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学科评审组: 植物保护学

教育厅编号:

安徽省高等学校省级自然科学研究项目
申 请 书

项目名称: 微囊藻藻胆蛋白光活化杀虫剂研究
申 请 者: 黄蓓
所在单位: 安徽大学
邮政编码: 230039
通讯地址: 合肥 肥西路3号 安徽大学龙河校区
电 话:
传 真:
申请日期: 2025年3月26日

安 徽 省 教 育 厅
二〇一〇年制

填 表 说 明

一、 填写申请书前, 请先查阅安徽省教育厅科研项目申请措施及要求。申请书各项内容要实事求是, 逐条认真填写。表示要明确、 严谨, 字迹要清楚易辨。外来语要同时用原文和汉字表示。第一次出现缩写词, 须注出全称。
二、 申请书打印时用A4纸, 于左侧装订成册。报送原件一份。
三、 封面右上角学科评审组由申请者选择填写, 教育厅编号由教育厅统一填写。

申请者承诺:

我确保上述填报内容真实性。假如取得资助, 我与本项目组组员将严格遵守安徽省教育厅科研项目管理相关要求, 切实确保研究工作时间, 按计划认真开展研究工作, 按时报送相关材料。

申请者（签章）
2025年3月26日

项目名称
微囊藻藻胆蛋白光活化杀虫剂研究
项目类别
B
A、 重大项目 B、 关键项目 C、 通常项目 D、 自筹经费
E、 专题研究任务
是否产学研项目
否
是 、 否
学 科
2106060
研究类型
B
A、 基础研究 B、 应用基础研究C、 应用研究
责任人姓名
黄蓓
性别
女
民族
汉
出生日期
1963-02
行政职务
试验室主任
专业职务
教授
研究专长
细胞生物学
最终学历
博士硕士
最终学位
博士
担任导师
硕导
起止年月
-01 至 -12
电子邮件

工作单位
安徽大学
联络电话

通讯地址
合肥 肥西路3号 安徽大学龙河校区
邮政编码
230039
关键参与者
姓 名
性别
出生
日期
专业职务
研究专长
学历
学位
工作单位
签字
陆合文
男
1969-07
工程师
农药配方
大学本科
学士
安徽陆野农化责任有限企业

李玉成
男
1963-02
教授
环境学
博士硕士
博士
安徽大学资环学院

刘凤才
男
1977-09
工程师
提取工艺
大学本科
学士
安徽陆野责任有限企业

汪宇
男
1987-07
研究实习员
细胞生物学
硕士硕士
学士
安徽大学生命科学学院

武子涵
女
1988-01
研究实习员
生物技术
硕士硕士
学士
安徽大学生命科学学院

梁杰
男
1988-01
研究实习员
细胞生物学
硕士硕士
学士
安徽大学生命科学学院

预期结果
申请发明专利2项, 发表研究论文2篇以上
申请经费(单位: 万元)
5

研究内容和意义
摘

要
巢湖水华蓝藻95%以上是铜绿微囊藻, 含有丰富藻胆蛋白, 关键含藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白, 其中, 藻蓝蛋白（含四吡咯结构藻蓝素）占90% 以上百分比, 含有很强光吸收与电子传输效率, 含有光敏剂优良特征。
本试验拟经过抽提、 粗过滤、 微滤、 超滤脱毒、 低温静置离心、 真空干燥等提取纯化方法从干化处理后微囊藻中分离出藻胆蛋白, HPLC检测藻毒素含量, 并对其光动力学杀伤效果（PDT）进行体外培养细胞学检测, 流式细胞仪进行细胞周期、 凋亡分析; 然后, 将藻胆蛋白混入培养基喂养果蝇, 经光照处理后观察其对成虫、 幼虫体长、 存活率及繁殖率影响, 荧光显微镜观察藻蓝蛋白在体内分布吸收情况, 电镜检测PDT对器官组织影响, 并与光活化染料赤鲜红B（EB）、 四吡咯光敏剂Photofrin进行比较; 在实蝇杀虫剂配方研制方面, 有针对性地选择实蝇饵料、 并进行藻胆蛋白与实蝇饵料配比及实蝇光活化杀虫效果试验, 为微囊藻藻胆蛋白作为光敏杀虫剂这种"绿色农药"应用奠定基础。

填 写 简 表 注 意 事 项

一、 简表内容将输入计算机, 必需逐项认真填写, 采取国家公布标准简化汉字。
二、 凡选择性栏目, 将对应提醒符A、 B等之一填入该栏。
三、 部分栏目填写要求:
项目名称: 应正确反应研究内容和范围, 最多不超出40个汉字（含标点符号）。
基础研究: 拟以认识自然现象、 探索自然规律为目, 不直接考虑应用目标研究活动。
应用基础研究: 指有广泛应用前景, 但以获取新原理、 新技术、 新方法为关键目研究。
应用研究: 为某种具体实用目标提供技术管理、 方法和路径研究。
学 科: 填报到三级学科。
申请经费: 以万元为单位, 用阿拉伯数字表示, 注意小数点。
起止年月: 起始时间从第二年1月算起, 终止时间为完成年度12月。
关键参与者: 指在项目组内对学术思想、 技术路线制订、 理论分析、 对 项目完成起关键作用人员, 本人应在申请书上署名。
研究内容和意义: 写出小于1000字摘要。

一、 立论依据
（包含项目研究意义和必需性、 中国外研究现实状况和发展趋势分析, 并附关键参考文件及出处。产学研项目还要填写对项目及产品基础情况介绍, 包含项目产品关键应用范围、 技术创新点、 项目成熟程度、 项目完成时所处阶段等内容介绍。字数不限）

光活化杀虫剂是近几年发展起来一个新型、 高效、 低毒农药, 这类农药特点是在生物环境中无所不在自然因子一光和氧作用下能极大地提升其毒杀害虫效果。它含有传统杀虫剂无法比拟优点, 所以被大家冠以“绿色农药”美称。
焰红染料B 及其同荧光素钠混配农药制剂(Sure dye)已在美国取得专利保护。Sure dye 饵制剂已在危地马拉被用于防治地中海实蝇。现在赤藓红 B 作为杀家蝇幼虫药剂已在美国环境保护局获准登记 ,实现了商品化。对服食赤藓红 B (500 — mgPmL) 实蝇光照 6h后 ,死亡率伴随给药剂量增加和光照时间延长而增加。
尽管很多染料对蚊蝇有很强杀虫活性 ,不过它们对有脊椎动物毒性却不尽如人意。一个家蝇田间搜集品系在摄食浓度增加、 光接触5小时选择压力下 ,代后抗性展现48倍。所以, 天然产物起源光敏剂研制越来越受到大家关注。
本课题组研究发觉, 起源于蓝藻藻胆蛋白在辅助激光照射后产生活性氧等自由基, 每2-3个自由基可杀伤1个细胞。因为其安全性高, 其作为“绿色农药”研发意义重大。

1．1水华蓝藻蛋白及藻毒素介绍
水华蓝藻是指水体富营养化造成异常繁殖生长浮游水生植物。通常引发水华爆发蓝藻是微囊藻。水华微囊藻关键种类有铜绿微囊藻（Microcystis.aeruginusa）、 绿色微囊藻（M.viridis）、 惠氏微囊藻(M.wesenbergii)、 水华微囊藻(M.flosaguae)、 害鱼微囊藻(M.ichthyoblabe).其中, 以铜绿微囊藻最为常见。
微囊藻中最常见细胞内毒素为环肽类素微囊藻毒素（microcystin,MC）, 又称肝毒素。现在, 最少有60多个异构体被分离, 存在最普遍、 含量较高、 毒性较大有MC-LR、 RR、 YR, 其中, L、 R和Y分别为亮氨酸、 精氨酸、 酪氨酸[1]。WHO《饮用水卫生基准》中将水中MC-LR安全限值暂定为1μg／l; 同时, 暂定微囊藻毒素许可日摄取量安全限值为0.04μg／(kg·d)
微囊藻中藻胆蛋白含量可达细胞干重10%～20%.藻胆蛋白是藻类中捕光色素蛋白总称, 其关键功效作为辅助色素提升光合作用电子传输效率。Shirley Paps等人研究表明: 微囊藻藻胆蛋白关键为C-PC和APC, 其中, C-PC占90% 以上百分比。

沈强等人采取从昆明滇池机械收获产毒水华蓝藻为材料, 经过采取抽提、 粗过滤、 微滤、 超滤脱毒(截留分子量100kda)、 低温静置离心、 真空干燥等提取纯化方法, 从1kg微囊藻粉中制备纯度(A620／A280)高达1.8057g藻蓝蛋白干粉, 小鼠急性毒性试验显示, 纯化藻蓝蛋白无毒性[2]; ID50大于3.71g/kg, 而对照原料藻粉ID50为0.10g/kg, 并初步经过食品安全性毒理学评价程序。
1.2 藻蓝蛋白结构与色基光谱特征
1.3 藻胆蛋白光敏作用与活性氧
1．5四吡咯化合物光动力灭蝇效果
1.7 本项目研究目与意义

本试验拟在不一样时间段采集微囊藻, 经过对藻胆体密度分析及藻胆蛋白含量测定, 确定微囊藻最好采集时间; 对经脱毒处理分离出藻胆蛋白、 多聚体及单体稳定性、 光谱特征、 作为光敏剂在分子水平及细胞水平诱导产生活性氧ROS量进行分析, HPLC检测藻毒素含量, 并对其光动力学杀伤效果进行体外培养细胞学检测。然后, 将藻胆蛋白混入培养基喂养果蝇, 依据藻蓝蛋白能够被诱发产生荧光特征, 用荧光显微镜观察藻蓝蛋白在体内分布吸收情况, 确定给药时间; 经光照处理后观察其对成虫、 幼虫体长、 细胞分裂指数、 存活率及繁殖率影响, ELISA方法检测藻毒素在果蝇体内含量, 并与光活化染料赤鲜红B(EB)、 四吡咯光敏剂Photofrin进行比较, 为微囊藻合理利用, 以及作光敏杀虫剂、 荧光探针等奠定理论基础。

关键应用范围: 藻胆蛋白可溶性粉剂可用于实蝇防治

技术创新点:

项目成熟程度:

项目完成时所处阶段等内容介绍

参考文件

二、 研究方案
1、 总体思绪、 研究目标、 研究内容和拟处理关键问题（分段论证, 字数不限, 可加页）
（产学研项目还要填写:
（1）项目依据技术原理, 包含文件、 专利, 或发明等;
（2）中国外相关技术研究、 开发觉实状况介绍、 分析;
（3）采取现有成熟关键技术、 已攻克关键技术、 待研究关键技术等;
（4）估计项目完成时计划处理关键技术及达成技术性能指标、 实现质量标准类型、 标准名称。指标要尽可能量化, 该指标为验收考评指标）

1.1总体思绪:
为有效地利用微囊藻藻蓝蛋白, 本项目拟在不一样时间段搜集蓝藻, 确定含高藻胆蛋白及低藻毒素采集最好条件; 在藻蓝蛋白分离纯化过程中伴随藻毒素检测。经过在细胞水平对藻胆蛋白光敏作用产生活性氧ROS产率、 对培养果蝇细胞、 幼体、 成体成活率、 繁殖率检测, 找到藻蓝蛋白光敏剂抑制果蝇生长最好剂量与光照条件。经过对PDT作用后细胞周期及形态学分析, 了解微囊藻藻蓝蛋白光敏作用机理; 利用藻蓝蛋白可被光激发而产生红光特征, 观察其在昆虫各组织代谢及分布规律; 同时, 选择多个实蝇进行藻胆蛋白与饵料配方试验, 为微囊藻藻胆蛋白光敏杀虫剂大田试验奠定基础。

1.2 研究目标
(1) 搞清光照强度对微囊藻藻胆蛋白及藻毒素含量影响, 确定含高藻胆蛋白及低藻毒素采集最好条件。
(2) 经过对活性氧ROS产率、 果蝇细胞、 幼体、 成体成活率、 繁殖率及细胞形态学分析, 找到藻蓝蛋白光敏剂抑制果蝇生长最好剂量与光照条件。
（3）优化藻胆蛋白与实蝇进行饵料配方, 为藻胆蛋白光敏杀虫剂田间试验奠定基础。

1.3 研究内容
（1）在不一样时间段搜集巢湖微囊藻, 经过藻胆体在细胞内密度分布、 藻毒素含量检测, 确定微囊藻采集最好条件。
(2) 优化微囊藻藻胆蛋白分离及除去藻毒素方法, 并对微囊藻C-PC稳定性、 光谱特征、 得率进行分析。
(3) 藻胆蛋白光敏剂抑制果蝇细胞生长久有效果检测（细胞水平）
以光活化染料赤鲜红B(EB)、 四吡咯光敏剂Photofrin为对照, 检测微囊藻C-PC PDT作用对昆虫细胞生长抑制率, 确定IC50。荧光显微镜进行细胞凋亡观察, 流式细胞仪检测PDT作用后细胞凋亡率, 同时, 合适添加微量藻毒素, 观察其对细胞毒性及对藻蓝蛋白光敏作用影响。
（4）果蝇在体试验: 将藻蓝蛋白混入培养基喂养果蝇, 依据藻蓝蛋白能够被诱发产生荧光特征, 用荧光显微镜观察藻蓝蛋白在体内分布吸收情况, 确定给药时间; 经光照处理后观察其对成虫、 幼虫存活率及繁殖率影响。
（5）针对多个实蝇, 进行藻胆蛋白与饵料及荧光增敏剂配方试验, 在野外检测其杀虫效果。

1.4 拟处理关键科学问题
,
1.5项目依据技术原理, 包含文件、 专利, 或发明等

1.6中国外相关技术研究、 开发觉实状况介绍、 分析;

1.7采取现有成熟关键技术、 已攻克关键技术
已攻克关键技术: 微囊藻采集季节、 前期处理技术; 藻胆蛋白分离方法（专利正在申请中）; 藻胆蛋白光敏杀虫剂作用条件（专利正在申请中）。

1.8估计项目完成时计划处理关键技术及达成技术性能指标。
计划处理关键技术: 藻胆蛋白规模化分离技术设备优化。
藻胆蛋白光敏杀虫剂田间实施条件优化。
藻胆蛋白可溶性粉剂达成技术性能指标:
关键成份: C型藻蓝蛋白, 其发色团为藻蓝胆素（四吡咯结构色基）
相对分子质量: 21KD。
特征性吸收峰: 620nm,
光谱纯度: A620/A280大于1.5
色谱纯度: 大于85%
稳定性: 在pH为中性, 40℃以下藻蓝蛋白稳定性良好,
小鼠室内急性毒性试验, ID50大于8g/kg

2、 拟采取研究方法、 技术路线、 试验方案及可行性分析（字数不限, 可加页）:
（产学研项目关键描述申报项目研究开发内容及包含关键技术、 关键问题处理方案; 技术路线描述包含工艺步骤图、 产品结构图、 框架图等）

2.1研究方法
经过采取抽提、 粗过滤、 微滤、 超滤脱毒、 低温静置离心、 真空干燥等提取纯化方法方法从微囊藻中提取藻胆蛋白, 经过紫外可见分光光度计、 电泳、 HPLC方法检测其光谱纯度、 分子量大小、 藻蓝蛋白含量及藻毒素含量.
1.藻胆蛋白提取
2.藻胆蛋白检测与定量
3）电泳检测藻胆蛋白分子量
4）溶解度检测
(6) 培养细胞PDT试验
3.自然光条件下果蝇光敏作用试验

4.藻胆蛋白对小鼠毒性试验

2.1技术路线

A．微囊藻藻胆蛋白分离技术线路及工艺步骤

搜集富藻水

藻水分离（旋振筛）

清水 藻泥

干燥（塑料大棚挂晒）

制粉（粉碎机）

破壁、 浸提（磷酸缓冲液）

沉淀（杂质） 离心（离心机）

上清液

沉淀 过滤（0.22-0.45微米平板过滤器）

上清液

超滤（50KD超滤膜装置）

过滤液 藻胆蛋白浓缩液

藻毒素检测（HPLC） 藻胆蛋白得率检测

干燥成粉（冷冻干燥机）

B．微囊藻藻胆蛋白光活化杀虫效果试验

藻胆蛋白干粉

理化性质测定 小鼠急性毒理试验
（分子量、 光谱性质分析 、 C-PC, APC含量 ）

昆虫细胞株PDT试验:
细胞抑制率（MTT法）
细胞学分析（荧光显微镜、 电境）
细胞周期、 凋亡分析（流式细胞仪）

果蝇在体PDT试验
藻蓝蛋白在各组织中分布（荧光显微镜）
成体、 幼体生存率检测
成体繁殖率检测
PDT对器官组织影响（电镜）

实蝇杀虫剂配方研制
实蝇饵料选择
藻胆蛋白与实蝇饵料配比
多个不一样实蝇光活化杀虫效果试验

关键技术、 关键问题处理方案

2.3 可行性分析
本课题组与中科院海洋所王广策研究员课题组长久合作, 参与过相关肿瘤光动力诊疗藻胆蛋白光敏剂青年海洋‘863’项目、 国家科技部二十一世纪“创新药品博士基金”、 国家高技术研究发展计划（863计划）“藻胆蛋白抑制与诊疗肿瘤及大规模高纯度制备工艺研究”。
本课题组已熟练地掌握了C-PC分离纯化、 判定及光谱分析、 C-PC PDT作用细胞学试验、 动物模型在体试验及抗体制备技术; 已建立了生物活性功效检测平台, 包含抗肿瘤、 抗氧化、 提升免疫力、 促细胞增殖等活性检测。现在正参与巢湖蓝藻水专题研究, 已搜集了不一样季节微囊藻, 并对C-PC进行了分离纯化, 掌握了藻毒素去除方法, 并用MTT法对微囊藻C-PC作了体外PDT抑制昆虫细胞生长试验。
项目组组员李玉成教授在巢湖蓝藻综合利用方面有着丰富经验, 负担着国家水专题重大项目“巢湖市水源区污染物起源和迁移及对水体影响研究”, 对该项目完成提供了有力支持。
安徽陆野农化有限责任企业是国家发改委农药定点生产厂家, 市、 区政府部门关键扶持企业, 是以加工和复配为主农药、 肥料生产企业, 被授予亳州市农业产业化龙头企业。企业拥有优异生产、 检测设备, 依靠安徽省化工研究院、 河南省农科院、 安徽大学生命科学学院等科研单位, 不停研制开发新产品, 现在已发展成拥有三大系列十多个品种, 有2项自主研发产品经过了结果判定: （1）0.5%辣椒碱水乳剂 (2) 4.5%高效氯氰菊酯水乳剂
所以, 本项目是在原有抗肿瘤光敏剂良好工作基础上开展抗虫光敏剂这种新型绿色农药研究, 方法成熟, 项目组组员基础扎实, 技术全方面, 合作企业较强产品研发与市场运作能力, 完全有能力完成本项目研究目标。

3、 本项目创新之处（论证须充足, 字数不限, 可加页）
（产学研项目按理论创新、 应用创新、 技术创新、 工艺创新、 结构创新等方面创新点描述。尽可能用试验数据对技术创新性进行描述, 要有数据分析、 对比, 要有新旧技术、 结构或工艺对比）

3.1理论创新
3.2应用创新
3.1 技术创新

4、 年度研究计划及预期进展（产学研项目填写产品化和市场化计划安排）:

.1---.6
藻胆蛋白分离纯化方法优化
.7---.12
不一样时间段从巢湖采集蓝藻（只有每年7-10月能够采集）
分析光照强度对铜绿微囊藻细胞中藻藻胆体密度分布及藻毒素含量影响
.1—.6
藻胆蛋白干粉理化性质测定, 小鼠急性毒理试验
昆虫细胞株PDT试验: 作为光敏剂C-PC抑制昆虫细胞生长久有效果检测（细胞水平）
对PDT作用后细胞机理分析（细胞周期、 细胞形态）
.7—.12
果蝇PDT在体试验。
藻蓝蛋白在果蝇体内分布及代谢规律研究
.1—.6
实蝇杀虫剂配方研制: 实蝇饵料选择, 藻胆蛋白与实蝇饵料配比
多个不一样实蝇光活化杀虫效果试验
.7—.12
申请发明专利
撰写研究论文

5、 预期研究结果（产学研合作项目填写项目完成后产品技术性能参数）:

1. 研制出微囊藻藻胆蛋白关活化杀虫粉剂配方:

2. 完成微囊藻藻胆蛋白关活化杀虫粉剂制备工艺步骤

3. 申请发明专利2项, 在中国外学术刊物发表2-3篇研究论文, 培养硕士2-4名。

三、 研究基础
1、 与本项目相关研究工作积累和已取得研究工作成绩（产学研项目还要填写试用单位意见、 是否经过技术检测、 判定, 项目曾经取得其它计划支持情况。可提供试验室样品检测数据）:

1．2 藻蓝蛋白光敏剂抗肿瘤作用
相关藻胆蛋白亚基抗肿瘤特征研究为本试验室原创性科研结果积累。

1.3 相关论文被引用及结果获奖情况

1．4 本课题组与中科院海洋所课题组合作研究结果
1．5 藻毒素对体外培养细胞生长影响（预试验结果）
1.6 微囊藻藻蓝蛋白对果蝇细胞PDT试验

陆野农化在杀虫剂方面研究结果:
陆野农化有限责任企业研发能力
陆野农化有限责任企业始建于1998年, 为国家发改委、 农业部农业部肥料定点生产企业, 位于中国历史文化名城—亳州。亳州是曹操、 华佗家乡, 是最大中药材集散地, 江泽民主席曾题词“华佗故里, 药材之乡”。企业自建厂以来, 在各级领导关心和大力支持下, 短短几年企业规格快速扩大, 被安徽省乡镇企业局授予“科技先导型企业”, 经过几年发展, 企业由建厂时单一品种, 发展成拥有三大系列十多个品种, 以加工和复配为主农药、 肥料生产企业。

正在制备与销售产品有:
20% 乙酰甲胺磷 EC、 40% 辛硫磷 EC、 480g/L毒死蜱 EC、 18g/L阿维菌素 EC、 5%氟铃脲 EC
4.5%高效氯氰菊脂 EC、 25g/L高效氯氟氰菊脂 EC、 80%敌敌畏 EC、 3%辛硫磷 GR、 20%三唑磷 EC、 25%噻嗪酮异丙威 WP、 4.5%高效氯氰菊脂 EW、 25g/L联苯菊脂 EC 、 氨基酸水溶肥料
与其她企业合作经营产品有:
25%氧乐果·氰戊菊脂、 12.5%井冈·蜡芽菌、 3%高氯·吡虫啉、 9%氰戊·灭多威、 10%高氯·氧乐果、 10%吡虫啉·灭多威、 40%氧乐果、 5%毒死蜱颗粒剂
2、 已含有试验条件, 尚缺乏试验条件和拟处理路径:
2、 工作条件
安徽大学生命科学学院负担了“211”三期建设项目“江淮流域生态安全与资源可连续利用”, 拥有安徽省生态工程与生物技术关键试验室、 安徽省中药研究与开发关键试验室、 我院分子及细胞生物学试验室。可利用仪器有: 高效液相色谱仪、 气相色谱仪、 超声波细胞粉碎仪层层析、 超滤设备; 多功效电泳仪、 柱层析分离设备、 超速冷冻离心机、 冷冻干燥设备、 快速蛋白纯化系统、 快速凝胶成像系统; 紫外分光光度计、 荧光分光光度计、 酶标仪、 荧光显微镜; 气候培养箱、 动物细胞培养室。安徽大学现代技术中心还拥有电子显微镜、 制备液相色谱、 核磁共振仪、 红外光谱仪等仪器设备。

安徽陆野农化技术中心是企业自主创新研发基地和人才培养基地, 含有农药成份分析所需仪器设备, 关键包含:
光谱分析类: 等离子体发射光谱、 原子吸收分光光度计、 中红外光谱仪
质谱分析类: 高效气质联用仪、 高效液相色谱仪、 液质联用仪
图谱分析类: 薄层扫面仪
水分检测类: 水分测定仪
样品处理与制备类: 旋转蒸发仪、 干燥设备、 蒸馏水制备装置、 分析天平、 、 粉碎机等

可利用外单位仪器设备:
流式细胞仪、 激光共聚焦显微镜: 中国科技大学生命科学学院分子生物学试验中心提供。

尚缺乏试验条件:

3、 申请者和项目组关键组员学历和研究工作简历（近期负担与本项目相关各级科研项目、 发表与本项目相关关键论著和取得学术奖励情况及在本项目中负担任务）:

3、 申请人介绍
黄蓓: 女, 博士, 教授, 硕士生导师
1983年7月毕业于安徽大学生物系动物专业, 同年留校任教.曾在德国海登堡大学进修发育生物学, 回国后从事细胞生物学与发育生物学教学与科研工作, 1999.2-.6中国科学技术大学生命科学学院攻读在职博士。 .7—.7美国Emory大学药理系博士后。现为安徽省科学技术协会委员、 安徽省细胞生物学学会常务理事、 安徽省中青年学科带头人培养对象, 安徽省首届陈香梅教育奖取得者, 安徽大学生命科学学院细胞与分子生物学试验室主任, 细胞生物学硕士点责任人。

发表相关论文:
已完成研究项目
获奖情况
(1)“藻胆蛋白色基多肽光敏剂抗肿瘤特征研究”获安徽省高校优异科技结果三等奖。(K-3-5-1)（第一名）
(2) 海洋生物活性蛋白和多肽规模制备及其药源生物快繁技术。国家海洋局海洋创新结果二等奖。（B, 第七名）
在本项目中负担任务: 项目设计与实施

陆合文, 工程师, 总经理。
安徽省化工研究院工程师, 安徽陆野责任有限企业总经理。毕业于。。。。。。。。。

自主开发研究项目有:

（1）0.5%辣椒碱水乳剂（-4经过结果判定, 结果登记号。。。。。。。。）
本项目属于新型绿色生物农药和农药新剂型研究。辣椒碱从辣椒中提取, 本产品为稳定乳状液, 它是将辣椒碱原药、 高渗剂噻酮、 乳化剂、 少许溶剂乙醇和水在高剪切搅拌情况下形成一个水包油型高分散度、 稳定均相制剂。因为溶剂是乙醇, 无其它有毒有机溶剂, 使得该产品为愈加绿色环境保护水性化制剂产品, 对环境无污染, 是一个理想无公害绿色农药。0.5%辣椒碱水乳剂关键用于蔬菜、 棉花、 果树等作物害虫防治, 防效好, 持效期长, 杀虫谱广, 使用安全, 有利于保护环境, 对天敌安全, 也可其她作物害虫。
关键技术指标:
辣椒碱含量, % 0.5±0.07
pH值范围 4.0～7.0
倾倒性: 倾倒后残余物, % ≤3.0
洗涤后残余物, % ≤0.5
乳液稳定性（稀释200倍） 合格
持久起泡性（1min后）, mL ≤20
低温稳定性 合格
热贮稳定性 合格
该产品使用方便, 持效期长, 有利于环境保护, 经济、 社会和生态效益显著, 含有很好推广应用前景。

（2）4.5%高效氯氰菊酯水乳剂（-4经过结果判定, 结果登记号。。。。。。。。）
本项目属于拟除虫菊酯农药新剂型、 新品种研究, 其产品为稳定乳状液, 它是将高效氯氰菊酯原药、 麻醉剂、 高渗剂噻酮溶于少许有机溶剂所得到液体分散在水中形成一个水包油型高分散度、 稳定均相制剂。4.5%高效氯氰菊酯水乳剂关键用于蔬菜、 棉花、 果树等作物害虫防治, 防效好, 持效期长, 杀虫谱广, 使用安全, 有利于保护环境, 对天敌安全, 也可其她作物害虫。
关键技术指标:
高效氯氰菊酯总含量, % 4.5±0.4
pH值范围 4.0～7.0
倾倒性: 倾倒后残余物, % ≤3.0
洗涤后残余物, % ≤0.5
乳液稳定性（稀释200倍） 合格
持久起泡性（1min后）, mL ≤20
低温稳定性 合格
热贮稳定性 合格
本结果配方合理, 剂型新奇, 工艺优异, 居中国领先水平。产品使用方便, 持效期长, 有利于环境保护, 含有很好推广应用前景。

刘凤才。。。。。。。。。

李玉成, 男, 博士, 教授, 硕士生导师
* 论文: 作者.题目.刊名.年份.卷（期）.页码
专著: 作者.书名.出版者.年份
四、 产学研合作项目可行性汇报（本节可单独撰写, 作为申请书附件材料）
1、 项目产业化基础（分段叙述, 字数不限, 可加页）:

（1）合作企业技术创新、 生产和销售能力, 以及相关领域研发基础和研发队伍情况;
安徽陆野农化有限责任企业是国家发改委农药定点生产厂家, 市、 区政府部门关键扶持企业, 现有职员125人, 其中管理和工程技术人员20多人。企业拥有优异生产、 检测设备, 依靠安徽省化工研究院、 河南省农科院、 安徽大学生命科学学院等科研单位, 不停研制开发新产品。经过几年发展, 企业由建厂时单一品种, 发展成拥有三大系列十多个品种, 以加工和复配为主农药、 肥料生产企业。企业关键产品有2.5％高渗高效氯氰菊酯乳油、 40％高渗辛硫磷乳油、 3％辛硫磷颗粒剂、 5％氟铃脲乳油、 含氨基酸水溶肥料等。现在, 企业产品已远销河南、 河北、 江苏、 山东、 重庆、 广东、 江西、 湖南等10多个省市自治区, 深得广大经销商和农民信赖和好评, 企业生产展现勃勃生机。被授予亳州市农业产业化龙头企业。
现在已经有2项自主研发产品经过了结果判定: （1）0.5%辣椒碱水乳剂 (2) 4.5%高效氯氰菊酯水乳剂

　　安徽陆野农化有限责任企业正以“开拓、 进取、 求实、 创新”精神, 在政府相关部门大力支持下, 与时俱进, 抓住机遇, 加速技术改造和产品结构调整创新, 努力争取发展成为拥有杀虫剂、 杀菌剂、 除草剂、 植物生长调整剂和肥料五大系列二十多个品种科技型企业, 为安徽农药及肥料工业发展、 为农业增产增收做出应有贡献。

（2）双方合作基础、 已完成研究开发工作及中试情况和判定年限;
安徽陆野农化有限责任企业与安徽大学生命科学学院在巢湖水化蓝藻作为生物农药开发利用方面合作已经有一年多时间, 现在已基础完成了微囊藻藻胆蛋白对果蝇光活化杀虫效果试验、 小鼠急性毒理试验、 巢湖蓝藻采集、 处理方法、 藻胆蛋白分离方法试验室阶段研究, 已写成2项专利正在申请中。
在中试方面, 正在进行微囊藻藻胆蛋白分离纯化设备定制及生产工艺步骤设计; 在对实蝇光敏杀虫剂研制方面, 正在联合省农科院教授开展诱捕饲料配方及实蝇田间试验研究。

（3）技术或工艺特点以及与现有技术或工艺比较所含有优势;
A.在微囊藻藻胆蛋白分离方法方面:
传统方法通常包含反复冻融, 冷冻离心、 硫酸铵盐析、 透析、 上柱脱盐, 数次梯度洗脱、 冷冻干燥等, 工艺繁琐、 得率低、 成本高、 而且无法大量制备, 严重限制了藻胆蛋白制品推广使用。
本项目正在研制方法: 采集微囊藻, 晒干粉碎后成干藻粉, 加入磷酸盐缓冲液搅拌抽提, 用板状初过滤弃沉淀, 然后将滤液依次经过 2 μm和 0.45 μm微滤器进行微滤处理, 得到澄清藻提取液, 使用超滤装置 ( 截留分子量 10kDa)截留下藻胆蛋白溶液添加等体积蒸馏水后继续超滤, 如此反复数次, 除去微囊藻毒素; 浓缩藻胆蛋白溶液冷冻干燥后得到蓝色藻胆蛋白干粉.

B. 藻胆蛋白光敏杀虫剂作用方面:
焰红染料B 及其同荧光素钠混配农药制剂(Sure dye)已在美国取得专利保护。Sure dye 饵制剂已在危地马拉被用于防治地中海实蝇。现在赤藓红 B 作为杀家蝇幼虫药剂已在美国环境保护局获准登记,实现了商品化。对服食赤藓红 B (500—mg/mL) 实蝇光照 6h后 ,死亡率伴随给药剂量增加和光照时间延长而增加。
用自然光对果蝇所做试验结果显示: 在光照强度为40J/cm2 , 有效作用浓度范围为250μg/ml-1000μg/ml, 小鼠急性毒理试验安全剂量为小于或等于5g/kg, 致死剂量为大于或等于8g/kg藻胆蛋白溶液。
所以, 藻胆蛋白光敏剂有效浓度是焰红染料B千分之一（？）, 且安全有效。

（4）关键技术突破对行业技术进步关键意义和作用, 对相关产业或行业影响、 对经济社会可连续、 协调发展影响,与当地域优势关联程度、 对当地域优势资源综合利用或优势产业技术提升影响。

A.改善后藻胆蛋白提取工艺省去了使用大量硫酸铵沉淀蛋白步骤, 利于环境保护及规模化生产。
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B. 在藻胆蛋白光敏杀虫剂对环境影响方面

尽管很多染料, 如焰红染料B对蚊蝇有很强杀虫活性 ,不过它们对有脊椎动物毒性却不尽如人意。一个家蝇田间搜集品系在摄食浓度增加、 光接触5小时选择压力下,代后抗性展现48倍。而天然产物起源藻胆蛋白光敏剂本身是植物叶绿体中捕光天线蛋白, 对动物、 植物比较安全, 在实蝇后代证实不会产生抗性。
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C．与当地域优势关联程度、 对当地域优势资源综合利用或优势产业技术提升影响。
产品投放市场后, 能够替换部分传统化学农药, 有利于环境保护和人体健康, 对调整中国农药产品结构、 剂型结构, 发展中国生物农药水乳剂产业, 促进农药行业技术进步和产品升级换代, 发展生态农业和绿色食品, 提升农产品国际竞争力, 促进国民经济发展, 保护环境等, 均含有十分关键意义, 社会效益和生态效益显著。
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2、 项目市场概述（分段叙述, 字数不限, 可加页）

（1）项目产品中国外市场容量、 发展情况、 发展趋势;
杀虫剂是防治病虫灾难、 确保农业丰收关键手段。长久以来, 因为大量使用化学农药进行害虫控制, 不仅造成了对生态环境污染, 也使得害虫抗药性大大增强, 造成化学农药用量深入增加。为处理这一问题, 大家探索合理利用生态新方法来有效控制害虫。所以在实际应用当中, 不易产生残留及生物富集现象, 而且因为其成份相对复杂, 害虫不易产生抗性, 是化学农药较为理想替换品。
所谓光活化杀虫剂即为在无光照条件下对害虫无活性或活性很低, 但在日光或特定波长人工光(尤其是近紫外光)照射下杀虫活性大幅度增加一类物质。现在, 这类杀虫剂有望成为传统化学杀虫剂替换物。光活化杀虫剂在可见光照射下快速失活, 加上它们在黑暗条件下缺乏显著毒性, 所以降低了它们对环境产生关键影响风险。所以, 从安全和环境方面考虑, 光活化杀虫剂不仅提升了杀虫剂药效 ,而且避免了在环境中持久残留 ,符合无公害农药所要求环境友好性; 而且因为光活化农药产生活性氧在细胞上生化