，即可将小鼠完全固定。二、大鼠二、大鼠二、大鼠二、大鼠 大鼠的门齿很长。实验者应戴上帆布手套，右手大鼠的门齿很长。实验者应戴上帆布手套，右手大鼠的门齿很长。实验者应戴上帆布手套，右手大鼠的门齿很长。实验者应戴上帆布手套，右手轻轻抓住大鼠的尾巴向后拉，但要避免抓其尖端，左轻轻抓住大鼠的尾巴向后拉，但要避免抓其尖端，左轻轻抓住大鼠的尾巴向后拉，但要避免抓其尖端，左轻轻抓住大鼠的尾巴向后拉，但要避免抓其尖端，左手抓紧鼠两耳和头颈部的皮肤，并将大鼠固定在左手手抓紧鼠两耳和头颈部的皮肤，并将大鼠固定在左手手抓紧鼠两耳和头颈部的皮肤，并将大鼠固定在左手手抓紧鼠两耳和头颈部的皮肤，并将大鼠固定在左手中，右手即可进行操作。中，右手即可进行操作。中，右手即可进行操作。中，右手即可进行操作。F三、豚鼠三、豚鼠 抓取幼小的豚鼠时，可用双手捧起来；抓抓取幼小的豚鼠时，可用双手捧起来；抓取较大的豚鼠时，取较大的豚鼠时，先用手轻轻扣、按住豚鼠背部，顺势抓紧其肩胛上方皮肤，拇指和食指环其颈部，用另一只手轻轻托住其臀部，即可将豚鼠抓取固定四、家兔四、家兔四、家兔四、家兔 一只手抓住兔的颈部皮毛，将兔提起，用另一一只手抓住兔的颈部皮毛，将兔提起，用另一一只手抓住兔的颈部皮毛，将兔提起，用另一一只手抓住兔的颈部皮毛，将兔提起，用另一只手托其臀，或用手抓住背部皮肤提起来。因家只手托其臀，或用手抓住背部皮肤提起来。因家只手托其臀，或用手抓住背部皮肤提起来。因家只手托其臀，或用手抓住背部皮肤提起来。因家兔耳大，故人们常误认为抓其耳可以提起，或有兔耳大，故人们常误认为抓其耳可以提起，或有兔耳大，故人们常误认为抓其耳可以提起，或有兔耳大，故人们常误认为抓其耳可以提起，或有人用手挟住其腰背部提起均为不正确的操作。人用手挟住其腰背部提起均为不正确的操作。人用手挟住其腰背部提起均为不正确的操作。人用手挟住其腰背部提起均为不正确的操作。实验动物的给药途径和方法实验动物的给药途径和方法 为了观察药物对机体功能、代谢、形态的影响，为了观察药物对机体功能、代谢、形态的影响，为了观察药物对机体功能、代谢、形态的影响，为了观察药物对机体功能、代谢、形态的影响，需要将药物注入实验动物体内。由于实验目的、动需要将药物注入实验动物体内。由于实验目的、动需要将药物注入实验动物体内。由于实验目的、动需要将药物注入实验动物体内。由于实验目的、动物种类、药物剂型不同，给药途径和方法也多种多物种类、药物剂型不同，给药途径和方法也多种多物种类、药物剂型不同，给药途径和方法也多种多物种类、药物剂型不同，给药途径和方法也多种多样。样。样。样。（一）（一）口服给药口服给药 经口给药剂量准确，对动物安全，是动物实验经口给药剂量准确，对动物安全，是动物实验经口给药剂量准确，对动物安全，是动物实验经口给药剂量准确，对动物安全，是动物实验中常用的给药方法，尤其是移植实验中受体动物的中常用的给药方法，尤其是移植实验中受体动物的中常用的给药方法，尤其是移植实验中受体动物的中常用的给药方法，尤其是移植实验中受体动物的肠道灭菌处理，必须口服肠道不吸收的抗生素。肠道灭菌处理，必须口服肠道不吸收的抗生素。肠道灭菌处理，必须口服肠道不吸收的抗生素。肠道灭菌处理，必须口服肠道不吸收的抗生素。1 1灌胃法灌胃法灌胃法灌胃法 是借灌胃器将药物直接灌到动物胃内的一是借灌胃器将药物直接灌到动物胃内的一是借灌胃器将药物直接灌到动物胃内的一是借灌胃器将药物直接灌到动物胃内的一种常用给药方法，此法给药剂量准确。但是每种常用给药方法，此法给药剂量准确。但是每种常用给药方法，此法给药剂量准确。但是每种常用给药方法，此法给药剂量准确。但是每天强制性操作和定时给药会给动物造成一定程天强制性操作和定时给药会给动物造成一定程天强制性操作和定时给药会给动物造成一定程天强制性操作和定时给药会给动物造成一定程度的机械性损伤和心理上的影响。因此必须充度的机械性损伤和心理上的影响。因此必须充度的机械性损伤和心理上的影响。因此必须充度的机械性损伤和心理上的影响。因此必须充分掌握灌胃技术。分掌握灌胃技术。分掌握灌胃技术。分掌握灌胃技术。（1）鼠类）鼠类：鼠类的灌胃器由注射器和特殊的灌：鼠类的灌胃器由注射器和特殊的灌胃针构成。左手固定鼠，右手持灌胃器，将灌胃针胃针构成。左手固定鼠，右手持灌胃器，将灌胃针从鼠的右口角插入口中，沿咽后壁慢慢插入食道，从鼠的右口角插入口中，沿咽后壁慢慢插入食道，使其前端到达膈肌位置。灌胃针插入时应无阻力，使其前端到达膈肌位置。灌胃针插入时应无阻力，如有阻力或动物挣扎则应退针或将针拔出，以免损如有阻力或动物挣扎则应退针或将针拔出，以免损伤、穿破食道或误入气管。伤、穿破食道或误入气管。（2 2）兔、猪、犬等）兔、猪、犬等）兔、猪、犬等）兔、猪、犬等：灌胃一般要借助于开口器、灌灌胃一般要借助于开口器、灌灌胃一般要借助于开口器、灌灌胃一般要借助于开口器、灌胃管进行。先将动物固定，再将开口器固定于上下门胃管进行。先将动物固定，再将开口器固定于上下门胃管进行。先将动物固定，再将开口器固定于上下门胃管进行。先将动物固定，再将开口器固定于上下门齿之间，然后将灌胃管（常用导尿管代潜）从开口器齿之间，然后将灌胃管（常用导尿管代潜）从开口器齿之间，然后将灌胃管（常用导尿管代潜）从开口器齿之间，然后将灌胃管（常用导尿管代潜）从开口器的小孔插入动物口中，沿咽后壁而进入食道。插入后的小孔插入动物口中，沿咽后壁而进入食道。插入后的小孔插入动物口中，沿咽后壁而进入食道。插入后的小孔插入动物口中，沿咽后壁而进入食道。插入后应检查灌胃管是否确实插入食道。可将灌胃管外开口应检查灌胃管是否确实插入食道。可将灌胃管外开口应检查灌胃管是否确实插入食道。可将灌胃管外开口应检查灌胃管是否确实插入食道。可将灌胃管外开口放入盛水的烧杯中，若无气泡产生，表明灌胃管被正放入盛水的烧杯中，若无气泡产生，表明灌胃管被正放入盛水的烧杯中，若无气泡产生，表明灌胃管被正放入盛水的烧杯中，若无气泡产生，表明灌胃管被正确插入胃中，未误入气管。确插入胃中，未误入气管。确插入胃中，未误入气管。确插入胃中，未误入气管。动物种类动物种类插入深度，插入深度，每次灌胃量：每次灌胃量：小白鼠小白鼠3cm3cm1ml1ml大白鼠、豚鼠大白鼠、豚鼠5cm5cm1-4ml1-4ml兔兔 15cm15cm80-100ml80-100ml犬犬约约20cm20cm200-250ml200-250ml（二）注射给药法（二）注射给药法（二）注射给药法（二）注射给药法 注射给药剂量准确、作用快，是动物实验中注射给药剂量准确、作用快，是动物实验中注射给药剂量准确、作用快，是动物实验中注射给药剂量准确、作用快，是动物实验中常用的给药方法，给药时应注意针头的选择（鼠常用的给药方法，给药时应注意针头的选择（鼠常用的给药方法，给药时应注意针头的选择（鼠常用的给药方法，给药时应注意针头的选择（鼠类用类用类用类用4#4#4#4#针头，兔、猫、犬、猪、猴用针头，兔、猫、犬、猪、猴用针头，兔、猫、犬、猪、猴用针头，兔、猫、犬、猪、猴用6 6 6 68#8#8#8#针头）。针头）。针头）。针头）。1 1皮下注射皮下注射皮下注射皮下注射 皮下注射时用左手拇指和食指轻轻提起运动皮下注射时用左手拇指和食指轻轻提起运动皮下注射时用左手拇指和食指轻轻提起运动皮下注射时用左手拇指和食指轻轻提起运动皮肤，右手持注射器，使针头水平刺入皮下，推皮肤，右手持注射器，使针头水平刺入皮下，推皮肤，右手持注射器，使针头水平刺入皮下，推皮肤，右手持注射器，使针头水平刺入皮下，推送药液使注射部位隆起。拔针时，以手指捏住针送药液使注射部位隆起。拔针时，以手指捏住针送药液使注射部位隆起。拔针时，以手指捏住针送药液使注射部位隆起。拔针时，以手指捏住针刺部位，可防止药液外漏。皮下注射剂量为刺部位，可防止药液外漏。皮下注射剂量为刺部位，可防止药液外漏。皮下注射剂量为刺部位，可防止药液外漏。皮下注射剂量为0.1-0.1-0.1-0.1-0.3ml/10g.0.3ml/10g.0.3ml/10g.0.3ml/10g.皮下注射一般选取皮下组织疏松的部位，皮下注射一般选取皮下组织疏松的部位，皮下注射一般选取皮下组织疏松的部位，皮下注射一般选取皮下组织疏松的部位，大鼠、大鼠、大鼠、大鼠、小鼠和豚鼠小鼠和豚鼠小鼠和豚鼠小鼠和豚鼠可在颈后肩胛间、腹部两侧作皮下注射；可在颈后肩胛间、腹部两侧作皮下注射；可在颈后肩胛间、腹部两侧作皮下注射；可在颈后肩胛间、腹部两侧作皮下注射；家兔家兔家兔家兔可在背部或耳根部作皮下注射：可在背部或耳根部作皮下注射：可在背部或耳根部作皮下注射：可在背部或耳根部作皮下注射：猫、犬猫、犬猫、犬猫、犬则在大则在大则在大则在大腿外侧作皮下注射。腿外侧作皮下注射。腿外侧作皮下注射。腿外侧作皮下注射。2 2皮内注射皮内注射皮内注射皮内注射 将注射部位脱毛、消毒，用左手拇指和食指压将注射部位脱毛、消毒，用左手拇指和食指压将注射部位脱毛、消毒，用左手拇指和食指压将注射部位脱毛、消毒，用左手拇指和食指压住皮肤并使之绷紧，在两指之间，用皮试针头紧贴住皮肤并使之绷紧，在两指之间，用皮试针头紧贴住皮肤并使之绷紧，在两指之间，用皮试针头紧贴住皮肤并使之绷紧，在两指之间，用皮试针头紧贴皮肤表层刺入皮内，然后向上挑起并再稍刺入。随皮肤表层刺入皮内，然后向上挑起并再稍刺入。随皮肤表层刺入皮内，然后向上挑起并再稍刺入。随皮肤表层刺入皮内，然后向上挑起并再稍刺入。随之慢慢注入一定量的药液之慢慢注入一定量的药液之慢慢注入一定量的药液之慢慢注入一定量的药液,会感到有很大阻力会感到有很大阻力会感到有很大阻力会感到有很大阻力.F缓慢注射，皮肤表面出现白色桔皮样隆起，若隆缓慢注射，皮肤表面出现白色桔皮样隆起，若隆起可维持一定时间，则证明确实注射在皮内起可维持一定时间，则证明确实注射在皮内.如如很快消失很快消失,就可能注入皮下就可能注入皮下,应重换部位再注射应重换部位再注射,如果注射完毕后马上拔针如果注射完毕后马上拔针,药液会从针孔漏出药液会从针孔漏出,所所以需注射后以需注射后5min5min再拔出再拔出.3 3肌肉注射肌肉注射肌肉注射肌肉注射 肌肉注射一般选肌肉发达，无大血管通过的部位。肌肉注射一般选肌肉发达，无大血管通过的部位。肌肉注射一般选肌肉发达，无大血管通过的部位。肌肉注射一般选肌肉发达，无大血管通过的部位。注射时针头宜垂直迅速刺入肌肉，回抽针栓如无回血，注射时针头宜垂直迅速刺入肌肉，回抽针栓如无回血，注射时针头宜垂直迅速刺入肌肉，回抽针栓如无回血，注射时针头宜垂直迅速刺入肌肉，回抽针栓如无回血，即可注射。即可注射。即可注射。即可注射。大鼠、小鼠、豚鼠大鼠、小鼠、豚鼠大鼠、小鼠、豚鼠大鼠、小鼠、豚鼠可注射大腿外侧肌肉；可注射大腿外侧肌肉；可注射大腿外侧肌肉；可注射大腿外侧肌肉；家兔家兔家兔家兔可在腰椎旁的肌肉、臀部或股部肌肉注射：可在腰椎旁的肌肉、臀部或股部肌肉注射：可在腰椎旁的肌肉、臀部或股部肌肉注射：可在腰椎旁的肌肉、臀部或股部肌肉注射：犬、猴犬、猴犬、猴犬、猴等大型动物选臂部注射。等大型动物选臂部注射。等大型动物选臂部注射。等大型动物选臂部注射。4 4腹腔注射腹腔注射腹腔注射腹腔注射 腹部向上，应尽量使动物头处于低位，使内脏腹部向上，应尽量使动物头处于低位，使内脏腹部向上，应尽量使动物头处于低位，使内脏腹部向上，应尽量使动物头处于低位，使内脏移向上腹，将针头在下腹部腹白线稍向左的位置移向上腹，将针头在下腹部腹白线稍向左的位置移向上腹，将针头在下腹部腹白线稍向左的位置移向上腹，将针头在下腹部腹白线稍向左的位置,注射器沿注射器沿注射器沿注射器沿45454545角斜向穿过腹肌进入腹腔，此时有落角斜向穿过腹肌进入腹腔，此时有落角斜向穿过腹肌进入腹腔，此时有落角斜向穿过腹肌进入腹腔，此时有落空感，回抽无回血或尿液，即可注入药液。空感，回抽无回血或尿液，即可注入药液。空感，回抽无回血或尿液，即可注入药液。空感，回抽无回血或尿液，即可注入药液。q小鼠的一次注射剂量为小鼠的一次注射剂量为小鼠的一次注射剂量为小鼠的一次注射剂量为0.1-0.2ml/10g(0.1-0.2ml/10g(0.1-0.2ml/10g(0.1-0.2ml/10g(体重体重体重体重)q大鼠一次注射剂量为大鼠一次注射剂量为大鼠一次注射剂量为大鼠一次注射剂量为1-2ml/100g(1-2ml/100g(1-2ml/100g(1-2ml/100g(体重体重体重体重).).).).q家兔：下腹部近腹白线左右两侧家兔：下腹部近腹白线左右两侧家兔：下腹部近腹白线左右两侧家兔：下腹部近腹白线左右两侧1cm1cm1cm1cm处处处处q犬：脐后腹白线两侧边犬：脐后腹白线两侧边犬：脐后腹白线两侧边犬：脐后腹白线两侧边1 1 1 12cm2cm2cm2cm处进行腹腔注射处进行腹腔注射处进行腹腔注射处进行腹腔注射5 5静脉注射静脉注射静脉注射静脉注射 将药液直接注射于静脉管内，使其随着血液分布将药液直接注射于静脉管内，使其随着血液分布将药液直接注射于静脉管内，使其随着血液分布将药液直接注射于静脉管内，使其随着血液分布全身全身全身全身,迅速奏效。但排泄较快，作用时间较短。迅速奏效。但排泄较快，作用时间较短。迅速奏效。但排泄较快，作用时间较短。迅速奏效。但排泄较快，作用时间较短。（1 1 1 1）小鼠和大鼠）小鼠和大鼠）小鼠和大鼠）小鼠和大鼠：常采用尾静脉注射。鼠尾静脉共常采用尾静脉注射。鼠尾静脉共常采用尾静脉注射。鼠尾静脉共常采用尾静脉注射。鼠尾静脉共有有有有3 3 3 3根，根，根，根，左右两侧和背侧各左右两侧和背侧各左右两侧和背侧各左右两侧和背侧各1 1 1 1根。注射时，先将动物根。注射时，先将动物根。注射时，先将动物根。注射时，先将动物固定在暴露尾部的固定器内，尾部用固定在暴露尾部的固定器内，尾部用固定在暴露尾部的固定器内，尾部用固定在暴露尾部的固定器内，尾部用4545454550505050的温水的温水的温水的温水浸润几分钟或用浸润几分钟或用浸润几分钟或用浸润几分钟或用75%75%75%75%酒精棉球反复擦拭使血管扩张，酒精棉球反复擦拭使血管扩张，酒精棉球反复擦拭使血管扩张，酒精棉球反复擦拭使血管扩张，并使表皮角质软化。并使表皮角质软化。并使表皮角质软化。并使表皮角质软化。各种动物一次给药能耐受的最大容量各种动物一次给药能耐受的最大容量(ml)(ml)动物动物 灌胃灌胃 皮内注射皮内注射 皮下注射皮下注射 肌肉注射肌肉注射 腹腔注射腹腔注射 静脉注射静脉注射 小鼠小鼠 0.9 0.1 1.5 0.2 1.0 0.8 大鼠大鼠 5.0 0.1 5.0 0.5 2.0 4.0 兔兔 200 0.2 10 2.0 5.0 10 猫猫 150 0.2 10 2.0 5.0 10 猴猴 300 0.3 50 3.0 10 20 狗狗 500 0.3 100 4.0 _ 100血样的采集血样的采集 根据不同的实验要求及不同种类的实根据不同的实验要求及不同种类的实验动物而采取不同的采血方法。如：验动物而采取不同的采血方法。如：心心心心脏脏脏脏、胸胸胸胸主主主主动动动动脉脉脉脉、股股股股动动动动脉脉脉脉、静静静静脉脉脉脉、剪剪剪剪(割割割割、刺刺刺刺)尾、眼眶、断头尾、眼眶、断头尾、眼眶、断头尾、眼眶、断头1 1小鼠和大鼠小鼠和大鼠小鼠和大鼠小鼠和大鼠（1 1）剪尾采血：需血量较少时常用此法。）剪尾采血：需血量较少时常用此法。）剪尾采血：需血量较少时常用此法。）剪尾采血：需血量较少时常用此法。先将动物固定，将鼠尾浸在先将动物固定，将鼠尾浸在先将动物固定，将鼠尾浸在先将动物固定，将鼠尾浸在45454545左右温水中几分左右温水中几分左右温水中几分左右温水中几分钟或用酒精棉球涂擦鼠尾钟或用酒精棉球涂擦鼠尾钟或用酒精棉球涂擦鼠尾钟或用酒精棉球涂擦鼠尾,使尾部血管充盈使尾部血管充盈使尾部血管充盈使尾部血管充盈,剪去尾尖剪去尾尖剪去尾尖剪去尾尖1 1 1 12mm(2mm(2mm(2mm(小鼠小鼠小鼠小鼠)或或或或3 3 3 35mm(5mm(5mm(5mm(大鼠大鼠大鼠大鼠),),),),使血液顺血管壁自由流使血液顺血管壁自由流使血液顺血管壁自由流使血液顺血管壁自由流入试管或用血红蛋白吸管吸取。采血结束时入试管或用血红蛋白吸管吸取。采血结束时入试管或用血红蛋白吸管吸取。采血结束时入试管或用血红蛋白吸管吸取。采血结束时,伤口消毒伤口消毒伤口消毒伤口消毒并压迫止血。此法每只鼠一般可采血并压迫止血。此法每只鼠一般可采血并压迫止血。此法每只鼠一般可采血并压迫止血。此法每只鼠一般可采血10101010次以上，小鼠次以上，小鼠次以上，小鼠次以上，小鼠每次可取血每次可取血每次可取血每次可取血0.1ml0.1ml0.1ml0.1ml左右，大鼠可取血左右，大鼠可取血左右，大鼠可取血左右，大鼠可取血0.30.30.30.30.5ml0.5ml0.5ml0.5ml。（2 2）眼眶后静脉丛采血：操作者一手固定小鼠或大鼠，眼眶后静脉丛采血：操作者一手固定小鼠或大鼠，眼眶后静脉丛采血：操作者一手固定小鼠或大鼠，眼眶后静脉丛采血：操作者一手固定小鼠或大鼠，食指和拇指轻轻压迫颈部两侧，使眶后静脉丛充血，食指和拇指轻轻压迫颈部两侧，使眶后静脉丛充血，食指和拇指轻轻压迫颈部两侧，使眶后静脉丛充血，食指和拇指轻轻压迫颈部两侧，使眶后静脉丛充血，另一只手持毛细采血管，以另一只手持毛细采血管，以另一只手持毛细采血管，以另一只手持毛细采血管，以45454545从内眼角刺入，并向从内眼角刺入，并向从内眼角刺入，并向从内眼角刺入，并向下旋转，感觉刺入静脉丛后，再向外边退边吸，当得下旋转，感觉刺入静脉丛后，再向外边退边吸，当得下旋转，感觉刺入静脉丛后，再向外边退边吸，当得下旋转，感觉刺入静脉丛后，再向外边退边吸，当得到所需血量后，放松加于颈部的压力，并拔出采血器，到所需血量后，放松加于颈部的压力，并拔出采血器，到所需血量后，放松加于颈部的压力，并拔出采血器，到所需血量后，放松加于颈部的压力，并拔出采血器，以防穿刺孔出血。若技术熟练，此方法在短期内可重以防穿刺孔出血。若技术熟练，此方法在短期内可重以防穿刺孔出血。若技术熟练，此方法在短期内可重以防穿刺孔出血。若技术熟练，此方法在短期内可重复采血，小鼠一次可采复采血，小鼠一次可采复采血，小鼠一次可采复采血，小鼠一次可采0.2-0.3ml0.2-0.3ml0.2-0.3ml0.2-0.3ml，大鼠可采血约，大鼠可采血约，大鼠可采血约，大鼠可采血约0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml。如只进行一次取血，可采用摘眼球法。如只进行一次取血，可采用摘眼球法。如只进行一次取血，可采用摘眼球法。如只进行一次取血，可采用摘眼球法。（3 3）股动脉采血：大量取血时常用此法。需手术分股动脉采血：大量取血时常用此法。需手术分股动脉采血：大量取血时常用此法。需手术分股动脉采血：大量取血时常用此法。需手术分离股动脉。小鼠的一次采血量可达离股动脉。小鼠的一次采血量可达离股动脉。小鼠的一次采血量可达离股动脉。小鼠的一次采血量可达0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml，大鼠可达，大鼠可达，大鼠可达，大鼠可达2.0ml2.0ml2.0ml2.0ml。（4 4 4 4）断头采血）断头采血）断头采血）断头采血（5 5 5 5）心脏采血：将动物麻醉并仰卧固定置实验台上。）心脏采血：将动物麻醉并仰卧固定置实验台上。）心脏采血：将动物麻醉并仰卧固定置实验台上。）心脏采血：将动物麻醉并仰卧固定置实验台上。心前区皮肤脱毛，常规消毒。于左侧第心前区皮肤脱毛，常规消毒。于左侧第心前区皮肤脱毛，常规消毒。于左侧第心前区皮肤脱毛，常规消毒。于左侧第3 3 3 3、4 4 4 4肋间心尖肋间心尖肋间心尖肋间心尖博动最强处将针头垂直刺入心脏，由于心脏的搏动，博动最强处将针头垂直刺入心脏，由于心脏的搏动，博动最强处将针头垂直刺入心脏，由于心脏的搏动，博动最强处将针头垂直刺入心脏，由于心脏的搏动，血液可自动进入注射器。如无血液流出，拔出针头后血液可自动进入注射器。如无血液流出，拔出针头后血液可自动进入注射器。如无血液流出，拔出针头后血液可自动进入注射器。如无血液流出，拔出针头后重新穿刺，不能左右来回斜穿，以免造成气胸而导致重新穿刺，不能左右来回斜穿，以免造成气胸而导致重新穿刺，不能左右来回斜穿，以免造成气胸而导致重新穿刺，不能左右来回斜穿，以免造成气胸而导致动物很快死亡。动物很快死亡。动物很快死亡。动物很快死亡。目的：防止动物挣扎，保持安静目的：防止动物挣扎，保持安静 防止意外损伤，便于操作防止意外损伤，便于操作 实验动物的实验动物的麻醉麻醉全全身麻醉身麻醉1%1%硫喷妥钠硫喷妥钠:15:15mg/kgmg/kg，iv/ipiv/ip2%2%戊巴比妥戊巴比妥:4040mg/kgmg/kg，iv/ipiv/ip盐酸氯胺酮盐酸氯胺酮:40:40mg/kgmg/kg，sc/imsc/im复方氯胺酮复方氯胺酮:0.01:0.01ml/kgml/kg，sc/imsc/im麻醉方法麻醉方法1吸入法吸入法 乙醚、氯仿等挥发性麻醉剂用吸入法麻醉，乙醚、氯仿等挥发性麻醉剂用吸入法麻醉，适用于各种实验动物。大鼠、小鼠可将头部放入适用于各种实验动物。大鼠、小鼠可将头部放入蘸有乙醚棉球的广口瓶或干燥器内，蘸有乙醚棉球的广口瓶或干燥器内，4 46 6分钟后分钟后即处于麻醉状态。如实验过程较长，可在其鼻部即处于麻醉状态。如实验过程较长，可在其鼻部放棉花或纱布，不时滴加乙醚维持，也可用乙醚放棉花或纱布，不时滴加乙醚维持，也可用乙醚先麻醉后再用非挥发性麻醉剂维持麻醉。先麻醉后再用非挥发性麻醉剂维持麻醉。在给药过程中，如果发现动物的角膜反射消失，在给药过程中，如果发现动物的角膜反射消失，在给药过程中，如果发现动物的角膜反射消失，在给药过程中，如果发现动物的角膜反射消失，瞳孔突然放大，应立即停止麻醉。如果呼吸停止，可瞳孔突然放大，应立即停止麻醉。如果呼吸停止，可瞳孔突然放大，应立即停止麻醉。如果呼吸停止，可瞳孔突然放大，应立即停止麻醉。如果呼吸停止，可进行人工呼吸，并配以咖啡因、可拉明等苏醒剂，待进行人工呼吸，并配以咖啡因、可拉明等苏醒剂，待进行人工呼吸，并配以咖啡因、可拉明等苏醒剂，待进行人工呼吸，并配以咖啡因、可拉明等苏醒剂，待恢复自主呼吸后再进行实验。因乙醚易引起上呼吸道恢复自主呼吸后再进行实验。因乙醚易引起上呼吸道恢复自主呼吸后再进行实验。因乙醚易引起上呼吸道恢复自主呼吸后再进行实验。因乙醚易引起上呼吸道分泌物增多，导致窒息，可先注射阿托品预防。分泌物增多，导致窒息，可先注射阿托品预防。分泌物增多，导致窒息，可先注射阿托品预防。分泌物增多，导致窒息，可先注射阿托品预防。2 2腹腔和静脉给药麻醉法腹腔和静脉给药麻醉法腹腔和静脉给药麻醉法腹腔和静脉给药麻醉法 非挥发性麻醉剂如戊巴比妥钠、硫喷妥钠等巴比非挥发性麻醉剂如戊巴比妥钠、硫喷妥钠等巴比非挥发性麻醉剂如戊巴比妥钠、硫喷妥钠等巴比非挥发性麻醉剂如戊巴比妥钠、硫喷妥钠等巴比妥类药物及水合氯醛、氨基甲酸乙酯等，可用腹腔或妥类药物及水合氯醛、氨基甲酸乙酯等，可用腹腔或妥类药物及水合氯醛、氨基甲酸乙酯等，可用腹腔或妥类药物及水合氯醛、氨基甲酸乙酯等，可用腹腔或静脉注射麻醉。大鼠、小鼠、豚鼠常用腹腔给药麻醉；静脉注射麻醉。大鼠、小鼠、豚鼠常用腹腔给药麻醉；静脉注射麻醉。大鼠、小鼠、豚鼠常用腹腔给药麻醉；静脉注射麻醉。大鼠、小鼠、豚鼠常用腹腔给药麻醉；兔、犬、猴等多用静脉给药麻醉。此法主要用于需麻兔、犬、猴等多用静脉给药麻醉。此法主要用于需麻兔、犬、猴等多用静脉给药麻醉。此法主要用于需麻兔、犬、猴等多用静脉给药麻醉。此法主要用于需麻醉醉醉醉2 2 2 2小时以上的实验，麻醉过程平稳，但麻醉深度和使小时以上的实验，麻醉过程平稳，但麻醉深度和使小时以上的实验，麻醉过程平稳，但麻醉深度和使小时以上的实验，麻醉过程平稳，但麻醉深度和使用剂量较难掌握和控制，一旦过量可引起血压下降和用剂量较难掌握和控制，一旦过量可引起血压下降和用剂量较难掌握和控制，一旦过量可引起血压下降和用剂量较难掌握和控制，一旦过量可引起血压下降和呼吸抑制，可用戊四氮、可拉明等急救。呼吸抑制，可用戊四氮、可拉明等急救。呼吸抑制，可用戊四氮、可拉明等急救。呼吸抑制，可用戊四氮、可拉明等急救。局部麻醉局部麻醉1%1%盐酸普鲁卡因，局部注射盐酸普鲁卡因，局部注射2%2%盐酸可卡因，粘膜表面麻醉盐酸可卡因，粘膜表面麻醉 局部麻醉方法很多，有表面麻醉，浸润麻醉和阻局部麻醉方法很多，有表面麻醉，浸润麻醉和阻局部麻醉方法很多，有表面麻醉，浸润麻醉和阻局部麻醉方法很多，有表面麻醉，浸润麻醉和阻断麻醉等，使用最多的是浸润麻醉。浸润麻醉是将药断麻醉等，使用最多的是浸润麻醉。浸润麻醉是将药断麻醉等，使用最多的是浸润麻醉。浸润麻醉是将药断麻醉等，使用最多的是浸润麻醉。浸润麻醉是将药物注射于皮内、皮