革兰氏阴性杆菌大肠杆菌介绍.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,*,*,革兰氏阴性杆菌大肠杆菌介绍,优选革兰氏阴性杆菌大肠杆菌介绍,一、大肠杆菌的一般特性,一、大肠杆菌的一般特性,该抗原刺激机体主要产生IgM类抗体。,R因子：抗性转移因子和抗性决定因子。,（5）肠侵袭性大肠杆菌（EIEC）,大肠杆菌对热的抵抗力较其他肠道杆菌强。,优选革兰氏阴性杆菌大肠杆菌介绍,不耐热（LT）：65 30min破坏，免疫原性强。,分解代谢产物供厌氧菌生长。,L型K抗原：对热敏感，100 1h破坏其抗原性，并失去与相应抗体的结合力和凝集性，位于被膜中，偶见于荚膜中。,葡萄糖 1g,胆盐、煌绿等对非致病性大肠杆菌有选择性抑制作用，而对致病性大肠杆菌无抑制作用，所以用肠道选择鉴别培养基来分离致病性大肠杆菌。,（2）产志贺毒素大肠杆菌(STEC）,3、菌毛 在细胞表面还含有一种比鞭毛更细更短更硬的丝状体叫菌毛，可分为普通菌毛和性菌毛。,1、病料的采集：肠道外感染取中段尿、血液、脓液、脑脊液等，腹泻者取粪便。,一、大肠杆菌的一般特性,1,、,G,直短杆菌，两端钝圆，散在或成对。,革兰染色,2,、周身鞭毛，能运动，无芽孢，有的有荚膜。,3,、代谢能力强，代谢类型是异养兼性厌氧型。,二、培养及生化特性,1,、培养特性,兼性厌氧；,最适生长温度,37,，最适生长,；,普通琼脂培养基：生长良好，圆形凸起、光滑、湿润、半透明、灰白色菌落，直径约,23mm,；,普通肉汤培养基：均匀浑浊，管底有粘性沉淀，液面管壁有菌环。,肠道菌鉴别培养基,麦康凯琼脂培养基：红色菌落。,伊红美兰琼脂培养基：黑色带金属闪光的菌落。,SS,琼脂培养基：一般不生长或生长较差，生长者呈红色。,血平板：一些致病性菌株常,溶血。,麦康凯琼脂培养基,伊红美兰琼脂培养基,SS,琼脂培养基,血平板,2,、,生化特性,I,：吲哚试验,M,：甲基红试验,V,：,V-P,试验,C,：枸橼酸盐利用实验,（,1,）三糖铁培养基,配方,牛肉膏,5g,硫酸亚铁,氯化钠,5g,蒸馏水,1000mL,蛋白胨,20g,硫代硫酸钠,蛋白胨,5g,琼脂,1 2g,乳糖,10g 2%,酚红溶液,蔗糖,10g,葡萄糖,1g,原理,测定细菌对葡萄糖、乳糖及蔗糖的发酵反应，以及能否产生硫化氢。可鉴别肠道菌。,葡萄糖,乳糖,蔗糖,硫酸亚铁,大肠杆菌,沙门菌,能产硫化氢菌株,发酵葡萄糖和乳糖；大量产酸产气,底层和斜面均呈黄色，底层有气泡,只发酵葡萄糖产酸产气,底层黄色，斜面保持红色,因形成硫化亚铁而使培养基呈黑色,对照,假单胞菌,志贺氏菌,沙门氏菌,大肠杆菌,变形杆菌,三糖铁培养基,吲哚试验,V-P,试验,枸橼酸盐试验,甲基红试验,IMViC,试验,三、大肠杆菌的基本结构,(,一,),细胞壁,大肠杆菌的细胞壁分外膜和肽聚糖层。,外膜是大肠杆菌细胞壁的主要成分，主要由磷脂、蛋白质和脂多糖组成。,脂多糖是革兰氏阴性细菌的内毒素，也是革兰氏阴性细菌细胞壁的特有成分，主要与抗原性、致病性及对噬菌体的敏感性有关。,外膜,周质,细胞质膜,（二）质粒,F,因子：又称致育因子，插入、复制和转移的功能。有,F,因子的大肠杆菌为雄性，用,F,+,表示，不含,F,因子的大肠杆菌称为雌性，用,F,-,表示。通过,F,+,和,F,-,细菌的接合，,F,因子可经性菌毛传递给,F,-,菌株，使,F,-,菌株转变为,F,+,菌株。,R,因子：抗性转移因子和抗性决定因子。,Col,因子：产大肠杆菌素因子，编码合成大肠杆菌素。,四、大肠杆菌的特殊结构,1,、荚膜 荚膜具有抗原性，构成了大肠杆菌的表面抗原，即,K,抗原。,2,、鞭毛,由鞭毛蛋白组成，构成了细菌的鞭毛抗原，与运动有关。,3,、菌毛 在细胞表面还含有一种比鞭毛更细更短更硬的丝状体叫菌毛，可分为普通菌毛和性菌毛。,大肠杆菌可以透过接合作用传递遗传物质。,五、抗原及血清型,（一）抗原,O,抗原，即菌体抗原，为细胞壁脂多糖。该抗原刺激机体主要产生,IgM,类抗体。,H,抗原，即鞭毛抗原，,H,抗原主要刺激机体产生,IgG,类抗体，与其他肠道菌基本无交叉反应。,K,抗原，即荚膜抗原，位于,O,抗原外层，为多糖。,具有,K,抗原的菌株不能被其相应的抗,O,血清所凝集叫“,O,不凝集性”。,据耐热性不同，,K,抗原又分为：,L,、,A,和,B,三型。,L,型,K,抗原：对热敏感，,100 1h,破坏其抗原性，并失去与相应抗体的结合力和凝集性，位于被膜中，偶见于荚膜中。,A,型,K,抗原：耐,100 1h,，但破坏其抗原性和,O,不凝集性，但保留与相应抗体结合能力。位于荚膜中，抗,A,血清可使具有相应,A,抗原的菌体出现荚膜肿胀现象。,B,型,K,抗原：,100 1h,破坏其抗原性与相应抗体的凝集性，但保留其与相应抗体结合力。,（二）血清型,可用,O:K:H,排列表示其血清型。如：,O8:K23:H19,，表示该菌具有,O,抗原,8,，,K,抗原,23,，,H,抗原为,19,。,致人畜腹泻的产肠毒素大肠杆菌，除含,K,抗原外，还可含有蛋白质性粘附素抗原。对粘附素抗原应并列写于多糖,K,抗原之后。如：,O8:K87,，,K88:H19,中,K88,即为粘附素抗原。,六、致病性,（一）致病物质,1,、定居因子（,Colonization factor,，,CF,）；也称粘附素，即大肠杆菌的菌毛。,2,、肠毒素是肠产毒性大肠杆菌在生长繁殖过程中释放的外毒素，分为耐热和不耐热两种。,耐热（,ST,）：,10020min,不破坏，免疫原性弱。,不耐热（,LT,）：,65 30min,破坏，免疫原性强。,3,其他：细胞壁脂多糖的类脂,A,具有毒性；,K,抗原有抗吞噬作用，有抵抗抗体和补体的作用。,（二）所致疾病,1,肠道外感染,：多为内源性感染，以泌尿系感染为主；大肠杆菌可侵入血液，引起败血症；大肠杆菌性脑膜炎。,2,急性腹泻,（,1,）肠产毒性大肠杆菌（,ETEC,）,（,2,）产志贺毒素大肠杆菌,(STEC,）,（,3,）肠致病性大肠杆菌（,EPEC,）,（,4,）肠出血性大肠杆菌（,EHEC,）,（,5,）肠侵袭性大肠杆菌（,EIEC,）,（,6,）肠粘附性大肠杆菌（,EAEC,）,肠产毒性大肠杆菌（,ETEC,）,ETEC,是致人和幼畜腹泻最常见的病原菌；毒力因子有粘附素性菌毛和肠毒素。,致病过程,七、抵抗力,大肠杆菌对热的抵抗力较其他肠道杆菌强。,55,加热,60min,或,60,加热,15min,仍有部分细菌存活。,胆盐、煌绿等对非致病性大肠杆菌有选择性抑制作用，而对致病性大肠杆菌无抑制作用，所以用肠道选择鉴别培养基来分离致病性大肠杆菌。,对磺胺类、链霉素、氯霉素等敏感。,八、非致病性大肠杆菌的作用,保护肠道的微生态平衡。消耗肠道内的氧气，创造厌氧环境，利于厌氧菌的生长；分解代谢产物供厌氧菌生长。,能合成维生素,K,和,B,。,对外袭菌有拮抗作用。某些大肠杆菌能产生大肠菌素，对一些病原微生物具有拮抗作用。,（1）肠产毒性大肠杆菌（ETEC）,SS琼脂培养基：一般不生长或生长较差，生长者呈红色。,（4）肠出血性大肠杆菌（EHEC）,如：O8:K87，K88:H19 中 K88即为粘附素抗原。,由鞭毛蛋白组成，构成了细菌的鞭毛抗原，与运动有关。,底层黄色，斜面保持红色,R因子：抗性转移因子和抗性决定因子。,耐热（ST）：10020min不破坏，免疫原性弱。,1、荚膜 荚膜具有抗原性，构成了大肠杆菌的表面抗原，即K抗原。,血平板：一些致病性菌株常溶血。,因形成硫化亚铁而使培养基呈黑色,K抗原，即荚膜抗原，位于O抗原外层，为多糖。,（2）产志贺毒素大肠杆菌(STEC）,蔗糖 10g,一、大肠杆菌的一般特性,（2）产志贺毒素大肠杆菌(STEC）,L型K抗原：对热敏感，100 1h破坏其抗原性，并失去与相应抗体的结合力和凝集性，位于被膜中，偶见于荚膜中。,可用O:K:H排列表示其血清型。,九、微生物学的诊断,1,、病料的采集,：肠道外感染取中段尿、血液、脓液、脑脊液等，腹泻者取粪便。,2,、分离培养,：粪便标本直接接种肠道杆菌选择性培养基。其他病料可同时接种血琼脂平板和肠道杆菌选择性培养基。,37,培养,18,24h,后，观察菌落并涂片染色镜检。,3,、生化鉴定：,大部分菌株发酵乳糖产酸产气，并发酵葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇和木胶糖等产酸产气。,IMViC,试验为“,+-”,。即为典型大肠杆菌。,谢谢观看！,