实验三---微生物菌落制片技术.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,实验三 微生物菌落制片技术,一、目的要求,1学习并掌握放线菌形态的制片方法,2学习并掌握霉菌的制片方法。,二、基本原理,放线菌扦片法：,将放线菌接种在琼脂平板上，扦上灭菌盖玻片后培养，,使放线菌菌丝沿着培养基表面与盖玻片的交接处生长而附着在盖玻上,。,观察时，轻轻取出盖玻片，置于载玻片上直接镜检。,这种方法可观察到放线菌自然生长状态下的特征，而且便于观察不同生长期的形态。,霉菌载玻片培养法：,无菌操作将培养基琼脂薄层置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养物，,霉菌即在载玻片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。,培养一定时间后，将载玻片上的培养物置显微镜下观察。,这种方法既可以保持了霉菌自然生长状态，还便于观察不同发育期的培养物。,三、器材,菌种,链霉菌；曲霉，青霉，根霉,培养基,马铃薯琼脂培养基,仪器或其他用具,灭菌平皿、载玻片、盖玻片、U形玻棒，接种环，解剖刀，镊子，20%的甘油，显微镜等。,注意,1 划线要细密些,以利扦片；,2 扦片要扦在接种线上；,2 霉菌载玻片培养法,培养小室的灭菌,琼脂块的制作,取已灭菌的马铃薯培养基67mL注,入另一灭菌的平皿中，使之凝固成薄层。用解,剖刀切成0.51cm,2,的琼脂快，并将其移至上述,培养室中的载玻片上（每片放两块）。,接种,用尖细的接种针挑取少量的孢子接种于,琼脂快的边缘上，用无菌操作镊子将盖,玻片覆盖在琼脂快上。,培养,先在平皿的滤纸上加35ml灭菌的20%,甘油，盖上皿盖，28培养。,镜检,根据需要可在不同的培养时间内取出载,玻片置低倍镜下观察，必要时换高倍镜。,注意,1 制作过程应注意无菌操作；,2 接种量要少，尽可能将分散的孢子接种在琼脂块边缘上，否则培养后菌丝过于稠密影响观察；,3 观察时,宜用略暗光线；先用低倍镜找到适当视野，再换高倍镜观察。,五、实验报告,简述,曲霉、青霉、根霉的菌落颜色及特征。,六、思考题,1,试比较教材中所列三种培养和观察放线菌方法的优缺点。,2 根据载玻片培养观察方法的基本原理，你认为上述哪些过程中的哪些步骤可以根据具体情况作一些改进或可用其他的替代方法？,