第8章-球菌.ppt

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,第八章 球菌,(coccus),种类多，分布广，少数为病原性球菌。,化脓性球菌,常见种类：葡萄球菌、链球菌,肺炎链球菌、肠球菌,脑膜炎奈瑟菌,淋病奈瑟菌,葡萄球菌,链球菌,肺炎链球菌,脑膜炎,奈瑟菌,淋病,奈瑟菌,G+,G+,G+,G-,G-,化脓性感染,食物中毒,烫伤综合征,毒性休克综合征,化脓性感染,猩红热,风湿热,亚急性细菌性心内膜炎,大叶性肺炎,中耳炎,流行性脑,脊髓膜炎,淋病,第一节 葡萄球菌属,葡萄球菌属,(Staphylococcus),是最常见的化脓性球菌，分布广、,大多为腐物寄生菌及属于正常菌群的表皮葡萄球菌，,致病的主要是金黄色葡萄球菌。,coccus,一、金黄色葡萄球菌,（,一）生物学性状,1,形态：约,1m,，葡萄串状排列的,G,+,球菌。（阴性、,L,型）,coccus,金黄色葡萄球菌(伤口感染的脓液直接涂片),coccus,coccus,腐生葡萄球菌在血平板上的菌落特征,（白色或柠檬色，不溶血）,coccus,白色葡萄球菌（色素）,coccus,3,生化反应,致病性菌株分解甘露醇，产酸；,触酶（过氧化氢酶）阳性（链阴性）。,coccus,4,重要的抗原结构,（,1,）葡萄球菌,A,蛋白,(SPA),菌体表面蛋白，与人,IgG1,、,IgG2,、,IgG4,的,Fc,段非特异结合，而,Fab,仍能与特异抗原结合。利用此原理建立了协同凝集试验，广泛用于微生物抗原检测。,在体内这种,SPA,与,IgG,复合物还有抗吞噬作用,(,封闭了,IgG,的,Fc,段）及促细胞分裂等活性,。,coccus,协同凝集试验的临床应用：,将特异性抗体结合在,富含,SPA,的金葡菌表面,作为,诊断试剂,用于,流脑、菌痢,等的诊断。,coccus,coccus,（,2,）荚膜多糖：群特异性,促进细菌对细胞及医用导管、生物瓣膜等,的粘附，形成生物被膜,(biofilm),是,引起医院感,染的重要因素。,金黄色葡萄球菌,A,群多糖抗原（核糖醇）,表皮葡萄球菌,B,群多糖抗原（甘油残基）,coccus,5,分类,按色素、生化反应等表型分类：,金黄色、表皮和腐生葡萄球菌三个种；,coccus,金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌 腐生葡萄球菌,菌落色素 金黄色 白色 白色或柠檬色,血浆凝固酶,+,溶血素,+,耐热核酸酶,+,SPA,+,分解甘露醇,+,噬菌体分型 多数能,不能 不能,致病力,强,弱,无,（,2,）按有无,凝固酶,分两类：凝固酶阳性的葡萄,球菌可被相应噬菌体裂解，而分,4,群,23,型。,在流行病学调查方面等有重要意义。,（,3,）按核酸的遗传性分型,coccus,6,抵抗力较强,耐热、耐干燥、耐盐；,对龙胆紫、多种抗生素敏感，但易产生耐药性，,尤其是,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（,MRSA,），,已成为,医院感染最常见的致病菌。,coccus,（二）致病性,1,致病物质,（,1,）,凝固酶,（,coagulase),：能使人或兔血浆发生凝固，是致病性的重要标志。,游离凝固酶,：被血浆中凝血酶反应因子（协同因子）激活，形成凝血酶样物质。,试管法检测（血浆凝固）,coccus,结合凝固酶,（纤维蛋白原受体），,玻片法检测（细菌凝聚）。,coccus,两种凝固酶呈相平行关系。,保护细菌，抵抗吞噬和杀菌物质的作用；,感染局限化和血栓形成。,其他酶类,纤维蛋白溶酶（葡激酶）,血浆纤维蛋白溶解，利于细菌扩散；,耐热核酸酶：临床上作为测定葡萄球菌有无致病性的重要指标。,透明质酸酶,脂酶,coccus,（,2,）葡萄球菌溶素（,staphylolysin),有、,、,、,四种。,溶素,外毒素、抗原性强,破坏细胞膜的完整性,。,（,3,）杀白细胞素,(leukocidin),破坏中性粒细胞和巨噬细胞,，,最终导致细胞死亡。,死亡的细胞形成脓栓，加重坏死。,coccus,（,4,）肠毒素,(enterotoxin),有,9,个血清型，是一组,热稳定,的蛋白质。,抵抗蛋白酶的水解作用。,食入后引起以呕吐为主的食物中毒。,是一种超抗原,也与生物武器有关，,气雾剂的方式，吸入后,使各器官功能受损及休克，持续,2,周左右，,足以使队伍丧失战斗能力,。,c,occus,（,5,）表皮剥脱毒素（,exfoliatin),金葡菌,质粒编码,的蛋白质，两个生物型。,具有丝氨酸蛋白酶功能，使皮肤发生弥漫性,红斑和水疱、表皮脱落（烫伤样皮肤综合征）。,（,6,）毒性休克综合征毒素,-1,（,toxic shock syndrome toxin-1,TSST-1,）：,TSST-1,引起,毒性休克综合征,：,发热、皮疹、休克。,发生多器官功能紊乱,c,occus,2,所致疾病：,侵袭性疾病,和,毒素性疾病,（,1,）侵袭性疾病：,导致多部位化脓感染。,局部感染：疖、痈、毛囊炎、麦粒肿、,伤口化脓等；,各器官感染：气管炎、脓胸、心包炎；,全身感染：败血症、脓毒血症。,c,occus,coccus,coccus,（,2,）毒素性疾病：,由外毒素引起,食物中毒：产毒株污染食物，繁殖产毒，,食后,1,6h,发生急性胃肠炎，,1,2d,可恢复。,烫伤样皮肤综合征：由产生表皮剥脱毒素,菌株引起的感染。,毒性休克综合征：主要由,TSST-1,引起，,高热，低血压，皮疹、,严重时出现休克。,c,occus,（三）免疫性,天然免疫起重要作用。,感染后建立的特异性免疫力不强，,不足以预防再次感染。,c,occus,（四）微生物检查法,标本,脓汁、血液,分离培养,凝固酶,甘露醇,直接涂片镜检,革兰阳性葡萄串状排列,生长现象,脂溶性色素,生化反应,溶血现象,耐热核酸酶,coccus,2,分离培养与鉴定,标本接种血平板（血标本需先经增菌），,37,24h,培养，观察菌落特征。,致病性鉴定：,金黄色色素（,+,）,透明溶血环（,+,）,凝固酶 （,+,）,耐热核酸酶（,+,）,甘露醇分解（,+,）,3.,药敏试验：必须做,Coccus,4,、肠毒素检测,标本：呕吐物，粪便、剩余食物等。,方法：,ELISA,方法,：查,Ag,，敏感、快速。,分子生物学技术：,16S rRNA,核糖体分型、,PCR,分析细菌质粒和产毒菌株,DNA,。,coccus,（五）防治原则,1,、一般性预防：,2,、治疗,-,抗生素,（必须做药敏）,3,、自身菌苗或,类毒素治疗疗法,Coccus,防治原则,防,注意,消毒隔离,防止,医源性感染,防止,耐药性产生,治,抗菌素,药敏试验,耐药性转移,Coccus,二、凝固酶阴性葡萄球菌,（,coagulase-,negative staphylococci,CN,S）,过去认为只有金葡菌才具有致病性，而,CNS,是,人类无害的共栖菌，但近年来临床和实验室检测,结果证实：,CNS,已成为,hospital infection,常见病,原菌。而且耐药菌株比金葡菌更多见。,种类：,表皮、腐生,、溶血、人葡萄球等,30,余种。,Coccus,致病性,条件致病：,以表皮葡萄球菌常见，抵抗力低下,或进入非正常寄居部位时引起感染。,常见的有：,1,、泌尿系感染,青年女性急性膀胱炎的主要病菌。,2,、细菌性心内膜炎,安装人工心脏瓣膜者。,3.,败血症,特别是新生儿。,仅次于大肠埃希菌和金葡菌,Coccus,4,、术后及植入医用器械引起的感染,股骨头、心脏起搏器安装所致的感染多数是由,CNS,引起。,已成为主要医学问题。,CNS,产生的粘质物，,牢固附着于植入性医用器械，并保护细菌免受抗生素和免疫因素的作用。,Coccus,据美国,CDC,统计，,CNS,在各类感染中,比例（,10.02%,）仅次于大肠埃希菌,(19.2%),居第二位。,致病机制,-,细胞壁外的粘质物,粘附定植,Coccus,微生物学检查,表皮,和腐生葡萄球菌,是最常见的两种,CNS,，,它们与金葡菌的鉴别及它们两者的鉴别应从色素、凝固酶产生、甘露醇发酵等方面。,Coccus,第二节 链球菌属,（,Streptococcus,),广泛分布于自然界、人及动物粪便和健康人鼻咽部，少数致病,（对人致病的主要是,A,群链球菌,和,肺炎链球菌,）。,链球菌分类（常用以下三种方法）,1,、按溶血现象分：,甲型溶血性链球菌，草绿溶血环、条件致病。,乙型溶血性链球菌，透明溶血环，致病性强。,引起人和动物多种疾病。,丙型链球菌，,（,-,），（,-,）。,-,溶血,-,溶血,不,溶血,甲型溶血性链球菌,乙型溶血性链球菌,丙型链球菌,2,、按抗原结构分类,按细胞壁中多糖抗原不同分群：,A,、,B,、,C,、,20,个群。,表面蛋白抗原（,M,）分型：,A,群,100,个型,B,群,4,型,C,群,13,型,抗原分类,分,20,个群，,（,A,群,）,(,溶血性链球菌或化脓性链球菌）,根据蛋白抗原（,M,）,进一步分型,荚膜,细胞壁,蛋白质,多糖,肽聚糖,细胞膜,细胞质,3.,按生化反应分类,链球菌不分解菊糖，不被胆汁溶解,如：根据对氧的需要分三类，,其中的厌氧菌一般为口腔、消化道、,泌尿生殖道部位的正常菌群。特定条,件下才致病。,一、,A,群链球菌,(group A streptococcus),是链球菌中致病力最强的细菌。,占链球菌感染的,90%,。,（一）生物学性状,1.,形态染色：为链状排列的球形或卵圆形，,G,+,，幼龄菌有荚膜,肉汤培养基中的镜下形态,（革兰染色）,2.,培养特征,营养要求较高，菌落小（,0.5,0.75mm,），灰白、光滑型，有宽而透明溶血环。,3.,生化反应,不分解菊糖、不被胆汁溶解特性用于鉴别甲链和肺炎链球菌。,肺炎链球菌胆汁溶解试验阳性,（澄清、透明）,链球菌胆汁溶解试验阴性,（混浊）,4.,抗原构造复杂,荚膜,蛋白质,多糖,肽聚糖,细胞膜,细胞质,菌毛样结构,脂磷壁酸,F,蛋白,细胞壁,多 糖：,（,C,抗原）,蛋白质：,（,M,、,T,、,R,、,S,抗原）,（二）致病性,1,、致病物质,（,1,）胞壁成分,1,）粘附素：,LTA,与,M,蛋白,共同组成菌毛样,结构，粘附组织细胞；,F,蛋白,能与上皮细胞,表面纤维粘连蛋白结合。,利于定植和繁殖,。,2,）,M,蛋白：,主要毒力因子，,抗吞噬作用,与某些超敏反应疾病发生有关。,3,）肽聚糖：具有致热、溶解血小板,等作用。,（,2,）外毒素类,1,）致热外毒素,（,pyrogenic exotoxin),又称红疹毒素或猩红热毒素。,有,A,、,B,、,C,三个血清型,抗原性强，有超抗原作用,可直接作用于下丘脑引起发热反应,2,）链球菌溶素,（,streptolysin),溶解红细胞，破坏白细胞和血小板。,SLO,：对,O,2,敏感,SH-SS-,失活；,对中性粒细胞、心肌有毒性；,抗原性强,SLS,：对,O,2,稳定（菌落周围溶血环）；,对白细胞,(,损伤溶酶体）和,对多种组织细胞有破坏作用；,无抗原性。,（,3,）侵袭性酶类：均为扩散因子,透明质酸酶,链激酶,（,streptokinase;SK,）：亦称溶,纤维蛋白酶，溶解血块或阻止血浆凝固，有,利,于病菌扩散。,（,r-sk,治疗急性心梗）,链道酶,（,streptodornase;SD,）,亦称,DNA,酶，降解脓液中高粘性的,DNA,，,脓液稀化，病菌扩散。,（,SK,、,SD,酶制剂可提高抗菌药物疗效）,2,所致疾病,A,群可经多途径感染，致三类疾病：,化脓性感染,：淋巴管炎,淋巴结炎，蜂窝织炎、坏死性筋膜炎（广泛性肌肉和脂肪坏死）、产褥热、扁桃体炎，咽峡炎，鼻窦炎等。,下肢蜂窝织炎,自,80,年代以来，欧美及亚洲一些国家相继报道由,A,群链球菌变异株感染引起的重症猩红热、急性风湿热、菌血症、肌炎、坏死性筋膜炎（,NF,）等病例明显增加，尤其是由于,A,群链球菌变异株能迅速破坏组织，,引起,NF,和肌炎而被称为“食肉菌”。,其中一部分病人往往伴有中毒性休克症状，被称为链球菌中毒素休克综合征，本病病情严重，病死率很高。,A,群链球菌变异株引起的坏死性筋膜炎,（,NF,）,和肌炎,中毒性疾病：,猩红热（发热、咽峡炎、,全身弥漫性皮疹）、,链球菌毒素休克综合征。,超敏反应性疾病,急性肾小球肾炎（,M12,、,M4,、,M2,、,M49,型）；,风湿热（,M18,、,M3,、,M5,）。,（三）免疫性,A,群感染后，不同型的,M,蛋白均可诱导产生免,疫干扰素，可大大增强吞噬细胞活性。,猩红热病后,可建立牢固的同型抗毒素免疫。,由于,A,群型别多，故可反复感染。,（四）微生物学检查法,1.,标本：脓汁、鼻咽拭子、血液等。,2,直接涂片镜检：根据菌体特征作初步诊断。,3,分离培养与鉴定,注意观察菌落特征,透明溶血应与金葡菌鉴别：触酶试验（,-,）；,草绿色溶血应与肺炎链球菌鉴别：,胆汁溶菌试验（,-,）,4.,氨基肽酶检测（,PYR,试验）,A,群（化脓性链球菌）阳性,咽峡炎链球菌阴性,5.,血清学试验：抗链球菌溶素,O,试验,（,antistreptolysin O test,，,ASO tast,):,抗,O,试验,测患者血清中抗,O,抗体,250,单位左右：辅助诊断风湿热。,400,单位：活动性风湿热。,（五）防治原则,一般预防,1,、对急性咽峡炎和扁桃腺炎患者，应彻底治疗,以防止肾小球肾炎、亚急性细菌性心内膜炎等的,发生,;,2,、建立无菌观念，进行无菌操作等。,治疗：青霉素,G,作为首选药物。,肺炎链球菌电镜图,二、肺炎链球菌,肺炎链球菌,三、其他,1,、,B,群链,2,、,D,群链,3,、甲型溶血链球菌，对人致病的,主要有：,变异链球菌,-,与,龋齿的,发生关系密切。,可引起,亚急性细菌性心内膜炎,脑膜炎奈瑟菌,N.meningitidis,是,流行性脑脊髓膜炎,(,流脑）的病原体。,（一）生物学性状,1,、,形态与染色,肾形、成双排列、凹面相对、,G-,。,新分离出的菌株有荚膜和菌毛。,2,、培养：专性需氧,要求高，巧克力色培养基,透明、露滴状菌落，不溶血,有自溶现象,脑膜炎奈瑟菌电镜图,3,、抵抗力很弱,体外难存活,室温,3h,死亡,怕冷怕干燥，送检标本保温、保湿、迅速、易自溶。,（二）致病性与免疫性,1,、致病物质,菌毛,(,粘附,),荚膜多糖,(,抗吞噬,，群特异性抗原,),内毒素（,endotoxin,）,荚膜多糖的性质,抗吞噬,是抗原，引起体液免疫,在脑膜炎病人的脊髓液中可检测,作为抗原制作成疫苗,2、,所致疾病,传播方式,飞沫,（airborne droplets,）,传染源,病人或带菌者,（carrier,）,普通型 占,90,左右,临床表现 暴发性 少见,慢性败血症型 少见,脑膜刺激症,头痛,呕吐,颈项强直,3、免疫性,儿童,(6,个月,-2,岁半,),，发病率高,体液免疫为主,（三）微生物学检查,标本,分离培养与鉴定,脑脊液、血液、出血点渗出液、鼻咽拭子,保暖、保湿、立即送检，培养基预温,直接涂片镜检,中性粒细胞内、外有革兰阴性双球菌，可作出初步诊断。,巧克力（色）培养基,快速诊断,对流免疫电泳，,SPA,协同凝集试验,脑脊液、瘀血点,血液,分离培养,（卵黄双抗平板）,增菌培养,直接涂片染色,分离培养,（,巧克力色平板）,可疑菌落、盐水自凝,无自凝,报告阴性,涂片染色,生化反应,自凝、色素,初步报告,鼻咽拭子,生长特性,血清学分群,（四）防治原则,荚膜多糖疫苗，保护率,90%,以上。,淋病奈瑟菌,俗称,淋球菌,，引起的淋病，属于,性传播疾病，我国发病率最高。,生物学性状,G,双球菌，呈咖啡豆样，有,荚膜,和,菌毛,；,要求高，巧克力培养基；,急性期患者标本中，多见于中性粒细胞内；,抵抗力极差。,淋球菌革兰染色,菌毛,外膜蛋白,IgA1,蛋白酶,致病物质,传播方式,性接触（直接）,间接接触：通过毛巾、被褥等,垂直传播,淋病,人类是淋病奈瑟菌的,唯一宿主。,主要通过性接触引起泌尿道和生殖系统炎症,新生儿,淋菌性结膜炎,新生儿由产道感染,所致疾病,分泌物,直接涂片染色,分离培养,可疑菌落,涂片染色,生化反应,初步报告,生长特性,防治原则,防,开展防治性病的健康教育,建立无菌观念,治,抗生素,新生儿,1%,硝酸银滴眼,复习思考题,1,名词解释：,SLO,凝固酶,抗“,O,”试验,2,简答题：,(1)SPA,的主要特性及医学意义。,(2),简述脑膜炎奈瑟菌的形态染色特征。,(3),淋病奈瑟菌的防治原则。,(4),简述肺炎链球菌的形态染色特征及致病性。,3.,论述题：,(1),试述葡萄球菌的致病物质及所致疾病。,(2),试述,A,群链球菌的致病物质及所致疾病。,