临床微生物标本采集[1]演示稿.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,几个概念,1.标本=样品=从整体里取出来的部分物质,标本不是整体，但要代表整体,2.检验结果准确，严谨地说，是标本内信息表达准确。标本检验结果准确但对病人来说未必准确！,3.标本溯源患者体内信息的不确定性！,王占科，雷万生.中国全科医学,2010,25(2):126-130,护士，医生，卫勤人员等工作已经参与了检验结果全程质量控制行为！感谢您们！,临床微生物标本检验流程,临床标本,留取,环节一,运送,实验室,环节二,分析前,分析中,判断合格？,环节三,接种,18-24h培养,处理分析标本，菌落涂片G染色上机鉴定药敏,门诊病房,不合格,合格,环节四,环节五,分析后,发报告,环节六,SOP,培养基、冰箱,温箱、co2培养箱,直接检测,仪器鉴定菌种+药敏，KB法药敏,主要是痰标本涂片判断是否合格,对每个环节进行控制，构成质量保证体系,1.,为感染的诊断提供依据,2.为抗感染治疗提供参考,3.临床流行病学调查,微生物检验的一个重要功能就是进行细菌耐药监测,，以指导临床合理使用抗生素，并制定合理的用药,方案。,微生物检验的作用,标本的采集和处理原则,标本质量的好坏直接影响实验结果的正误。,标本采集不当可导致假阴性，假阳性结果的出现。,标本的采集，送检，保存等各个环节都要规范操作，严格进行质量控制，是确保实验结果准确可靠的前提。,*,盛标本容器须经灭菌处理。或为一次性无菌塑料盒。,*,送检标本应注明来源和检验目的，以便选用相应的培养基和适宜的培养环境，必要时应注明选用何种抗菌药物。,呼吸道标本,Respiratory Cultures,痰标本,1:咳痰，清水反复漱口去除表面菌后用力咳痰，指导病人从呼吸道深部咳出新鲜痰液于痰盒内送检，只有口水或鼻腔分泌物的，请不要送检。送检到检验科的已接种的不合格痰标本，在看过涂片结合平板培养情况后会在发报告时报告单上会注明：,标本来自上呼吸道,。,此时痰标本需重新指导留过，不合格的痰培养，会耽误治疗的时机。,2：对于少痰，干咳无痰者，可用雾化诱导咳出深部痰液，及时送检。不要超过2h常温送检接种。,注：,对于普通细菌性肺炎，痰标本送检每天1次，连续2 3天。不建议24h内多次采集，除非痰液外观性状出现改变；,如不能及时送检，应将标本暂存于4，但放置时间不可超过2h。运输时勿置于冰块中。,咽拭子,1.,清水漱口后，将棉拭子擦拭到咽后壁，,注意避免触及舌，口腔黏膜和唾液，,留取后放入空的无菌管内，及时送检。,2.对化脓性扁桃体炎或口腔念珠菌病标本提取时，用棉拭子在病灶部位擦拭数次即可。不要超过2h送检接种。不能及时送检请放于4冰箱保存。,目的：,培养和鉴定引起咽炎的病原菌，不能反映下呼吸道感染的情况,发报告时间：阴性正常结果两个工作日，阳性结果需要三四个工作日,痰标本质量,带血痰,唾液or诱导痰(?),脓痰,粘液样痰,显微镜下不合格痰标本,痰标本抗酸染色后镜检,血培养,Blood Culture,一、血培养送检指征,1发热（38）或低温（36）,2,怀疑有菌血症或脓毒症如休克、寒颤,3白细胞10 10,9,/L,4血小板减少,5皮肤粘膜出血,6昏迷,7多器官衰竭,8,严重的局部感染,9,呼吸频率加快等,血培养瓶培养,包括血液，骨髓，胸腹水，穿刺液，关节液，心包液，等标本，在采集时的质量直接关系到血液瓶培养的阳性率和准确性,皮肤消毒：75%酒精擦拭静脉，注意彻底消毒，因许多微生物，尤其葡萄球菌属通常存在皮肤表面或近表层处，易造成污染,培养瓶的消毒：75%酒精消毒培养瓶橡皮塞待60秒,采血时机：在发热或寒战时，尽量在使用抗生素之前，,若临床怀疑为菌血症的应在24h内再连续采集三次血培养标本,采血量：成人5-10ML 婴幼儿：1-2ML,(除血液之外的正常无微生物部位里体液标本请抽2-5ML,例如：骨髓至少不少于0.5ML注入血培养瓶）,血培养瓶培养(续),采集时间：,抗生素使用前,停止用药1-2天后,下次用药前,血药浓度较低时抽取。,标本采集后注入无菌小瓶或无菌试管中送检，也可将抽取液直接注入血培养瓶送检,注：血培养申请单上请抽血护士手写抽血时间，将培养瓶上的小条码贴到申请单上，并在血培养瓶上写上科室，姓名，床号。立即常温送检！,禁止冷藏,发报告时间：阴性正常结果五个工作日，阳性：及时报告危急值,血培养阳性,1.,培养出肠球菌，金黄色葡萄球菌，,革兰阴性球菌，革兰阴性杆菌,等时，多数可以确认为病原菌,2.培养出凝固酶阴性葡萄球菌、草绿色链球菌、芽胞杆菌等时，感染？污染,？,引流液，胆汁,采集：用70%酒精消毒导管，用注射器从引流管无菌采集2-3ml，注入无菌容器。,常温保存2h内及时送检。,标本不能直接从引流袋中放出，因为引流液在袋中的储留时间太长容易生长细菌。造成假阳性结果，,误导临床,。,发报告时间：阴性正常结果三个工作日，阳性结果及时发出。,尿培养标本,Urine Culture,尿标本的采集指征,(1)有典型的尿路感染症状；,(2)肉眼脓尿 标本采集后注入无菌小瓶或无菌试管中送检，也可将抽取液直接注入血培养瓶送检 或血尿；,(3)尿常规检查白细胞或亚硝酸盐阳性；,(4)不明原因的发热，无其他局部症状；,(5)留置导尿管的患者出现发热；,(6)膀胱排空功能受损；,(7)泌尿系统疾病手术前,。,中段尿,在未使用抗生素前采集标本，注意避免消毒剂污染标本，留取清洁中段尿，以晨起第一次中段尿为宜,1、,避免尿道口污染！,先用清水冲洗或消毒湿巾消毒外阴及尿道口周围，再用洁净纸巾等擦干，先排出一部分尿以冲洗尿道口，截留中段尿5ml左右于无菌瓶中。,2、标本留取后及时送检，不能立即送检者，可暂存4冰箱，但不能超过1小时后送检。,3、尿液留置到容器的2/3即可，不要留取太满，瓶盖也不要随便打开，以污染影响检测准确度。,注：,长期插有导尿管的病人，建议拔掉重置，或行耻骨上膀胱穿刺留取标本，切勿在导尿袋中直接留取标本。会造成结果假阳性，错误用药。,留置导尿管中采集或清洗不干净的尿液标本（经常被培养出三种以上细菌，疑污染，微生物室会做好登记退回申请单，需要临床科重新留取标本检查）,发报告时间：阴性正常结果两个工作日，阳性结果及时发出,粪便标本采集的时间,腹泻病人在急性期用药前采集；沙门菌感染、肠热症应在2周内采；,胃肠炎在急性期6h内采集新鲜脓血便。,有腹泻的病人，在送培养标本的同时可以送细菌涂片检查。抗生素相关性腹泻，培养是阴性，但涂片检查却可以看到细菌比例失调，涂片临床意义大于培养。,粪便，直肠拭子，褥疮溃疡,1、排便后，挑取有脓血，黏液部分的粪便2-3克（液状粪便取絮状物1-3ml），盛于无菌盒内盖盖送检，用无菌棉棍取标本时务必注意不要接触到便盆或马桶，以免污染造成误检！,对不易获取粪便者或婴幼儿可用肛拭子采集，常温不超过2h及时送检！如不能及时送检请放置4冰箱保存，因为粪便极易滋生细菌，影响结果检测。,2、直肠拭子：,将无菌拭子用生理盐水湿润后小心插入拭子超过肛门括约肌，轻轻旋转拭子取到标本放入无菌容器。,3、褥疮溃疡分泌物标本获取时，先用无菌盐水清洗表面，再用拭子用力采集损伤底部，放入无菌容器及时送检。,注意事项：,除排便困难外，不推荐使用拭子；,标本不能混入尿液，消毒剂或者化学药物；,腹泻患者建议多次送检以确定致病菌。,发报告时间：阴性正常报告两个工作日，阳性结果及时发出,脓肿伤口分泌物，组织，静脉导管,1、采集前用无菌盐水或70%酒精彻底清创，擦去表面渗出物和污染杂菌。,用无菌注射器穿刺法抽吸深部脓液，或从伤口深处采集渗出分泌物放入无菌容器。,如果采集到的标本量比较少时，可以用无菌拭子蘸zhan少许无菌生理盐水，以保持标本湿度，,2、在送检小样本组织时一般也需要滴加几滴无菌生理盐水保持湿润，用无菌容器送检。,（组织或抽吸物标本送检准确率高于拭子分泌物标本),3、需取深静脉导管培养时，用70%酒精消毒导管周围皮肤，将导管末端约5cm移入无菌管中及时送检。分泌物，组织，静脉导管在常温放置都不要超过1h及时送检.,注意事项：,烧伤创面、脓肿标本不应采集表面或表皮组织；,不提倡采集烧伤或动物咬伤12小时内的伤口，除非存在感染指征；,当创伤出血时，敷用药物,2h,以内不应采集标本，此时获得阳性结果的机会很少。,发报告时间：阴性正常报告三个工作日，阳性结果及时报告。,脓肿伤口分泌物 组织,深静脉导管,深部脓液标本抽取,脑脊液，前列腺液，阴道分泌物,采集脑脊液一般用腰椎穿刺术获得。第一管脑脊液送培养。,采集量一般不低于1ML,置于无菌管内立即送检。,脑脊液培养时医生一般会考虑是否为脑膜炎双球菌感染，脑膜炎双球菌对环境温度敏感，不能放置冰箱，需35下保温送检。但做病毒检查的脑脊液标本时应放置冰块，可在4冰箱保存72小时内送检。,以肥皂水和清水清洗尿道口及附近皮肤，,直肠按压前,列腺获取分泌物以无菌管采集或用无菌拭子送检。,阴道分泌物的采集可用无菌棉拭子自阴道深部或阴道穹后部，宫颈2-3cm处，转动并停留10-30秒取分泌物，淋球菌培养同样需要保温及时送检，,衣原体，支原体等培养无法及时送检时应该放置冰箱4保存。,注意事项：,恶露标本不作为培养标本。,脑膜炎双球菌,新型隐球菌,手工K-B法药敏试验,目前我科微生物室尚需开展的项目,厌氧菌培养（省内各大医院均未开展，因影响因素太多，）,病毒鉴定（需在四级实验室内操作）,结核菌培养(培养时间太长需56天才可发报告）,（分子生物学技术和免疫学是最佳诊断的方法）,微生物培养还应注意的问题,1.培养阳性的分离菌不一定是真的病原菌，特别从有菌部位来的，如痰标本；,2.无菌部位培养出来的病原菌应当连续监测，若病原菌发生改变或治疗效果不佳时应考虑更换抗生素；,3.细菌的耐药性在治疗过程中可能会发生改变，要注意观察是否有耐药性的变迁。,小 结,1、微生物标本在标本采集前、中、后必须保证无菌，否则无法真实客观地反应病人情况。,2、只有保证标本采集的质量，才能为提高微生物及其药敏检测的准确性，为及时、有效的治疗提供实验室依据。,3、标本采集后的保存和运输同样重要，保存不当或运输过程中造成污染，都会导致错误的检验结果。,4、重视分析前的质量管理，确保病人标本的检测质量这是至关重要的一个环节，对于不合格的标本,采用现代化的检测系统也无法获得可靠的结果。保证检验结果的准确性不仅仅是检验科的责任，临床及病人的配合也是至关重要的，检验科的检验质量离不开临床的帮助。,几个常识,1.脓液是白细胞死亡破裂的产物，因白细胞本身有杀细菌作用，因此，脓液未必能培养出细菌。,3.血细菌培养是培养的活细菌，抗生素使用后，血培养往往是阴性。微生物标本中的厌氧菌在空气中会死亡。,4.检验结果不是标本送到检验科时的结果，而是采集时患者的结果。,5.标本明显不合格，没必要送检验科。如明显的口水痰假标本！,6.,无菌体液细菌培养的价值远高于有菌部位标本。如血液，脑脊液都是无菌体液，痰，大便等是有菌分泌物。对于有菌体液培养出的细菌不一定就是致病菌，也可能是条件致病菌或正常菌群！,谢谢大家！,