中药化学实验.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,实验室注意事项,：,1.安全,2.纪律,3.实验目的,自身安全：酸、碱及有毒试剂,实验室安全：火、水、电及仪器使用,按时上课，有事请假,私自旷课,无实验成绩课堂纪律：坚决不允许打闹，噪音要小,完成课程，取得学分.训练实验技能养成良好的实验习惯：正确操作，仔细观察,实验一,苦参中苦参总碱的提取、纯化和鉴定,实验目的,1.四个原理：,渗漉提取法的使用原理,离子交换法提取生物碱的原理,索式提取器连续回流提取的原理,利用溶解性差异分离氧化苦参碱方法。,2.,三个操作方法：,渗漉提取法方法,离子交换法提取生物碱的方法,索式提取器连续回流提取的方法,3.,一个检识方法：,掌握生物碱的常规定性检识方法。,实验流程,苦参粗粉100g,以0.1%盐酸约100ml湿润半,小时装入渗漉中，以0.1%,盐酸1200ml渗漉，速度12d/s,渗漉液,通过装湿重60g（60ml）树脂的阳离子交换树脂柱交换，交换速度12d/s。注意测定不同交换时间pH值的变化。（每隔15分钟）,吸碱树脂,1.提取,取3.2ml36%浓盐酸（密度为1.19）,配置1200ml0.1%稀盐酸,将树脂倒入烧杯中，以蒸馏水洗至洗液无色抽滤后室温晾干。将树脂置烧杯中，加入浓氨水，拌匀（加氨水量以手握成团但不粘手为度），密闭放置。,吸碱树脂,碱化树脂,放置20分钟，装入滤纸袋置索氏提取器中以氯仿连续回流提取610小时，回收氯仿至尽，蒸去水分。,残留物,残留物,以20ml丙酮回流残留物，过滤，溶液回收部分丙酮，加盖放置，结晶，抽滤，干燥。,粗品总碱结晶,1.回收溶剂；,2.用少量（多次）丙酮转移至蒸发皿中，将其蒸干；,3.用丙酮约20ml将残留物转移至小烧瓶中，空气冷凝至完全溶解；,4.将丙酮溶液过滤至锥形瓶中；,5.略加浓缩，加塞放置析晶。,步骤：,注意事项,渗漉提取前，湿润药材的重要性,注意渗漉速度和离子交换速度（以离子交换液不穿为准）,确定提取终点,树脂柱内液面不能低于树脂面,浓盐酸密度：,1.18g/ml,层析鉴定,层析板：,自制硅胶CMC硬板,样 品：,精品总碱氯仿溶液,对照品：,氧化苦参碱的氯仿溶液,展开剂：,氯仿：甲醇（15：4）10ml中加2 滴氨水摇匀使用,显色剂：,改良碘化铋钾试剂,结 果：,样品斑点与对照品斑点比较位置并计算R,f,值,理化鉴识,取样品加少量乙醇，滴碘化铋钾，观察颜色变化。,实验二,槐米中芦丁的提取、分离、鉴定及槲皮素的制备,实验目的,1.掌握黄酮类成分的主要性质及黄酮苷、苷元的结构研究的一般方法；,2.熟悉根据溶解性差异来提取分离芦丁的方法；,3.了解芦丁紫外光谱的测定方法。,实验原理,提取原理：芦丁在冷热水中的溶解度差异,纯化原理：芦丁在冷热甲醇中的溶解度差异,制备原理：槲皮素为芦丁的苷元，因此可进,行酸水解得到槲皮素,实验流程,加水煎煮两次，趁热过滤合并煎煮液,槐米（,20g,）,药渣,煎煮液,放置,45h，,抽滤,沉淀,粗品芦丁,自然干燥,1、提取,粗品芦丁,沉 淀 滤 液,精品芦丁,2、精制,沉 淀,干燥,放置，待结晶析出，抽滤至干。,加甲醇1520ml，水浴加热（空气冷凝）溶解，至无黄色物，,趁热,过滤。,1、甲醇量可以适当增加。,2、注意控制回流温度。,3、回流时间以芦丁完全溶解为准。,注意：,精品芦丁(0.2g),放入150ml圆底烧瓶中，加入2%稀硫酸50ml,空气冷凝直火加热（电炉上放石棉网）40分钟，,放冷抽滤,。,沉 淀 滤 液,水洗至中性抽滤、干燥。,取,10ml，加Ba(OH),2,约1g,调PH7.5,过滤,沉 淀 滤 液,水浴浓缩至12ml,浓缩液（备检查糖用）,3.槲皮素的制备,槲皮素,4、芦丁、槲皮素的鉴定,（1）试管定性反应：,HCl-Mg粉反应,取样品的乙醇溶液1ml加少许镁粉，再加浓HCl 12滴，观察颜色。,FeCl,3,反应,取样品的乙醇溶液1ml加1%的FeCl,3,乙醇溶液23滴，观察颜色。,中性醋酸铅反应,取样品的乙醇溶液1ml加5%的中性醋酸铅溶液12滴，观察现象。,-萘酚、浓,H,2,SO,4,反应,取样品的乙醇溶液1ml加-萘酚试液1 2滴后振摇，然后沿管壁加适量浓,H,2,SO,4,，观察两界面处的颜色。,（2）,AlCl,3,纸斑反应,取样品的乙醇溶液，在滤纸上各滴一个点，干燥后置紫外灯下观察荧光。然后在原斑点上喷,AlCl,3,，干燥后重新置紫外光灯下观察荧光。,5、糖的检识（径向纸层析）,展开剂：正丁醇：冰醋酸：水（4：1：5）上层,显色剂：邻苯二甲酸-苯胺试剂（95烘干）,样 品：水解浓缩液,对照品：葡萄糖、鼠李糖的水溶液,展开方式：径向,结 果：对照样品斑点及对照品斑点位置并计,算R,f,值。,一、目的要求,1、掌握亲脂性中性成分（薯蓣皂苷元）的提取方法。,2、掌握薯蓣皂苷及薯蓣皂苷元的性质和检识方法。,二、实验原理,薯蓣皂苷在植物体内与糖结合成苷，但经过水解可得薯蓣皂苷元和单糖，利用薯蓣皂苷元不溶于水，易溶于有机溶剂的性质，利用石油醚连续回流将其提取出来。,实验三,穿山龙中薯蓣皂苷元的提取、分离、鉴定,薯蓣皂苷,穿山龙粗粉（50g）/组,三、实验内容,置圆底烧瓶中，加水,250ml,、浓硫酸,20ml,，室温浸泡,24,小时，文火加热回流46小时，放冷，倾出酸水液。,酸性药渣,用清水漂洗,3次,，然后将药渣倒入乳钵中，加,Na2CO3,粉末，反复研磨，调pH至中性，水洗，抽干。,中性药渣,自然晾干,干燥药渣,置乳钵中研成细粉，置索氏提取器中，以石油醚（6090沸程）为溶剂，连续回流提取45小时.,干燥药渣,石油醚提取液,回收石油醚至剩1015ml时，迅速倾入小三角烧瓶中，放置使充分冷却，过滤。,沉 淀,滤 液,用少量冷石油醚洗二次抽干.,薯蓣皂苷元粗品,四、薯蓣皂苷元的鉴定,（1）化学检识：,醋酐-浓硫酸反应（Libermann-Burchard反应）,取样品少许，置白瓷皿中，加冰醋酸0.5ml使溶解，续加醋酐0.5ml搅匀，再于溶液的边沿滴加1滴浓硫酸，液体则呈现紫红色，最后变成乌绿色。,氯仿-浓硫酸反应（Salkowski反应）,取样品少许，用1ml氯仿溶解，加入1ml浓硫酸后，在硫酸层出现红或蓝色，氯仿层有绿色荧光出现。,吸附剂：硅胶-CMC薄层板,样 品：5%自制薯蓣皂苷元的乙醇液,对照品：5%薯蓣皂苷元对照品的乙醇液,展开剂：苯：乙酸乙酯（8：2）,显色剂：25%磷钼酸的乙醇溶液（喷洒后110加热5分钟）,（2）薄层色谱检识,