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,新知初探思维启动,要点突破讲练互动,知能演练轻巧夺冠,第一章 微生物培养技术,新知初探思维启动,要点突破讲练互动,知能演练轻巧夺冠,第一章 微生物培养技术,新知初探思维启动,要点突破讲练互动,知能演练轻巧夺冠,第一章 微生物培养技术,新知初探思维启动,要点突破讲练互动,知能演练轻巧夺冠,第一章 微生物培养技术,新知初探思维启动,要点突破讲练互动,知能演练轻巧夺冠,第一章 微生物培养技术,新知初探思维启动,要点突破讲练互动,知能演练轻巧夺冠,第一章 微生物培养技术,新知初探思维启动,要点突破讲练互动,知能演练轻巧夺冠,第一章 微生物培养技术,新知初探思维启动,要点突破讲练互动,知能演练轻巧夺冠,第一章 微生物培养技术,新知初探思维启动,要点突破讲练互动,知能演练轻巧夺冠,第一章 微生物培养技术,新知初探思维启动,要点突破讲练互动,知能演练轻巧夺冠,第一章 微生物培养技术,第一章 微生物培养技术,第一章 微生物培养技术,第1页,第,1,节微生物分离和纯培养,第2页,学习导航,1.,了解相关微生物及其培养基基础知识。,2.,了解消毒和灭菌原理、方法、进行无菌技术操作。,重点,3.,了解微生物接种方法步骤，进行大肠杆菌分离和纯培养。,重、难点,第3页,新知初探思维开启,一、培养基,1.,含义：,因为微生物代谢方式不一样，因而对营养物质需求也是有差异。依据微生物,_,需要，将各种营养物质混合在一起，配制成适合微生物生存营养基质。,生长繁殖和代谢,第4页,2.,平板培养基,将,_,后固体培养基基质倒入,_,，冷却凝固后制成培养基。,二、接种技术,1.,含义,：把对应研究对象移入,_,中过程。,溶化,无菌培养皿,培养基,第5页,2.,方法,在平板培养基上接种方法有平板划线法、,_,法、,_,法等。平板划线法又包含连续划线法和交叉划线法。,稀释涂布平板,稀释混合平板,第6页,判一判,(1),微生物是指由细胞组成一类个体微小生物。,(,),(2),在微生物分离和纯培养时，需要无菌操作。,(,),(3),普通我们饮用奶制品，多采取高温灭菌法。,(,),(4),灭菌和消毒都能够杀死细菌芽孢等休眠体。,(,),第7页,三、无菌技术,1.,目标和要求,在微生物分离和纯培养过程中，为了预防,_,污染，必须采取,_,进行操作。在试验过程中，要对所用器材、培养基进行严格灭菌，对工作场所进行消毒。,外来杂菌,无菌技术,第8页,2.,灭菌和消毒,灭菌,消毒,概念,用_理化原因杀死环境或物体内外_微生物,用相对_理化方法杀死环境或物体上病原微生物和有害微生物营养细胞,惯用方法,_,法,_,消毒法和,_,消毒法,适用对象,所用器材、培养基,工作场所,强烈,全部,温和,高温灭菌,射线,化学药剂,第9页,四、大肠杆菌分离和纯培养,1.,方法,：,_,。,2.,步骤,平板划线分离法,牛肉膏蛋白胨琼脂,接种环,连续,交叉,菌落,倒置,第10页,想一想,划线法为何能够分离出大肠杆菌？,【,提醒,】,伴随线延长，菌数越来越少,最终可分离得到由一个细菌繁殖而来菌落。,第11页,关键点突破讲练互动,关键点一无菌技术,1.,概念：,无菌技术不但能预防试验室培养物被其它外来微生物污染，保持微生物纯培养，而且在分离、转接时亦能预防其它微生物污染。取得纯净培养物关键是预防外来杂菌入侵，无菌技术围绕着怎样防止杂菌污染展开，主要包含以下几个方面：,第12页,(1),对试验操作空间、操作者衣着和手，进行清洁和消毒。双手用肥皂洗净，擦干后用,75%,酒精消毒。,(2),将用于微生物培养器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。培养基用高压蒸气灭菌，接种环用火焰灼烧来灭菌。,(3),为防止周围环境中微生物污染，试验操作应在酒精灯火焰附近进行。,第13页,(4),试验操作时应防止已经灭菌处理材料用具与周围物品相接触。,2.,常见消毒灭菌方法及其适用范围,方法,适用范围,煮沸消毒法,日常生活中广泛使用,巴氏消毒法,牛奶、啤酒等不宜进行高温消毒液体,化学药剂消毒法,皮肤、伤口、动植物组织表面消毒,空气、手术器械、塑料或玻璃器皿等,第14页,方法,适用范围,紫外线消毒法,接种室空气,灼烧灭菌法,微生物接种工具，如接种环、接种针或其它金属用具等，接种过程中试管口或锥形瓶口等,干热灭菌法,玻璃器皿、金属用具等,高压蒸汽灭菌法,培养基及各种器材、物品,第15页,尤其提醒,无菌技术除了用来预防试验室培养物被其它外来微生物污染外，还能有效防止操作者本身被微生物感染。,第16页,细菌培养过程中分别采取了高压蒸汽灭菌锅、酒精、火焰灼烧等几个不一样处理,这些方法依次用于杀灭哪些部位杂菌,(,),A,接种环、手、培养基,B,高压锅、手、接种环,C,培养基、手、接种环,D,接种环、手、高压锅,例,1,第17页,【,解析,】,此题考查学生对无菌技术掌握。高压蒸汽灭菌锅是灭菌一个设备，通惯用于培养基灭菌。用酒精擦拭双手是消毒一个方法。火焰灼烧能够快速彻底地灭菌，适合用于微生物接种工具，如接种环。,【,答案,】,C,第18页,变式训练,以下操作错误是,(,),A,用酒精擦拭双手,B,用氯气消毒水源,C,试验室用紫外线进行消毒,D,玻璃器皿,(,吸管、培养皿,),用酒精直接擦拭即可到达彻底灭菌目标,第19页,解析：选,D,。玻璃器皿、金属用具等耐高温、需要保持干燥物品，应采取干热灭菌法进行灭菌，而用酒精直接擦拭达不到彻底灭菌目标。,第20页,关键点二探究微生物分离和纯培养,1.,菌落含义及菌种判定,在固体平板培养基上，由单个微生物细胞或孢子繁殖而来一个含有特定形状子细胞群体，称为菌落。其各方面特征，如形状、大小、表面、边缘、隆起、透明度、颜色等均可作为菌种判定依据。,第21页,2.,纯化培养,纯培养过程中假如划线接种形成菌落特征不一致,说明含杂菌，需要深入划线挑菌，直至纯化。,3.,培养不一样微生物，需要不一样,pH,微生物种类,最适,pH,大肠杆菌等细菌,中性,放线菌,偏碱性,酵母菌、霉菌,微酸性,第22页,(1),在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑,_,、,_,和渗透压等条件。因为该细菌含有体积小、结构简单、变异类型轻易选择、,_,、,_,等优点，所以常作为遗传学研究试验材料。,例,2,第23页,(2),在微生物培养操作过程中，为预防杂菌污染，需对培养基和培养皿进行,_(,消毒、灭菌,),；操作者双手需要进行清洗和,_,；静止空气中细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能,_,。,第24页,(3),若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌个数，要想使所得预计值更靠近实际值，除应严格操作、屡次重复外，还应确保待测样品稀释,_,_,。,(4),通常，对取得纯菌种还能够依据菌落形状、大小等菌落特征对细菌进行初步,_,。,第25页,(5),培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采取检测方法是,_,_,_,。,(6),若用大肠杆菌进行试验，使用过培养基及其培养物必须经过,_,处理后才能丢弃，以预防培养物扩散，造成污染。,第26页,【,解析,】,(1),大肠杆菌含有体积小、结构简单、变异类型轻易选择、易培养、生活周期短等优点,培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑温度、酸碱度和渗透压等条件。,第27页,(2),灭菌是用强烈理化原因杀死物体内外全部微生物，所以对培养基和培养皿要进行灭菌；而消毒是用较为温和物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害微生物，所以操作者双手需要进行清洗和消毒；紫外线能使蛋白质变性，还能损伤,DNA,结构。,第28页,(3),稀释涂布平板法是将菌液进行一系列梯度稀释，然后将不一样稀释度菌液分别涂布到琼脂固体培养基表面，进行培养，应确保样品稀释百分比适当。,(4),对取得纯菌种还能够依据菌落形状、大小等菌落特征对细菌进行初步判定。,第29页,(5),培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采取检测方法是将未接种培养基在适宜温度下放置适宜时间，观察培养基上是否有菌落产生。,(6),因为有大肠杆菌会释放一个强烈毒素,并可能造成肠管出现严重症状，使用过培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃，以预防培养物扩散，造成污染。,第30页,【,答案,】,(1),温度酸碱度易培养生活周期短,(2),灭菌消毒损伤,DNA,结构,(3),百分比适当,(4),判定,(,或分类,),(5),将未接种培养基在适宜温度下放置适宜时间，观察培养基上是否有菌落产生,(6),灭菌,第31页,互动探究,大肠杆菌菌落在固体平板培养基上是什么形状？,【,提醒,】,菌落光滑、圆形,易与基质脱离。,第32页,
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