3.2体外受精和早期胚胎发育-zb2.ppt

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,3.2,体外受精和早期胚胎培养,1978,年,7,月,25,日世界首例试管婴儿,第一个试管婴儿于,1978,年,7,月,25,日在英国的奥尔德姆市医院诞生，她的名字叫,路易丝,.,布朗,。路易丝,.,布朗的母亲梅,.,布朗因输卵管阻塞而不能生育。,医生从梅,.,布朗（时年,31,岁）体内提取卵子，再取她丈夫（时年,38,岁）的精液，经处理在体外使卵子受精，受精卵分裂形成,16,细胞胚后重新植入梅,.,布朗的子宫内。,9,个多月后就生下了路易丝,.,布朗。,1988,年,3,月,10,日我国首例试管婴儿诞生,著名妇产科专家张丽珠教授与中国首例试管婴儿,根据资料回答下列问题：,1.,试管婴儿技术包括哪些操作步骤,？,（体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植）,2.,试管婴儿培育和母亲正常怀孕的过程有何异同？,相同之处,：都通过有性生殖产生,;,都要在母体子宫内发育形成胎儿。,不同之处,：受精作用在体外，并在体外发育成早期胚胎进行胚胎移植。,一、从试管牛说起,牛的生育率虽然很低，但是牛的卵母细胞却相当的多，其卵巢中卵母细胞数目要比一生中排卵数多,1000,倍左右,公牛产生的精子数目就更多了,伟大设想诞生了,试管动物技术,是指通过人工操作使卵子和精子在,体外,条件下,成熟和受精,，并通过培养发育成,早期胚胎,后，再经,移植,产生后代的技术。,精子,卵子,受精卵,早期胚胎,移植,子宫,个体,试管动物技术过程：,第一步：体外受精,第二步：胚胎的早期培养,第三步：胚胎移植,快速繁殖动物优良品种,目的：,试管动物技术,a.,如何使雌性动物排出更多的卵子？,b.,对实验动物小鼠、兔和小家畜猪、羊如何采集卵子？,c.,对于大家畜或大型动物如何采集卵子？,d.,采集的卵子是否马上可以受精？,阅读,P69,、,70,思考以下问题：,1.,卵母细胞的采集和培养,采用的主要方法是给供体注射,，使其排出更多的卵子，之后从,中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精。,促性腺激素,输卵管,a.,如何使雌性动物排出更多的卵子？,超数排卵处理,b.,对实验动物小鼠、兔和小家畜猪、羊如何采集卵子？,对不同动物,采集卵母细胞的方法不同。,1.,卵母细胞的采集和培养,大家畜或大型动物，如牛，卵细胞的采集：,从屠宰场已屠宰母畜的,中采集卵母细胞，也可以借助,、,或,等工具，直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞。,卵巢,超声波,(B,超,),探测仪,内窥镜,腹腔镜,1.,卵母细胞的采集和培养,c.,对于大家畜或大型动物如何采集卵子？,d.,采集的卵子是否马上可以受精？,采集的卵母细胞，都要在体外经,后，才能与,精子结合完成受精。,人工培养成熟,获能,阅读,P70,、,71,思考以下问题：,a.,精子的采集有哪些方法？,b.,体外受精需要哪些前处理？,2,、精子细胞的采集和获能,2,、精子细胞的采集和获能,（,1,）采集方法：,假阴道法,手握法,电刺激法,a.,精子的采集有哪些方法？,大家畜或大型动物,猪、犬等体型较小，易于控制的动物,野生或经济动物,此外，啮齿类实验动物可在处死后从附睾尾收集精液。,2,、精子细胞的采集和获能,（,2,）体外精子获能的方法：,培养法,:,化学诱导法,:,如：啮齿动物、家兔和猪等,如：牛、羊等,放入人工配制的获能液中,放在一定浓度的,肝素,或,钙离子载体,A23187,溶液中,b.,体外受精需要哪些前处理？,3.,受精,获能溶液,专用受精溶液,获能的精子和培养成熟的卵子，一般情况下在,或,中完成受精过程。,CO,2,培养箱,三、胚胎的早期培养,复习,：动物细胞培养的条件是什么？,糖,、氨基酸、,促生长因子,、无机盐、,微量元素,、血清等,动物细胞培养液成分,?,精子和卵子在体外受精后，应将受精卵移入,发育培养液,中继续培养，以,检查受精状况和受精卵的发育能力,。,培养液成分：,有机盐、,无机盐,、维生素、激素、,氨基酸,、核苷酸、,血清,等,三、胚胎的早期培养,动物胚胎培养液成分与动物细胞培养液成分比较,项目,动物胚胎培养液,动物细胞培养液,盐类,营养物质,调节物质,特有物质,无机盐和有机盐,氨基酸、核苷酸,维生素、激素,血清,无机盐、微量元素,促生长因子,糖、氨基酸,血清、血浆,三、胚胎的早期培养,培养发育到适宜阶段时，可将其取出向受体移植或冷动保存,三、胚胎的早期培养,不同动物胚胎移植时间不同,牛、羊：,小鼠、家兔：,试管婴儿：,桑椹胚或囊胚阶段,可在更早的阶段移植,816,个细胞阶段,注：胚胎发育的主要场所是母体,为充分利用屠宰母畜卵巢上的卵母细胞，不妨将屠宰场和,“,胚胎工厂,”,合建。这样屠宰场的产品就不仅是鲜肉，还会生产出大量的胚胎和胚胎工程所需的原材料，你看这个想法可行吗？,奇思妙想,目前，从屠宰场废弃的卵巢中，每个卵巢平均可采集,10,枚左右可用卵母细胞，经体外培养成熟和受精后约可获,4,枚可用的胚胎，经过移植给受体母牛，最终可得到,1,2,头犊牛。牛体外受精胚胎的工厂化生产已经成为可能。,存放条件？,采集良种母牛的卵母细胞,卵母细胞的体外培养,采集良种公牛精子,精子体外获能,体外受精,良种牛体外受精胚胎,胚胎移植,受体牛,良种犊牛,成熟期牛,屠宰加工厂,市场,采集卵巢中的卵母细胞,“试管牛”工厂化生产的技术流程图,思考,：试管牛的产生属于克隆吗？,早期胚胎,胚胎移植,C,代孕母体,D,新个体,（与,B,遗传物质相同）,克隆动物的培育,过程,A,雌性动物卵子,去核,细胞质,取核,B,动物体细胞,核移植,显微注射,重组细胞,有性生殖,无性生殖,核移植技术、,胚胎移植,遵循,不遵循,体外受精,胚胎移植,试管动物,克隆动物,发育起点,生殖方式,技术手段,遗传物质,遗传规律,比较试管动物和克隆动物,来自,2,个个体,主要来自核供体,受精卵,重组细胞,胚胎移植,采集卵母细胞,体外培养,采集精子,体外获能,体外受精,早期胚胎培养,受体牛,小,结,（,时期,：）,1,）超数排卵,（试剂）,2,）活体取卵,（仪器）,3,）从屠宰的卵巢取卵,方法,（,方法，试剂,）,（试剂）,（培养条件、目的阶段）,成熟的卵子,获能的精子,MII,中期,方法,1,、关于牛体外受精及胚胎的工厂化生产的叙述，正确的是,A.,精子和卵细胞受精形成受精卵后即可移入母牛子宫,B.,采集的卵母细胞应立即与精子共同放入培养液才能形成受精卵,C.,成熟的卵细胞与收集来的精子相遇形成受精卵，需培养到一定,阶段才可移植,D.,体外受精胚胎的工厂化生产即胚胎发育和受精过程只需在体外,进行,2,、下列现代生物技术成果获得必须通过胚胎移植的是,A.,转基因良种鸡,B.,重组酵母乙肝疫苗,C.,单克隆抗体,D.,试管婴儿,C,D,巩固练习,3,、采集的卵母细胞，在体外经人工培养成熟后，才能与获能的精子受精，以下原因,不正确,的是,A.,卵子从输卵管中冲出也要经历类似精子获能的过程,B.,动物排出的卵子成熟程度不同,C.,体外人工培养至减数分裂第二次分裂中期时才成熟,D.,冲出的卵子还需要培养一段时间由小变大,D,4,、下列关于滋养层细胞的叙述，,不正确,的是,A.,囊胚滋养层细胞将来发育成胎盘和胎膜,B.,可以用滋养层细胞做,DNA,分析性别鉴定,C.,囊胚滋养层细胞就是将来原肠胚的外胚层,D.,滋养层细胞沿透明带内壁扩展和排列,C,5,、下列有关胚胎工程的叙述，正确的是,A.,“,试管动物,”,的生殖方式属于无性生殖,B.,卵裂球时期每一个细胞的体积比受精卵大,C.,通过胚胎移植技术可充分发挥良种母畜的繁殖潜力,D.,对某一胚胎的干细胞移植，产生的动物中雄性和,雌性的概率各占,1/2,C,6,、下列关于胚胎工程的叙述，正确的是（）,A.,通过胚胎体外培养可直接获得新生儿,B.,超数排卵技术要使用一定的激素,C.,胚胎移植中的受体与供体必须都为优良品种,D.,受体母畜需要遗传性状优良的品种，供体母畜可用,遗传性 状一般的品种,B,7,、,“,试管婴儿,”,技术是通过将不孕夫妇的精子和卵细胞取出在试管中完成受精，并在试管中培养受精卵使其发育到桑椹胚或囊胚阶段，再将胚胎移入女性子宫内发育成胎儿。它不仅使一部分不能生育的男女重新获得了生育的机会，也为人类的优生开辟了新的途径。据此回答：,（,1,）,“,试管婴儿,”,技术在生物学上所依据的原理是,A.,有性生殖,B.,组织培养,C.,克隆技术,D.,基因工程,（,2,）,“,试管婴儿,”,的形成用到下列哪些技术？,（填序号）,体外培养 人工授精 胚胎移植 核移植,A,8,、下图是培育能产生凝血因子牛的过程示意图，回答相关问题：,（,1,）为能从良种母牛体内一次取得多枚卵子，可以采用,的方法。据报道，这种技术已经被滥用于人类生育中，从而出现许多人工,“,多胞胎,”,，这种技术带来的危害之一是,。,（,2,）在过程中，当一个精子进入卵细胞后会激发卵子发生反应，如透明带反应等，其意义是,。过程涉及的技术是,。,注射促性腺激素,影响胎儿的健康发育、对孕妇的身体不利等,防止多精入卵,胚胎移植,1,）进行小鼠胚胎工程时，首先在光控周期下饲养成年雌鼠，并注射促性腺激素，目的是,。然后从雌鼠输卵管中取出卵子，在一定条件下培养成熟；并从雄鼠附睾中取出精子，在一定条件下培养一段时间，目的是,。再在,37,，,5%CO,2,条件下，精卵共同作用,4h,，冲洗后继续培养。定时在显微镜下观察胚胎的变化，第,5,天可以看到胚胎发生收缩，细胞间隙扩大，接着胚胎内部出现裂隙，这时胚胎已经进入,_ _,期。,促进超数排卵,使精子获能,囊胚,9.,回答下列问题,2,）如果体外受精后，在精原核与卵原核融合之前，用微型吸管除雄原核，再用细胞松弛素,B,处理（作用类似于用秋水仙素处理植物细胞），处理后的受精卵可发育成小鼠。这种方法在动物新品种选育中的显著优点是,。,3,）如果将小鼠甲的体细胞核移入小鼠乙的去核卵细胞中，由重组细胞发育成小鼠丙，则小鼠丙的基因来源有,。,容易获得纯合子并缩短育种时间,小鼠甲（体细胞）的核基因和小鼠乙（卵细胞）的细胞质基因,