细菌代谢产物的检测和鉴定.pptx

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,细菌分类及判定,同济医院检验科,细菌代谢产物的检测和鉴定,第1页,细菌生物化学试验,原理：因为细菌各自酶系统不一样，新陈代谢产物也有所不一样，而这些产物又各含有不一样生物化学特征。为此，可利用生物化学方法来判别细菌类别，这种试验称为细菌生化反应试验,细菌代谢产物的检测和鉴定,第2页,惯用检验方法,碳水化合物代谢试验,氨基酸和蛋白质代谢试验,碳源利用试验,呼吸酶类试验,抑菌试验,细菌代谢产物的检测和鉴定,第3页,碳水化合物代谢试验,细菌代谢产物的检测和鉴定,第4页,糖（醇、苷）类发酵试验,原理,因为细菌含有发酵不一样糖类酶，故分解糖能力不一样，终末产物亦不一致。,应用,判定细菌最主要试验，尤其对肠杆菌科细菌判定尤为主要。,细菌代谢产物的检测和鉴定,第5页,细菌代谢产物的检测和鉴定,第6页,氧化一发酵试验(OF试验),原理,氧化型：仅在有氧环境中分解葡萄糖,发酵型：在有氧或无氧环境中都能分解,葡萄糖,产碱型：在有氧或无氧环境中都不能,分解葡萄糖,细菌代谢产物的检测和鉴定,第7页,结果：,两支培养基均无改变为产碱型；,两支培养基均产酸为发酵型；,若不加石蜡培养基产酸为氧化型。,应用：,肠杆菌科细菌（发酵型）,非发酵菌（产碱型/氧化型）,葡萄球菌（发酵型）,微球菌（氧化型）,细菌代谢产物的检测和鉴定,第8页,细菌代谢产物的检测和鉴定,第9页,-半乳糖苷酶试验,原理：有细菌可产生-半乳糖苷酶，能分解邻-硝基酚-D-半乳糖苷(ONPG)，而生成黄色邻-硝基酚，在很低浓度下也可检出。,细菌代谢产物的检测和鉴定,第10页,结果：菌悬液展现黄色为阳性反应，普通在2030min内显色。,应用：快速及迟缓分解乳糖细菌ONPG试验为阳性，而不发酵乳糖细菌为阴性。本试验主要用于迟缓发酵乳糖菌株快速判定。,细菌代谢产物的检测和鉴定,第11页,细菌代谢产物的检测和鉴定,第12页,七叶苷水解试验,原理：,七叶苷 七叶素 黑色化合物,培养基：,七叶苷培养基、胆汁七叶苷培养基。,细菌,枸橼酸铁,细菌代谢产物的检测和鉴定,第13页,结果：培养基变为黑色为阳性，不变色者为阴性。,应用：D群链球菌（+）,其它链球菌（-）,细菌代谢产物的检测和鉴定,第14页,甲基红试验,原理：,葡萄糖 丙酮酸 混合酸（pH),醇酮醛（pH)红色反应（+）,橘黄色（-）,细菌,甲基红试剂,细菌代谢产物的检测和鉴定,第15页,培养基：,葡萄糖蛋白胨水培养基。,应用,：大肠埃希菌（+）,产气肠杆菌（-）,肠杆菌科中沙门菌属、志贺菌属、枸橼酸杆菌属、变形杆菌属等为阳性，而肠杆菌属则为阴性。,细菌代谢产物的检测和鉴定,第16页,细菌代谢产物的检测和鉴定,第17页,V-P,试验,原理,：,葡萄糖 丙酮酸 乙酰甲基甲醇,二乙酰 红色化合物（+）,培养基,：葡萄糖蛋白胨水培养基,细菌,OH,-,O,胍基,细菌代谢产物的检测和鉴定,第18页,结果：,在数分钟内出现红色为阳性；如无红色出现且于35 4h后仍如故者即为阴性。,应用：,常与甲基红试验一起使用，因为前者阳性细菌，后者通常为阴性。,产气肠杆菌（+）,大肠埃希菌（-）,细菌代谢产物的检测和鉴定,第19页,细菌代谢产物的检测和鉴定,第20页,蛋白质和氨基酸代谢试验,细菌代谢产物的检测和鉴定,第21页,吲哚试验,原理,色氨酸 吲哚 玫瑰吲哚,（,红色,）,应用,肠道杆菌判定。,大肠埃希菌（+）,沙门菌属（-）,对二甲基氨基苯甲醛,细菌代谢产物的检测和鉴定,第22页,细菌代谢产物的检测和鉴定,第23页,硫化氢试验,原理,含硫氨基酸 硫化氢,硫化铅/硫化亚铁,（,黑色,）,应用,肠杆菌科菌属间判定。,细菌,醋酸铅/硫酸亚铁,细菌代谢产物的检测和鉴定,第24页,尿素（脲）酶试验,原理：,无色,尿素 氨,红色,应用：,肠杆菌科中变形杆菌属判定。,细菌,细菌代谢产物的检测和鉴定,第25页,细菌代谢产物的检测和鉴定,第26页,苯丙氨酸脱氨酶试验,原理,苯丙氨酸 苯丙酮酸,10%氯化铁,绿色化合物,应用：,肠杆菌科判定,变形杆菌属、摩根菌属、普罗威,登斯菌属（+）,细菌代谢产物的检测和鉴定,第27页,细菌代谢产物的检测和鉴定,第28页,氨基酸脱羧酶试验,原理：氨基酸 特异性脱羧酶 胺CO,2,指示剂变色,应用：肠杆菌科细菌判定。如肺炎克雷伯菌赖氨酸为阳性，鸟氨酸为阴性。,细菌代谢产物的检测和鉴定,第29页,细菌代谢产物的检测和鉴定,第30页,明胶液化试验,原理：明胶 明胶酶 氨基酸,失去凝固力,应用：肠杆菌科细菌判定。如沙雷菌、普通变形杆菌、阴沟肠杆菌等。,细菌代谢产物的检测和鉴定,第31页,碳源利用试验,细菌代谢产物的检测和鉴定,第32页,枸橼酸盐利用试验,原理,枸橼酸盐 碳酸盐+氨,（pH),溴麝香草酚蓝,绿色 深蓝色,应用：肠杆菌科细菌判定,埃希菌属、志贺菌属、爱德华菌,属（-）,细菌代谢产物的检测和鉴定,第33页,细菌代谢产物的检测和鉴定,第34页,呼吸酶类试验,细菌代谢产物的检测和鉴定,第35页,细胞色素氧化酶试验,原理,盐酸二甲基对苯二铵 醌类化合物,（深紫色）,应用,奈瑟菌属、假单胞菌属（+）,肠杆菌科（-）,细菌,Cyt氧化酶,细菌代谢产物的检测和鉴定,第36页,细菌代谢产物的检测和鉴定,第37页,过氧化氢酶（触酶）试验,原理,一些细菌分泌过氧化氢酶，使过氧化氢生成水和初生态氧，继而形成氧分子出现气泡。,应用,金黄色葡萄球菌、奈瑟菌属（+）,链球菌属（-）,细菌代谢产物的检测和鉴定,第38页,细菌代谢产物的检测和鉴定,第39页,（血浆）凝固酶试验,原理,金葡 血浆凝固酶,应用：致病性葡萄球菌判定,游离,结合（凝聚因子）,协同因子,凝血酶,纤原,纤维蛋白,细菌代谢产物的检测和鉴定,第40页,细菌代谢产物的检测和鉴定,第41页,胆汁溶菌试验,原理,胆盐、去氧胆酸钠和牛黄胆酸钠能选择性溶解肺炎链球菌。,应用,肺炎链球菌（+）,甲型链球菌（-）,细菌代谢产物的检测和鉴定,第42页,CAMP试验,B,族,链,球,菌,细菌代谢产物的检测和鉴定,第43页,