小白鼠缺氧耐受性试验.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,小白鼠几种类型的缺氧,辽宁医学院 叶丽平,相关知识复习,缺氧的概念,缺氧的分类及各类的缺氧机制,5.,细胞内氧化代谢,外呼吸,内呼吸,气体运输,乏氧性,血液性,循环性,组织性,缺氧类型,供氧,用氧,实验目的,复制,乏氧性,、,血液性,和,组织性,缺氧,动物模型，掌握缺氧的分类；,观察不同类型缺氧时,呼吸、皮肤粘膜颜色,的变化，了解 解救措施；,了解,成年、新生小鼠,对,缺氧耐受性的差异,，并分析机制。,实验动物,成年小白鼠（,7,只）,新生小白鼠（,1,只）单独放置,实验器材和药品,缺氧瓶,+,软胶塞，,CO,中毒瓶,+,解救瓶、烧杯,钠石灰，铁纱网，镊子，注射器，,氧气，,CO,，,5,亚硝酸钠,1,美兰,0.1,氰化钾,10,硫代硫酸钠，生理盐水,实验步骤,乏氧性,缺氧,一氧化碳中毒性,缺氧,亚硝酸钠中毒性,缺氧,氰化物中毒性,缺氧,动物尸检,成年,小白鼠,新生,小白鼠,步骤,1,观察正常状态,一般指标,(,呼吸频率,口唇颜色,),步骤,2,缺氧瓶,+,钠石灰,+,成年鼠,+,铁网包裹乳鼠,观察指标,呼吸频率,(,次,/10,秒,每隔,3,分钟观察,),、,口唇、皮肤颜色、存活时间、肝脏颜色,1.,乏氧性缺氧,呼吸频率观察小白鼠,腹部的起伏,实验中尽量,减少对小白鼠的刺激,2.,CO,中毒性缺氧,小白鼠,A(,中毒,),小白鼠,B(,中毒解救,),步骤,1,观察正常状态，一般指标,步骤,2,放入,中毒瓶,放入,中毒解救瓶,步骤,3,注入,3 ml,CO,注入,3 ml,CO,步骤,4,软瘫后立即输入,O,2,观察,指标,呼吸频率,(,次,/10,秒,每隔,3,分钟观察,),，,口唇、皮肤颜色、存活时间、肝脏颜色,3.,NaNO,2,中毒性缺氧,小白鼠,A(,中毒,),小白鼠,B(,中毒解救,),步骤,1,分别用烧杯罩住，观察正常状态及一般指标,步骤,2,背部皮下注射,0.3ml NaNO,2,背部皮下注射,0.3ml NaNO,2,步骤,3,腹腔注射,0.3ml,生理盐水,腹腔注射,0.3ml 1,美兰,观察,指标,呼吸频率,(,次,/10,秒,每隔,3,分钟观察,),口唇、皮肤颜色、存活时间、肝脏颜色,防止美兰沾到身体、衣物及地面,4.,氰化物,中毒性缺氧,小白鼠,A(,中毒,),小白鼠,B(,中毒解救,),步骤,1,分别用烧杯罩住，观察正常状态一般指标,步骤,2,背部皮下注射,0.3ml KCN,背部皮下注射,0.3ml KCN,步骤,3,腹腔注射,0.4ml,生理盐水,腹腔注射,0.4ml,Na,2,S,2,O,3,观察,指标,呼吸频率,(,次,/10,秒,每隔,3,分钟观察,),口唇、皮肤颜色、存活时间、肝脏颜色,防止,KCN,沾到身体、衣物及地面,动物尸检,观察对象,实验,1,、,2,、,3,、,4,中的小鼠,观察指标,1,皮肤颜色,观察指标,2,肝脏颜色（剖腹）,血液颜色,实验结果,缺氧类型,缺氧前,缺氧后,存活,时间,肝脏,颜色,R,(,次,/10,秒,),皮肤口,唇颜色,3,6,9,乏氧性缺氧,成,幼,CO,中毒,A,B,NaNO,2,中毒,A,B,KCN,中毒,A,B,小鼠捕捉技巧,右手抓鼠尾略向后拉,左手的拇指和食指抓住小鼠两耳后项背部皮毛,无名指及小指夹住鼠尾,左手翻转使鼠腹部朝上，头略朝下,小白鼠的捉拿方法,三通管的使用,腹腔注射,鼠头朝下,针头倾斜,45,度,不要太靠近中线,针头尖向下,避开肝脏和膀胱,图,2,小白鼠的腹腔注射,皮下注射,实验结果,缺氧类型,缺氧前,缺氧后,存活,时间,肝脏,颜色,R(,次,/10,秒,),皮肤口,唇颜色,3,6,9,乏氧性,缺氧,成,幼,CO,中毒,A,B,NaNO,2,中毒,A,B,KCN,中毒,A,B,一、乏氧性缺氧,钠石灰有何作用？,成鼠、幼鼠哪个存活时间长？为什么？,小白鼠呼吸频率有何变化？为什么？,小白鼠是否出现发绀？什么叫发绀,?,实验分析,1.,钠石灰,=CaO+NaOH,吸收,CO,2,消除,CO,2,对实验的影响,2.,成鼠、幼鼠哪个存活时间长？为什么？,幼鼠,新陈代谢低，耗氧量少,，相对成鼠需氧量少；,幼鼠呼吸中枢发育不完善，对,缺氧不敏感,；,幼鼠,Hb,含量高,，相对不易缺氧；,幼鼠主要,靠糖酵解供能,，成鼠主要以有氧呼吸供能，故幼鼠需氧少。,呼吸频率变化 先加快，后减慢，最后死亡,PaO,2,呼吸中枢,(+),，呼吸深快,化学感受器,(+),颈动脉体,主动脉体,呼吸中枢,(-),呼吸减慢,PaO,2,4.,乏氧性缺氧时，,毛细血管,中氧合,Hb,减少，脱氧,Hb,浓度增多,超过,5g/dL,以上，可使皮肤与粘膜呈青紫色，称发绀。,二、,CO,中毒性缺氧,CO,中毒性缺氧属于哪种类型的缺氧,?,什么叫血液性缺氧,?,CO,中毒性缺氧的发生机制是什么,?,樱桃红色是哪种物质的颜色,?,失去携氧能力,CO,Hb HbCO (,樱桃红色,),与,1,个血红素结合，其余对氧亲和力,CO,中毒机制,抑制,RBC,糖酵解，,2,3-DPG,氧离曲线左移,亲和力,释氧,亲和力高,三、,NaNO,2,中毒性缺氧,属于哪种类型的缺氧,?,发生机制是什么,?,注射美兰的小白鼠是否存活，为什么,?,4.,咖啡色是哪种物质的颜色,?,不能 携氧,其余,Fe,2+,-O,2,亲和力,Hb-Fe,3+,-,OH,氧化剂,硝酸盐,亚硝酸盐,肠道 细菌,(,棕褐色,),高铁血红蛋白血症,Hb-Fe,2+,氧离曲线左移,释氧,还原剂,四、,KCN,中毒性缺氧,1.,属于哪种类型的缺氧？,2.,发生机制是什么,?,3.,注射,Na,2,S,2,O,3,的小白鼠是否存活？为什么？,4.,玫瑰红色是怎样产生的,?,KCN,与,氧化型细胞色素酶,的三价铁结合为,氰化高铁细胞色素氧化酶,，使之,不能还原,成还原型细胞色素氧化酶，呼吸链中断，组织细胞不能利用氧。,cytaa,3,Fe,3+,cytaa,3,Fe,3+,-CN,CN,-,+,氧化型,氰化高铁细胞色素氧化酶,cytaa,3,Fe,2+,还原型,3,、存活,机制：,Na,2,S,2,O,3,与,KCN,生成,无毒的硫氰酸钠，随尿液排出体外；,4,、小白鼠皮肤粘膜、肝脏呈玫瑰红色。,因为组织利用氧障碍,毛细血管中的,HbO,2,含量增加,皮肤粘膜,呈玫瑰红色。,实验结论,低张性缺氧时呼吸频率先 后 ；其他类型缺氧时呼吸频率持续；,新生小白鼠的耐缺氧能力强于成年小白鼠；,美兰对,NaNO,2,中毒有解救作用；,Na,2,S,2,O,3,对,KCN,中毒有解救作用；,