第四节-志贺氏菌.ppt

单击此处编辑母版标题样式,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,案例,2002年10月16日上午,案情：,某,1700,余,名师生发生集体性食物中毒。,中毒病症：,高烧、呕吐、腹泻等食物中毒症状；,部分学生出现,脑水肿、心肌损伤、血尿、肝肿,大、肠胃炎、肠淋巴结炎等严重病症，对,健康,造成严重危害。,1,流行病学调查结果：,食物中毒是由于食用了某饭店提供的,盒饭,所,致。饭店购进黄瓜，,没有清洗干净,，又,违规采用凉拌,的方法,制作“葱油黄瓜”，而这批黄瓜被,宋内氏志贺氏菌所污染,。,触犯刑法：,触犯了,中华人民共和国刑法第一百四十三条、,第一百五十条的规定，,构成,生产、销售,不符合卫生标,准的食品,罪,。,/4-25-2-1-3.php(,志贺氏菌扫描电镜照片),2,法院判决：,根据中华人民共和国刑法第一百四十三条、第一百五,十条、第六十七条第一款的规定，判决如下：,一、被告单位犯生产、销售不符合卫生标准的食品罪，判处罚金,人民币,50000,元。,二、被告人周某犯生产、销售不符合卫生标准的食品罪，判处有,期徒刑,三年六,个月，并处罚金人民币17000元。,三、被告人陈某生产、销售不符合卫生标准的食品罪，判处有期,徒刑,二年,，并处罚金人民币17000元。,四、被告人石某犯生产、销售不符合卫生标准的食品罪，判处有,期徒刑,三年,，并处罚金人民币17000元。,审判长,审判员,代理审判员,二00三年六月五日,书记员,书记员,3,第二节 志贺氏菌检验,Gallery/pages/Sh.,4,1形态与染色,志贺氏菌是,G-,无芽孢，无鞭毛、无荚膜中小杆菌,。,2-3,m,0.5-0.7,m。,2培养特性,一般的,S,小菌落,志贺氏菌金属镀膜 2000,05/02/vip/img/5571.jpg,6,3主要生化特性,发酵乳糖,:,(,宋内氏志贺氏菌,:,迟缓,+,),葡萄糖发酵,:,+,(,福氏志贺氏菌6型可微量产气),硫化氢试验：,2志贺氏菌,三糖铁培养基,7,与肠杆菌科各属细菌相比较，志贺氏菌属的,主要鉴别特征,为：,不运动,对各种糖的利用能力较差,，,且一般不形成可见气体,。,8,肠杆菌科，,志贺氏菌属，4个群，47个血清型,。,A,群痢疾志贺氏菌(,S.dysenteriae,),；,B,群福（弗）氏志贺氏菌(,S.flexneri,),：,我国以该型为主,C,群鲍氏志贺氏菌(,S.baydii,),；,D,群宋（索）内氏志贺氏菌(,S.sonnei,)：,我国以该型为主,分型：,10,11,6致病性,1）危害：,食物中毒，痢疾,志贺氏菌病仍然是肠道主要传染病之一，发病率高，流行 广泛，对国计民生危害严重。,全世界,年,发病例数超过,2亿,，其中，500万例需要住院治疗，年死亡病例达65万。本菌主要流行于发展中国家，但发达国家有时有局部暴发。,我国主要以福氏志贺氏菌和宋氏志贺氏菌痢疾流行为主，其他菌群也有报道，但此病仍居法定传染病的首位。,*10150个细菌即可使,1050受攻击的人致病致病,13,A real image of,Shigella,inside human cells,15,41,GN,增菌液：按,GBT478928-2003,中417规定。,增菌液，含甘露醇和胆盐（去氧胆酸钠）可抑制,G,菌和大肠菌。,6,8,h,分离培养用42 45,42,HE,琼脂：按；,GBT478928-2003,中421规定。,含乳糖（-）、胆盐、染料指示剂,43,SS,琼脂：按,GBT478928-2003,中422规定。,含胆盐、乳糖、染料指示剂,44 麦康凯琼脂：按,GBT424,规定,含乳糖（-）、胆盐、染料指示剂,45 伊红美蓝琼脂(,EMB)：,按,GBT 478928-2003,中 425规定。,含乳糖、伊红美蓝,二,选,一,二,选,一,7（4）培养基和试剂,16,4,.9,4,.16,进一步生化实验用培养基,(,志贺氏菌全部为阴性,),49 葡萄糖铵琼脂：按,GBT4789282003,中38规定。,410 尿素琼脂(,pH72)：,按,GBT478928-2003,中315规定。,411 西蒙氏柠檬酸盐琼脂：按,GBT4789282003,中35规定。,412 氰化钾(,KCN),培养基：按,GBT478928-2003,中316规定。,413 氨基酸脱羧酶试验培养基：赖氨酸、鸟氨酸及对照培养基，按,GBT,4789282003,中312规定。,414 糖发酵管：棉子糖、甘露醇、甘油七叶苷及水杨苷，按,GBT,478928-2003,中32规定。,415 5乳糖发酵管：按,GBT478928-2003,中432规定。,416 蛋白胨水、靛基质试剂：按,GBT4789282003,中313规定。,417 志贺氏菌属诊断血清。,18,8（5）、检验程序志贺氏菌检验程序,19,续,续,20,9（5）.原理,1)增菌,2)选择性鉴别培养基分离志贺氏菌,3)初步生化试验,4)血清学分型和进一步生化试验,1)增菌,用,GN,增菌液，一般为6-8,h，,时间过长，其他杂菌就会大量繁殖。,21,2)选择性,鉴别,培养基分离志贺氏菌,志贺氏菌常用的选择性琼脂平板:,HE/SS,麦康凯/伊红美蓝,志贺氏菌:乳糖发酵 -/迟 24,h,;,H,2,S -，,同时用两种平板分离志贺氏菌，,可互补提高检出率，防止漏检。,选择性较强,选择性不强,都含有乳糖,菌落特点 无色半透明,weishengwu/shigellajiangyi-4.htm,MacConkey agar contains,22,*三糖铁（,TSI）,琼脂试验的原理,试验方法：,以接种针挑取待试菌可疑,菌落或纯培养物,，,穿刺接种并涂布于斜面,，置361培养18-24,h，,观察结果。,三糖铁琼脂(,TSI),成分：,蛋白胨 20.0,g,牛肉膏3.0,g,乳 糖 10.0,g,蔗糖 10.0,g,葡萄糖1.0,g,硫酸亚铁铵,(含6个结晶水)0.5,g,酚红,0.025,g,或5,g/L,溶液5,mL,氯化钠5.0,g,硫代硫酸钠0.5,g,琼脂 12.0,g,蒸馏水 1000.0,mL,24,原理分析：,本培养基适合于,肠杆菌科,的鉴定。用于观察细菌对,糖,的利用和,硫化氢,（变黑）的产生。该培养基含有,乳糖、蔗糖和葡萄糖,的比例为,10:10:1,;,只能利用,葡萄糖,的细菌，葡萄糖被分解产酸可使斜面先变黄，但因量少，生成的,少量酸,，因接触空气而,氧化,，加之细菌利用培养基中含氮物质，生成,碱,性产物，故使斜面后来又变红;底部由于是在厌氧状态下，酸类不被氧化，所以仍保持黄色。,而发酵,乳糖,的细菌(,e.coli)，,则产生,大量的酸,，使整个培养基呈现,黄色,。,如培养基接种后产生,黑色,沉淀,，是因为某些细菌能分解,含硫氨基酸，生成硫化氢,，硫化氢和培养基中的,铁盐,反应，生成,黑色,的硫化亚铁沉淀。,25,提问：,志贺氏菌:,都能分解葡萄糖，产酸不产气，大多不发酵乳糖，,不产生,H,2,S。,应该产生什么现象？,大肠杆菌:,能分解葡萄糖产酸产气，大多数能分解乳糖，不产,生,H,2,S。,应该是什么现象？,沙门氏菌,:能分解葡萄糖，不发酵乳糖，大多数产生,H2S，,多数,产气。,答案：,26,复习题,1、叙述志贺氏菌的检验程序和原理,28,