实验一--微生物培养基的制备和高压.ppt

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,环境微生物学实验,微生物学的基本操作,显微操作技术,无菌操作技术,分离纯化技术,染色观察技术,照射、使用化学药品,A,、,干热灭菌利用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的,火焰烧灼灭菌,(,Direct flaming),如接种环，接种针和金属用具,热空气灭菌,(,Hot-air sterilization),如玻璃器皿，培养皿等用,电烤箱在,160-170,o,C,（,2,小时）可以达到灭菌的目的,注意：培养基,、,橡胶制品,、,塑料制品不能干热灭菌,培养基配制,称量溶化调,pH*,（过滤*）分装*加塞*包扎灭菌,实验步骤,1,、称量,按培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨、,NaCl,放入烧杯中。,牛肉膏,常用玻棒挑取，可放在称量纸上，称量后直接放入水中，这时如稍微加热，牛肉膏便会与称量纸分离，然后立即取出纸片。,蛋白胨,很易吸湿，在称取时动作要迅速。,（一）牛肉膏蛋白胨培养基（培养细菌用）：,2,、溶化,在烧杯中先加入少于所需要的水量，用玻棒搅匀，然后在石棉网上加热使其溶解。将药品完全溶解后，补充水到所需的总体积,。,配制固体培养基时，将称好的,琼脂,放入已溶的药品中，在加热溶化，最后补足所损失的水分。在制备用三角瓶盛固体培养基时，一般也可先将一定量的液体培养基分装于三角瓶中，然后按,1.5,2.0,的量将琼脂直接分别加入各三角瓶中，不必加热溶化，而是灭菌和加热溶化同时进行，节省时间。,在琼脂溶化过程中，应控制火力，以免培养基因沸腾而溢出容器。同时，需不断搅拌，以防琼脂糊底烧焦。,3,、调,pH,在未调,pH,之前，先用精密,pH,试纸测量培养基的原始,pH,，如果偏酸，用滴管向培养基中,逐滴加入,1 mol/L NaOH,，边加边搅拌，并随时用,pH,试纸测其,pH,，直至,pH,达,7.6,。反之，用,1 mol/L HCl,进行调节。,先称取可溶性淀粉放入小烧杯中，并用少量冷水将淀粉调成糊状，再加入少于所需水量的沸水中，继续加热，使可溶性淀粉完全溶化,。然后再称取其他各成分依次逐一溶化。对微量成分,FeSO,4,.,7H,2,O,可先配成高浓度的贮备液按比例换算后再加入。待所有药品完全溶解后，补充水分到所需的总体积。加入琼脂，融化，补足水量即可。,（二）高氏号培养基（培养放线菌用）,按,配方,顺序加入药品，完全溶解后加入琼脂，,不必调节,pH,（三）查氏培养基（培养霉菌用）,1,4,组配牛肉膏蛋白胨培养基,500ml,，分装,2,瓶,5,6,组配高氏一号培养基,500ml,，分装,2,瓶,7,8,组配查氏培养基,500ml,，分装,2,瓶,培养皿,10,个,1ml,移液管,2,支,试管,5,支，装,9ml,自来水,装,90ml,自来水并带有玻璃珠的三角烧瓶,1,个,50ml,烧杯,1,个,以上物品均加棉花塞，报纸包扎好，做记号后灭菌,各组任务安排,