动物细胞培养和核移植技术000001.pptx

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,专题,2,细胞工程,动物细胞工程,动物细胞工程的技术手段,动物细胞工程技术的基础,动物细胞培养,常用技术手段,动物细胞工程,动物细胞培养,动物细胞融合,生产单克隆抗体,动物细胞核移植,2010,年,10,月,22,日，,Selina,在上海拍摄新版电视剧,我和春天有个约会,时意外受伤，其背部和四肢被诊断为,54%,三度灼伤。,Selina,出院，短发亮相的她增胖,5,公斤已做,3,次植皮手术。,新闻播报：,2.2.1,动物细胞培养,和核移植技术,一,.,动物细胞培养,从动物机体中取出,相关组织,，将它们分散成,单个细胞,，然后放在适宜的,培养基,中，让这些细胞,生长和增殖,。,(,一,),概念：,（二）原理：,（三）过程：如何进行细胞培养,?,细胞增殖,（有丝分裂）,请同学们结合图,2-16,，阅读课本后，简述动物细胞培养的基本过程？,定义：,人们通常将动物组织,消化后,的,初次培养,称为原代培养。,胰蛋白酶处理,取出组织,胚胎或幼龄动物器官、组织,剪碎,单个细胞,细胞悬液,转入培养瓶内培养,原代培养,细胞贴壁、接触抑制,原代培养的特点：,使细胞与培养液充分接触,细胞分化程度低，分裂能力强。,细胞贴壁过程,细胞贴壁：,在培养瓶悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。,培养瓶或培养皿壁要求：,表面光滑、无毒、易于贴附。,当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。,接触抑制,定义：,贴满瓶壁的细胞用,胰蛋白酶,处理,然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖，,这个过程称,传代培养,.,（,分瓶培养的过程,）,传代培养,结果：,（动物细胞培养不能最终培养成生物体）,细胞群，细胞产物,Q1,、为什么传代培养的细胞一般传至,10,代后就不易传下去？,细胞会随着分裂次数的增多，而逐步衰老、死亡。,细胞一般传至,10,代,左右就会,衰老死亡,细胞传至,10,50,代，部分细胞的,细胞核型可能发生变化,，有少部分还发生突变向癌细胞方向发展。,Q2,、有无,50,代后继续增殖的可能？,一般使用或冷冻保存的正常细胞都是,10,代以内的,（因为细胞内保持了正常的,二倍体核型,）,Q3,、人们通常保存哪种类型的细胞？,小结：动物细胞培养过程：,动物组织块（幼龄动物）,细胞悬液,胰蛋白酶,原代培养,单个细胞,加培养液,原理：,细胞增殖（有丝分裂）,结果：,细胞群，细胞产物,剪碎,传代培养,部分细胞无限传代,分瓶培养,加,胰蛋白酶,（动物细胞培养不能最终培养成生物体）,多细胞动物和人体的细胞都生活在,内环境,中，根据你所学的知识，认为体培养细胞应该模拟内环境的哪些内容呢？,（四）动物细胞培养需要的条件：,1,、无菌、无毒,2,、全部的营养物质,3,、适宜的温度和,PH,值,4,、必要的气体条件,36.50.5,度,7.2-7.4,1),无菌处理；,2),添加抗生素；,3),更换培养液，清除代谢产物,液体合成培养基：（,糖、氨基酸）、促生长因子、（水、无机盐、微量元素）,等；通常还需加入,血浆、血清等,天然成分。,O,2,、,CO,2,（,95,空气,+5,CO,2,）,O,2,是细胞代谢必须的；,CO,2,维持培养液的,PH,。,（五）动物细胞培养技术的应用,大规模的生产有重要价值的生物制品,如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体,为基因工程技术提供受体细胞,培养健康细胞用于烧伤病人皮肤移植,有毒物质的检测,细胞的生理、药理、病理研究,如用于筛选抗癌药物等，为治疗和预防癌症及其他疾病提供依据,获得细胞,细胞的全能性,细胞或细胞产品,新的个体或细胞产品,培养结果,或细胞产物,快速繁殖、培育无病毒植株等,培养目的,营养物质、动物血清,营养物质、植物激素,培养基特有成分,液体培养基,固体培养基,培养基性质,细胞增殖,原 理,动物细胞培养,植物组织培养,比较项目,植物细胞和动物细胞培养的比较,二,.,动物细胞核移植技术和克隆动物,将动物的一个细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成为一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体（克隆动物）。,分,类,胚胎细胞核移植,：,体细胞核移植,：,细胞分化程度低，恢复全能性容易；,细胞分化程度高，恢复全能性不容易,1.,动物细胞核移植概念：,2.,体细胞核移植的过程：,（,难度高,）,原理：,动物细胞核的全能性,取供体细胞传代培养,10,代以内的细胞,.,为什么？,用的是去核的减数第二次分裂中期细胞（,M,中期,）为什么？,激活方法：,激活目的：,促融方法：电刺激,胚胎移植至代孕受体内,妊娠、分娩,供体：优质高产奶牛,受体：普通奶牛（卵母细胞的采集与培养）,1.,体积大，易操作,营养物质丰富。,2.,含有促使细胞核表达全能性的物质。,有人说它三个母亲，对吗？,10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型,卵细胞,母绵羊,母绵羊,乳腺细胞,细胞质,细胞核,细胞核移植,早期胚胎,卵裂,C,母绵羊子宫（代孕母体）,胚胎移植,多莉羊,分娩,妊娠,多莉羊的培育过程,重组细胞,3.,体细胞核移植技术的应用前景：,1.,加速家畜遗传改良的进程,2.,保护濒危物种,3.,生产医用蛋白质及组织器官的移植,4.,了解胚胎发育和衰老过程；追踪研究疾病的发展过程和治疗疾病,3,、体细胞核移植技术存在的问题,P50,（,1,）成功率非常低,（,2,）克隆动物以表现早衰、生理缺陷等健康问题。,成功率低，绝大多数克隆动物存在健康问题并表现出遗传和生理缺陷：如体型过大，异常肥胖，发育困难，脏器缺陷，免疫失调等。,2.2.1,动物细胞培养和核移植技术,一、,动物细胞培养,概念、原理、过程、应用,二、动物细胞核移植技术,概念、原理、过程、应用,1.,下列属于动物细胞培养与植物组织培养主要区别的是,A.,培养基成分不同,B.,动物细胞培养不需要在无菌条件下进行,C.,动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能,D.,动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株,2.,在克隆多利羊的过程中，下列哪项技术没有运用到,A.,细胞培养技术,B.,细胞核移植,C.,胚胎移植技术,D.,基因工程技术,A,D,08,年宁夏卷,回答下列有关动物细胞培养的问题：,在动物细胞培养的过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面,时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的,。此时，瓶壁上形成的细胞层数是,，要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的是,。,随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现,的现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成,细胞，该种细胞的黏着性,，细胞膜表面蛋白质（糖蛋白）的量,。,相互接触,单层,胰蛋白酶,衰老甚至死亡,接触抑制,不死性,降低,减少,检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到,期的细胞用显微镜进行观察。,在细胞培养过程中，通常在,条件下保存细胞，因为在这种条件下，细胞中,的活性降低，细胞的,速率降低。,给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作,进行攻击。,中,冷冻,酶,新陈代谢,抗原,二、,动物细胞,核移植技术和克隆动物,1,、离体的,植物组织或细胞,完整的植株,技术,植物组织培养,原理：,植物细胞的全能性,2,、离体的,动物组织或细胞,完整的动物体,技术,核移植,原理：,动物细胞核的全能性,1,、植物组织培养技术：,原理：,过程：,2,、植物体细胞杂交技术：,原理：,过程：,3,、动物细胞培养技术：,原理：,过程：,细胞的全能性,脱分化、再分化,细胞膜的流动性和细胞的全能性,原生质体融合和植物组织培养,细胞增殖,原代培养和传代培养,