二十味肉豆蔻丸对5xFAD小鼠学习记忆和焦虑抑郁样行为的影响.pdf

中国药理学与毒理学杂志2023年9月第37卷增刊1Chin J Pharmacol Toxicol，Vol 37，Suppl 1,Sep 2023特点，近年来已有研究表明中药复方（七福饮、通窍活血汤等）及单味药（远志、肉苁蓉、人参、石菖蒲等）防治AD有明显功效。然而，其主要活性成分尚不明确。科学合理的活性成分辨识对于保证中药安全有效及药物研发有重大意义。配体垂钓是基于药物靶点与活性配体之间的亲和作用，从复杂样品体系中“垂钓”活性配体的筛选技术，较传统筛选方法具有特异性强、效率高等优势。此外，配体垂钓-液质联用技术可以实现活性成分快速筛选及结构鉴定。目前与AD相关的潜在药物靶点主要有NMDA受体、5-羟色胺受体、乙酰胆碱酶、-1肾上腺素受体等，结合配体垂钓技术（磁性纳米粒子技术、细胞膜色谱技术、基于表面等离子共振的生物分子相互作用技术、固定化酶反应器等）可为防治AD中药活性成分辨识及临床药物开发提供新的突破口。关键词：阿尔茨海默病；配体垂钓；中药活性成分作者简介：陈凌霄，博士，主要从事中药活性物质基础及作用机制研究，E-mail：通讯作者：程肖蕊，E-mail：Z2-1-2当归芍药散促进痴呆动物脑膜淋巴管A引流作用的机制研究高铭凰，陈君媚，赖瑶娜，王 奇（广 州 中 医 药 大 学 科 技 创 新 中 心，广 东 广 州510405）摘要：目的 研究当归芍药散（DSS）促进痴呆动物脑膜淋巴管A引流的作用及其分子机制。方法基于A1-42脑定位注射构建双侧颈淋巴结摘除、脑膜淋巴管光动力学消融诱导脑淋巴管损伤的痴呆动物模型，通过行为学评价DSS对痴呆动物模型的学习记忆能力；采用免疫荧光和Western印迹等技术检测DSS对淋巴管引流A功能及神经炎症的调控作用。结果 与A1-42模型相比，进一步摘除颈深淋巴结或进行脑膜淋巴管光动力学消融手术后，脑池伊文思蓝注射显示脑淋巴液引流障碍，脑膜Lyve-1荧光染色表达减少；小鼠脑膜及脑实质中A1-42表达增高。转录组学GO功能富集分析结果表示，海马区血管循环系统受到了广泛影响。海马和皮质区小胶质细胞Iba-1、CD11C表达增加，促炎因子IL-18、IL-6、TNF-增多，抑炎因子YM-1表达下降。DSS给药后，痴呆动物模型Morris水迷宫逃避潜伏期缩短、平台穿越次数增加，新物体识别指数增高；脑池伊文思蓝注射显示脑淋巴液引流改善，脑膜Lyve-1荧光染色表达增加；脑膜与脑实质中 A1-42表达下降，PDPN、VEGF-C表达增加；小胶质激活与促炎因子释放减少。结论 DSS通过改善脑膜淋巴管功能，促进痴呆模型小鼠A引流，其机制与调节大脑淋巴与类淋巴系统引流功能，改善神经炎症有关。关键词：当归芍药散；痴呆；脑膜淋巴管；神经炎症；A引流基金项目：国家自然科学基金（82274616）通讯作者：王 奇，E-mail：Z2-1-3中药多糖治疗阿尔茨海默病的机制研究进展韩欣园1，叶田园2（1.山 东 中 医 药 大 学 中 医 学 院，山 东 济 南250355；2.山东中医药大学中医药创新研究院，山东 济南 250355）摘要：阿尔茨海默病是当前老龄社会所面临的重大健康挑战，临床只能应用相关药物缓解症状，无法根治。中药多糖在改善阿尔茨海默病方面具有一定潜力。在阿尔茨海默病的防治中，多糖发挥作用的途径可能有：抗氧化应激：激活 Keap1/Nrf2 通路及 Wnt/连环蛋白通路来降低促氧化酶体的表达；抑制细胞凋亡：抑制 NF-B和 p38MAPK活化并激活 PI3K/Akt通路、下调 Bax/Bcl-2比值；抗神经毒性：上调Nrf2/HO-1信号通路和Nrf2-ARE 通路，抗 A毒性；抗炎症反应：抑制NLRP3的活化从而抑制NLRP3/ASC/胱天蛋白酶1炎症级联途径的形成等；抑制线粒体功能障碍：调节GSK-3通路阻断Ca2+内流，抑制mPTP的开放，升高线粒体中细胞色素含量，抑制胞质细胞色素 c 的释放；激活细胞自噬：通过 PI3K/AKT/mTOR 途径激活自噬并改善自噬体的形成，促进LC3-向LC3-的转化等；抗Tau蛋白磷酸化：上调AKT和mTOR的磷酸化，并激活PTEN/AKT/mTOR通路发挥作用等。因此，中药多糖在AD治疗中具有良好的应用前景。关键词：多糖；阿尔茨海默病；作用机制基金项目：国家自然科学基金（82205078）；山东省自然科学基金（ZR2021QH157）作者简介：韩欣园，E-mail：通讯作者：叶田园，E-mail：Z2-1-4二十味肉豆蔻丸对5xFAD小鼠学习记忆和焦虑抑郁样行为的影响 60中国药理学与毒理学杂志2023年9月第37卷增刊1Chin J Pharmacol Toxicol，Vol 37，Suppl 1，Sep 2023侯路娥，赵宏伟，程肖蕊（山东中医药大学中医药创新研究院，山东 济南250355）摘要：目的 探讨经典藏药二十味肉豆蔻丸对阿尔茨海默病（AD）动物模型 5FAD 小鼠学习记忆、焦虑抑郁及衰老的影响。方法 灌胃给予5xFAD 小鼠二十味肉豆蔻丸，采用 Y 迷宫、新物体识别、高架十字迷宫、抓力、悬尾、糖水偏爱实验和老化度评分检测小鼠的学习记忆能力、焦虑抑郁样行为和衰老状态。结果 在Y迷宫实验中，与野生型相比，5FAD 小鼠新臂进入次数减少，二十味肉豆蔻丸可延长其新臂持续时间和增加新臂持续时间百分比。在新物体识别实验中，与野生型相比，5FAD 小鼠短期和长期新物体偏爱指数下降，给予二十味肉豆蔻丸均能使其上升。二十味肉豆蔻丸可延长高架十字迷宫实验中 5FAD 小鼠的开臂停留时间与悬尾实验中的悬尾不动时间，增加糖水摄取实验中 5FAD 小鼠的蔗糖摄入量，增强其前肢抓力、降低老化度评分。结论 二十味肉豆蔻丸具有改善 5FAD 小鼠学习记忆和抗焦虑抑郁的能力，也可减轻 5FAD 小鼠衰老状态。关键词：二十味肉豆蔻丸；学习记忆；焦虑；抑郁；老化基 金 项 目：中 央 引 导 地 方 科 技 发 展 专 项 基 金（YDZX2021083）；西 藏 自 治 区 科 技 计 划 项 目（XZ202201ZY0026G）作者简介：侯路娥，E-mail：通讯作者：程肖蕊，E-mail：Z2-1-5APP和CSF信号驱动5FAD小鼠偏离衰老轨迹致阿尔茨海默病发生李 鹤，叶田园，程肖蕊（山东中医药大学中医药创新研究院，山东 济南250355）摘要：目的 探究正常衰老转向阿尔茨海默病（AD）发生的机制。方法 基于 10X 单细胞测序技术，分别对2、12、24月龄5FAD及其野生型小鼠海马进行测序，采用 Cellchat分析细胞间信号串扰。结果 在小鼠海马中共鉴定出 10 种细胞类型，与WT相比，小胶质细胞在5FAD小鼠偏离衰老轨迹发展成AD的过程中变化最显著。WT小鼠海马中小胶质细胞的淀粉样前体蛋白（APP）和集落刺激因子（CSF）信号强度随增龄无变化，而在5FAD小鼠中，APP信号强度在12和24月龄时均大于2月龄，CSF信号强度在2月龄时最弱、12月龄时最强、24月龄时稍减弱。与同月龄WT小鼠相比，5FAD小鼠中小胶质细胞APP信号的接收强度增强；CSF在2月龄时接收信号减弱，而在12和24月龄增强。结论 APP和CSF信号驱动5FAD小鼠偏离衰老轨迹转向AD的发生。关键词：阿尔茨海默病；衰老；免疫基金项目：国家自然科学基金（82205078）；山东省自然科学基金（ZR2021QH157）作者简介：李 鹤，E-mail：通讯作者：程肖蕊，E-mail：Z2-1-6七福饮中人参和制远志防治阿尔茨海默病的活性成分发现李珩玉，赵宏伟，王加锋，程肖蕊（山东中医药大学中医药创新研究院，山东 济南250355）摘要：目的 寻找七福饮中人参、制远志药对防治阿尔茨海默病（AD）的活性成分。方法 使用UPLC-Q-TOF-MS对灌胃七福饮后归属于人参、制远志的入血、入脑成分进行鉴定，网络药理学分析其防治AD的可能活性成分。结果 从七福饮给药血浆中鉴定出了归属于人参和制远志的22个入血原型成分和7个代谢产物。给药脑脊液中归属于人参入脑成分3个 20（S）-人参皂苷Rh1、20（R）-人参皂苷 Rh1和姜状三七苷 R1，制远志入脑成分 2 个（3，6-二芥子酰基蔗糖和细叶远志皂苷）。预测出3，4，5-三甲氧基肉桂酸、人参皂苷 Rh4、Rf、Rk3等20个可能的潜在活性成分，他们可能调节APH1B、NCSTN、PSEN1、PSEN2、PSENEN 等 57 个生物分子的表达或功能。其中20（R）-人参皂苷Rh1、20（S）-人参皂苷Rh1、姜状三七苷R1既是入脑成分又是“化合物-靶点”网络中度数最高的节点。结论20（S）-人参皂苷Rh1、20（R）-人参皂苷Rh1、3，6-二芥子酰基蔗糖和细叶远志皂苷可能是七福饮中人参和制远志防治AD的潜在活性成分。关键词：人参；制远志；七福饮；阿尔茨海默病；物质基础基金项目：山东省自然科学基金重大基础研究项目（ZR2020ZD17）作者简介：李珩玉，E-mail：通讯作者：程肖蕊，E-mail： 61