维生素类药物(1).ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,2020/8/9 Sunday,#,2026/11/10,维生素类药物(1),概 述,一、概念,维生素,1）维持人体正常代谢功能所,必需,的一类,微量,的,生物活性,物质，主要用于机体的,能量转移,和,代谢调节,。,2）大多数人体内,不能自行合成,必须从食物中摄取。,Company Logo,Hot Tip,二、化学结构：,醇、酯、酸、胺、醛，酚,三、分类,脂溶性,维生素:,VitA、D,2,、D,3,、E、K,1,水溶性,维生素:VitB族(B1、B2、B6、B12),VitC、叶酸、烟酸、烟酰胺,Company Logo,四、分析方法,1.,生物法,2.,微生物法,3.,化学法,4.,物理化学法,Company Logo,第一节 维生素A（Vitamin A）的分析,维生素A1,活性最高，维生素A,2,的生物,活性是维生素A,1,的30-40%，维生素A,3,的生物活性是维生素A,1,的0.4%，故通,常所说的维生素A系指维生素A,1。,Company Logo,第一节 维生素A（Vitamin A）的分析,来 源,1）天然产物 主要来源于鲛类无毒海鱼肝脏中提取的脂肪油,即,鱼肝油,。从鱼肝油提取的V,A,多为各种酯类的混合物，其中主要为,醋酸酯和棕榈酸酯。,2）人工合成产物,全反式维生素A醋酸酯,中国药典收载的VA是人工合成的VA醋酸酯结晶加精制植物油制成的油溶液，其制剂有V,AD,胶丸和V,AD,滴丸。,Company Logo,药典收载情况,V,A,及醋酸酯棕榈酸酯混合物的食用油溶液。,人工合成的V,A,醋酸酯结晶加精制植物油制成的油溶液，其制剂有V,AD,胶丸和V,AD,滴丸。,浓缩V,A,油,混合物,Ch.P,USP,BP,Company Logo,第一节 维生素A（Vitamin A）的分析,一、结构和性质,（一）结构,H 维生素A醇,-COCH,3,维生素A醋酸酯,-COC,15,H,31,维生素A棕榈酸酯,Company Logo,环己烯,共轭多,烯侧链,存在多种立体异构化合物,具有UV吸收,易发生脱氢、脱水、聚合反应,Company Logo,（二）性 质,1。,性状,Add Your Text,2。,稳定性,3。,紫外吸收特性,Add Your Text,4。,与三氯化锑呈色,Text,Company Logo,O,2,H,+,重排,O,O,V,A,酸,V,A,醛,呋喃型氧化物,（无生物活性）,Company Logo,H,+,+,+,-H,去水V,A,（V,A3,）,烯丙型醇,遇酸易发生脱水反应,Company Logo,二、鉴别反应,CHCl,3,反应机理,：V,A,与三氯化锑(SbCl,3,)中存在的亲电试剂氯化高锑（SbCl,5,）作用形成不稳定的蓝色正碳离子。,注意事项：,反应需在无水、无醇条件下进行。,水可使,SbCl,3,水解成SbOCl,乙醇可与正碳离子作用，使正电荷消失,溶剂：饱和无水三氯化锑的无醇氯仿溶液,Company Logo,2、,紫外吸收特征,去水维生素A（A,3,）：6个共轭双键，其最大吸收波长向红移，在340390nm波长间出现,3,个最大吸收峰(,348、367、389nm,)。,维生素A：5个共轭双键，其无水乙醇液在,326nm,波长处有最大吸收。,Company Logo,3、,薄层色谱法,BP USP,薄层板：硅胶G 硅胶,展开剂：环已烷-乙醚（8：2）,显色剂：三氯化锑 磷钼酸,现 象：,蓝色斑点,蓝绿色斑点,Company Logo,三、含量测定,1,紫外-可见分光光度法,2,比色法,3,高效液相色谱法,Company Logo,（一）紫外-可见分光光度法,利用维生素A醇和其醋酸酯分子中具,多烯共轭体系,结构，在,325328nm,处有选择性吸收峰，故可进行含量测定,Company Logo,三点校正法三波长测定法,（1）原因,（2）原理,Company Logo,1,VitA的,max,（328nm）,2,和,3,在,1,的两侧各选一点,(3)波长选择,等波长差法：,1,-,2,=,3,-,1,等吸收比法：A,2,=A,3,=6/7A,max,eg:中国药典中测定V,A,醋酸酯，,1,=328nm、,2,=316nm、,3,=340nm,eg:中国药典中测定V,A,醇，,1,=325nm、,2,=310nm、,3,=334nm,Company Logo,(4)测定方法,测定对象,V,A,醋酸酯,（纯度较高）,第一法（直接测定法）,max在326-329nm之间，且分别计算5个波长处的差值均不超过0.02，直接用测得的A,328,，用下述公式计算含量,标示量%=A,328,D1900w/(W100L标示量)100%,等波长差法 300、316、328、340、360nm,Company Logo,最大吸收波长是否在326-329之间,是,否,计算吸收度比值之差是否超过0.02,第二法（皂化）,是,否,计算A,328（校正）,A,328,Company Logo,-15%-3%0 3%,皂化,A,328（校正）,A,328,皂化,计算A值(一个或几个超过,0.02),Company Logo,5、生物效价及换算因数,1IU的VitA=0.300ug的全反式维生素A醇,=0.344ug的全反式维生素A醋酸酯,（1）生物效价的定义,维生素A含量是用生物效价表示,单位 IU/g（国际单位）,生物效价（IU/g）=吸收系数换算因数,Company Logo,（2）换算因数的计算,1g维生素A醋酸酯相当的维生素A的国际单位数为,1g维生素醇相当的维生素A的国际单位数为,Company Logo,(VitA酯),(VitA醇),换算因子=IU/g/,Company Logo,1、判断法选择A A测定或A校正,2、求,3、计算效价,（3）计算,Company Logo,制剂 VitA胶丸的含量计算,Company Logo,第二法（皂化法）,用醇制氢氧化钾加热皂化（水解），用乙醚提取，挥干溶剂，残渣用异丙醇溶解，测定含量。,测定对象,VitA醇,等吸收比法 300、310、325、334nm,Company Logo,最大吸收波长是否在323-327之间,是,否,A,300,/A,325,是否超过0.73,色谱法纯化,是,否,计算A,325（校正）,，或A值,Company Logo,计算A值,0,3%,3%,Company Logo,（二）三氯化锑比色法,（三）高效液相色谱法,Company Logo,思考题,1）三点校正紫外分光光度法测定维生素A含量的依据（原理）是什么？,2）三点校正紫外分光光度法测定维生素A醋酸酯含量时，校正公式是什么？换算因子是多少？写出测定其胶丸含量时标示量%的计算式。,Company Logo,氨基嘧啶环CH,2,噻唑环(季铵碱),第二节 维生素B,1,的分析,氨基嘧啶环,噻唑环,UV,（一）结构,一、结构与性质,还原性,Company Logo,1、溶解性,易溶于水,；微溶于乙醇；不溶于乙醚,2、硫色素反应,（二）性质,3、紫外吸收特性,4、与生物碱沉淀试剂反应,5、氯化物特性,Company Logo,二、鉴别试验,（一）硫色素反应,（二）生物碱沉淀反应,（三）与硝酸铅的反应,（四）氯化物反应,VitB,1,+NaOH,共热,Na,2,S,Na,2,S+Pb(NO,3,),2,PbS,2,（黑色）,Company Logo,硫色素反应（鉴别与含量测定）,硫色素反应为VitB,1,的专属反应,原理,NaOH,环合,环合,Company Logo,鉴别试验,Company Logo,H,+,H,+,H,+,VitB,1,与生物碱沉淀试剂的反应（,鉴别）,H,+,Company Logo,（一）非水溶液滴定法,（原料药）,三、含量测定,原 理,利用噻唑环上季铵和嘧啶环上氨基的弱碱性，在非水溶液中用高氯酸液滴定。,Company Logo,（二）紫外吸收（鉴别与含量测定）,VitB,1,分子结构中具共轭双键，在紫外区,246nm,处有最大吸收，可进行,鉴别与含量测定。,原,理,差示分光光度法,？,Company Logo,计算公式：,取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于维生素,1,25mg），置100ml 量瓶中，加盐酸溶液(91000)约70ml，振摇15分钟使维生素,1,溶解，加盐酸溶液(91000)稀释至刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过，精密量取续滤液5ml，置另一100ml量瓶中，再加盐酸溶液(91000)稀释至刻度，摇匀，照分光光度法在246nm 的波长处测定吸收度，按C,12,H,17,ClN,4,OS.HCl的吸收系数为 421计算，即得。,（二）紫外可见分光光度法,（维生素,1,片剂）,Company Logo,（三）硫色素荧光法,激发波长365nm 发射波长435nm,1、方法与计算,对照液,+NaOH+铁氰化钾+异丁醇,+NaOH+异丁醇,+NaOH+铁氰化钾+异丁醇,+NaOH+异丁醇,供试液,S,d,A,b,含量测定,Company Logo,2、特点,灵敏度高，线性范围宽,代谢产物不干扰，适用于体液分析,Company Logo,（三）高效液相色谱法,（四）毛细管电泳法,Company Logo,L（+）抗坏血酸（活性最高）,D（-）异抗坏血酸（为前者5%）,L（+）异抗坏血酸（无活性）,D（-）抗坏血酸（无活性）,第四节 维生素C的分析,一、结构与性质,(一）结构,两个手性碳原子，有四个光学异构体,二烯醇强还原性,弱酸性（一元酸）,Company Logo,（二）性质,1、性状,白色结晶或结晶性粉末；无臭，味酸；久置色渐变微黄，水溶液显酸性。,2、溶解性 易溶于水；略溶于乙醇；不溶于氯仿和乙醚。,3、旋光性 比旋度+20.5,0,-+21.5,0,Company Logo,4、酸性,烯二醇结构,由于共轭效应的影响,C,3,OH,pKa=4.17,C,2,OH,pKa=11.5,故V,C,表现为一元酸，可与NaHCO,3,生成钠盐,Company Logo,、水解性,aOH,a,2,CO,3,酮酸盐,Company Logo,6、强还原性,二烯醇结构,（,）,抗坏血酸,（有生物活性）,去氢抗坏血酸,（有生物活性）,二酮古洛糖酸,（无生物活性）,Company Logo,50,7、具糖的性质,结构与,糖类,相似,8、紫外吸收特性,Company Logo,（二）鉴别试验,1、氧化反应,（）与AgNO,3,反应,Company Logo,（,）与2，6-二氯靛酚反应（含量测定）,还原型,原理,氧化型,自身指示终点法,测定方法,Company Logo,快速滴定 防止其他还原性物质干扰,（,2min内）,酸性环境,HPO,3,-HAc中VitC稳定,剩余比色测定,（定量过量）,（测剩余染料）,讨论,Company Logo,缺点,需经常标定,贮存一周,不稳定,干扰多,氧化力较强,Company Logo,（3）与碱性酒石酸铜反应,（4）与KMnO,4,反应,2、糖类的反应,3、紫外分光光度法,243nm,Company Logo,1、原理,（一）碘量法,三、含量测定,Company Logo,取本品约0.2g，精密称定，加新沸过的冷水100ml与稀醋酸10ml使溶解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴定液（0.mol/L）滴定，至溶液显蓝色，在30秒内不褪。每1ml碘滴定液(0.mol/L)相当于8.806mg的C,6,H,8,O,6,2、测定方法,Company Logo,1、酸性环境 减慢VitC被O,2,氧化速度,2、,新沸冷H,2,O 减免水中O,2,的干扰,3、讨论,3、立即滴定 减少,O,2,的干扰,4、制剂测定时注意，注意消除辅料的干扰。,Na,2,S,2,O,5,+H,2,O,2NaHSO,3,NaHSO,3,+CH,3,COCH,3,Company Logo,（四）高效液相色谱法,(二)2，6-二氯靛酚,（三）紫外-可见分光光度法,Company Logo,本 章 小 结,4、VitE：掌握硝酸反应的原理。,1、,VitA：掌握三氯化锑鉴别反应的原理、,UV法,含量测定的原理及两种测定方法的区别。,2、VitB,1,：掌握硫色素反应原理。,3、VitC：掌握其结构特征（还原性）、碘量法含量测定的原理及操作注意事项。,Company Logo,第四节 维生素D的分析,维生素D,2,结构式,一结构与性质,Company Logo,第四节 维生素D的分析,二、性质,1、,性状,无色针状结晶或白色结晶粉末；无臭、无味：遇光或空气均易变质。,2、,溶解性,在氯仿中极易溶解，在植物油中略溶，在水中不溶。,Company Logo,第四节 维生素D的分析,3、,不稳定性,含多个烯键，性质不稳定，遇光或空气及其它氧化剂无发生氧化变质，使效价降低，毒性增强。,4、,旋光性,VD,2,：6个手性碳，VD,3,：5个手性碳 二者均具有旋光性。,5、,显色反应,：甾醇类共有反应,6、,紫外吸收特性,Company Logo,二、鉴别反应,1,2,3,4,显色反应,1.与醋酐-浓硫酸反应,2.与氯化锑反应,3.其它,比旋度测定,其它,HPLC,TLC,m.p.,UV,IR,维生素D2,维生素D3,的,区分反应,Company Logo,第四节 维生素D的分析,（一）,麦角甾醇 的检查,三、杂质检查,（,二）前维生素D的光照产物检查,Company Logo,四、含量测定,1）化学法,2）光谱法,3）色谱法,1）化学法2）色谱法,3）微生物法,正相色谱法,USP,BP,CHP,Company Logo,苯 二氢吡喃,第五节 维生素E的分析,一、结构与性质,（一）结构：,苯并二氢吡喃醇衍生物,苯环+二氢吡喃环+饱和烃链,Company Logo,Cycle Diagram,Text,Text,Text,Text,Text,Cycle name,Add Your Text,第五节,维生素E,(,Vit E),R,1,R,2,Vit E(dl-Tocopheryl Acetate),Company Logo,名 称,R,1,R,2,相对活性,-生育酚,-生育酚,-生育酚,-生育酚,CH,3,CH,3,H,H,CH,3,H,CH,3,H,1.0,0.5,0.2,0.1,*,*,*,Company Logo,生物效价,右旋体 ：消旋体 =1.4：10,（天然品）,（合成品）,chp规定 维生素E（消旋-生育酚醋酸酯）,Company Logo,（二）性质,2、溶解性 易溶于有机溶剂，,不溶于水,3、紫外吸收特性 284nm,4、水解性,酯键,易水解（H,+,、OH,-,）,1、性状 微黄色至黄色或黄绿色澄清的,粘稠液体;遇光色渐变深,。,5、易氧化,Company Logo,1、硝酸反应,7515,橙红色,（二）鉴别试验,Company Logo,2、三氯化铁联吡啶反应,O,Company Logo,3、紫外光谱法,4、薄层色谱法,5、气相色谱法,max,284nm ,min,254nm,Company Logo,（三）杂质检查,生育酚,硫酸铈滴定液（0.01mol/L）,二苯胺（亮黄灰紫）,（1）原理：利用游离生育酚的,还原性,，将,硫酸铈,还原成,硫酸亚铈。,（2）试剂,Company Logo,（四）含量测定,1、GC法,选择性,好,灵敏度,高,速度,快,分离效能,好,挥发性低、不稳定、极性强衍生化易受样品蒸气压限制,特点,2、高效液相色谱法,3、荧光分光光度法,Company Logo,