甘蔗核心种质花叶病和宿根矮化病自然抗病性调查与分子检测.pdf

第 45 卷 第 4 期2023 年 10 月中 国 糖 料Sugar Crops of ChinaVol.45,No.4Oct.2023doi:10.13570/ki.scc.2023.04.006http:/收稿日期:2022-10-07基金项目:财政部和农业农村部国家现代农业产业技术体系糖料专项资金项目(CARS-170303);“云岭产业技术领军人才”培养项目“甘蔗有害生物防控”(2018LJRC56);云南省现代农业产业技术体系建设专项资金项目(YNGZTX-4-92)资助。第一作者:王晓燕(1981-),女,云南开远人,硕士,副研究员,研究方向为甘蔗病害,E-mail:xiaoyanwang402 。通信作者:黄应昆(1964-),男,云南建水人,研究员,研究方向为甘蔗病虫害防控,E-mail:huangyk64 ;马永德(1970-),男,云南临翔人,高级农艺师,研究方向为甘蔗种植技术推广,E-mail:497635960 。甘蔗核心种质花叶病和宿根矮化病自然抗病性调查与分子检测王晓燕1,马永德2,单红丽1,李 婕1,张荣跃1,李银煳1,李文凤1,黄应昆1(1.云南省农业科学院甘蔗研究所,云南开远 661699;2.耿马县农业农村局,云南耿马 677500)摘 要:抗病种质资源的发掘利用是抗病育种的基础和关键,筛选抗病种质对选育抗病品种具有重要意义。为明确国家甘蔗种质资源圃保存的核心种质花叶病和宿根矮化病病情及其自然抗病性,本研究于 2021 年,对国家甘蔗种质资源圃保存的 105 份甘蔗核心种质进行花叶病和宿根矮化病田间自然发病调查及其病原检测与抗性评价。结果表明,105 份核心种质中,花叶病 1 级高抗到 3 级中抗的有 75 份,占 71.4%;105 份核心种质样品检测到 SCSMV、SrMV 两种病毒,所有样品均未检测出 SCMV 病毒;38 份核心种质受 SCSMV 单独侵染检测出 SCSMV、检出率为 36.2%,15 份核心种质受 SrMV 单独侵染检测出 SrMV、检出率为 14.3%,20 份核心种质受 SCSMV 和 SrMV 复合侵染检测出 SCSMV 和 SrMV、检出率为 19.0%;105 份核心种质中 88 份感 RSD 呈阳性、阳性检出率为 83.8%,17 份未感 RSD 呈阴性、占总检测数的 16.2%。综合分析结果显示,21 份核心种质对SCSMV 和 SrMV 2 种病毒均表现为高抗,占 20.0%;27 份核心种质双抗 SCSMV 和 SrMV 2 种病毒,占 25.7%;17 份核心种质抗 RSD,占 16.2%;其中 11 份核心种质多抗 SCSMV、SrMV 和 RSD,占 10.5%。研究结果明确了 105 份甘蔗核心种质花叶病和宿根矮化病田间病情及其病原类群,筛选出 11 份多抗 SCSMV、SrMV 和 RSD 核心种质,为深入开展甘蔗抗病育种提供了抗病基因源和参考依据。关键词:甘蔗;核心种质;花叶病和宿根矮化病;病原检测;自然抗病性中图分类号:S435.661 文献标识码:A文章编号:1007-2624(2023)04-0047-10王晓燕,马永德,单红丽,等.甘蔗核心种质花叶病和宿根矮化病自然抗病性调查与分子检测J.中国糖料,2023,45(4):47-56.WANG Xiaoyan,MA Yongde,SHAN Hongli,et al.Investigation and molecular detection of natural resistance of sugarcane core germplasm to mosaic and ratoon stunting diseasesJ.Sugar Crops of China,2023,45(4):47-56.0 引言蔗糖产业是我国区域经济发展的重要支柱和边疆少数民族地区农民增收、地方财政增长的主要来源1。而甘蔗病害是制约蔗糖产业高质量发展的重要因素之一,其中甘蔗花叶病和宿根矮化病(ratoon stuning disease,RSD)是重要的种传甘蔗病害,对甘蔗产量和品质影响极大2-3。中国糖料 http:/2023甘蔗花叶病是一种重要的世界性种传病害,1892 年 Musschenbrock 在爪哇首次记述了该病,之后在世界各大蔗区普遍发生,目前已成为我国蔗区发生最普遍,危害最严重的病害之一3-4。自然条件下,甘蔗花叶病由马铃薯 Y 病毒科(Potyviridae)的甘蔗花叶病毒(Sugarcane mosaic virus,SCMV)、高粱花叶病毒(Sorghum mosaic virus,SrMV)、甘蔗线条花叶病毒(Sugarcane streak mosaic virus,SCSMV)等引起。目前,我国蔗区已确定的甘蔗花叶病病原主要有 SCSMV、SrMV 和 SCMV 3 种,且在各植蔗省区均有发生5-7。其中云南蔗区以 SCSMV 为主,严重时检出率高达 100%8;福建、四川、广西、贵州、海南和广东等蔗区以SrMV 为主,检出率分别为 84.8%、74.6%、65.3%、65.3%、58.8%和 55.6%;浙江蔗区以 SCMV 为主,检出率为 65.3%9。甘蔗宿根矮化病(RSD)是由棒杆菌属细菌(Leifsonia xyli subsp.xyli,Lxx)寄生于蔗株维管束中引起的一种世界性种传病害,自 1944 年在澳大利亚昆士兰首次发现以来10,已有美国、南非、毛里求斯、印度、巴西、中国等多个国家和地区报道了该病的发生,现已遍布世界各蔗区11-15。RSD 在我国蔗区普遍发生,20092012 年 LI 等16采用 PCR 检测对云南、广西 21 个甘蔗主产区进行抽查,RSD 检出率为 74.7%。20132014 年韦金菊等17对广西 9 个主产蔗区进行 RSD 发生情况调查,RSD 检出率为 71.22%。2017 年沈林波等18对广西、云南、广东和海南等省 12 个代表性蔗区进行抽查,12 个蔗区均能检测到 RSD,全国平均检出率为 16.56%。培育和推广抗病品种是防控甘蔗花叶病和 RSD 最为经济有效的措施,而抗病种质资源的发掘利用是抗病育种的基础和关键。我国国家甘蔗种质资源圃保存有 3 000 多份珍贵种质资源,但这些种质资源的甘蔗花叶病和 RSD 发生情况及自然抗病性不清,其病原缺乏分子水平的系统检测鉴定。为此,本研究开展了105 份甘蔗核心种质资源花叶病和 RSD 田间自然发病调查及抗性评价,并采样对其病原进行分子检测鉴定,以期为有效开展甘蔗抗花叶病和 RSD 育种提供科学依据。1 材料与方法1.1 材料国家甘蔗种质资源圃(National Germplasm Repository of Sugarcane),国家科技资源共享服务平台-作物种质资源库(National Infrastructure for Crop Germplasm Resources)保存的甘蔗核心种质资源 105 份。1.2 病害调查与样品采集于 2021 年 7 月甘蔗花叶病发生稳定期,通过目测蔗株叶片症状对国家甘蔗种质资源圃保存的 105 份核心种质进行甘蔗花叶病田间自然发病率调查。每份核心种质顺序调查 100 株,记录调查总株数和花叶病发病株数,计算病株率。参照文献19和文献20中的标准按 15 级分级进行抗性水平分类。结合花叶病调查每份核心种质采集病株叶片样品各 1 份,用于检测 SCSMV、SrMV、SCMV 3 种花叶病病毒。自然发病株率=(病株数/调查总株数)100%于 2021 年 12 月甘蔗成熟期,每份核心种质随机取 6 株,每株截取中下部茎节各 1 节,每节切成约 7 cm长,纵向“十字”剖为 4 份,再用钳子挤压蔗茎,共取约 25 mL 的蔗汁于 50 mL 离心管内混匀,样品放于冰箱中,于-20 保存用于检测 RSD。每取 1 个样品后,取样工具先用清水冲洗,再用 75%酒精进行消毒。1.3 花叶病病毒检测参照蒋军喜等21和李文凤等22方法对各核心种质病株叶片样品进行 SCSMV、SrMV、SCMV 3 种花叶病病毒检测。检测方法为:各核心种质病株样品称取叶片 0.2 g,采用北京全式金生物技术有限公司的TransZol Plant 试剂盒提取甘蔗叶片总 RNA,具体步骤按照说明书操作。以提取的甘蔗叶片总 RNA 为模板,用 TransScript One-Step gDNA Removal and cDNA synthesis SuperMix 试剂盒(北京全式金生物技术有限公司)并按其说明合成 cDNA 第一链。分别用 SCSMV、SrMV 和 SCMV 病毒特异性引物(表 1)对反转录产物进行 PCR 扩增。SCSMV 的 PCR 反应条件为:20 L PCR 扩增体系中含 ddH2O 9.6 L、2Easy Taq PCR SuperMix(北京全式金生物技术有限公司)8.0 L,cDNA 模板 2 L,上下游引物各 0.2 L(20 g/L);84 第 45 卷,第 4 期王晓燕,等:甘蔗核心种质花叶病和宿根矮化病自然抗病性调查与分子检测PCR 扩增程序为:94预变性 5 min;94 变性 30 s,55 退火 30 s,72 延伸 1 min,35 个循环;72延伸10 min。SCMV 和 SrMV 的 PCR 反应条件为:20 L PCR 扩增体系中含 ddH2O 7.2 L、2Easy Taq PCR SuperMix(北京全式金生物技术有限公司)10 L,cDNA 模板 2 L,上下游引物各 0.4 L(20 g/L);PCR 扩增程序都为:94 预变性 5 min;94 变性 30 s,60 退火 30 s,72 延伸 1 min,35 个循环;72 延伸 10 min。病原检测阳性对照为经检测鉴定是 SCSMV、SrMV 和 SCMV 的植株基因组 RNA,阴性对照为茎尖组织脱毒健康植株基因组 RNA,空白对照为灭菌双蒸水。表 1 甘蔗花叶病病原检测所用引物Table 1 Primers used to detect the pathogens of sugarcane mosaic disease引物名称Primer引物序列(5-3)Sequences(5-3)退火温度/Tm/目的片段大小/bpProduct size/bpSCSMVSCSMV-F:ACAAGGAACGCAGCCACCTSCSMV-R:ACTAAGCGGTCAGGCAAC55939SrMVSrMV-F:CATCARGCAGGRGGCGGYACSrMV-R:TTTCATCTGCATGTGGGCCTC60828SCMVSCMV-F:GATGCAGGVGCHCAAGGRGGSCMV-R:GTGCTGCTGCACTCCCAACAG60924 R(AG),Y(CT),V(ACG),H(ACT)1.4 RSD 检测参照 LI 等16和张荣跃等15的方法对每份核心种质采集的蔗汁样品进行 RSD 检测。检测方法为:各样品取 4 mL 蔗汁,采用北京全式金生物技术公司的 Easy Pure plant Genomic DNA Kit 植物 DNA 提取试剂盒提取蔗汁总 DNA,具体步骤按照说明书操作。以提取的蔗汁总 DNA 为模版进行 PCR 扩增。PCR 扩增体系含 ddH2O 8.6 L,2Easy Taq PCR SuperMix(北京全式金生物技术有限公司)8 L,DNA 模板 3 L,上下游引物(Lxxl:5-CCGAAGTGAGCAGATTGACC-3;Lxx2:5-ACCCTGTGTTGTTTTCAACG-3)各0.2 L(20 g/L);扩增程序为:95 预变性 5 min,94 变性 30s,56 退火 30 s,72 延伸 1 min,35 个循环后 72 延伸 5 min。预期扩增片段大小为 438 bp。RSD 阳性对照为经检测鉴定为 Lxx 的病株蔗汁总DNA,阴性对照为本所脱毒无菌蔗株,空白对照为灭菌去离子水。2 结果与分析2.1 甘蔗花叶病调查及 SCSMV、SrMV、SCMV 病毒检测结果105 份甘蔗核心种质中,1 级高抗到 3 级中抗的有 75 份,占 71.4%。其中,赣蔗 75-65桂糖 69-349桂糖71-67云辐86-13川宁85-78川糖57-416福农91-3623粤农86-295粤农88-162崖城 71-255 崖城 80-139 台糖 134 台糖 173 新台糖 8 号 C92-52 POJ2878 RB72-454Phil72-446FR96-405CP94-1100L116等 21 份核心种质表现 1 级高抗,占 20.0%;桂糖 11 号云蔗 87-58福 91-4710福农 90-6652闽糖 69-421闽糖 86-2121闽糖 92-649崖城 84-125崖城 84-37台糖 1108台糖 160台糖 172M438-59PR77-3042MY5770Co740RB83-5054Vmc95-09Q170Q200FR97-33FR97-82FR93-344FR93-803FR94-87CP67-412CP89-2377等 27 份核心种质表现 2 级抗病,占 25.7%;27 份核心种质表现 3 级中抗,占 25.7%(表 2)。从图 1 可以看出,105 份核心种质样品检测出 SCSMV、SrMV 两种病毒,所有样品均未检测出 SCMV 病毒。其中,38 份核心种质受 SCSMV 单独侵染检测出 SCSMV,检出率为 36.2%;15 份核心种质受 SrMV 单94中国糖料 http:/2023独侵染检测出 SrMV,检出率为 14.3%;20 份核心种质受 SCSMV 和 SrMV 复合侵染检测出 SCSMV 和SrMV,检出率为 19.0%(图 1)。综合分析结果显示,赣蔗 75-65桂糖 69-349桂糖 71-67云辐 86-13川宁 85-78川糖 57-416福农 91-3623粤农 86-295粤农 88-162崖城 71-255崖城 80-139台糖 134台糖 173新台糖 8 号C92-52POJ2878RB72-454Phil72-446FR96-405CP94-1100L11621 份核心种质对 SCSMV 和 SrMV 两种病毒均表现为高抗,占 20.0%;桂糖 11 号云蔗 87-58福 91-4710福农 90-6652闽糖 69-421闽糖 86-2121闽糖 92-649崖城 84-125崖城 84-37台糖 1108台糖 160台糖 172M438-59PR77-3042MY5770Co740RB83-5054Vmc95-09Q170Q200FR97-33FR97-82FR93-344FR93-803FR94-87CP67-412CP89-237727 份核心种质双抗 SCSMV 和 SrMV 两种病毒,占 25.7%。2.2 RSD 检测结果PCR 检测结果表明,105 份甘蔗核心种质中 88 份感 RSD 呈阳性,阳性检出率为 83.8%;17 份未感 RSD呈阴性,占总检测数的 16.2%(图 2)。可见,自然条件下,甘蔗核心种质易感 RSD,比例偏高;而抗 RSD 甘蔗核心种质极少,抗性水平偏低。表 2 甘蔗核心种质花叶病调查及自然抗病性Table 2 Occurrence investigation and natural resistance of sugarcane core germplasm in mosaic disease序号Samples No.种质Germplasms花叶病Sugarcane mosaic disease病株率/%Disease incidence等级Grade抗性反应Resistance response1赣蔗 75-650.001高抗(HR)2赣南 76-68140.434感病(S)3桂糖 11 号6.562抗病(R)4桂糖 69-3490.001高抗(HR)5桂糖 71-670.001高抗(HR)6云蔗 01-102917.783中抗(MR)7云辐 86-130.001高抗(HR)8云蔗 65-22546.974感病(S)9云蔗 87-587.692抗病(R)10云瑞 99-15512.503中抗(MR)11川宁 78-11140.324感病(S)12川宁 85-780.001高抗(HR)13川糖 57-4160.001高抗(HR)14川糖 85-421100.005高感(HS)15川糖 85-63393.335高感(HS)16川糖 89-10337.004感病(S)17川糖 69-29030.233中抗(MR)18内江 60-5025.003中抗(MR)19福 91-47102.532抗病(R)20福农 90-66523.922抗病(R)05 第 45 卷,第 4 期王晓燕,等:甘蔗核心种质花叶病和宿根矮化病自然抗病性调查与分子检测续表 2序号Samples No.种质Germplasms花叶病Sugarcane mosaic disease病株率/%Disease incidence等级Grade抗性反应Resistance response21福农 91-36230.001高抗(HR)22福农 91-365029.633中抗(MR)23闽糖 69-4214.172抗病(R)24闽糖 70-61111.543中抗(MR)25闽糖 86-21219.282抗病(R)26闽糖 92-6494.552抗病(R)27FCP86-9345.164感病(S)28粤农 79-30921.543中抗(MR)29粤农 86-2950.001高抗(HR)30粤农 88-1620.001高抗(HR)31粤糖 64-14940.004感病(S)32粤糖 79-17717.463中抗(MR)33粤糖 82-33930.433中抗(MR)34粤糖 84-383.825高感(HS)35粤糖 85-6426.833中抗(MR)36粤糖 93-15930.773中抗(MR)37崖城 71-2550.001高抗(HR)38崖城 73-95470.735高感(HS)39崖城 75-28363.044感病(S)40崖城 76-185.005高感(HS)41崖城 76-916.443中抗(MR)42崖城 80-1390.001高抗(HR)43崖城 84-1256.002抗病(R)44崖城 84-373.262抗病(R)45崖城 96-4819.153中抗(MR)46台糖 11085.712抗病(R)47台糖 11375.005高感(HS)48台糖 12332.943中抗(MR)49台糖 1340.001高抗(HR)50台糖 1606.902抗病(R)51台糖 1721.092抗病(R)52台糖 1730.001高抗(HR)53新台糖 10 号69.055高感(HS)54新台糖 8 号0.001高抗(HR)15中国糖料 http:/2023续表 2序号Samples No.种质Germplasms花叶病Sugarcane mosaic disease病株率/%Disease incidence等级Grade抗性反应Resistance response55新台糖 22 号19.053中抗(MR)56PT41-14464.524感病(S)57PT41-16170.215高感(HS)58B33-3781.405高感(HS)59M438-599.092抗病(R)60KN93-0627.033中抗(MR)61PR77-30424.732抗病(R)62C39-47525.003中抗(MR)63C92-520.001高抗(HR)64MY57701.192抗病(R)65Co100133.634感病(S)66Co41980.725高感(HS)67Co7407.692抗病(R)68POJ28780.001高抗(HR)69RB72-4540.001高抗(HR)70RB83-50548.772抗病(R)71RB84-525715.793中抗(MR)72SP80-184251.524感病(S)73Vmc84-52428.793中抗(MR)74Vmc87-59913.513中抗(MR)75Vmc95-0910.002抗病(R)76Phil72-4460.001高抗(HR)77CC84-7524.593中抗(MR)78Q13591.435高感(HS)79Q1708.972抗病(R)80Q2005.412抗病(R)81Q20728.093中抗(MR)82Q9634.044感病(S)83选 310.533中抗(MR)8495H401741.774感病(S)85FR96-4050.001高抗(HR)86FR97-13738.464感病(S)87FR97-338.972抗病(R)88FR97-8049.094感病(S)89FR97-828.262抗病(R)90FR99-24461.364感病(S)25 第 45 卷,第 4 期王晓燕,等:甘蔗核心种质花叶病和宿根矮化病自然抗病性调查与分子检测续表 2序号Samples No.种质Germplasms花叶病Sugarcane mosaic disease病株率/%Disease incidence等级Grade抗性反应Resistance response91FR93-3449.522抗病(R)92FR93-8032.902抗病(R)93FR94-878.892抗病(R)94FR96-3173.085高感(HS)95CP62-39464.584感病(S)96CP65-35757.384感病(S)97CP67-4126.172抗病(R)98CP72-121014.143中抗(MR)99CP72-35688.335高感(HS)100CP80-184223.193中抗(MR)101CP85-130817.393中抗(MR)102CP89-23771.892抗病(R)103CP94-11000.001高抗(HR)104L1160.001高抗(HR)105L65-6919.613中抗(MR)图 1 105 份甘蔗核心种质花叶病病原检测韦恩图Fig.1 Venn diagram for pathogen detection of mosaic disease in 105 sugarcane core germplasms35中国糖料 http:/2023图 2 105 份甘蔗核心种质 RSD 检测结果Fig.2 RSD detection results of 105 sugarcane core germplasms3 结论与讨论甘蔗种质资源是现代甘蔗育种中抗病基因的重要来源,抗病种质资源的发掘利用是抗病育种的基础和关键,筛选抗病种质、拓宽抗病遗传基础对选育抗病品种具有重要意义。本研究对国家甘蔗种质资源圃保存的 105 份甘蔗核心种质进行花叶病和宿根矮化病田间自然发病调查及其病原检测与抗性评价,分析明确了各核心种质对甘蔗花叶病和 RSD 的自然抗病性,检测确认核心种质受 SCSMV、SrMV 两种病毒单独或复合侵染,综合评价筛选出双抗 SCSMV 和 SrMV 的核心种质 48 份、抗 RSD 的核心种质 17 份、多抗 SCSMV、SrMV 和 RSD 的核心种质 11 份,为深入开展甘蔗抗花叶病和 RSD 育种提供了丰富的抗病基因源和参考依据。分子检测结果显示,105 份核心种质样品检测到 SCSMV、SrMV 2 种病毒,所有样品均未检测出 SCMV病毒;38 份核心种质受 SCSMV 单独侵染,检出率为 36.2%;15 份核心种质受 SrMV 单独侵染,检出率为14.3%;20 份核心种质受 SCSMV 和 SrMV 复合侵染,检出率为 19.0%,由此表明 SCSMV 是云南蔗区花叶病主要病原,这与 WANG 等8和李银煳等23的研究结果一致。而其他学者研究认为,云南蔗区以 SrMV 为花叶病主要病原,检出率为 95.0%;SCSMV 次之为 56.8%9,这可能与采样地域、气候或种苗调运、品种轮换、病毒相互竞争、农事操作等有关。关于 SCSMV 和 SrMV 的田间消长动态还需进一步研究。为摸清我国不同蔗区 RSD 发生情况和自然抗病性,20092017 年,张荣跃等15、LI 等16、韦金菊等17和沈林波等18对云南、广西不同蔗区不同主栽品种的 RSD 发病情况进行调查,确认 RSD 在各蔗区普遍发生,阳性检出率分别为 59.54%、74.7%、71.22%和 16.56%。本研究 105 份甘蔗核心种质的 RSD 阳性检出率为 83.8%,显著高于以上学者的研究结果,可见,甘蔗核心种质易感 RSD,比例偏高;而抗 RSD 甘蔗核心种质极少,抗性水平偏低。生产上甘蔗花叶病和 RSD 的防控措施多样,其中选育和种植抗病品种是最为经济有效的措施,鉴于SCSMV 已成为甘蔗花叶病主要病原8,23,RSD 发生严重15-16,今后应加强多抗 SCSMV、SrMV 和 RSD 甘蔗新品种选育。而本研究筛选的多抗 SCSMV、SrMV 和 RSD 的核心种质,可作为珍贵抗病基因源,与常用育种亲本杂交,选育抗花叶病和 RSD 甘蔗新品种,供生产上推广应用。其次,作为防治 RSD 的主要措施,生产和种植健康种苗已在巴西、古巴、澳大 利亚等国应用多年。甘蔗健康种苗的生产主要有温水脱毒和组培脱45 第 45 卷,第 4 期王晓燕,等:甘蔗核心种质花叶病和宿根矮化病自然抗病性调查与分子检测毒两种方法。卢文洁等24研究表明温水脱毒对甘蔗有明显的增产增糖效果,新植公顷增产最高 49 830 kg,1 年宿根公顷增产最高达 29 895 kg,2 年宿根公顷增产最高达 23 656 kg,蔗糖分提高 0.35%0.86%,宿根年限延长 23 年。组培脱毒既可去除 RSD 病菌又可脱去甘蔗病毒获得健康种苗,如 2020 年 Gonzlez-Arnao 等25采用冷冻渗透疗法和组织培养,除去病蔗体内 SCMV 获得无毒苗。建议在我国各蔗区建立甘蔗专用健康种苗圃,将其作为防治甘蔗病害和增产增糖的手段,以提供脱毒健康种苗在生产上大面积推广应用,促进甘蔗产业健康、可持续高质量发展。参考文献 1 张跃彬 邓军 陈跃 等.云南高原特色甘蔗产业发展与技术战略研究 M.北京 中国农业出版社 2013.2 黄应昆 李文凤.现代甘蔗病虫草害防治彩色图说 M.北京 中国农业出版社 2016.3 HUANG Y K LI W F ZHANG R Y et al.Color illustration of diagnosis and control for modern sugarcane diseases pests and weeds M.Singapore Springer Nature Singapore Pte Ltd.2018.4 黄应昆 李文凤 卢文洁 等.云南蔗区甘蔗花叶病流行原因及控制对策 J.云南农业大学学报 2007 22 6 935-938.5 周国辉 许东林.甘蔗病毒病及其防治研究进展 J.植物保护学报 2005 32 3 324-327.6 李文凤 丁铭 方琦 等.云南甘蔗花叶病病原的初步鉴定 J.中国糖料 2006 2 4-7.7 李文凤 董家红 丁铭 等.云南甘蔗花叶病病原检测及一个分离物的分子鉴定 J.植物病理学报 2007 37 3 242-247.8 WANG X Y LI W F HUANG Y K et al.Molecular detection and phylogenetic analysis of viruses causing mosaic symptoms in new sugarcane varieties in China J.European Journal of Plant Pathology 2017 148 931-940.9 贺尔奇.中国蔗区甘蔗花叶病病毒的发生分布及其群体遗传进化分析 D.福州 福建农林大学 2022.10 MARTIN J P ABBOTT E V HUGHES C G.世界甘蔗病害 第 1 卷 M.陈庆龙译.北京 农业出版社 1982.11 BAILEY R A TOUGH S A.The current disribution of ratoon stunting disease in the South African sugar industry G.Procedure 65 th Annual Congress South African Sugar Technology Associate 1991 25-29.12 HOY J W GRISHAM M P DAMANN K E.Spread and increase of ratoon stunting disease of sugarcane and comparison of disease detection methods J.Plant Disease 1999 83 1170-1175.13 DUTTAMAJUMDER S K.Surreptitious spread of sugarcane ratoon stunting disease pathogen Leifsonia xyli subsp.xyli in subtropical India J.Indian Phytopathology 2001 54 4 481-483.14 RAGO A M ACRECHE M M SOPENA R A.A survey of ratoon stunting disease Leifsonia xyli subsp.xyli in commercial sugarcane fields at Tucuman Argentina J.Sugar Cane International 2004 22 6 12-14.15 张荣跃 黄应昆 李文凤 等.甘蔗主栽品种宿根矮化病调查及病原检测 J.中国糖料 2014 2 26-27.16 LI W F SHEN K HUANG Y K et al.Incidence of sugarcane ratoon stunting disease in the major cane-growing regions of China J.Crop Protection 2014 60 44-47.17 韦金菊 宋修鹏 黄伟华 等.广西主要蔗区甘蔗宿根矮化病调查 J.南方农业学报 2017 48 7 1216-1219.18 沈林波 吴楠楠 冯小艳 等.我国蔗区甘蔗宿根矮化病发生情况的分子检测 J.热带生物学报 2019 10 4 314-318.19 李文凤 黄应昆 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germplasm resources is the basis and key of disease-resistant breeding,and screening disease-resistant germplasm is of great significance for breeding disease-resistant varieties.In order to clarify the disease occurrence and natural resistance of mosaic and ratoon stunting(RSD)diseases of core germplasm preserved in the National Nursery of Sugarcane Germplasm Resources,the field occurrence investigation,pathogen detection and resistance evaluation were carried out in 105 core germplasms in 2021.The results showed that for mosaic resistance,75 of 105 core germplasms(71.4%)were scored between highly resistant(Grade 1)to moderately resistant(Grade 3).SCSMV and SrMV were detected in 105 core germplasms,and SCMV was not detected in all samples.SCSMV was detected in 38 core germplasms,which infected by SCSMV alone,with a detection rate of 36.2%.SrMV was detected in 15 core germplasms,which infected by SrMV alone,with a detection rate of 14.3%.SCSMV and SrMV were detected in 20 core germplasms,which infected by both SCSMV and SrMV,and the detection rate was 19.0%.Among 105 core germplasms,88 were posit