骨肉瘤组织中E-cad、MMP-13的表达及其与临床病理特征的关系.pdf

骨骨肉肉瘤瘤组组织织中中 、的的表表达达及及其其与与临临床床病病理理特特征征的的关关系系张立全 齐文斐 作作者者单单位位:河河南南省省开开封封市市人人民民医医院院 【摘要】目的 探讨上皮型 钙粘蛋白()、基质金属蛋白酶()在骨肉瘤组织中的表达及其与临床病理特征的关系 方法 选取经外科手术治疗的骨肉瘤患者 例作为研究对象采集患者术后病理组织并采用免疫组化法检测骨肉瘤组织中、的表达分析其与患者临床病理特征的关系 结果 骨肉瘤组织中的 高表达低于癌旁组织、高表达高于癌旁组织差异有统计学意义(.)骨肉瘤患者组织中、高表达与不同 分期、淋巴结转移有关(.)相关分析结果显示骨肉瘤组织中 表达与 分期、淋巴结转移呈负相关(.)生存分析显示 高表达的总生存率高于无或低表达差异有统计学意义(.)高表达的总生存率低于无或低表达差异有统计学意义(.)结论 骨肉瘤组织中 呈无或低表达 呈高表达、表达与临床病理特征密切相关可作为临床评估骨肉瘤患者预后的生物标志物 【关键词】骨肉瘤上皮型 钙粘蛋白基质金属蛋白酶临床病理特征 :./.中图分类号:.文献标识码:文章编号:().【】()().(.).(.)(.)(.)(.).【】(:)骨肉瘤是原发恶性骨肿瘤中较为常见的一种其特点是肿瘤细胞可直接产生骨样组织 骨肉瘤初期常见症状为疼痛及肿胀因其多发于青少年群体临床上易与生长痛混淆因而大部分患者就诊时已处于中晚期 有数据显示骨肉瘤患者经临床治疗后 年生实用癌症杂志 年 月第 卷第 期 .存率为 但发生转移的患者生存率仅在 因此早期明确骨肉瘤患者病理特征及时采取有效干预措施对延长患者生存期尤为重要 上皮型 钙粘蛋白()可介导细胞间黏附 下调可降低组织内细胞黏附的强度增加细胞活动性在多种恶性肿瘤中呈低表达情况 基质金属蛋白酶()可分解细胞外基质参与机体多种生理与病理过程在多种恶性肿瘤的侵袭与转移中发挥着重要作用 目前临床上关于、与骨肉瘤患者病情变化的关系尚未明确 基于此本研究旨在分析骨肉瘤组织中、的表达及其与临床病理特征的关系 现报告如下 材材料料与与方方法法.一般资料 本研究经我院医学伦理委员会批准 选取 年 月至 年 月期间本院收治的骨肉瘤患者例为研究对象 性别:男性 例女性 例年龄 岁平均(.)岁 纳入标准:符合外科学第 版中关于骨肉瘤的诊断标准经病理检查确诊为骨肉瘤行外科手术治疗且术前均未接受过放化疗、免疫治疗等知情同意书中相关条目均被患者及其家属知悉、签订 排除标准:存在慢性骨髓炎、骨巨细胞瘤、尤文肉瘤等疾病合并其他类型的恶性肿瘤合并传染性疾病精神异常妊娠期或哺乳期女性.组织中、检测 经包埋制作的组织标本按照 规格进行连续切片 烤片 后置于二甲苯中浸泡脱蜡 并经无水乙醇、梯度乙醇清洗 蒸馏水洗 采用磷酸缓冲盐溶液()冲洗 次/次放置于.柠檬酸盐缓冲液微波盒煮沸放入切片后中高档微波修复 之后放凉至室温 冲洗 次/次采用 溶液中孵育 以灭活内源性过氧化物酶 冲洗 反复冲洗 次/次分别加入、一抗置于 冰箱过夜 恒温箱孵育 冲洗后滴加生物素标记的二抗 冲洗 次/次二氨基联苯胺()染色 蒸馏水洗涤树胶封片置于显微镜下观察 用已知阳性切片作为阳性对照 代替一抗作为阴性对照.阳性判读 采用双盲法阅片细胞质或(和)胞膜出现棕黄色颗粒为阳性 每张切片随机选取 个高倍镜()视野每个视野内最少有 个细胞 阳性细胞染色强度分值:无着色:分浅黄色:分黄色:分棕黄色:分 阳性细胞所占百分比(阳性细胞数/总细胞数):阴性:为 分 阳性率为 分 阳性率为 分 为 分染色强度 阳性细胞所占百分比 总评分 总评分 分为无表达或低表达总评分 分为高表达.临床资料收集及随访 通过本院电子病历系统收集患者临床资料包括性别(男、女)、年龄、肿瘤组织学分级(高分化、中分化、低分化)、分期(期、期、期、期)、淋巴结转移等 以门诊复诊或电话方式进行随访随访截止日期为 年 月 记录患者总生存期()定义为从确诊日至随访截止日期或死亡时间.统计学方法 收集的研究数据采用 .软件进行数据处理经 正态性检验并符合正态分布的研究数据采用()表示计数资料用例数或率表示采用 检验等级资料采用秩和检验采用 相关分析检验骨肉瘤组织中、表达与临床病理特征的相关性采用 生存曲线分析患者生存情况采用 检验 .为差异具有统计学意义 结结果果.骨肉瘤组织与癌旁组织中、阳性表达比较 骨肉瘤组织中的 无或低表达、高表达高于癌旁组织差异有统计学意义(.)见表 表 骨肉瘤组织与癌旁组织中、阳性表达比较/例 组织无或低表达 高表达无或低表达高表达骨肉瘤组织()癌旁组织().实用癌症杂志 年 月第 卷第 期 .骨肉瘤组织中、的表达及其与临床病理特征的关系 不同 分期、淋巴结转移的骨肉瘤患者的、表达比较 差异有统计学意义(.)见表 表 骨肉瘤组织中、的表达及其与临床病理特征的关系/例 临床病理特征无或低表达高表达统计值无或低表达高表达统计值性别.男()女()年龄.岁()岁()组织学分级.高分化()中分化()低分化()分期.()()()()淋巴结转移.无()有().骨肉瘤组织中、表达 相关分析结果显示骨肉瘤组织中 表达与 分期、淋巴结转移呈负相关(.、.、.)表达与 分期、淋巴结转移呈正相关(.、.、.).、表达与患者生存预后的相关性 截止到 年 月 例患者中生存共 例其中 高表达共 例(.)存活 无或低表达共 例(.)存活 高表达共 例存活 无或低表达共 例存活 生存分析显示 高表达的总生存率高于无或低表达差异有统计学意义(.)高表达的总生存率低于无或低表达差异有统计学意义(.)见图 讨讨论论 骨肉瘤是骨恶性肿瘤中较为常见的一种类型其肿瘤细胞可直接产生骨样组织可累及骨膜、骨皮质及髓腔患者可表现为骨骼、关节疼痛、局部肿块等症状图 骨肉瘤组织中 表达对患者的 生存曲线图图 骨肉瘤组织中 表达对患者的 生存曲线图实用癌症杂志 年 月第 卷第 期 .具有进展迅速、恶性程度高、早期转移、病死率高等特点 近年来因骨肉瘤手术及放化疗方案不断发展约有 的患者可获得长期生存 但余军林等研究表明转移性骨肉瘤患者的病死率仍处于较高水平因此对骨肉瘤发生发展及转移的分子机制进行深入性的系统研究具有重要的临床意义 是钙粘蛋白家族成员之一主要存在于上皮细胞、部分间质细胞中可介导细胞间黏附维持细胞极性及上皮细胞形态完整等 在组织结构的构建、重塑、维护及生物发育过程中细胞外信号、细胞膜受体与细胞内信号信使间的相互作用具有重大意义 国内外研究表明 无或低表达与鼻咽癌、甲状腺癌、结直肠癌等实体肿瘤发生发展具有密切相关性 且毕虎等的研究表明 在骨肉瘤组织中的表达低于骨软骨瘤组织 本研究结果显示骨肉瘤组织中的 无或低表达高于癌旁组织与上述研究结果较为一致 可介导细胞间黏附其表达下调或缺失可导致细胞间黏附力下降细胞间连接松散增加细胞活动性导致原位细胞更易发生侵袭及转移 本研究中 表达与 分期、淋巴结转移有关且 无或低表达患者的总生存率低于高表达患者说明 表达与骨肉瘤患者病情有关且其表达越低患者预后越差 研究表明肿瘤细胞可脱离原发灶黏附在细胞外基质通过降解基质来实现向其他部位侵袭、转移目的 而 可维持机体组织结构可通过改变细胞微环境影响细胞分化过程且 可抑制细胞迁移维持原位功能当其表达降低或缺失时会降低或破坏细胞间黏附作用致使上皮细胞间充质转化细胞极性丢失肿瘤细胞获得了较强的抗凋亡、迁移、侵袭及降解细胞外基质的能力肿瘤浸润深度增加易向远处转移因而促进骨肉瘤发生、发展此外 可启动抑癌基因超甲基化其表达下调或缺失会降低抑癌基因超甲基化表达增强肿瘤细胞的侵袭、浸润能力进而促进骨肉瘤发生、发展 基质金属蛋白酶具有降解细胞外基质、破坏肿瘤细胞侵袭的组织学屏障的作用与肿瘤血管生成、转移、侵袭浸润等过程具有密切关系 目前临床上认为恶性肿瘤转移的首发条件为细胞外基质间的黏附及降解 是基质蛋白酶金属家族中主要降解型、型胶原纤维、粘蛋白、纤维连接蛋白等类型其在结直肠癌、非小细胞肺癌、胃癌等多种恶性肿瘤中均有表达 本研究中骨肉瘤组织中 高表达情况大于癌旁组织这与崔涛等的研究结果一致 表达上调会增强其降解细胞外基质能力致使肿瘤细胞屏障及极性被破坏调控细胞与基质间的黏附作用致使上皮细胞间充质转化致使肿瘤细胞脱离原发灶向其他部位侵袭、转移 本研究中 高表达与 分期、淋巴结转移有关且 高表达患者的总生存率低于无或低表达患者说明 与骨肉瘤患者疾病分期、淋巴结转移有关且其表达越高患者预后越差 可破坏肿瘤细胞侵袭的组织学屏障促进肿瘤侵袭、转移 且 高表达可促进破骨细胞进行骨吸收其可降低抑癌蛋白 及载脂蛋白 活性促进肿瘤细胞生长、分化、增殖 此外 可调控/信号通路来上调活化 细胞核因子 蛋白等蛋白表达增强破骨细胞活性促进胶原降解增加骨重吸收进而促进骨肉瘤发生发展缩短患者的生存期 此外 高表达可协同纤维蛋白溶解酶、组织蛋白酶等降解血管周围基质及基底膜增强肿瘤血管生成能力促进骨肉瘤发生发展导致患者生存期较短 综上所述骨肉瘤组织中 呈无或低表达 呈高表达且二者表达异常与骨肉瘤患者的临床病理特征有关可作为骨肉瘤患者预后评估的生物标志物 但本研究也存在一定局限性本研究为单中心研究样本量较少可能会导致结果偏倚未来可进行大样本的系统研究以进一步证实本研究结论参考文献 李 涛李 娜李 佳等.微小 靶向调控 及对骨肉瘤细胞迁移侵袭的影响.临床肿瘤学杂志():.柴 丽董良仓.两种方案对治疗高分化骨肉瘤患者的 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