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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,*,第,14,讲生物技术在食品加工中应用及植物组织培养,第1页,考试要求,1.,果酒及果醋制作。,2.,泡菜腌制和亚硝酸盐测定。,3.,植物组织培养。,第2页,1.,(,浙江,11,月考节选,),回答与酿酒和制醋相关问题：,(1),为了取得优良酿酒红曲霉菌株，将原菌株孢子诱变处理后制成较稀浓度单孢子悬液，这么做目标是在培养时有利于取得,_,。,(2),大米经蒸煮、红曲霉菌糖化后，用某酿酒酵母进行酒精发酵，发酵完成后得到新鲜红曲酒，酒中乙醇浓度不超出,15%,。其主要原因是当发酵液中乙醇浓度靠近,15%,时，,_(A.,乙醇氧化逐步增强直至平衡,B.,葡萄糖分解逐步增强直至平衡,C.,乙醇氧化逐步减弱直至停顿,D.,葡萄糖分解逐步减弱直至停顿,),。,第3页,(3),已知葡萄糖与蒽酮试剂反应能产生颜色。采取光电比色法测定红曲酒中葡萄糖含量步骤以下：,第一步，标准曲线制作。用蒸馏水配制,_,_,，,与蒽酮试剂反应后，用比色计测定，并制作,_,_,标准曲线。,第二步，样品处理。将待测酒样品经过活性炭脱色，其目标是,_,。,第三步，样品测定与计算。,(4),影响红曲酒风味主要原因，除了温度、,pH,、氧气等环境原因外，还有,_,_(,答出,2,点即可,),。,第4页,(5),在红曲醋生产工艺中，将适量红曲酒、水和醋化醋杆菌等混合。再添加一定量谷壳糠等制成涣散发酵料，其主要目标是,_,，以利于醋酸发酵。,解析,(1),在适当稀释度下，可培养得到相互分开菌落，即单菌落。,(2),乙醇浓度靠近,15%,时，抑制了酵母菌存活，可推知葡萄糖分解会逐步减弱直至停顿。,(3),标准曲线制作：用蒸馏水配置不一样浓度葡萄糖标准溶液，与蒽酮试剂反应后，用比色计测定，并制作以葡萄糖浓度为横坐标，以光密度值为纵坐标标准曲线。样品处理：因为要用比色杯测光密度值，所以将待测酒样品经过活性炭脱色，其目标是预防酒样颜色影响比色。,第5页,(4),酿酒过程中，除了温度、,pH,、氧气等环境原因外，还有酿酒原料、菌种活性、糖含量、杂菌污染、次级代谢产物等都会影响酒风味。,(5),酿酒过程中，添加一定量谷壳糠等制成涣散发酵料，可在发酵过程中为醋酸发酵积存氧气，涣散有利于空气流通。,答案,(1),单菌落,(2)D,(3),一系列浓度葡萄糖标准溶液葡萄糖浓度与光密度值关系排除酒原有颜色干扰,(4),不一样菌株、不一样原料,(5),增加通气性,第6页,2.,(,浙江,4,月选考节选,),回答与泡菜腌制和亚硝酸盐测定相关问题：,(1),制作泡菜时，为缩短发酵周期，腌制前可加入乳酸菌。取少许酸奶，用无菌蒸馏水稀释后，再用,_,蘸取少许稀释液，在,MRS,乳酸菌专用培养基平板上划线，以取得乳酸菌单菌落。,(2),泡菜腌制过程中，会产生有机酸、醇类和亚硝酸盐，其中醇类是由,_,进行厌氧呼吸产生。亚硝酸盐对人体有害，为测定泡菜中亚硝酸盐含量，从泡菜中提取亚硝酸盐，与,_,发生重氮化反应，再与,N,1,萘基乙二胺偶联，形成紫红色产物。然后用光程为,1 cm,_,，在,550 nm,光波下测定光密度值，与由一定浓度梯度亚硝酸钠制作,_,比对，计算样品中亚硝酸盐含量。,第7页,(3),已知乳酸菌中亚硝酸还原酶能降解亚硝酸盐。在一定腌制时间内，伴随腌制时间延长，泡菜中亚硝酸盐含量逐步降低，是因为在厌氧和,_,环境下亚硝酸盐被亚硝酸还原酶降解。,第8页,解析,(1),平板上划线工具为接种环。,(2),泡菜腌制过程中醇类是由假丝酵母进行厌氧呼吸产生。测定泡菜中亚硝酸盐含量时，要从泡菜中提取亚硝酸盐，与对氨基苯磺酸发生重氮化反应，再与,N,1,萘基乙二胺偶联，形成紫红色产物，然后用光程为,1 cm,比色杯，在,550 nm,光波下测定光密度值，与由一定浓度梯度亚硝酸钠制作标准曲线比对，从而计算样品中亚硝酸盐含量。,(3),伴随腌制时间延长，泡菜中亚硝酸盐含量逐步降低，是因为在厌氧和酸性环境下亚硝酸盐被亚硝酸还原酶降解。,答案,(1),接种环,(2),假丝酵母对氨基苯磺酸比色杯标准曲线,(3),酸性,第9页,3.,(,浙江,10,月选考,),科研人员拟将已知花色基因,(,目标基因,),转入矮牵牛核基因组中，培育新花色矮牵牛。请回答：,(1),为了取得大量目标基因，将其与含有抗生素抗性基因质粒,DNA,形成重组,DNA,，再与经,_(A.,氯化钙,B.,氯化钠,C.,蔗糖,D.,葡萄糖,),处理大肠杆菌液混合，使重组,DNA,进入大肠杆菌。用,_,玻璃刮刀将稀释后大肠杆菌液,_,接种到含有抗生素固体培养基上，经培养形成,_,，再进行判定和扩大培养。,(2),从扩大培养大肠杆菌中提取含有目标基因,DNA,，用,_,分别切割含目标基因,DNA,和农杆菌,Ti,质粒，然后用,DNA,连接酶连接，形成重组,DNA,并导入农杆菌。,第10页,(3),取田间矮牵牛幼嫩叶片，经自来水冲洗，先用,70%_,浸泡，再用,5%,次氯酸钠浸泡，最终用,_,清洗，作为转基因受体材料。,(4),将消毒后矮牵牛叶片剪成小片，在含有目标基因农杆菌溶液中浸泡后，取出并转移至加有适当配比生长调整剂,MS,培养基,(,含蔗糖、琼脂和抗生素，下同,),上，使小叶先脱分化形成,_,。再将其转移至另一培养基诱导形成芽，芽切割后转移至,_(A.LB,培养基,B.MS,培养基适宜浓度,NAA,C.MS,培养基适宜浓度,BA,D.NAA/BA,小于,1,MS,培养基,),上生根，形成完整植株。,(5),取出试管苗，在适宜光照、温度和,80%,以上,_,等条件下进行炼苗。提取叶片组织,DNA,，采取,PCR,技术,_,目标基因，判定目标基因是否成功导入。,(6),为判断本研究是否到达预期目标，可比较转基因植株和非转基因植株,_,性状。,第11页,解析,(1),将目标基因导入微生物细胞需要利用钙离子处理使受体细胞变成感受态细胞。用灭菌玻璃刮刀将稀释后大肠杆菌液涂布接种到含有抗生素固体培养基上，经培养形成菌落。,(2),基因工程工具酶包含限制性核酸内切酶和,DNA,连接酶。,(3),外植体需依次经自来水冲洗、,70%,酒精浸泡、,5%,次氯酸钠浸泡、无菌水清洗，才能够作为转基因受体材料。,(4),外植体先在,MS,培养基上脱分化形成愈伤组织，然后转移至发芽培养基诱导形成芽，芽切割后转移至生根培养基,(MS,培养基适宜浓度,NAA),上生根，形成完整植株。,(5),炼苗需要在,80%,以上湿度下进行。,PCR,技术能够扩增目标基因。,(6),为判断本研究是否到达预期目标，可比较转基因植株和非转基因植株花色性状。,答案,(1)A,灭菌涂布菌落,(2),限制性核酸内切酶,(3),酒精无菌水,(4),愈伤组织,B,(5),湿度扩增,(6),花色,第12页,1,.,正误判断,(1),酒精发酵反应式为,C,6,H,12,O,6,2CO,2,2C,2,H,5,OH,，果酒整个制作过程需严格控制无氧环境。,(),(2),醋化醋杆菌是好氧菌，醋酸发酵过程中需向发酵瓶中缓缓通入无菌空气，直至发酵液,pH,不再降低。,(),(3),醋杆菌在缺乏糖源时，有氧条件下可将乙醇氧化为醋酸，所以果酒搁置时间过久，会产生酸味。,(),(4),腌制泡菜盐水要煮沸冷却后使用，以有效杀灭水中微生物及除去水中氧气，利于乳酸发酵。,(),第13页,(5),亚硝酸盐可与,N,1,萘基乙二胺偶联，形成紫红色产物，可用光电比色法定量。,(),(6),发芽培养基和生根培养基中添加蔗糖目标是提供营养和调整渗透压。,(),(7),培养一株完整试管苗，必须先进行生根培养，然后进行生芽培养。,(),(8),植物组织培养得到试管苗，必须经过移栽炼苗后方可转移至土中培养。,(),第14页,2,.,读图析图,以下列图,1,、图,2,为酒精发酵、醋酸发酵装置简图。,第15页,(1),图,1,为,_,发酵装置简图。图中在弯曲玻璃管中装水作用有,_,；,发酵瓶中要留约,1/3,空间，目标是,_,_,；,将发酵瓶放在,_,条件下，当,_,，表示发酵完成。,(2),图,2,为,_,发酵装置简图。发酵瓶中装锯末目标类似于,_,技术，将适量醋化醋杆菌培养物加在酒,水混合物中，混匀，并调,pH,至,_,后，倒入图,2,_,瓶；管内塞有棉花惯用,_,，用以,_,；当流入丙瓶流出液,_,，表示发酵完成。,第16页,提醒,(1),酒精预防氧气进入和空气中杂菌污染、逸出发酵过程产生,CO,2,以降低瓶内压力给酵母菌提供氧气以使其快速繁殖、预防瓶中发酵液溢出,25,30,发酵瓶中停顿出现气泡,(2),醋酸酶固定化,7.0,乙脱脂棉过滤空气,pH,不再降低,第17页,考点,1,果酒及果醋制作,1.,(,浙江,“,超级全能生,”,联考,),蓝莓富含花青素等营养成份，含有保护视力、软化血管、增强人体免疫力等功效。如图为蓝莓果酒生产工艺流程简图，据图回答以下问题。,选料,冲洗,粉碎,灭菌,？,发酵,？,果酒,(1),流程中,“,？,”,处内容分别为,_,、,_,。,(2),制作果酒时，温度应该控制在,_,；若温度过高，将影响酒,_,；若发酵瓶密封性不好，可能会在,_(A.,酵母菌厌氧呼吸,B.,乳酸菌,C.,醋化醋杆菌,D.,霉菌,),作用下造成果酒变酸。,第18页,(3),蓝莓果酒制作过程中，接种完成后要先向发酵罐中通入一段时间无菌空气，其目标是,_,_,。,当发酵罐中,_,，表示果酒发酵完成。,答案,(1),接种过滤,(2)25,30,风味,C,(3),在有氧条件下，使酵母菌快速繁殖，增加数量停顿出现气泡,第19页,2.,(,嘉兴一中期末,),葡萄是常见水果，能够用来榨果汁、制果酒和果醋，下列图是制作果酒果醋简易装置。请回答：,第20页,(1),用该装置进行葡萄酒酿制过程中，开关,1,和,2,开闭情况为,_,。,(2),研究发觉很多原因会影响葡萄酒品质，为提升葡萄酒澄清度，能够添加,_,处理葡萄汁。普通情况下可给葡萄汁添加,_,以提升酒精度。,(3),在葡萄酒发酵过程中，不一样品种酵母菌发酵产生葡萄酒酒精度不一样，若要从野生酵母中筛选出酒精转化率高、对酒精耐受能力强酿酒酵母，可用,_,。,(4),用葡萄酒制作果醋过程中将醋化醋杆菌与酒水混合物混匀，并,_,后加入发酵瓶中，发酵过程中要不停从开关,1,通入,_,，在这个过程中也能够用,_,替换醋化醋杆菌。,第21页,解析,酵母菌进行厌氧呼吸生成酒精和,CO,2,，葡萄酒酿制过程中应一直关闭开关,1,，以确保厌氧环境；同时定时打开开关,2,，以释放,CO,2,。醋化醋杆菌进行需氧呼吸生成醋酸，发酵过程中要不停从开关,1,通入无菌空气，以确保有氧环境。,答案,(1),一直关闭开关,1,，定时打开开关,2,(2),果胶酶蔗糖,(3),含高浓度酒精培养基进行筛选,(4),调整,pH,无菌空气醋曲,第22页,(1),酵母菌是兼性厌氧型生物，在制作果酒发酵早期，酵母菌利用发酵瓶内留存氧气进行需氧呼吸以实现快速繁殖；瓶内氧气耗尽后，酵母菌进行厌氧呼吸产生酒精。整个发酵过程，酵母菌一直产生,CO,2,，所以需要不停释放,CO,2,。,(2),醋化醋杆菌是需氧菌，只进行需氧呼吸，即使短时间缺氧也会造成其死亡，所以整个发酵过程需要不停通入无菌空气。,(3),发酵菌种、发酵原材料、发酵条件,(,温度、,pH,、氧气、杂菌等,),均会影响发酵产品产量和质量。,第23页,考点,2,围绕泡菜腌制和亚硝酸盐测定考查社会责任,3.,(,杭州质检,),不一样浓度还原型谷胱甘肽,(GSH),处理对甘蓝泡菜中硝酸还原酶,(NR),活性和亚硝酸盐含量影响如图所表示。,第24页,请回答：,(1),甘蓝泡菜腌制和样品处理：腌制甘蓝泡菜时，所用盐水需煮沸，其目标是,_,。甘蓝样品处理过程中，加硫酸锌产生沉淀后，水浴加热目标是,_,。然后冷却至室温，用滤纸过滤，用水淋洗,2,3,次，将,_,在容量瓶中定容。,(2),测定亚硝酸盐含量：取,10 mL,样品溶液，进行显色处理。用光程为,1 cm,_,在,550nm,处测定光密度值。,(3),甘蓝泡菜发酵过程中,NR,活性和亚硝酸盐含量均呈,_,趋势。添加不一样浓度,GSH,处理均可,_NR,活性和亚硝酸盐含量峰值。当添加,GSH,质量分数较低时，,NR,活性和亚硝酸盐含量伴随,GSH,浓度增大而,_,。,第25页,答案,(1),杀灭杂菌并去除氧气深入让蛋白质沉淀滤液和洗涤液,(2),比色杯,(3),先上升后下降抑制降低,第26页,(1),泡菜腌制过程中起作用主要是假丝酵母和乳酸菌，二者均是厌氧菌，所以泡菜腌制过程中要严格控制无氧环境。如盐水煮沸、坛口水封等。,(2),泡菜腌制过程亚硝酸盐含量改变及原因,腌制早期，乳酸菌含量极少，坛内有氧环境有利于一些杂菌如硝酸盐还原菌繁殖，这些细菌能够促进硝酸盐还原为亚硝酸盐。但伴随腌制时间增加，氧气消耗，发酵液酸性增强，乳酸菌大量繁殖，亚硝酸盐被乳酸菌中亚硝酸还原酶降解，含量又有所下降。,第27页,考点,3,植物组织培养,4.,某同学欲用组织培养方法快速繁殖百合，其流程以下：,请回答以下问题：,(1),配好培养基需经,_,灭菌后才能使用。用,_,对自然生长百合鳞茎进行消毒，然后在超净台中用,_,冲洗，切段后进行接种。,第28页,(2),诱导丛状苗时，培养基中应添加植物激素及配比是,_(A.,生长素用量高于细胞分裂素用量,B.,生长素用量低于细胞分裂素用量,C.,生长素用量低于赤霉素用量,D.,生长素用量高于赤霉素用量,),。,(3),将生根后百合直接定植于土壤中，死亡率很高。改进办法是将其移至蛭石中，用塑料布罩,2,3,天后，逐步加大塑料布开口，使其生长环境中,_,逐步降低，这一过程即为图中,_,。,第29页,解析,(1),培养基需要经过高压蒸汽灭菌法灭菌。自然生长外植体须在,70%,乙醇中浸泡,10 min,，再在,5%,次氯酸钠溶液中浸泡,5 min,，再用另一,5%,次氯酸钠溶液浸泡,5 min,，最终用无菌水清洗再接种。,(2),诱导丛状苗应选取发芽培养基，细胞分裂素用量要高于生长素用量。,(3),组织培养得到试管苗需要经过锻炼来适应外界湿度改变。待生根后，将苗移至草炭土或蛭石中，用玻璃罩或塑料布保持,80%,以上湿度，,2,3,天后逐步降低湿度进行锻炼，直处处于自然湿度下为止。,答案,(1),高压蒸汽,70%,乙醇和,5%,次氯酸钠溶液无菌水,(2)B,(3),湿度锻炼,第30页,影响植物组织培养原因,(1),培养材料：不一样植物组织，培养难易程度差异很大，轻易进行无性繁殖植物也轻易进行组织培养。同一个植物材料年纪、保留时间长短等对培养也有影响，幼龄、保留时间短植物材料轻易培养成功。,(2),无菌条件：培养基上有细菌等微生物存在时，它们比植物细胞生长、繁殖得更加快，而且它们会产生毒素，使培养植物细胞中毒，所以在培养过程中要求进行一系列消毒、灭菌，要求无菌操作。,(3),生长素和细胞分裂素浓度和配比：生根培养基中含生长素，利于生根；发芽培养基中含生长素和细胞分裂素，但细胞分裂素较生长素多，利于发芽。,第31页,
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