第八章球菌.ppt

单击此处编辑母版标题样式,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,第八章球菌,第一节 葡萄球菌属,葡萄球菌属,是,G,+,球菌，,是化脓菌中最常见者，广泛分布于自然界,，,因其常堆聚成葡萄串状，故名。本属包括30多个种，其中金黄色葡萄球菌致病性强，分布广泛，可引起许多严重感染。表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌是人体正常菌群,，,前者偶尔能引起感染,一 生物学性状,(一)形态与染色,金黄色葡萄球菌直径约0.8-1.0,m，,呈葡萄串状排列,，,在固体培养基上生长的细菌排列典型,，,于脓汁或液体培养基中，可见有单个、成对、四联体以及短链状排列。,该,菌无芽胞，无鞭毛，一般不形成荚膜，但在少数菌株的外层可见有荚膜样的粘液物质。,G,，,在陈旧培养物中可变成,G,葡萄球菌扫描电镜,图,(二)培养和生化反应,金黄色葡萄球菌为需氧或兼性厌氧菌，,在,普通培养基上生长良好，形成圆形、隆起、表面光滑、湿润、有光泽、不透明、边缘整齐的中等大小金黄色菌落。在血平板上可形成完全透明溶血环(,溶血)。在液体培养基中呈混浊生长,该,菌能分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖，产酸不产气。分解甘露醇产酸在鉴定致病性方面有一定意义,（三）抗原构造,1 葡萄球菌,A,蛋白（,SPA),是存在于,90%,以上的金黄色葡萄球菌细胞壁表面的一种蛋白质，为完全抗原，能与人及多种哺乳动物的,IgG,1,、,IgG,2,和,IgG,4,分子的,Fc,段非特异性结合，而结合后的,IgG,分子的,Fab,段仍能与抗原特异性结合,利用这种结合原理建立的协同凝集试验已广泛应用于,临床诊断,2.多糖抗原 磷壁酸与肽聚糖相连，,具,有抗 原性,从金黄色葡萄球菌,引起的,心内膜炎患者血清中用琼脂扩散试验可以检出抗磷壁酸抗体,此外，少数金黄色葡萄球菌菌株的荚膜亦具有抗原性,(四)分,类,1,根据,DNA,相关性程度，葡萄球菌分32个种,2 噬菌体分型 目前国际上将金黄色葡萄球菌分为4个噬菌体群、23个噬菌体型。噬菌体分型可用于流行病学调查,3,根据色素和生化反应不同，分为金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌3种,三种葡萄球菌的主要性状,性状 金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌 腐生葡萄球菌,菌落色素 金黄色 白色 白色或柠檬色,凝固酶,葡萄糖,甘露醇,溶血素,耐热核酸酶,A,蛋白,磷壁酸类型 核糖醇型 甘油型 两者兼有,噬菌体分型 多数能 不能 不能,致病性 强弱 无,（五）抵抗力,在不形成芽胞的细菌中金黄色葡萄球菌抵抗力最强,对,干燥,、热和化学消毒剂有一定的抵抗力,601,h,或,8030,min,才能将其杀死,。,在2%石炭酸中,15,min,死亡。,耐盐，在含有,10,%-,15,%,NaCl,的培养基中仍能繁殖,对某些染料较敏感 如110-20万倍稀释的龙胆紫溶液能抑制其生长,易产生,耐药菌,性,二、致病性,金黄色葡萄球菌,能,产生多种外毒素以及胞外酶作为其致病物质，且毒性强，临床感染的机会多、症状严重，耐药菌株也多,，已成为医院内感染的最常见的致病菌,(一)致病物质,1.凝固酶,是一种能,使含有抗,凝,剂的,人或兔血浆,发生凝固,的蛋白质,凝固酶的作用类似凝血酶原，使液态的纤维蛋白原变成固态纤维蛋白，进而使血浆凝固,凝固酶,的意义：,致病作用 抗吞噬和抵抗,体液中杀菌物质,金黄色葡萄球菌的感染易于局限化和形成血栓亦与凝固酶有关,鉴别作用,是鉴定金黄色葡萄球菌,有无致病性,的重要指标,2.葡萄球菌溶素,致病,萄萄球菌可以产生,、,等,多,种溶素,，,其中,溶血毒素是金黄色葡萄球菌的重要致病物质，,对白细胞、血小板、肝细胞、成纤维细胞、血管平滑肌细胞等均有毒害作用,溶血素为蛋白质，,不耐热,。,经甲醛处理可制成类毒素，用于金黄色葡萄球菌感染的预防和治疗,3.杀白细胞素,只损伤中性粒细胞和巨噬细胞,，因这,两类细胞表面具有特异性受体,。,该毒素由,F(,快)和,S(,慢)两种组分构成。两者单独存在时无杀伤性，必须协同才有作用,抵抗宿主吞噬细胞，增强细菌的致病力,鉴于杀白细胞素具有强烈的杀白细胞活性，有可能用于白血病的治疗,4.肠毒素,引起葡萄球菌食物中毒的致病物质。肠毒素根据抗原性分为,A、B、C,1,、C,2,、C,3,、D、E、F,、,G,和,H 9,个血清型。肠毒素是蛋白质，溶于水,耐热10030,min，,食品中的毒素不因加工而灭活；对蛋白酶也有耐性，故在消化道中不被破坏,作用机理,可能是毒素,吸收后直接,刺激呕吐中枢所致,5.剥脱性毒素(表皮溶解毒素),是蛋白质，,能裂解表皮的棘状颗粒层细胞，引起烫伤样皮肤综合征(,SSSS),。,该毒素分,A、B,两种类型。前者耐热,(100,20,min),，,由染色体基因控制；后者不耐热，6030,min,灭活，由质粒控制,作用:,能裂解表皮的棘状颗粒层细胞使表皮和真皮脱离,6.中毒性休克综合征毒素,(TSST-1),成分是蛋白质,对胰酶有抵抗力,在,pH4.5,能被胃蛋白酶消化,TSST-1,能引起机体发热、猩红热样皮疹、脱屑和休克等症状,致病物质 所致疾病,血浆凝固酶 侵袭性疾病：皮肤局部化脓性炎症,葡萄球菌溶素 各种器官的化脓性感染,杀白细胞素 全身的感染和败血症,脓毒血症等,肠毒素 食物中毒,假膜性肠炎,表皮剥脱毒素 烫伤样皮肤综合征,中毒性休克综合征毒素,I,中毒性休克综合征,金黄色葡萄球菌的致病物质与所致疾病,(,二,),所致疾病,有侵袭性和毒素性两种,1.,侵袭性疾病 主要引起,化脓性感染,一般发生在皮肤组织，也可发生于深部组织，甚至波及全身,局部感染:疖子、痈、气管炎肺炎、中耳炎、脓胸等内脏器官感染,全身感染：败血症、脓毒血症等,2.毒素性疾病,食物中毒,机理：当,含有蛋白、淀粉和奶油类食物被产生肠毒素的金黄色葡萄球菌污染后，在,20,以上经,8-10,h,即可产生大量肠毒素。食入含该毒素的食品后,患病,表现：,经1-6,h,潜伏期，出现恶心、呕吐、腹泻等急性胃肠炎症状,，,严重者可虚脱或休克,，,一般1-2日内恢复,假摸性性肠炎,当肠道菌发生菌群失调时，由于耐药性葡萄球菌大量繁殖，产生肠毒素，引起腹泻为主的临床症状。因肠粘膜被一层假膜所覆盖（该膜由炎性渗出物、肠粘膜坏死块和细菌组成）故称假摸性性肠炎,烫伤样皮肤综合征,（,SSSS),多见于婴幼儿和免疫功能低下的成人。开始皮肤有红斑,，,1-2,d,表皮起皱,，,继而出现含无菌清亮液体的大泡，轻微损伤可破溃，最后表皮,脱,落,如病人得不到及时治疗，可有20%病人死亡,毒素性休克综合征,（,TSS),由产生,TSST-1,的金黄色葡萄球菌引起。病人表现为突然高热、呕吐、腹泻、弥漫性红疹、瘀斑或多形性皮疹，继有脱皮、低血压、粘膜病变(口咽、阴道等)；严重的病人还出现心、肾衰竭，,甚至,休克,TSS,过去,常见于经期使用受污染或未经消毒月经塞的妇女，但,现,亦见于儿童和成人,(三)免疫性,有一定天然免疫力，只有当受伤或免疫力低下时才感染,从同一病人可反复受金黄色葡萄球菌感染来看，说明特异免疫性不强，难以防止再次感染,三、微生物学检查法,一般局部化脓性感染，如疖、痈等微生物学检查意义不大，但对全身性感染在确定病因或选择有效治疗药物上有一定价值,1 标本,根据病情可采取脓汁、血液、脑脊液、骨髓穿刺液、呕吐物、粪便或可疑食物等,2 直接涂片染色镜检,取脓汁、痰等涂片、革兰染色镜检，可见典型葡萄球菌，但不能区别致病性和非致病性葡萄球菌,3 分离培养与鉴定,涂片镜检,标本 血平板 菌落 血浆凝固酶试验,甘露醇发酵试验,少数血浆凝固酶阴性葡萄球菌有时也能致病，故在最后判定时须结合临床表现,(四)动物实验,主要对葡萄球菌肠毒素检查,采取呕吐物、粪便或剩余食物 分离,培养,接种肉汤培养基 取滤液给小猫腹腔注射,，,若,4,h,后动物出现呕吐、腹泻及体温升高时说明可能有肠毒素。继续观察，动物常在,1-2,d,内中毒死亡,初步诊断应符合以下特征：,镜检符合葡萄球菌的形态学特征,菌落色素为脂溶性金黄色，血平板上有完,全透明的溶血现象,甘露醇发酵阳性,血浆凝固酶阳性,耐热核酸酶检测阳性，肠毒素的鉴定，在,专业实验室进行,四、防治原则,无特异性防治,注意个人卫生，及时处理皮肤创伤,加强,食品加工或饮食服务工作,的管理,避免医源性感染,选用敏感抗菌药物,治疗,对反复发作的顽固性疖疮，采用自身菌苗,第二节 链球菌属,链球菌属,细菌是化脓性球菌中另一大类常见细菌，为链状或个别成双排列的,G,+,球菌,，,链球菌在自然界中广泛分布。其中化脓性链球菌产生多种致病物质，引起各种化脓性炎症、毒素性疾病与链球菌感染后超敏反应。某些链球菌为正常菌群，引起条件性感染,一、生物学性状,（,一）,形态与染色,G,+,球形或卵圆形，呈链状排列,，在液体培养基中易呈长链；在固体培养基链较短；化脓性链球菌不形成芽胞，无鞭毛，但有菌毛,有的菌种幼龄期可形成透明质酸的荚膜,链 球 菌 扫 描 电 镜,（二）,培养和生化反应,本菌为需氧或兼性厌氧菌，营养要求较高,，,在加有血液、血清等成分的培养基中生长良好。在固体培养基表面生成细小、灰白色、表面光滑、有乳光的菌落；不同种类的链球菌可产生不同的溶血现象,。,本菌能分解葡萄糖，不分解菊糖，不被胆汁溶解。后两点可与肺炎链球菌鉴别,（三）,抗原构造,链球菌抗原构造复杂，主要有,3,种,1 蛋白质抗原或表面抗原:具有型的特异性,A,群有,M、T、R、S,四种,2 多糖抗原,(,C,抗原,),:为群特异性抗原,3 核蛋白抗原,(,P,抗原,):,无特异性,(,四,),分类,1.根据溶血作用分类,甲,(,),型溶血,性链球菌:,有草绿色溶血环,为条件致病菌,乙,(,),型溶血,性链球菌:,呈,完全,透明溶血环,亦称溶血性链球菌,致病力强,丙型,链球菌:无,溶血,环,无致病性,2.根据族特异性抗原分类,根据,细胞壁多糖(,C),抗原,不同,将乙型溶血性链球菌分为,A-H,、,K-T,和,U、V,共20个,群,引起人类疾病,90%,A,群,B,、,C,、,D,和,G,群偶见,表面蛋白抗原,是化脓性链球菌细胞壁的蛋白质抗原，位于,C,抗原外层。除,M,蛋白质抗原外，还有,T、R,和,S,表面蛋白抗原。,M,蛋白是化脓性链球菌一种重要毒力因子，具有抗吞噬作用。,M,蛋白有型特异性，,A,群根据,M,蛋白抗原性不同分约100个型,。此外，应用分子模拟试验证明，,M,蛋白与心肌肌浆蛋白有共同抗原表位，故与风湿性心肌炎可能有关,（,五,）抵抗力,本菌抵抗力不强，加热,6030,min,即被杀死。对一般消毒剂,敏感,乙链对,红霉素、,青,霉素、氯霉素、,四环素、,磺胺等均敏感,极少发现耐药菌株,二 致病性,（一,）,致病物质,链球菌具有较强的侵袭力（产生粘附素、和多种侵袭性的酶）和多种毒素,1 链球菌溶素,有溶解红细胞、破坏白细胞和血小板的作用。根据对氧的稳定性分为对氧敏感的链球菌溶血素,O（SLO）,和对氧稳定的溶血素,S,(SLS),（1）,SLO,：,绝大多数,A,族链球菌和许多,C,、,G,族菌株可产生。,SLO,为含有-,SH,基的蛋白质,对热及氧敏感，遇氧时-,SH,基被氧化成-,S-S,-,基，暂时失去溶血能力，若加入还原,剂,如半胱氨酸等，又可恢复其溶血能力,抗,O,实验就是根据此原理设计的,SLO,的作用,溶解红细胞、破坏中性粒细胞、对血,小板、巨噬细胞、神经细胞有毒害作用，对心肌有急性毒害作用可引起心跳骤停,SLO,有抗原性，其抗体即抗,O,抗体,(,ASO),有中和,SLO,的活性，阻止其溶血作用,85%,90%,的患者于链球菌感染后,2,3,w,到病愈后数月或一年内可查到,SLO,抗体，一般其效价在,1：400,以上，可作为链球菌新近感染的指标或风湿热的辅助诊断,（2）,SLS,多数,A、C、G,群及其他链球菌产生,SLS,，,SLS,是小分子糖肽，无抗原性，对热和酸敏感不易保存,在血平半上的溶血环由此毒素产生因,SLO,对,O,2,稳定,2 致热外毒素,：,又称红疹毒素,或,猩红热,毒，素,此毒素的产生由噬菌体基因所控制。至少有,A,、,B,、,C 3,种血清型，具有抗原性,作用,：,引起发热反应 是毒素直接作用于下丘脑所致,猩红热的红疹,可能是一种超敏反应,C,型还能增加脑屏障对内毒素和细菌的通透,性，,可提高家兔对内毒素休克的敏感性10,万倍,2 侵袭性酶,透明质酸酶,（,扩散因子,）：,能分解透明质酸，使细菌及其毒素易在组织中扩散,链激酶,(,SK),亦称溶纤维蛋白,:,能使血液中溶纤维蛋白酶原转变为溶纤维蛋白酶，溶解血块或阻止血浆凝固，有利于细菌在组织中扩散,链道酶,(,SD,),亦称链球菌,DNA,酶,：,该酶能分解脓汁中高度粘稠性的,DNA；,使脓汁稀薄，有利于细菌扩散,M,蛋白 为,A,群链球菌细胞壁中的蛋白成分有近,100,种,作用:有抗吞噬和抵抗吞噬细胞内杀菌作用;与心肌和肾小球基底膜有共同抗原，引起超敏反应,F,蛋白 是化脓性链球菌的粘附素,F,蛋白位于细胞壁内,能与细胞壁表面的纤,维粘连蛋白结合,使细菌粘附到上皮细胞,表面,利于细菌在宿主体内繁殖和定居,（,二）所致疾病,链球菌性疾病,90%,是由,A,群引起的，感染源为病人和带菌者。途径为飞末传播、伤口和经口所致疾病有化脓性、中毒性和超敏反应三类,(1)化脓性炎症,可引起局部的痈、脓肿等；由于产生,SD、SK,等使脓汁稀薄，有利于细菌扩散，易引起蜂窝组织炎；细菌沿淋巴管和血管扩散易引起丹毒、淋巴管炎、淋巴结炎及败血症；,其他系统感染主要有扁桃体炎、咽炎、咽峡炎、鼻窦炎、肾盂肾炎及产褥热等,(2)猩红热(,属于中毒性疾病）,这是一种急性呼吸道传染病，,由产生致热外毒素的化脓性链球菌所致。细菌经咽喉粘膜侵入机体，增殖并产生毒素引起高热、全身红疹等症状，病后获得较强的免疫力,(3)链球菌感染后超敏反应,风湿热和急性肾小球肾炎 在咽炎或脓皮病后均可发生，多见于儿童和青少年，由于链球菌,M,蛋白,引发,型和,型超敏反应所致,D,族链球菌,本菌包括粪链球菌、牛链球菌和马链球菌。营养要求不高，可在普通培养基上生长。血液琼脂平板上呈甲型或乙型溶,血,D,族链球菌,为,正常,菌群,偶而引起泌尿道感染、腹部化脓性感染、败血症和心内膜炎,身体虚弱和免疫功能低下者易感染,甲型溶血性链球,菌,也称草绿色链球菌 常见的菌种有唾液链球菌、血链球菌、米勒氏链球菌、轻型链球菌和变形链球菌，是人类口腔、上呼吸道的正常菌群，具有条件致病性，引起下列两种疾病,1.龋齿,常由变形链球菌引起,，,该菌为厌氧菌，粘附于牙齿表面,。,能分解蔗糖产生,高分子量、,粘性大,的,不溶性葡聚糖。能把细菌粘附在牙齿表面形成菌斑。除变形链球菌外，菌斑中细菌分解,多,种糖产酸，导致局部,牙,釉质脱钙形成龋齿,2.亚急性细菌性心内膜,当拨牙或摘除扁桃体时，寄居于口腔的甲型链球菌可乘机侵入血流，引起菌血症。若心瓣膜有损伤或先天性缺陷时,细菌可在损伤部位繁殖，引起炎症,由此菌引起的亚急性心内膜炎占全部病例,50%,