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课后定时检测案42 基因工程
[基础对点练]——考纲对点·夯基础
1.下列关于基因工程的叙述,错误的是( )
A.目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物
B.限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶
C.人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性
D.载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达
2.在DNA的粗提取实验中,对DNA提取量影响较小的是( )
A.使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂并释放出DNA等核物质
B.搅拌时要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动
C.在析出DNA黏稠物时,要缓缓加入蒸馏水,直至黏稠物不再增多
D.要用冷酒精沉淀DNA,甚至可将混合液再放入冰箱中冷却
[提能强化练]——考点强化·重能力
3.[经典高考]北极比目鱼中有抗冻基因,其编码的抗冻蛋白具有11个氨基酸的重复序列,该序列重复次数越多,抗冻能力越强,下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图,有关叙述正确的是( )
A.过程①获取的目的基因,可用于基因工程和比目鱼基因组测序
B.将多个抗冻基因编码区依次相连形成能表达的新基因,不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白
C.过程②构成的重组质粒缺乏标记基因,需要转入农杆菌才能进行筛选
D.应用DNA探针技术,可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达
[大题冲关练]——综合创新·求突破
4.[2022·广东汕头市高三三模]叶绿体基因工程是指向叶绿体基因组中引入外源目的基因,并使之表达。Rubisco酶(简称R酶)是光合作用中CO2固定的关键酶,深红红螺菌的R酶活性是一般植物的4倍。科学家尝试将该菌的Rubisco基因(简称R基因)导入玉米叶绿体,提高玉米R酶活性,进而提高玉米光合能力。RbcL基因位于叶绿体DNA上,其产物参与光合作用过程。
(1)在构建基因表达载体中,使用了玉米叶绿体特异性基因RbcL基因的启动子和终止子, 其目的是 。在构建该表达载体时,需要使用的工具酶有 。
(2)科学家试图修改R基因中部分碱基,以改变R酶部分氨基酸序列,以进一步提高R酶的活性,该操作属于 工程。
(3)获得成功转化R基因的玉米细胞,利用植物组织培养技术获得转基因植株其中使用到三种培养基主要激素配方如下(NAA是一种生长素类似物,6-BA是一种细胞分裂素)。其中培养基A主要作用是 ,诱导培养物生根的培养基编号为 。
培养基编号
A
B
C
NAA(mg/L)
0.5
0.05
0.1
6-BA(mg/L)
0.5
2.5
0.05
5.[2022·天津高三三模]针对新冠病毒(SARS-CoV-2)的重组蛋白疫苗、核酸疫苗(包括 DNA疫苗和 RNA疫苗)等疫苗都在研发当中。下图为其中一种疫苗的研发思路,图中①~⑦表示过程,箭头表示NcoⅠ、SphⅠ、NheⅠ、BamHⅠ的酶切位点(四种酶的识别序列详见表),标记基因SUC2控制合成蔗糖酶,使 P型酵母菌能利用培养基中的蔗糖生存。
(1)图中①过程需要使用 酶先得到cDNA,再使用 技术扩增得到S基因。
(2)为使③过程顺利进行,需先使用限制酶 和 切割质粒B,选用两种限制酶对新冠病毒的S基因进行切割的目的是_________________________________________________________________________________________________________________________________________(答出1点即可)。
(3)图中表示筛选的过程是 (填编号),为达到利用标记基因筛选的目的,普通的P型酵母菌应该满足的条件是
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(4)重组疫苗注入志愿者体内后,S蛋白基因指导合成的S蛋白作为 ,刺激机体产生能与之相结合的抗体,抗体的分泌量可作为检测疫苗对志愿者免疫效果的指标。参加临床试验的志愿者需要满足的条件之一是 (选填“有”或“无”)SARS-CoV-2感染史,理由是
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6.[2022·辽宁沈阳市高三三模]绞股蓝细胞中含有抗烟草花叶病毒(TMV)基因,能合成抗TMV蛋白,使绞股蓝叶片能抗TMV感染。科研人员利用转基因技术将绞股蓝细胞中的抗TMV基因转入烟草细胞,培育出了抗TMV的烟草,主要流程如图所示。请分析下图并回答问题:
(1)从绞股蓝细胞中提取抗TMV基因转录的RNA,合成目的基因。过程①需要的酶是 。利用PCR技术扩增目的基因时,反应体系中除有缓冲液、原料(dNTP)、目的基因外,还应含有 。
(2)由①获得的目的基因在构建表达载体时,应在目的基因的首端和尾端分别添加 ,同时为了与表达载体连接,通常在两端插入不同的限制性酶切位点,主要原因是 。由图可知,在过程③中应将目的基因插入Ti质粒的T-DNA上,同时该片段中还应有 抗性基因。
(3)将含抗TMV基因的烟草细胞经⑤获得再生植株的生物技术是 。这项技术不仅能实现快速繁殖作物还能保持优良品种的 。
(4)过程⑥在个体生物学水平鉴定,需要做 实验,可检测植株是否具有抗性以及抗性的强度。
7.超量表达P蛋白转基因玉米的获得与鉴定。
在超量表达P基因载体的构建中,所用DNA片段和Ti质粒的酶切位点如图1所示,P蛋白在玉米株系的表达量如图2所示。
回答下列问题:
(1)强启动子是一段有特殊结构的DNA片段,能被 识别并结合,驱动基因的持续转录。为使P基因在玉米植株中超量表达,应优先选用 酶组合,将片段和Ti质粒切开后构建重组表达载体。TDNA在该实验中的作用是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。
(2)据图2分析,选择a1、a2、a3玉米株系,作为超量表达P蛋白转基因玉米的生理特性研究的实验材料,理由是
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