DB22∕T 2686-2017 人参中氟啶胺的测定 液相色谱-质谱∕质谱法(吉林省).pdf

ICS 65.020.01 B 38 DB22 吉林省地方标准 DB 22/T 26862017 人参中氟啶胺的测定 液相色谱-质谱/质谱法 Determination of fluazinam in ginseng HPLC-MS/MS method 2017-09-30 发布 2017-11-30 实施 吉林省质量技术监督局 发 布 DB22/T 26862017 I 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009 和 GB/T 20001.4-2015 给出的规则起草。本标准由吉林出入境检验检疫局提出并归口。本标准起草单位：吉林出入境检验检疫局检验检疫技术中心、通化出入境检验检疫局。本标准主要起草人：康明芹、陈明岩、曹海微、田芳洁、李荣荣、邢燕燕、赵巍巍、史晓丽、李洪丽。DB22/T 26862017 1 人参中氟啶胺的测定 液相色谱-质谱/质谱法 1 范围 本标准规定了生晒参和鲜园参中氟啶胺的的原理、试剂或材料、仪器设备、样品、分析步骤、实验数据处理、精密度及试验报告。本标准适用于生晒参和鲜园参中氟啶胺的测定。本方法生晒参中氟啶胺的定量限为10.0 g/kg，检出限为3.0 g/kg；鲜园参中氟啶胺的定量限为5.0 g/kg，检出限为2.0 g/kg。2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法。3 原理 样品用乙腈提取，提取液离心后加 PSA 吸附剂和 C18 吸附剂净化后，用液相色谱-质谱/质谱仪测定，外标法定量。4 试剂或材料 除非另有规定，仅使用分析纯试剂。4.1 水，GB/T 6682，一级。4.2 氟啶胺标准物质，CAS：79622-59-6，纯度 99.0%。4.3 无水硫酸镁（MgSO4）。4.4 乙二胺-N-丙基硅烷（PSA）。4.5 十八烷基硅烷键合硅胶（C18）。4.6 乙腈（CH3CN），色谱纯，流动相。4.7 甲醇（CH3OH），色谱纯，流动相。4.8 氟啶胺标准储备液（100.0 g/mL），准确称取 10 mg 氟啶胺标准物质（4.2）用甲醇溶解并定容至 100 mL 容量瓶。4.9 氟啶胺标准工作溶液，从标准储备溶液（4.8）中准确移取 1.0 mL 于 100 mL 容量瓶中，用乙腈（4.6）定容至刻线。使用时再根据需要用空白基质液（4.10）稀释配制成适当浓度的标准工作溶液，现用现配。4.10 空白基质液，选择不含氟啶胺且与待测样品同种类的样品，按照分析步骤 7.1 和 7.2 处理得到空白基质液。4.11 滤膜，0.22 m，有机相。DB22/T 26862017 2 5 仪器设备 5.1 液相色谱-质谱/质谱仪。5.2 天平：感量0.0 001 g 和0.001 g。5.3 离心机：转速不低于 10 000 转每分钟。5.4 粉碎机：转速不低于 10 000 转每分钟。5.5 组织捣碎机：转速不低于 10 000 转每分钟。5.6 涡旋混合器。5.7 超声波清洗器。6 样品 6.1 生晒参 取有代表性的样品不低于 100 g，粉碎，过 0.18 mm 孔径筛，装入干净的容器内混匀备用。6.2 鲜园参 取有代表性的样品不低于 100 g，切块，用组织捣碎机捣碎制成均匀的浆状，装入干净的容器内混匀备用，若冷冻保藏，解冻后需匀浆后使用。7 分析步骤 7.1 提取 7.1.1 生晒参 称取 1 g 样品（精确至0.001 g）于离心管中，加 2.5 mL（4.1）水混匀后加入 10 mL 乙腈(4.6)，涡旋混合1 min，超声10 min 后以10 000 转每分钟离心2 min，上清液待净化。7.1.2 鲜园参 称取2 g 样品（精确至0.001 g）于离心管中，加10 mL 乙腈(4.6)，涡旋混合1 min，超声10 min 后以10 000 转每分钟离心2 min，上清液待净化。7.2 净化 取1 mL 上清液于小离心管中，加入150 mg 无水硫酸镁（4.3）、50 mg PSA（4.4）和50 mg C18（4.5）吸附剂后迅速涡旋混匀1 min 至充分分散后，以10 000 转每分钟离心2 min，上清液过膜待测定。7.3 空白试验 除不添加样品外，采取完全相同的分析步骤进行平行操作。7.4 测定 7.4.1 色谱参考条件 色谱参考条件如下：a)色谱柱：C18，2.1 mm 150 mm，3.5 m 或相当者；DB22/T 26862017 3 b)柱温：35；c)进样量：10 L；d)流动相：A：甲醇（4.7）；B：水。梯度洗脱程序见表 1。表1 流动相及梯度洗脱条件 时间 min 流速 mL/min 流动相A%流动相B%0.0 0.20 60 40 3.0 0.20 95 5 8.0 0.20 95 5 8.1 0.20 60 40 15.0 0.20 60 40 7.4.2 质谱参考条件 质谱参考条件如下：a)离子源：电喷雾；b)扫描方式：负离子扫描；c)检测方式：多反应监测（MRM）；d)电离电压：-4.5 kV；e)脱溶剂气：0.75 MPa；f)雾化气：0.625 MPa；g)辅助气：0.625MPa；h)碰撞气：0.15 MPa；i)离子源温度：550.0；j)定性离子对、定量离子对、去簇电压、碰撞能量见表 2。表2 氟啶胺的监测离子对、去簇电压和碰撞能量 化合物名称 母离子 m/z 子离子 m/z 去簇电压 V 碰撞能量 V 417.9a-60-29 398.2-60-25 氟啶胺 465.0 389.1-60-25 a定量离子。7.4.3 标准工作曲线 将浓度为0.5 g/L、1.0 g/L、2.5 g/L、5.0 g/L、25.0 g/L的氟啶胺标准工作溶液，按参考色谱和质谱条件测定。以氟啶胺质量浓度为横坐标，相应的峰面积响应值为纵坐标，进行线性回归分析。7.4.4 定性分析 在同一色谱/质谱条件下进行标准溶液和样品溶液的测定，如果样品溶液中检出的色谱峰的保留时间与标准物质色谱峰的保留时间一致，所选择的两对子离子的质荷比也一致，而且样品定性离子的相对DB22/T 26862017 4 丰度与浓度相当标准工作溶液的定性离子的相对丰度相比较，相对标准偏差不超过表3规定的范围，则可判定样品中存在该物质。标准溶液的多反应监测色谱图参见附录A。表3 定性分析时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度/%50 20 50 1020 10 允许的相对偏差/%20 25 30%50 7.4.5 定量测定 平行做两份测定。对于高浓度样品须适当进行系列稀释。标准工作液和样液中被测组分的响应值均应在仪器线性响应范围内。在上述色谱条件下，氟啶胺的参考保留时间为 9.10 min，外标法定量。8 试验数据处理 按（1）式计算试样中氟啶胺含量，计算结果需扣除空白值。.(1)式中：X 试样中氟啶胺含量，单位为微克每千克(g/kg)；c 从标准曲线得到的氟啶胺溶液浓度，单位为微克每升(g/L)；c0 空白溶液浓度，单位为微克每千克(g/kg)；V 样液最终定容体积，单位为毫升(mL)；m 样液所代表的试料的质量，单位为克(g)。计算结果保留两位有效数字。9 精密度 9.1 重复性 在同一实验室，由同一操作者使用相同设备，按相同的测试方法，并在短时间内对同一被测对象相互独立进行测试获得的两次独立测试结果的绝对差值不大于这两个测定值的算术平均值的 15%，以大于这两个测定值的算术平均值的 95%的情况不超过 5%为前提。9.2 再现性 在不同的实验室，由不同的操作者使用不同的设备，按相同的测试方法，对同一被测对象相互独立进行测试获得的两次独立测试结果的绝对差值不大于这两个测定值的算术平均值的 20%，以大于这两个测定值的算术平均值的 95%的情况不超过 5%为前提。10 试验报告 DB22/T 26862017 5 试验报告至少应给出以下几个方面的内容：试验对象；所使用的标准（包括发布或出版年号）；所使用的方法（如果标准中包括几个方法）；结果；观察到的异常现象；试验日期。A DB22/T 26862017 6 A B 附 录 A（资料性附录）氟啶胺标准品液相色谱-质谱/质谱图 氟啶胺标准品液相色谱-质谱/质谱图见A.1。图A.1 氟啶胺标准品液相色谱-质谱/质谱图（10.0 g/L）_ C D