抗生素类药物的分析详细解释各类抗生素特点.ppt

二、抗生素二、抗生素药药物的物的质质量分析量分析显显色反色反应应光光谱谱法法色色谱谱法法生物学法生物学法 检查灭检查灭活前后的抑菌能力活前后的抑菌能力（一）（一）鉴别鉴别1.（二）（二）检查检查：异常毒性异常毒性检查检查 组组分分析分分析细细菌内毒素菌内毒素检查检查 杂质杂质吸收度吸收度热热原原检查检查 聚合物聚合物降降压压物物质检查质检查 悬悬浮浮时间时间与抽与抽针试验针试验无菌无菌检查检查发发酵液中含有：酵液中含有：无机无机盐盐、脂肪、各种、脂肪、各种蛋白蛋白质质、色素、色素、热热原、毒性物原、毒性物质质、微、微生物、各种降解生物、各种降解产产物等物等杂质杂质2.注射用普注射用普鲁鲁卡因青霉素卡因青霉素悬悬浮浮时间时间与抽与抽针试验针试验：取本品取本品1 瓶，瓶，按每按每40万万单单位加水位加水1ml 使成混使成混悬悬液，液，摇摇匀，静置匀，静置2 分分钟钟，不得有，不得有颗颗粒下沉粒下沉或明或明显显的分的分层层。用装有。用装有4号号针头针头的注的注射器抽取，射器抽取，应应能能顺顺利通利通过过，不得阻，不得阻塞。塞。3.1.抗生素活性表示方法抗生素活性表示方法效价效价单单位位：每毫升或每毫克中含有某种抗：每毫升或每毫克中含有某种抗生素的有效成分的多少。生素的有效成分的多少。表示方法表示方法：单单位位u 或或 g(三三)含量含量测测定或效价定或效价测测定定4.例：例：1 mg青霉素青霉素钠钠1670单单位位 1 mg庆庆大霉素大霉素=590单单位位1 mg青霉素青霉素钾钾=1670*356.4/372.5=1598单单位位标标示量表示方法：示量表示方法：例：青霉素例：青霉素V钾钾片每片含量片每片含量250 mg(400000单单位位)5.2.微生物微生物检检定法定法测测定抗生素抑菌或定抗生素抑菌或杀杀菌的能力。菌的能力。方法：方法：管碟法管碟法和和浊浊度法度法缺点缺点1、操作繁、操作繁琐琐2、培养、培养时间长时间长3、测测定定误误差大差大优优点点1、与、与临临床效果一致床效果一致2、灵敏度高、灵敏度高3、干、干扰扰物物质质少少6.3.化学及物理化学方法化学及物理化学方法优优点：点：1.准确度高准确度高 2.简单简单、快速、快速缺点缺点 1.易受易受杂质杂质干干扰扰 2.不一定代表生物效价不一定代表生物效价只有当用物理化学法只有当用物理化学法测测定的定的结结果与用果与用生物学法生物学法测测定的效价相一致定的效价相一致时时，才能，才能用物理化学法用物理化学法测测定定 7.分分类类（按（按结结构与性构与性质质）：）：内内酰酰胺胺类类、氨基糖苷、氨基糖苷类类、四四环环素素类类、大、大环环内内酯类酯类、多、多烯烯大大环环类类、多、多肽类肽类、苯、苯烃烃胺胺类类、蒽、蒽环类环类、其他抗生素其他抗生素类类三、抗生素的分三、抗生素的分类类8.分分类类青霉素族青霉素族头孢头孢菌素族菌素族第二第二节节 内内酰酰胺胺类类抗生素抗生素 9.青霉素青霉素类类母核：母核：6-氨基青霉氨基青霉烷烷酸酸 6-APA一、一、结结构与性构与性质质125436710.青霉素青霉素（青霉素（青霉素G G、苄苄青霉素青霉素）11.氨氨苄苄西林西林（氨（氨苄苄青霉素）青霉素）12.阿莫西林阿莫西林（羟羟氨氨苄苄青霉素）青霉素）13.普普鲁鲁卡因青霉素卡因青霉素14.头孢头孢菌素菌素类类7-ACA87612345NONHSCH2R1COOH母核（7-氨基头孢菌烷酸）RCO15.头孢头孢氨氨苄苄16.头孢头孢拉定拉定17.头孢羟头孢羟氨氨苄苄18.头孢噻头孢噻吩吩钠钠19.NaNa（一）（一）羧羧基基酸性：酸性：pKa值值在在2.52.8之之间间与碱金属与碱金属(Na+、K+)成成盐盐后，易溶于水后，易溶于水 20.与有机碱与有机碱(普普鲁鲁卡因卡因)成成盐盐，难难溶于水溶于水 普普鲁鲁卡因卡因青霉素青霉素21.（二）旋光性（二）旋光性青霉素青霉素类类头孢头孢菌素菌素类类*87612345NOSNSO432156722.（三）共（三）共轭轭体系体系 母核无明母核无明显显UV 多数有苯多数有苯环环取代基取代基 水解水解产产物物(青青酶酶烯烯酸酸)有有UV 青霉素青霉素类类COOH23.头孢头孢菌素菌素类类COOH母核有共母核有共轭轭体系体系 24.（四）（四）内内酰酰胺胺环环的不的不稳稳定性定性 水溶液：水溶液：不不稳稳定（定（pH66.8时较稳时较稳定）定）干燥条件下：干燥条件下：稳稳定定 不不稳稳定定因素因素四元四元环张环张力大力大 酰酰胺胺键键易水解易水解 25.某些金属离子某些金属离子高温高温氧化氧化剂剂青霉素水溶液在青霉素水溶液在pH 66.8时较稳时较稳定定26.例例青霉素的降解反青霉素的降解反应应青青霉霉素素青霉青霉噻唑噻唑酸酸H2O/OH青霉素青霉素酶酶青霉酸青霉酸H2OpH2100青霉青霉噻唑酰噻唑酰基基羟羟胺酸胺酸NH2OH青霉青霉烯烯酸酸pH4青霉胺青霉胺CO2青霉青霉醛醛HgCl227.(头孢噻头孢噻吩吩钠钠水溶液水溶液2524h失活失活8%)28.NaOH呈色呈色Fe3+/3H+二、二、鉴鉴 别别（一）呈色反（一）呈色反应应1.羟肟羟肟酸酸铁铁反反应应29.H+Fe3+/3（红红、棕、褐）、棕、褐）NaOH,C2H5OH30.哌拉西林 取本品取本品10mg，加水，加水2ml与与盐盐酸酸羟羟胺胺溶液溶液3ml，振，振摇摇溶解后，放置溶解后，放置5分分钟钟，加酸性硫酸加酸性硫酸铁铵试铁铵试液液1ml，摇摇匀，匀，显显红红棕色。棕色。31.2.茚茚三三酮酮反反应应32.烯烯醇式醇式茚茚三三酮酮酮酮式式茚茚三三酮酮缩缩合合蓝蓝紫色紫色+H2OCNCH2RC=ORCHH2NCOOHOC=COCOCOHNH2CCOCOCOCOHCNCCOCOCOCOHCHRNCCOCOCO33.（开（开环环分解）分解）3.双双缩脲缩脲反反应应-内内酰酰胺胺类类似似肽键肽键34.紫紫红红色色35.（分解）（分解）变变色酸色酸显色色4.与与变变色酸色酸-硫酸反硫酸反应应36.NH2CONSOHNCOOHCH3CH3HOCH（缩缩合）合）变变色酸色酸硫酸硫酸37.（偶合）（偶合）酚酚羟羟基基5.与重氮苯磺酸反与重氮苯磺酸反应应38.（偶合）（偶合）头孢哌酮头孢哌酮39.橙黄色橙黄色40.（二）各种（二）各种盐盐的反的反应应K+、Na+的火焰反的火焰反应应41.（三）（三）色色谱谱法法 对对照品照品对对照法照法1.TLC法法2.HPLC法法42.-内内酰酰胺胺环环酰酰胺胺（四）光（四）光谱谱法法1、IR法法羧羧酸离子酸离子 1600cm-1，1410cm-143.44.2.UV法法样样品、分解品、分解产产物的最大吸收波物的最大吸收波长长青霉素青霉素V V钠钠 A280nm/A264nm=1.301.50 45.pH3.846.三、三、杂质检查杂质检查 药药物物 检查项检查项目目 检查检查方法方法 头孢头孢他他啶啶 聚合物聚合物 HPLC法法 头孢头孢曲松曲松钠钠 结结晶性，有关物晶性，有关物质质，HPLC法法 聚合物聚合物头孢噻肟钠头孢噻肟钠 聚合物聚合物 HPLC头孢呋头孢呋辛辛酯酯 结结晶性，有关物晶性，有关物质质，HPLC法法 聚合物聚合物 头孢头孢氨氨苄苄 有关物有关物质质 HPLC法法 青霉素青霉素钾钾 吸光度，吸光度，结结晶性晶性 紫外分光光度法紫外分光光度法 聚合物聚合物 47.1.聚合物聚合物体体积积排阻色排阻色谱谱法法葡聚糖凝胶色葡聚糖凝胶色谱谱法法48.2.头孢呋头孢呋辛辛酯酯中有关物中有关物质质和异构体和异构体的的检查检查异构体异构体异构体异构体A异构体异构体B3-异构体异构体E异构体异构体控制比例控制比例有关物有关物质质49.异构体异构体：异构体异构体 相相对对保留保留时间时间 判断判断B B异构体异构体 0.9 0.9 A A异构体异构体 1.0 1.0 与与A A、B B异构体峰面异构体峰面积积 和之比和之比应为应为0.0.480.55.5550.有关物有关物质质高低高低浓浓度自身度自身对对照法（照法（1%）有关物有关物质质 相相对对保留保留时间时间 判断判断3-异构体异构体 1.2 不得大于不得大于对对照液主峰面照液主峰面积积之和的之和的1.5倍（倍（1.5%）E E异构体异构体 1.7 1.7和和2.1 2.1 不得大于不得大于对对照液主峰面照液主峰面积积之和（之和（1.0%）其他其他杂质杂质 不得大于不得大于对对照液主峰面照液主峰面积积之和的之和的1/2（0.5%）所有所有杂质杂质 不得大于不得大于对对照液主峰面照液主峰面积积之和的之和的3倍（倍（3.0%）51.（三）青霉素（三）青霉素钠钠（钾钾）的吸收度）的吸收度检查检查 供供试试液液 1.80 mg/ml，结结果判断：果判断：A280不得大于不得大于0.10，在，在264nm处处有最大吸收，吸光度有最大吸收，吸光度应为应为0.80-0.88.52.（四）有机溶（四）有机溶剂剂例：例：氨氨苄苄西林西林钠钠需需检查检查二二氯氯甲甲烷烷头孢哌酮钠头孢哌酮钠需需检查检查丙丙酮酮头孢头孢他他啶啶需需检查检查吡吡啶啶53.（五）（五）结结晶性晶性固固态态物物质质分分为结为结晶晶质质和非和非结结晶晶质质两大两大类类。检查结检查结晶性的方法：晶性的方法：第一法：偏光第一法：偏光显显微微镜镜法，法，应应呈呈现现双折射和双折射和消光位等晶体光学性消光位等晶体光学性质质。第二法：第二法：X射射线线粉末衍射法。粉末衍射法。结结晶晶质质呈呈现现特征的衍射特征的衍射图图，非晶，非晶质质的衍射的衍射图图呈弥散呈弥散状。状。54.四、含量四、含量测测定定55.（一）（一）HPLC法法方法：离子色方法：离子色谱谱法法流流动动相：相：缓缓冲液冲液/甲醇（乙甲醇（乙腈腈）56.（五）生物（五）生物样样品的分析品的分析血样血浆（抗凝）血清加内标沉淀蛋白离心取上清夜57.第三第三节节 氨基糖苷氨基糖苷类类抗生素抗生素链链霉素霉素 庆庆大霉素大霉素巴巴龙龙霉素霉素 卡那霉素卡那霉素 新霉素新霉素 等等58.链链霉素霉素链链霉胍霉胍+链链霉糖霉糖+N-甲基甲基-L-葡萄糖胺葡萄糖胺 苷元苷元糖糖链链霉双糖胺霉双糖胺一、一、结结构与性构与性质质59.链链霉胍霉胍链链霉糖霉糖N-甲基甲基-L-葡萄糖胺葡萄糖胺链链霉素霉素60.链链霉胍霉胍链链霉糖霉糖N-甲基甲基-L-葡萄糖胺葡萄糖胺碱性碱性水溶性水溶性旋光性旋光性有紫外吸收有紫外吸收 230nm稳稳定性定性61.巴巴龙龙霉素（霉素（，）D-葡萄糖胺葡萄糖胺 脱氧脱氧链链霉胺霉胺巴巴龙龙胺胺D-核糖核糖 巴巴龙龙霉糖霉糖巴巴龙龙二糖胺二糖胺R1、R2：-CH2NH262.庆庆大霉素大霉素 糖糖 苷元苷元绛红绛红糖胺糖胺 +脱氧脱氧链链霉胺霉胺 +加洛糖胺加洛糖胺 糖糖 63.绛红绛红糖胺糖胺紫素胺紫素胺2-脱氧脱氧链链霉胺霉胺加洛糖胺加洛糖胺复合物复合物碱性碱性水溶性水溶性旋光性旋光性性性质稳质稳定定无紫外吸收无紫外吸收R2OC R3R1HNNH2OOHH2NNH2OOOHNHCH3OHCH3264.二、二、鉴别鉴别 （一）（一）茚茚三三酮酮反反应应原理：具有原理：具有羟羟基胺和基胺和-氨基酸的性氨基酸的性质质65.+蓝蓝紫色紫色66.（二）（二）Molisch试验试验具有五碳糖或具有五碳糖或六碳糖六碳糖结结构构H+糠糠 醛醛羟羟甲基糠甲基糠醛醛-萘萘酚酚红红紫色紫色蒽蒽酮酮蓝蓝紫色紫色67.糠糠醛醛与与-萘萘酚呈色原理酚呈色原理红红紫色紫色羟羟甲基糠甲基糠醛醛68.糠糠醛醛与蒽与蒽酮酮的呈色原理的呈色原理羟羟甲基糠甲基糠醛醛蓝蓝紫色紫色69.例：阿米卡星的例：阿米卡星的鉴别鉴别反反应应：取本品：取本品约约 10mg，加水，加水1ml溶解后，加溶解后，加0.1%蒽蒽酮酮的的硫酸溶液硫酸溶液4ml，即，即显蓝显蓝紫色。紫色。70.（三）（三）N-甲基甲基葡萄糖胺葡萄糖胺反反应应乙乙酰酰丙丙酮酮 OH-吡咯衍生物吡咯衍生物对对二甲氨基苯甲二甲氨基苯甲醛醛H+樱樱桃桃红红色色（Elson-Morgan反反应应）新霉素新霉素巴巴龙龙霉素霉素71.(缩缩合合)72.樱樱桃桃红红色色对对二甲氨基苯甲二甲氨基苯甲醛醛H+73.硫酸巴硫酸巴龙龙霉素霉素 鉴别鉴别取本品取本品约约10mg，加水，加水1ml 溶解后，加溶解后，加盐盐酸溶液酸溶液(9100)2ml，在水，在水 浴中加浴中加热热10分分钟钟，加，加8 氢氢氧化氧化钠钠溶液溶液2ml 与与2 乙乙酰酰丙丙酮酮溶液溶液1ml，再在水浴中加，再在水浴中加热热 5 分分钟钟，冷却后，加冷却后，加对对二甲氨基苯甲二甲氨基苯甲醛试醛试液液1ml，即，即显樱显樱桃桃红红色。色。74.（四）麦芽酚反（四）麦芽酚反应应 链链霉素特有反霉素特有反应应H+分子重排分子重排75.紫紫红红麦芽酚麦芽酚76.硫酸硫酸链链霉素的霉素的鉴别鉴别方法：方法：取本品取本品约约20mg，加水，加水5ml溶解后，溶解后，加加氢氢氧化氧化钠试钠试液液0.3ml，置水浴上加，置水浴上加热热5分分钟钟，加硫酸，加硫酸铁铵铁铵溶液溶液0.5ml，即呈紫即呈紫红红色。色。77.链链霉素特有反霉素特有反应应（或或-萘萘酚酚）8-羟羟基基喹喹啉啉（五）（五）坂口反坂口反应应-萘萘酚酚78.橙橙红红色色 8羟羟基基喹喹啉啉 链链霉胍霉胍 79.硫酸硫酸链链霉素的霉素的鉴别鉴别方法：方法：取本品取本品约约0.5mg，加水，加水4ml溶解后，溶解后，加加氢氢氧化氧化钠试钠试液液2.5ml与与0.1%8-羟羟基基喹喹啉的乙醇溶液啉的乙醇溶液1ml，放冷至，放冷至约约15，加次溴酸，加次溴酸钠试钠试液液3滴，即滴，即显显橙橙红红色。色。80.坂口反坂口反应应N-甲基葡萄甲基葡萄糖胺反糖胺反应应麦芽酚反麦芽酚反应应81.（六）硫酸（六）硫酸盐盐反反应应H+盐盐酸酸or硝酸硝酸不溶不溶82.（七）色（七）色谱谱法：法：1.TLC多以硅胶多以硅胶为为薄薄层层板，三板，三氯氯甲甲烷烷-甲甲醇醇-浓浓氨水氨水为为展开展开剂剂，茚茚三三酮酮或碘或碘蒸汽蒸汽为显为显色色剂剂。2.HPLC83.（八）（八）UV法法 庆庆大霉素无大霉素无UV吸收吸收 BP2005:240330nm无吸收无吸收（九）（九）IR法法84.三、三、检查检查（一）（一）链链霉素霉素杂质杂质链链霉素霉素B（甘露糖（甘露糖链链霉素）霉素）1.来源来源 反反应应中中间间体体菌种菌种 链链霉素霉素B B 链链霉素霉素85.2 方法方法 TLC 对对照品法照品法 硫酸甲醇硫酸甲醇 加加热热回流回流 羟羟甲基糠甲基糠醛醛显显色色剂剂：1,3-1,3-萘萘二酚乙醇溶液与二酚乙醇溶液与20%20%硫酸硫酸 样样 品品甘露糖甘露糖样品溶液与对照溶液相对应的斑点相比较不得更深86.对对微生物的活性无明微生物的活性无明显显差异差异毒副作用和耐毒副作用和耐药药性不同性不同发发酵菌种不同酵菌种不同工工艺艺差差别别C组组分比例分比例不一致不一致规规定控制各定控制各组组分的相分的相对对百分含量百分含量（二）（二）庆庆大霉素大霉素C组组分的分的测测定定87.max=330nm衍生化法衍生化法 OPAOPA1.USP RPHPLC88.异异吲哚吲哚衍生物衍生物89.离子离子对对色色谱谱法法离子离子对试剂对试剂：0.02 mol/L庚庚烷烷磺酸磺酸钠钠面面积归积归一化法：一化法：各各组组分的含量分的含量%=rf/rs*100%规规定定 C1 2550%C1a 1035%C2a+C2 2555%90.91.2.电电化学化学检测检测器器检测庆检测庆大霉素大霉素C组组分（分（BP 2005）92.3.蒸蒸发发光散射光散射检测检测器器测测定定庆庆大霉大霉素素C组组分（分（Ch.P 2005）任何任何挥发挥发性低于流性低于流动动相的相的样样品均能被品均能被检测检测ELSD检测检测分分为为三个步三个步骤骤：（：（1）用惰性气）用惰性气体体雾雾化脱洗液（化脱洗液（2）流流动动相在加相在加热热管（漂管（漂移管）中蒸移管）中蒸发发（3）样样品品颗颗粒散射光后得到粒散射光后得到检测检测。溶液溶液浓浓度的度的对对数数值值与相与相应应的主峰面的主峰面积对积对数数值值成正比成正比93.流流动动相：相：0.2mol/l三氟醋酸三氟醋酸-甲醇（甲醇（92：8）流速：每分流速：每分钟钟0.6ml定量方法：定量方法：标标准曲准曲线线法，法，3个个浓浓度，相关度，相关系数系数应应不小于不小于0.99规规定定 C1 2550%C1a 1540%C2a+C2 2050%94.（四）硫酸盐测定（组分分析）硫酸硫酸萘萘替米星：取本品替米星：取本品约约0.12g，精密称定，精密称定，加水加水100ml使溶解，用使溶解，用浓浓氨溶液氨溶液调节调节pH值值至至11后，精密加后，精密加氯氯化化钡钡滴定液滴定液(0.1mol/L)10ml、酞酞紫指示液紫指示液5滴，滴，用乙二用乙二胺四醋酸二胺四醋酸二钠钠滴定液滴定液(0.05mol/L)滴定滴定，注，注意保持滴定意保持滴定过过程中的程中的pH值为值为11，滴定至紫，滴定至紫色开始消褪，加入乙醇色开始消褪，加入乙醇50ml，继续继续滴定，滴定，至至蓝蓝紫色消失，并将滴定的紫色消失，并将滴定的结结果用空白果用空白试试验验校正。本品含硫酸校正。本品含硫酸盐盐按无水物按无水物计计算算应为应为31.535.0。95.三、含量三、含量测测定定HPLC法：法：蒸蒸发发光散射法：依替米星、卡那霉素光散射法：依替米星、卡那霉素衍生化法：阿米卡星衍生化法：阿米卡星微生物微生物检检定法：定法：链链霉素、霉素、庆庆大霉素、大霉素、萘萘替米星替米星96.第四第四节节 四四环环素素类类抗生素抗生素97.1234567891011124a5aDCBA基基 本本 结结 构构98.四四环环素素（TC）tetracycline699.金霉素金霉素(CTC)chlortetracycline氯氯四四环环素素100.土霉素土霉素(OTC)oxytetracycline氧四氧四环环素素5101.多西多西环环素素(DOTC)doxycycline脱氧土霉素脱氧土霉素6102.美他美他环环素素（METC）metacycline103.一、一、结结构与性构与性质质酚酚羟羟基、基、烯烯醇型醇型羟羟基基 弱酸性弱酸性二甲胺基二甲胺基 弱碱性弱碱性（一）酸碱性与溶解度（一）酸碱性与溶解度1.两性化合物两性化合物 与酸、碱均能成与酸、碱均能成盐盐2.强强酸或酸或强强碱中溶解度碱中溶解度3.吸湿性吸湿性 多含多含结晶水晶水104.105.（二）旋光性（二）旋光性（三）（三）UV和和荧荧光光四四环环素素类药类药物及其降解物及其降解产产物均具有物均具有荧荧光。光。如：如：四四环环素素经经碱降解后，呈黄色碱降解后，呈黄色荧荧光光 土霉素土霉素经经酸性降解后，呈酸性降解后，呈绿绿色色荧荧光光 金霉素金霉素经经碱降解后，呈碱降解后，呈蓝蓝色色荧荧光光.106.1.差向异构化差向异构化C4（四）（四）稳稳定性定性对对各种氧化各种氧化剂剂、酸、碱都不、酸、碱都不稳稳定定107.差向四差向四环环素素ETC108.（土霉素、多西（土霉素、多西环环素不易差向异构化）素不易差向异构化）452CH3NHOHCONH2OOHOHOOHR2R1HO109.（1）酸性降解）酸性降解2.降解反降解反应应ATC110.脱水四脱水四环环素素C橙黄色橙黄色111.TCETCATCEATC差向脱水四差向脱水四环环素素橙橙红红色色 淡黄色淡黄色 砖红砖红色色 淡黄色淡黄色 112.（2）碱性降解）碱性降解无活性无活性 强强烈烈荧荧光光 113.二、二、鉴别试验鉴别试验（一）（一）HPLC法法（二）（二）TLC法法固定相：硅藻土（甘油、固定相：硅藻土（甘油、EDTA）EDTA 克服痕量金属造成的拖尾克服痕量金属造成的拖尾现现象象检视检视：365nm365nm波波长长下下观观察察荧荧光光114.（三）（三）IR光光谱谱法法（四）（四）UV光光谱谱法法多以酸性甲醇溶液多以酸性甲醇溶液为为溶溶剂剂。115.（五）（五）显显色法色法 1.H2SO4 反反应应116.（二）（二）FeCl3反反应应117.盐盐酸四酸四环环素的素的鉴别鉴别 取本品取本品约约0.5mg，加硫酸，加硫酸2ml，即，即显显深紫深紫色，再加三色，再加三氯氯化化铁试铁试液液 1 滴，溶液滴，溶液变为变为红红棕色。棕色。118.三、三、检查检查土霉素土霉素（OTC，1）4-差向四差向四环环素（素（ETC，1.42）盐盐酸金霉素（酸金霉素（CTC，1.39）脱水四脱水四环环素（素（ATC，0.48）差向脱水四差向脱水四环环素（素（EATC，0.62）盐盐酸四酸四环环素素（一）有关物（一）有关物质质HPLC法（法（2010年版）年版）方法：自身方法：自身对对照照+校正因子校正因子119.（二）吸收度（二）吸收度120.取本品，在取本品，在2025，加，加0.8%氢氢氧氧化化钠钠溶液制成每溶液制成每1ml含含10mg的溶液，的溶液，照紫外照紫外-可可见见分光光度法，置分光光度法，置4cm的的吸收池中，自加吸收池中，自加氢氢氧化氧化钠钠溶液起溶液起5分分钟时钟时，在，在530nm的波的波长处测长处测定，吸定，吸光度不得光度不得过过0.12（供注射用）。（供注射用）。盐盐酸四酸四环环素素杂质杂质吸收度吸收度121.（三）残留有机溶（三）残留有机溶剂剂盐盐酸多西酸多西环环素素为为半乙醇半水合物。半乙醇半水合物。应检查应检查乙醇，含乙醇的量乙醇，含乙醇的量应为应为4.3%6.0%。122.HPLC法（外法（外标标法）法）如：如：盐盐酸四酸四环环素素C18柱（柱（PH值值适适应应范范围围大于大于8.0）四、含量四、含量测测定定123.第五节 抗生素类药物中高分子 杂质的检查1.1.高分子高分子杂质杂质 分子量大于分子量大于药药物本身的物本身的杂质总杂质总称。分称。分子量一般在子量一般在1000-5000.1000-5000.124.蛋白、多蛋白、多肽肽、多糖或抗生素、多糖或抗生素与蛋白、多与蛋白、多肽肽、多糖的、多糖的结结合物。主要来自合物。主要来自于于发发酵工酵工艺艺，致敏，如青霉，致敏，如青霉噻唑噻唑蛋白、青蛋白、青霉霉噻唑噻唑多多肽肽。药药物的自身聚合物，来自于物的自身聚合物，来自于生生产产、贮贮存存过过程。可引程。可引发过发过敏。敏。外源性外源性杂质杂质内源性内源性杂质杂质2.来源来源125.3.高分子高分子杂质杂质的的质质控方法控方法（1）凝胶渗透色）凝胶渗透色谱谱法法126.（2 2）高分子）高分子杂质杂质的控制方法的控制方法-自身自身对对照外照外标标法法 原理原理：特定条件下，：特定条件下，药药物自身可物自身可缔缔合成与高分合成与高分子子杂质杂质有相似色有相似色谱谱行行为为的的缔缔合物。合物。计计算方法算方法：按外：按外标标法法计计算，得算，得样样品中高分子品中高分子杂杂质质相当于相当于药药物本身的相物本身的相对对含量。含量。127.色色谱谱条件条件色色谱谱柱：柱：葡聚糖凝胶葡聚糖凝胶G-10（40-120m），），玻璃柱内径玻璃柱内径1.01.4cm，柱，柱长长45cm。流流动动相相A：含：含3.5%硫酸硫酸铵铵的的pH7磷酸磷酸盐盐缓缓冲液冲液流流动动相相B：水。：水。头孢头孢他他啶啶聚合物的聚合物的测测定定对对照品溶液照品溶液：头孢头孢他他啶啶的水溶液。的水溶液。供供试试品溶液品溶液：头孢头孢他他啶啶的碳酸的碳酸钠钠溶液。溶液。128.系统适用性试验：129.头孢头孢他他啶啶和和蓝蓝色葡聚糖色葡聚糖2000的混合碳酸的混合碳酸钠钠溶液，用流溶液，用流动动相相A测测定。高聚体的峰高定。高聚体的峰高与与单单体和高聚体之体和高聚体之间间的谷高比的谷高比应应大于大于1.5。测定法：按外按外标标法以峰面法以峰面积计积计算，含算，含头头孢孢他他啶啶聚合物以聚合物以头孢头孢他他啶计啶计，不得，不得过过0.3%。130.1.熟悉抗生素熟悉抗生素类药类药物分析的特点及其物分析的特点及其常常规检验项规检验项目。熟悉生物学法与物理化目。熟悉生物学法与物理化学法学法测测定效价的原理及定效价的原理及优优缺点。缺点。2.掌握掌握内内酰酰胺胺类类抗生素的抗生素的结结构、构、性性质质、鉴别鉴别方法。方法。第十一章第十一章 复复习习内容内容131.3.掌握氨基糖苷掌握氨基糖苷类类抗生素的抗生素的结结构、性构、性质质及及鉴别鉴别，了解其，了解其检查检查及含量及含量测测定定4.掌握四掌握四环环素素类类抗生素的抗生素的结结构及性构及性质质，了解其了解其鉴别鉴别、检查检查及含量及含量测测定定5.了解抗生素了解抗生素类药类药物中高分子物中高分子杂质杂质的的检查检查方法。方法。132.1 下下 列列 哪哪 个个 药药 物物 会会 发发 生生 羟羟 肟肟 酸酸 铁铁反反应应 A.青霉素青霉素 B.庆庆大霉素大霉素 C.红红霉素霉素 D.链链霉素霉素 E.维维生素生素C 133.2 属于属于-内内酰酰胺胺类类的抗生素的抗生素药药 物有物有 A.青霉素青霉素 B.红红霉素霉素 C.头孢头孢菌素菌素 D.庆庆大霉素大霉素 E.四四环环素素134.3能和能和茚茚三三酮发酮发生呈色反生呈色反应应的物的物质质有有 A链链霉素霉素 B庆庆大霉素大霉素 C土霉素土霉素 D氨基酸氨基酸 E苯巴比妥苯巴比妥135.5能能发发生重氮化一偶合反生重氮化一偶合反应应的抗的抗 生素生素类药类药物是物是 A.青霉素青霉素 B.庆庆大霉素大霉素 C.苄苄星青霉素星青霉素 D.盐盐酸四酸四环环素素 E.普普鲁鲁卡因青霉素卡因青霉素136.6.以下反以下反应应可适用的可适用的药药物物 A.青霉素青霉素 B.链链霉素霉素 C.两者均能两者均能 D.两者均不能两者均不能 116Kober反反应应 117.羟肟羟肟酸酸铁铁反反应应 118.坂口反坂口反应应 119.N甲基葡萄糖胺反甲基葡萄糖胺反应应 120.在酸性溶液中水解在酸性溶液中水解DABBC137.812 可以可以鉴别鉴别的的药药物是物是 A.链链霉素霉素 B.庆庆大霉素大霉素 C.两者均可两者均可 D.两者均不可两者均不可 8.用异烟用异烟肼肼反反应应 9.用坂口反用坂口反应应 10.用麦芽酚反用麦芽酚反应应 11.用三用三氯氯化化铁铁反反应应 12.用用茚茚三三酮酮反反应应DAADC138.问题问题1317 A.茚茚三三酮酮反反应应 B.麦芽酚反麦芽酚反应应 C.坂口反坂口反应应 D.FeC13反反应应 E.羟肟羟肟酸酸铁铁反反应应 13头孢唑头孢唑林林钠钠 14金霉素金霉素 15链链霉素霉素 16庆庆大霉素大霉素 17青霉素青霉素EDEAABC139.四四环环素在酸性条件下的降解素在酸性条件下的降解产产物是物是 A.差向四差向四环环素素 B.脱水四脱水四环环素素 C.异四异四环环素素 D.去甲四去甲四环环素素 E.去甲氧四去甲氧四环环素素140.141.