医学微生物学：30章 虫媒病毒.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,第,30,章,虫媒病毒,学习要求,1,）掌握流行性乙型脑炎病毒的致病性与免疫性（传染源、传播媒介、储存宿主、流行季节、临床特点、隐性传染与免疫性。,2,）熟悉流行性乙型脑炎病毒的形态与结构；标本采取、血清学诊断。,3,）了解其他病毒。,虫媒病毒（,Arboviruses,）,通过,吸血节肢动物,叮咬易感的脊椎动物而传播；,节肢动物既是病毒的,传播媒介,，又是,储存宿主,；,多为,自然疫源性疾病,，也是,人畜共患病,；,具有明显的,地方性,和,季节性,1992,年国际虫媒病毒中心登记,535,种,对人类致病的虫媒病毒,128,种,中国发现的虫媒病毒,9,种,其中引起流行的虫媒病毒,4,种,分离到的虫媒病毒,5,种,虫媒病毒的种类,黄病毒科、黄病毒属：,乙型脑炎病毒 脑炎,森林脑炎病毒 脑炎,西尼罗脑炎病毒 脑炎、肝炎,圣路易斯脑炎病毒 脑炎,登革病毒 登革热、登革出血热,黄热病病毒 肝炎、出血热,重要的虫媒病毒及其所致疾病,我国流行的虫媒病毒,乙型脑炎病毒,登革病毒,俄罗斯春夏脑炎病毒（森林脑炎病毒,）,第一节,乙型脑炎病毒,Japanese encephalitis virus,JEV,流行性乙型脑炎病毒,是引起流行性乙型脑炎（乙脑）的病原体。病毒经蚊媒介引起中枢神经系统的急性感染致病。为一种人和动物共患的自然疫源性疾病。流行于夏秋季节。,案 例,患者，男，,5,岁。,5d,前无明显诱因发热，伴有头痛乏力，喷射呕吐，,1d,前昏迷,于,2004,年,8,月,25,日入院。居住地为农村，从未接种疫苗，蚊虫较多。,查体,T 39.4,，,R 32,次,/,分，,P 112,次,/,分，,Bp 150/100mmHg,。昏迷状态，被动体位，面色潮红，呼吸急促，双瞳孔等大等圆，直径约,3mm,，对光反射迟钝，颈抵抗阳性，四肢肌张力较高，心肺无异常，腹平软，肝脾未触及，双膝反射未引出，布氏征阳性，角膜反射存在。,布鲁斯基,(,Brudzinski,),征：病人仰卧两下肢伸直，医生以手托起头部使其下颌接近前胸部，如颈部有抵抗及颈后疼痛感，同时两下肢髋关节反射性屈曲即为阳性。,克尼格,(,Kernig,),征：病人取仰卧位，一侧下肢屈髋屈膝均呈直角，医生以一手按握膝关节上方另一手托住足跟部并向上抬举使膝关节被动伸展,(,见图,),。正常人大腿与小腿可成角大于,135,。,如伸展小腿与大腿夹角小于,135,，或大腿后屈肌紧张有明显抵抗并伴有痛即为阳性。,辅助检查,血常规：,Hb,164 g/L,，,WBC 11,10,9,/L,，,N 0.8,，,PLT 115,10,9,/L,；脑脊液检查常规：微混，总细胞,500,10,6,/L,，白细胞,460,10,6,/L,，分类多核细胞,0.70,，单核,0.30,；生化：蛋白,558mg/L,，糖,3.48mmol/L,，氯,123.7mmol/L,；新型隐球菌（,-,），乙脑特异性抗体,IgM,（,+,）；,EB,病毒抗体,IgM,（,-,），柯萨奇病毒抗体（,-,），合胞病毒抗体,IgM,（,-,），单纯疱疹病毒,-I,型抗体,-,IgM,（,-,），单纯疱疹病毒,-,型抗体,IgM,（,-,），巨细胞病毒抗体,-,IgM,（,-,），自身抗体（,-,）；颅脑,CT,显示局限性低密度阴影。,思考题,:,1,可疑哪种病原体感染？其生物学特性怎样？,2,该病原体的传染源、传播途径、易感人群以及流行特征怎样？,3,该病原体的微生物学诊断及鉴别诊断方法有那些？,一、生物学性状,1.形态与结构,病毒分类：属黄病毒科、黄病毒属,病毒颗粒呈球形，直径,30,40,nm,有包膜,，,核衣壳呈二十面体立体对称,乙脑病毒电镜图,乙型脑炎病毒结构模式图,培养特性,能在白纹伊蚊,C6/36,细胞、,Vero,细胞、,BHK21,细胞中增殖,引起明显的细胞病变,最易感的动物是,乳鼠,只有一个血清型，较少变异,抵抗力,对脂溶剂敏感,不耐热,56 30 min、100 2 min,均可灭活,对化学消毒剂敏感，多种消毒剂可灭活,二、流行病学特征,传染源,主要是带毒的猪、牛、马、驴、羊等家畜和鸟类,幼猪,具有高的感染率和高滴度的病毒血症，是最 重要的传染源和中间宿主,病人的病毒血症短暂，且血中病毒滴度不高，,故,病人不是主要的传染源,蝙蝠亦可能为乙脑病毒的传染源,传播媒介,主要传播媒介是三节吻库蚊,感染的蚊子可带毒越冬并可经卵传代，因此蚊子不仅是传播媒介又是重要的储存宿主,流行特征,主要在亚洲的热带和亚热带国家和地区流行,我国是乙脑的主要流行区，除青海、新疆及,西藏外均有乙脑流行,流行季节与蚊子密度的高峰期一致，以夏、,秋季流行为主,易感人群主要是10岁以下的儿童,二、致病性与免疫性,致病性与免疫性,1,、传播媒介：,主要为三节吻库蚊、白蚊伊蚊,病毒,叮咬,蚊子,猪,、牛、羊、马,或家禽,病毒血症,更多蚊子,叮咬,叮咬,易感人群,乙型脑炎,幼猪是主要的,中间宿主和,传染源,传播媒介及长期,储存宿主,2,、致病机制,乙脑病毒,蚊叮咬,人体,绝大多数为隐性或轻型感染,血管内皮细胞、,局部淋巴结增殖,血流（一次病毒血症）,肝、脾等单核吞噬细胞增殖,血流（二次病毒血症）,少数人,病毒突破血脑屏障,脑组织内增殖引起脑实质及脑膜病变,引起脑炎症状,（高热、惊厥或昏迷等）,高热,剧烈头痛、频繁呕吐、颈项强直,昏迷,中枢性呼吸衰竭,脑疝,病死率：,10%,40%,后遗症：,5%,20%,，表现为痴呆、失语、瘫痪,乙脑的,临床特征,二、致病性与免疫性,致病机制,血脑屏障通透性增加：,病毒诱导单核巨噬细胞分泌某些细胞因子，使血,-,脑屏障通透性增加，易于侵入中枢神经系统,细胞因子释放增加：,病毒感染刺激免疫细胞释放,TNF,-,、,IL,、,IFN,等炎,症细胞因子，引起炎症反应和细胞损伤,免疫复合物介导的免疫损伤,二、致病性与免疫性,免疫性,感染后免疫牢固而持久,体液免疫起主要作用,IgM,中和抗体,:,感染后,1,周产生，,2,周达高峰,IgG,中和抗体：维持数年,血凝抑制抗体：感染后第,5,天出现，,2,周达高,峰，维持,1,年以上,特异性细胞免疫可阻止病毒侵入脑组织,二、致病性与免疫性,病毒入血,形成,两次病毒血症,绝大多数,-,隐形感染,仅有,0.1%,感染者发病,-,乙型脑炎,/,大脑炎,病死率,1040%,，幸存者,520%,有,后遗症,感染后可获得,持久免疫,，以中和抗体为主,三、微生物学检查法,乙脑病毒微生物学检验,标本：患者血液、脑脊液、尸检脑组织,动物接种：乳鼠脑内接种发病,细胞培养：原代地鼠肾细胞、鸡胚细胞红细胞吸附试验,抗原抗体检测：,采用免疫标记技术检测标本中抗原,采用双份血清检测特异性抗体,四、防治原则,防治原则,灭蚊防蚊：,是预防乙型脑炎的重要环节,人群免疫：,灭活疫苗和减毒活疫苗,对象主要为流行区,6,个月以上,10,岁以下的儿童,在流行前,1,个月开始，间隔,7,10,天复种,1,次，以后每年加强注射一次,免疫保护率：超过60%,动物宿主的管理：,幼猪的免疫接种,思考题,1.,试述在我国流行的虫媒病毒的种类及流行特点。,2.,试述虫媒病毒的共同特征。,3.,试述流行性乙型脑炎病毒的致病机制及防治措施。,出血热病毒,第,31,章,*,出血热（,Hemorrhagic fever,）,是一类疾病的统称。共同特征：“,3H”,症状,1.,发热（,hyperpyrexia,）,2.,出血（,hemorrhage,）：皮肤黏膜出现瘀点、瘀斑、不同脏器的损害。,3.,低血压（,hypotension,）低血压、休克,*,引起出血热的病毒种类较多，,它们分属于不同 的病毒科，我国已发现的主要有：,汉坦病毒,、登革病毒及克里米亚刚果出血热病毒。,汉坦病毒,第一节,*,汉坦病毒于,1978,年由韩国学者李镐汪等从疫区,黑线姬鼠肺组织中分离出，分类：,单分子负链,RNA,病毒目（,Mononegavira,d,e,）,布尼亚病毒科（,Bunyaviridae,）,汉坦病毒属,（,Hantavirus,）,汉坦病毒在临床上主要引起两种急性传染病：,*,肾综合征出血热,（,Hemorrhagic Fever with Renal Syndrome,，,HFRS,）,以发热、出血、肾功能损害和免疫功能紊乱为主 要特征。,*,汉坦病毒肺综合征,（,Hantavirus pulmonary syndrome,，,HPS,）,以肺浸润及肺间质水,肿，呼吸窘迫、衰竭为主要 特征。,汉坦病毒,（,Hantavirus,),的型别,汉滩病毒（,Hantaan,virus,）,HFRS,汉城病毒（,Seoul virus,）,HFRS,多布拉伐,-,贝尔格莱德病毒,HFRS,（,Dobrava,-Belgrade virus,）,普马拉病毒（,Puumala,virus,）,HFRS,泰国病毒（,Thailand virus,）,HFRS,希望山病毒（,Prospect virus,）？,索塔帕拉雅病毒（,Thottapalaym,virus,）？,辛诺柏病毒（,Sin,Nombre,virus,）,HPS,中国是世界上,HFRS,疫情最严重的国家,1.,流行范围广：,除青海和新疆外，其余各省、市、,自治区均有病例报告。,*,传染源和宿主动物广泛、可通过多种途径传播,*,多为野外感染，主要危害青壮年,*,缺乏特异有效的治疗药物,2.,发病人数多：,10,万人左右,/,年；,占全球总病例数,80%,以上。,3.,病死率较高：,5%10%,。,一、生物学性状,1.,形态结构,病毒体呈圆形或卵圆形，直径,75,210nm,，,有囊膜，囊膜上有突起。,病毒核酸为单股负链,RNA,（,-,ssRNA,），分,L,、,M,、,S,三个片段。,四种结构蛋白：核蛋白,N,、糖蛋白,G1,、,G2,和,RNA,依赖,RNA,聚合酶（,RdRp,）,汉坦病毒,颗粒模型,*,囊膜糖蛋白,G1,和,G2,：,分别为,70,kD,和,55,kD,。,有中和抗原位点和血凝抗原位点，能刺激机体 产生中和抗体，起保护作用，但免疫原性较弱。,*,核蛋白：,50,kD,。含量高，免疫原性强。氨基 端有多个线性抗原位点，对于维持完整核蛋白 的立体构象和抗原活性有重要作用；既有,T,细 胞识别的位点，也有中和抗原位点；能刺激机 体体液免疫和细胞免疫应答。,2.,培养特性及实验动物,*,多种细胞敏感，,一般不出现细胞病变，,需用免疫学方法检测证实,。,*,易感动物有多种,（主要为啮齿动物），,但除了小白鼠乳鼠感染后可发病及致,死外，其余均无明显症状。,*,病毒型别,据基因序列和抗原性可分为,14,个型别,与人类疾病关系密切的,6,种血清型是汉滩,病毒、多布拉伐,-,贝尔格莱德病毒、汉城病毒,、普马拉病毒、辛诺柏病毒和希望山病毒，,我国流行的是汉滩病毒和汉城病毒,3.,抗原性,4.,抵抗力,*,对酸（,pH 3,）和丙酮、氯仿、乙醚等脂溶剂敏,感；一般消毒剂如新洁尔灭等也能灭活病毒。,*,不耐热，,56,60 30,分钟可灭活病毒。,*,紫外线照射（,50 cm,、,1,小时）可灭活病毒。,二、流行病学特征,1.,传染源和宿主动物,*,多宿主性，主要为啮齿动物。,姬鼠属、家鼠,属、林平属、白足鼠属等为主要传染源。,*,我国主要是黑线姬鼠和褐家鼠；,主要存在着,姬鼠型（汉滩型）疫区、家鼠型（汉城型）,疫区和混合型疫区。,汉坦病毒的主要动物宿主和传染源,黑线姬鼠,2.,传播途径,尚未完全确定,*,动物源性传播：,呼吸道,消化道,破损皮肤,*,垂直（胎盘）传播,*,虫媒（螨）传播,3.,流行季节,四季均可发生，有明显的季节性流行高峰,*,姬鼠型疫区：,11,12,月、,6,7,月,*,家鼠型疫区：,3,5,月份,*,混合型疫区：,冬、春季均可出现流行高峰,中国,HFRS,宿主动物汉坦病毒型别的分布,汉坦病毒循环,鼠间存在着病毒的自然循环，人作为易感宿主偶然进入这个循环就会感染。,三、致病性与免疫性,三、致病性与免疫性,1,、致病性,汉坦病毒,人体,人体毛细血管及,免疫细胞损伤,汉滩病毒、汉城病毒、普马拉病毒,多布拉伐,-,贝尔格莱德病毒,HFRS,高热、出血、,肾脏损害、,免疫功能紊乱,辛诺柏病毒,黑港渠病毒病毒,HPS,双肺弥漫性浸润，间质水肿，,迅速发展为呼吸窘迫、衰竭。,三大主症,*,发热,*,出血,*,肾脏损害,五期经过,*,发热期,*,低血压期,*,少尿期,*,多尿期,*,恢复期,1.,临床表现,：,潜伏期短，起病急，发病快,流行性出血热的症状,潜伏期为,5,46,天，一般为,1,2,周。本病典型表现有 起病急，有发热（,38,40,）、三痛（头痛、腰痛、眼眶痛）以及恶心、呕吐、胸闷、腹痛、腹泻、全身关节痛等症状，皮肤粘膜三红（脸、颈和上胸部发红），眼结膜充血，重者似酒醉貌。,HFRS,的部分临床表现,:A:,结膜充血；,B:,牙龈出血；,C:,皮下出血；,D:,皮肤淤斑。,2.,发病机理,1,）汉坦病毒直接作用,靶细胞：,血管内皮细胞、,骨髓巨核细胞、,肝细胞、神经细胞、单核细胞,2,）免疫病理损伤（发病与机体免疫应答密切相关）,*,型变态反应,早期,IgE,和组胺，嗜碱性,粒细胞脱颗粒试验阳性,*,型变态反应,早期特异性抗体，免疫复,合物形成，沉积到小血管、毛细血管、红细胞、,血小板、肾小球、肾小管基底膜等，补体被激,活，促使肥大细胞及受损血小板释放血管活性,物质、凝血因子等参与血管扩张和通透性增加,的作用，引起血管和各组织的免疫病理损伤。,1,）人群易感性,*,普遍易感；,*,多呈隐性感染；,*,患者以青壮年为主。,3.,免疫性,2,）免疫特点,*,感染后免疫应答出现早、强；,*,以体液免疫（中和抗体）为主；,*,细胞免疫（包括细胞因子）起重要作用；,*,病后免疫力持久；,*,强烈免疫应答也参与致病,。,四、微生物学检查法,（一）病毒分离与抗原检测,四、微生物学检查：,标本,病人急性期血清,病死者脏器,感染动物肺、肾等,A,549,、,Vero-E,6,2BS,、,地鼠肾细胞,免疫荧光抗体,染色法检病毒抗原,（二）血清学诊断：,检测病人血清中,IgM,、,IgG,抗体的效价及其变化以辅助诊断。,五、防治原则,1.,预防,*,灭鼠、防鼠，灭虫、消毒和个人防护措施,*,疫苗：纯化乳鼠脑灭活疫苗（汉滩型）、,细胞培养灭活单价疫苗（汉滩型、汉城型）,和双价疫苗（汉滩型和汉城型,）。疫苗接,种人体后均可刺激产生特异性抗体，大规,模接种观察表明对预防,HFRS,有较好效果。,2.,治疗,*,以,“液体疗法”为主的综合对症治疗措施,*,“抗肾综合征出血热病毒单克隆抗体”,已完成三期临床试验，结果表明安全有效,思考题,1.,肾综合征出血热的流行有哪些特点？,关于乙型脑炎病毒，错误的是,A.,核酸类型为,+,ssRNA,，核衣壳呈,20,面体立体对称，具有包膜，能凝集鹅的红细胞,B.,猪,蚊,猪是主要病毒循环环节,C.,人被蚊叮咬后绝大多数出现显性感染,D.,在乙脑患者，存在两次病毒血症,E.,目前我国使用的乙脑疫苗是减毒活疫苗，人群接种后能有效预防本病,流行性乙型脑炎病毒的传播途径是,A,跳蚤叮咬,B,蜱叮咬,C,三节吻库蚊叮咬,D,螨叮咬,E,虱叮咬,预防乙脑的关键是,A,防蚊灭蚊,B,易感人群普遍接种疫苗,C,幼猪接种疫苗,D,隔离病人,E,使用抗病毒制剂,流行性乙型脑炎,病毒的传染源是,A,幼猪,B,三带喙库蚊,C,虱,D,蜱,E,螨,关于出血热病毒的特性，哪项是错误的,A,为有包膜的,DNA,病毒,B.,黑线姬鼠为主要传染源,C.,经呼吸道和消化道传播,D.,病后可获得牢固的免疫力,E.,可使用灭活疫苗进行预防,肾综合征出血热的病原体是,A,登革病毒,B,汉坦病毒,C,新疆出血热病毒,D,埃博拉病毒,E,刚果出血热病毒,HFRSV,的流行与哪种动物有关,A,鼠,B,猫,C,狗,D,猪,E,牛,控制,HFRSV,流行最重要的有效措施是,A,灭鼠,B,灭蚤,C,灭蚊,D,防蜱叮咬,E,使用特异性疫苗,