微生物大小和数量的测定.pptx

,单击此处编辑母版标题样式,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,镜台测微尺,目镜测微尺,微生物大小和数量的测定,第1页,目镜测微尺每格实际代表长度随物镜放大倍数而改变，也会因使用不一样显微镜而产生误差，所以在使用前必须用镜台测微尺进行校正。,微生物大小和数量的测定,第2页,目镜测微尺,校正,微生物大小和数量的测定,第3页,三、操作步骤,l,目镜测微尺标定 把目镜上透镜旋开，将,目镜测微尺,轻轻放在目镜隔板上，使,有刻度一面朝下,。将,镜台测微尺,放在显微镜载物台上，使,有刻度一面朝上,。先用低倍镜观察，调焦距，待看清镜台测微尺刻度后，转动目镜，使目镜测微尺刻度与镜台测微尺刻度相平行，并使两尺左边一条线重合，向右寻找另外一条两尺相重合直线。,2,标定公式：,计算两刻度间目镜测微尺格数和镜台测微尺格数。因为镜台测微尺刻度每格长,10,m,，所以可得：,目镜测微尺每格长（,m,）,=,两条重合线间镜台测微尺格数,10,两条重合线间目镜测微尺格数,微生物大小和数量的测定,第4页,三、操作步骤,3,菌体大小测定 将镜台测微尺取下，换上酿酒酵母玻片标本，分别在低倍镜和高倍镜下找到目标物，测量,10,20,个菌体长和宽占目镜测微尺格数，再以目镜测微尺每格长度计算出菌体长和宽。统计结果,求出平均值。,镜台测微尺玻片很薄，如需标定油镜头时，要格外注意，以免压碎镜台测微尺或损坏镜头。,思索题,为何不一样放大倍数目镜和物镜必须分别进行标定？,微生物大小和数量的测定,第5页,酵母菌数量测定,一、目标要求,1,明确血球计数板计数原理。,2,掌握使用血球计数板进行微生物计数方法。,二、基本原理,用血球计数板在显微镜下直接计数是一个惯用微生物计数方法。该计数板是一块特制载玻片，其上由四条槽组成三个平台；中间较宽平台又被一短横槽隔成两半，各列有一个方格网，中间大方格即为计数室。计数室刻度普通有两种规格，一是大方格分成,25,个中格，而每个中格又分成,16,个小格；另一个是大格分成,16,个中格，而每个中格又分成,25,个小格，每个大格中小格都是,400,个。每一个大格边长为,lmm,，面积为,lmm,2,，盖玻片与载玻片之间高度为,0.lmm,，故计数室容积为,0.lmm,3,。,微生物大小和数量的测定,第6页,微生物大小和数量的测定,第7页,血球计数板,计数,微生物大小和数量的测定,第8页,计数时，通常数五个中格总菌数，然后求得每个中格平均值，然后再换算成,lml,菌液中总菌数。,假如是,25,个中方格计数板,1mL,菌液中总菌数,=A/52510,4,B=50000A,B,（个）,A,为五个中方格中总菌数，,B,为菌液稀释倍数,.,假如是,16,个中方格计数板，,1mL,菌液中总菌数,=A/51610,4,B=3A,B,（个）,微生物大小和数量的测定,第9页,（三）器材,1,菌种 酿酒酵母,2,仪器或其它用具 血球计数板，显微镜，盖玻片，无菌毛细滴管。,（四）操作步骤,l,菌悬液制备,以无菌生理盐水将酿酒酵母制成浓度适当菌悬液。,2,镜检计数室,在加样前，先对计数室进行镜检。若有污物，则需清洗，,吹干后才能进行计数。,3,加样品,将清洁干燥血细胞计数板盖上盖玻片，再用无菌毛细,滴管将摇匀酿酒酵母菌悬液由盖玻片边缘凹槽滴加,菌,液沿缝隙靠毛细渗透作用自动进入计数室，普通计数室均,能充满菌液。,取样时先要摇匀菌液；加样时计数室不可有气泡产生。,微生物大小和数量的测定,第10页,