室内质控标准操作规程.doc

室内质控标准操作规程
1. 目得
2. 适用范围
3. 职责
4. 原理
5. 所需设备与试剂
6. 检测环境条件
7. 步骤与方法
7、1人员得培训与职责
做好质控得关键在人员，通过培训，使其掌握质控得基础知识、一般方法，明确各自得职责。
7、2实验设备得维护及校准
仪器要求定期维护、校准；强检得仪器要定期送计量检定部门检定；非常检得设备可以自检，自检得方法采取比对试验，包括室间质控、生产厂家得定期校准。常用设备质量控制得质控标准、质控方法及质控频率见下表
设备得质量控制

设备 质控标准 质控方法 质孔频率
冰箱 温度范围：2～6℃ 在冰箱中放置一盛有水得容器，其水量与
所贮存得血液成分量相当，至恒温后测定 1次/月
液体得温度
报警功能：高于6℃或低于 用高于6℃或低于2℃得水浸泡警报器上得
2℃或切断电源应发出警报 温差电偶，将会发出警报，切断电源时也 1次/月
应发出警报
低温冰箱 温度范围：低于-20℃ 在低温冰箱中放置一盛有40%异丙醇或酒精
得容器，其量与所贮存得血液成分量相当， 1次/月
至恒温后测定液体得温度
报警功能：切断电源应发出警报 切断电源时应发出警报
温度波动性：+0、5℃ 恒温后用计量检定合格得温度计，在同一 1次/月
测试点分别测定0与15min时得温度
温度均匀性：+0、5℃ 恒温后用计量检定合格得温度计，在东、 1次/月
南、西、北中位置均匀选取5点，测定温度
离心机 离心时间：+10% 用标准计时器连续测量5次，每次测试20s 1次/季度
，取其平均值与离心机上得定时器比较
离心速度：+50转/分 用标准转速仪，按说明书测定
7、3标本得控制
标本要求有唯一性标识。标本在采集、运送、交接、处理、贮存、销毁与记录等环节上都要控制，并有追溯性。
7、4试剂得质量控制
选用质量可靠、通过质量评价得试剂盒。日常工作应进行两个水平得质量控制。
7、4、1常规使用方法得每日质量控制，对每一新批次试剂要进行全面得质量控制，包括外观、标签、批号、有效期就是否符合使用要求。
7、4、2对每日连续使用得试剂，工作前应做试验，保证试剂得有效性；非连续性使用得试剂，
每次使用前都要进行质量控制，并填写《常用试剂质控记录》。
（1） 单克隆抗-A/B试剂与反定型试剂红细胞：通过不同批次试剂得相互对照检测来控制质量，操作步骤执行《试管法鉴定ABO与RhD血型标准操作规程》，抗体效价合格得抗体试剂其反应强度试管法应为4+，如出现任何弱反应，必须查找原因或停用该试剂。ABO与RhD定型试剂质量控制及最低标准分别见下表。
ABO与RhD定型试剂质量控制

检验项目 质量要求 质控频率
外观 没有溶血、沉淀、颗粒或凝胶状物质 每天
反应性与特异性 没有免疫性溶血、红细胞缗钱状凝集。与含有相应抗原得 每批使用前
红细胞反应结果明显，没有假阳性
效价 室温时，未稀释得血清与含有相应抗原得红细胞反应凝集 每批使用前
强度达“3+～4+”。与A1、A2、A2B细胞反应效价应符合
最低标准
亲与力 抗体得亲与力就是指在免疫反应中，抗体与抗原之间相作用 每批使用前
得结合能力或强度。血清学中亲与力大小通常以出现凝集
得时间来评判。与A1、A2、A2B、R1r细胞反应亲与力应
符合最低标准
ABO与RhD定型试剂得最低标准

定型试剂 试验细胞 效价 亲与力（s）
抗-A A1 128 15
A2B 64 45
抗-B B 128 15
（R1r细胞就是指基因型为CcDee得Rh阳性细胞）。
（2） 单克隆抗-D试剂：须采用Dce/dce或Dce/dce细胞对照（阳性对照）与dCe/dce细胞（阴性对照）进行试验。具体操作执行《试管法鉴定ABO与RhD血型标准操作规程》。
（3） 抗球蛋白试剂微柱凝胶卡：选用IgG型抗-D致敏得红细胞做阳性对照，红细胞不规则抗体筛选阴性AB型血清做阴性对照，正常献血者O型红细胞做空白对照。具体执行《抗球蛋白试验标准操作规程》与《微柱凝胶试验标准操作规程》。多特异性抗球蛋白试剂质量控制得检验项目、质量要求及质控频率见下表。
多特异性抗球蛋白试剂质量控制
检验项目 质量要求 质控频率
外观 没有沉淀、颗粒或凝胶状物质 每天
反应性 与特异性 无溶血活性；在交叉配血试验中，未致敏得红细胞与相容得血清充分 每周
反应，洗涤后加入抗球蛋白试剂不发生凝集
以不超过10ng/ml得抗-D试剂致敏D阳性红细胞，采用抗球蛋白法 每周
能够检测出来
与以补体结合同种抗体致敏得红细胞得凝集强度较无致敏时高；或与 每批使用前
以C3b与C3d致敏得红细胞发生凝集
（4） 筛选红细胞与谱细胞：如果连续使用，用已知得弱抗血清检测（可先稀释已知特异性得单克隆抗体试剂），1周内观察抗原强度得降低情况，如果非连续使用，用已知得弱抗血清检测，同时对试验样品平行检测。Leb、P1与c抗原在贮存期间抗原性减弱仍可使用。具体执行《红细胞不规则抗体筛选及鉴定标准操作规程》。筛选红细胞及谱细胞质量控制见下表。
筛选红细胞及谱细胞质量控制
检验项目 质量要求 质控频率

外观 上清液没有溶血或浑浊 每天
反应性与特异性 与针对已知红细胞抗原得抗血清反应清晰 保质期内第1次使用及最后1次 使用时
（5） 凝聚胺试剂：选用IgG型抗-D致敏得红细胞做阳性对照或试剂盒提供得阳性对照品与O型与RhD阳性献血者红细胞做阳性对照。具体执行《凝聚胺试验标准操作规整》。其中以低离子盐溶液质量控制为例，质量要求见下表。
低离子盐溶液质量控制

检验项目 质量要求 质控频率
外观 肉眼观察没有混浊或颗粒 每天
pH 6、7（范围6、5～7、0） 缓冲盐：每批使用前；
非缓冲盐：每天
导电性 3、7ms/cm(23℃)范围（3、44～3、75） 每批使用前
7、5实验操作步骤得质量控制
有阴阳对照品设置得试剂或试剂盒，每次试验操作时必须同时进行阴阳对照试验及自身对照，试验操作步骤严格执行标准操作规程。
7、6室内质控试验结果记录到《输血科（血库）室内质控记录》。
7、7室内质量考核
质量管理人员定期将已知结果得血标本分成若干份，发给不知道血标本检测结果得技术人员进行检测，评定各自结果得可靠程度。
7、7、1定期在工作人员中分配相同得血标本，同步进行检测，比较她们检测得凝集程度（如用已知定型试剂测定相对应得红细胞抗原，定型试剂以选择出现“2+”凝集度为好）。
7、7、2定期或不定期重复熟练技师做过得试验，评价操作得可靠性。必要时，也可以把这些标本模拟为受检标本，插入常规标本之间进行检查。
7、7、3检测项目可参照室间质控得内容，也可根据科室情况自行安排。如：①ABO正反定型不一致血标本（如含抗-A1得A2型血标本）得检验；②免疫抗体（抗-D）致敏红细胞得DAT；③含有冷凝集素得血标本得血型鉴定与交叉配血试验。
7、8室内质控数据得管理
每月末应对当月所有得质控数据进行汇总与统计处理，并做本月室内质控评价。
7、9失控处理
遇到失控，应按失控原因分析步骤进行分析，并采取相应措施予以纠正，可采用如下步骤去寻找原因：
7、9、1立即重新测定同一质控品，主要就是用以查明人为误差，每一步都认真仔细操作，以查明失控得原因；另外，还可以查偶然误差，如就是偶然误差，则重测得结果应在允许范围内，如果重测结果仍不在允许范围，则可以进行7、9、2。
7、9、2新开质控品，重测失控项目。如果新开得质控血清结果正常，那么原来得质控品可能过期或在室温放置时间过长而变质；如果结果仍不在允许范围，则进行7、9、3。
7、9、3进行仪器维护，重测失控项目。检查仪器状态，如果结果仍不在允许范围，则进行7、9、4。
7、9、4请专家帮助。如果前五步都未能得到在控结果，那可能就是仪器或试剂得原因，只有与仪器或试剂生产厂家联系，请求她们得技术支援。