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单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,*,实验二十六,血清甘油三酯含量测定,一、目的与要求,1,、了解血清甘油三酯含量测定的正常值与临床意义,2,、掌握血清甘油三酯化学法测定的基本原理及主要技术方法,TG,3R(CH)2COOK,甘油,KOH,皂化,TG,+2HIO,4,2HCHO,(甲醛),+,乙酰丙酮,+,铵离子,3,5-,二乙酰,-1,4-,二氢二甲基吡啶,,与同样处理的标准管进行比色,可测出甘油三酯的含量。,氧化,二、原理:,三、操作步骤:,1,、抽提,取三只小试管依次加入,样品,,TG,标准液,蒸馏水,,抽提剂及硫酸,充分振荡,10min,;静置,20min,后,吸取上层液。,2,、皂化反应,取三只大试管加入上层液,异丙醇及皂化试剂,混匀后,放置,65,水浴,5min,。,3,、氧化显色,加入氧化试剂,混匀后加入乙酰丙酮并混匀,,65,水浴,15min,,取出后于,420nm,处比色。,四、,结果计算,:,C(TG),(,mg/ml,),=A,测定管,/A,标准管,*,0.2*1/0.2,C(TG),(,mg/dl,),=C(TG)*100,正常参考值为,30-150mg/dl,。,五、,注意事项,:,1,、抽提时摇匀静置,待完全分层后才能吸取,上层液,,吸取上层液时,不能吸入下层液,,摇匀时勿将试剂撒出。,2,、选用小试管时试管口径不能太细,否则溶液过多不能振荡混匀。,3,、,甘油三酯平均分子量为,885,。,4,、试管使用时需要干燥,清洗需要用洗涤剂。,微量移液器的使用,(加样枪),单通道数字可调式加样枪,多通道手动可调式加样枪,1,、看清加样枪规格。,2,、仔细调节旋钮至所需刻度。,3,、安装枪头。,4,、压至一档,吸取溶液。,5,、放出溶液:压至二档。,Lets begin,!,
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