丹参提取物对去卵巢模型大鼠骨质疏松的影响.pdf

食品研究与开发圆园23 年 10 月第 44 卷第 19 期DOI：10.12161/j.issn.1005-6521.2023.19.012作者简介：王玥（1985），女（汉），高级工程师，硕士研究生，研究方向：功能食品开发。*通信作者:李丽维,高级工程师，博士研究生。丹参提取物对去卵巢模型大鼠骨质疏松的影响王玥1，陈薇2，杨志国3，张艳艳3，王浩2，徐咏全1，刘垚杰2，李丽维1，2*（1.天士力研究院，天津 300410；2.天津科技大学 食品科学与工程学院，天津 300457；3.天津天士力（辽宁）制药有限责任公司，辽宁 阜新 123000）摘要：采用去卵巢大鼠模型，分别用丹参提取物低剂量、中剂量、高剂量和雌激素对模型鼠进行干预，探讨丹参提取物对雌激素缺乏引起的大鼠骨质疏松的影响。将 SD 大鼠分为假手术组、模型组、丹参提取物低、中、高剂量组和雌激素组，分别连续给药 12 周，测定子宫系数、股骨湿重、干重、灰重，并观察股骨、胫骨形态学的变化情况。结果显示：与假手术组比较，模型组动物体质量显著增加（P约0.01），子宫系数、股骨湿重、干重、灰重显著降低（P约0.05），股骨、胫骨骨小梁稀疏、断裂、排序紊乱；与模型组比较，丹参提物物各剂量组和雌激素组的体质量均显著降低（P约0.05），子宫系数、股骨湿重、干重及灰重均显著增加（P约0.05），股骨、胫骨的骨小梁结构得到不同程度的改善。综上，丹参提取物可提高去卵巢大鼠骨质量，改善骨微结构，且对子宫的影响小于雌激素，对去卵巢大鼠所致骨质疏松具有明显的改善作用。关键词：丹参提取物；去卵巢大鼠；骨质量；骨形态学；骨质疏松Effect of Salvia miltiorrhiza Extract in Treatment of Osteoporosis Caused by Ovariectomy in RatsWANG Yue1，CHEN Wei2，YANG Zhiguo3，ZHANG Yanyan3，WANG Hao2，XU Yongquan1，LIU Yaojie2，LI Liwei1，2*（1.Tasly Academy，Tianjin 300410，China；2.College of Food Science and Technology，Tianjin University ofScience&Technology，Tianjin 300457，China；3.Tianjin Tasly（Liaoning）Pharmaceutical Co.，Ltd.，Fuxin123000，Liaoning，China）粤遭泽贼则葬糟贼：The ovariectomized model rats were intervened with estrogen and low-，medium-，and high-doseSalviamiltiorrhizaextract，respectively，andtheeffectoftheextractonosteoporosiscausedby estrogendeficiencyin rats was studied.The SD rats were assigned into six groups：a sham operation group，a model group，low-，medium-，and high-dose S.miltiorrhiza extract groups，and an estrogen group.After 12 weeks of continuousadministration，the uterine coefficient，as well as the wet weight，dry weight，and ash weight of femur，wasmeasured，and the morphological changes of femur and tibia were observed.The results showed that comparedwith the sham operation group，the ovariectomy increased the body weight（P0.01），decreased the uterinecoefficientandthewetweight，dryweight，andashweightoffemur（P0.05），andcausedthe loosening，fracture，and disordered arrangement of trabeculae in the femur and tibia.Compared with the model group，S.miltiorrhizaextract and estrogendecreasedthebodyweight（P0.05），increasedtheuterinecoefficientandthe wetweight，dryweight，andashweight of femur（P99%）：上海麦克林生化科技有限公司；乙二胺四乙酸（ethylene diamine tetraacetic acid，EDTA）脱钙液、茁-雌二醇：北京索莱宝生物科技有限公司；青霉素：华北制药厂；丹参：市售。FA2004 型分析天平：METTLER TOLEDO 公司；TDL-8002 恒温水浴锅：天津市中环实验电炉有限公司；SX-2-8-12 马弗炉：沈阳长白电炉厂；Olympus CKX41显微镜：日本奥林巴斯株式会。1.2提取物制备丹参提取物制备方法：称取丹参（符合 2020 版 中华人民共和国药典 一部标准），采用水提方式提取，工艺为料液比 1 颐 8（kg/L），提取 3 次，过滤，合并提取液，浓缩，干燥制得丹参提取物，每克丹参提取物相当于丹参生药 2.86 g。1.3实验动物的选择实验选用健康雌性 3 月龄 SPF 级 SD 大鼠，体质量 250300 g，饲养于天津科技大学实验动物中心。饲养环境：（23依3）益，相对湿度 55%75%，12 h 明暗循环。大鼠被放置在白色塑料笼中，每笼 4 只，每组 2 笼。实验期间为动物提供充足的食物和水。本研究的所有实验程序均按照天津科技大学动物实验伦理委员会批准的方案进行。1.4分组与模型的建立将 SD 大鼠随机分为 6 组，每组 8 只，分别为假手术组（sham operation，SHA）、模型组（model，MOD）、丹参提取物低剂量组（Salviamiltiorrhizaextract low-dose，SL）、丹参提取物中剂量组（Salvia miltiorrhiza extractmedium-dose，SM）、丹参提取物高剂量组（Salvia milti原orrhizaextract high-dose，SH）、雌激素组（estrogen，E2）。大鼠适应性喂养 1 周之后进行建模，向大鼠腹腔注射10%水合氯醛溶液，腹部固定于鼠板上，于肋缘与脊柱交界处向下备皮，在离脊柱约 1 cm 处切开皮肤，剥开肌肉组织，用止血钳拉出游离的脂肪组织，找到粉红色的卵巢，在其与子宫连接处用 3 号线结扎，剪去卵巢组织，止血，并向腹腔内滴入青霉素注射液，再做肌层、皮肤的缝合。假手术组仅摘除卵巢附近的脂肪组织。各组大鼠单笼饲养，术后 3 d 腹腔注射青霉素注射液，术后 1 周进行阴道图片检查，确认卵巢完全摘除，卵巢摘除不完全者弃用。实验模型建立并恢复 1 周后开始给药。根据前期预实验结果，假手术组和模型组每天灌胃等量的生理盐水，SL、SM、SH 组每天分别灌胃63、83mg/kg 和 107mg/kg 的丹参提取物，雌激素组每天灌胃 1 mg/kg 茁-雌二醇。各实验组连续给药 12 周。1.5体质量和摄食量记录体质量及摄食量自给药开始后进行记录，其体质量每周称量 1 次，共计 12 周，摄食量每天测量 1 次并记录。观察各组摄食量与给药前后体质量的变化。1.6子宫系数测定大鼠处死前 12 h 进行断水断粮，处死后，将大鼠子宫上附着的脂肪剥离干净，吸取多余液体后称量子宫质量，计算子宫系数，观察各组子宫系数的变化，计算公式如下。基础研究81食品研究与开发圆园23 年 10 月第 44 卷第 19 期X=U/W伊1 000式中：X 为子宫系数，g/kg；U 为子宫质量，g；W 为大鼠体质量，g。1.7股骨计量学指标股骨湿重：剥离大鼠右侧股骨，将附着的肌肉和筋膜剔除干净，吸取多余液体后用天平进行称量。股骨干重：将剥离的大鼠右侧股骨脱脂 72 h，随后在 100 益环境中烘干 8 h，并置于干燥器中放置 30 min后进行称量。股骨灰重：取烘干后的股骨，放入 550 益马弗炉中8 h，取出后置于干燥器中冷却，精密称定股骨的灰重。1.8形态学观察参照赵恒侠等20的研究方法，分别取大鼠左侧胫骨、股骨,除净周围附着的肌肉和筋膜组织，然后将骨组织置于 10%福尔马林溶液中固定，EDTA 脱钙预处理后进行脱水、透明、包埋、切片、脱蜡、苏木素-伊红（hematoxylin-eosin staining，HE）染色、封片等步骤，分别获得大鼠股骨和胫骨切片。最后，通过光学显微镜采集图片，观察胫骨和股骨的骨小梁损伤程度。1.9统计学分析本实验统计方法采用 SPSS 22.0 软件进行统计学处理，结果均以平均值依标准差表示，采用单因素方差分析（analysis of variance，ANOVA）评估各组间差异，P约0.05 为差异有统计学意义。2结果与分析2.1体质量与摄食量各组大鼠体质量自开始给药时进行记录，各组结果见表 1。如表 1 所示，初始体质量各组间没有显著差异（P跃0.05），平均摄食量各组间无统计学差异（P跃0.05）。12周后体质量与 SHA 组比较，MOD 组体质量极显著增加（P约0.01），较 SHA 组增加 23.45%。与 MOD 组比较，SL、SM、SH 与 E2 组体质量均显著降低（P约0.05），较模型组分别降低了 7.98%、8.58%、9.57%、10.38%，说明丹参提取物能抑制去卵巢大鼠体质量的增加。2.2子宫系数各给药组对去卵巢大鼠子宫系数的影响结果如图 1 所示。由图 1 可知，SHA、MOD、SL、SM、SH、E2 组的子宫系数分别为 2.15、0.93、1.42、1.78、2.06、2.73 g/kg。与SHA 组比较，MOD、SL、SM 组的子宫系数显著降低（P约0.05），较假手术组分别降低了 57.02%、33.94%、17.25%，E2 组较假手术组显著升高了 26.50%（P约0.05），SH 组与 SHA 组无显著差异（P跃0.05）。与 MOD 组比较，SL、SM、SH 组和 E2 组子宫系数均显著升高（P约0.05），分别升高了18.24%、60.19%、63.73%和 194.29%，且观察到丹参提取物给药剂量与子宫系数的增加呈正相关。与E2 组比较，丹参提取物各剂量组均显著降低（P约0.05）。综上，丹参提取物各剂量组均可改善去卵巢大鼠的子宫系数，并且对子宫的刺激作用明显小于雌激素，而雌激素对子宫有明显的刺激作用。2.3股骨计量学指标各给药组对股骨湿重、股骨干重和股骨灰重的影响结果如图 2 所示。由图 2A 可知，SHA、MOD、SL、SM、SH、E2 组的股骨湿重分别为 1.22、1.02、1.10、1.15、1.16、1.24g。与 SHA组比较，MOD、SL 组股骨湿重显著降低（P约0.05），分别表 1各组大鼠给药前后体质量及摄食量Table 1Body weight and food intake of rats in each group分组初始体质量最终体质量平均摄食量SHA262.75依32.14336.52依29.4125.67依3.23MOD266.30依33.12415.41依25.69#26.78依2.58SL264.33依32.89385.69依28.61*25.69依2.96SM266.38依25.22382.31依20.91*27.69依2.44SH258.63依26.30378.83依31.03*26.33依2.12E2258.49依34.26372.31依34.07*26.88依3.31g注：#表示与 SHA 组比较具有极显著性差异（P约0.01）；*表示与MOD 组比较具有显著性差异（P约0.05）。不同小写字母表示具有显著性差异（P约0.05）。图 1不同受试物对去卵巢大鼠子宫系数的影响Fig.1Effects of different drugs on uterine coefficients ofovariectomized rats3.53.02.52.01.51.00.50SHAMODE2SLSMSHabcdeb1.41.21.00.80.60.40.20SHAMODE2SLSMSHabaabbcaA基础研究82食品研究与开发圆园23 年 10 月第 44 卷第 19 期降低了 15.91%、9.65%，SM、SH 组和 E2 组均无显著差异（P跃0.05）。与 MOD 组比较，SL、SM、SH 组和 E2 组的股骨湿重均显著升高（P约0.05），分别升高了 7.45%、12.45%、13.31%和 20.76%，且随着丹参提取物剂量增加，股骨湿重也逐渐增加。与 E2 组比较，SM、SH 组无显著差异（P跃0.05），表明丹参提取物中、高剂量对股骨湿重的增加与雌激素相当，且接近 SHA 组。由图 2B 可知，SHA、MOD、SL、SM、SH、E2 各组的股骨干重分别为 0.72、0.52、0.62、0.66、0.64、0.69 g，与 SHA组比较，MOD、SL、SH 组的股骨干重显著降低（P约0.05），较 SHA 分别降低 27.97%、13.29%、10.31%，SM 和 E2组均无显著差异（P跃0.05）。与 MOD 组相比，各给药组的股骨干重均显著升高（P约0.05），SL、SM、SH 和 E2组的股骨干重较 MOD 组分别升高 20.38%、27.91%、24.51%和 33.50%。与 E2 组比较，SL、SM、SH 组均无显著差异（P跃0.05），表明丹参提取物各剂量组对股骨干重的增加效果与雌激素相当。由图 2C 可知，SHA、MOD、SL、SM、SH、E2 各组的股骨灰重分别为 0.43、0.31、0.36、0.37、0.39、0.42 g。与SHA 组比较，MOD、SL、SM 和 SH 组的股骨灰重均显著降低（P约0.05），较 SHA 组分别降低 27.65%、15.59%、13.24%、8.24%，E2 组无显著差异（P跃0.05）。与 MOD 组相比，SL、SM、SH 和 E2 组的股骨灰重均显著升高（P约0.05），各组灰重较 MOD 组分别升高 16.67%、19.92%、26.83%和 35.37%，且丹参提取物给药剂量与股骨灰重的增加呈正相关（P约0.05）。与 E2 组比较，SL、SM 组有显著差异（P约0.05），SH 组无显著差异（P跃0.05）。综上，丹参各组均可增加去卵巢大鼠股骨湿重、股骨干重和股骨灰重，丹参提取物中剂量组和高剂量组对股骨湿重的增加效果与雌激素相当，且已接近假手术组。2.4骨形态学观察股骨形态学结果如图 3 所示，胫骨形态学结果如图 4 所示。由图 3 可知，SHA 组显示骨组织形态正常，股骨骨小梁密集，结构连接成网状，排列致密有序，粗细均匀，基本结构未见异常；MOD 组骨组织形态出现明显病理学改变，表现为骨小梁稀疏，断裂，排列紊乱，结构模糊，并可见游离末端；不同给药组股骨骨组织形态学变化较模型组均有明显改善，各给药组骨小梁无明显断裂，排列尚规则，且宽度接近正常，表明丹参各给药组和雌激素组均可以改善去卵巢大鼠股骨骨小梁结构。由图 4 可知，SHA 组显示骨组织形态正常，胫骨骨小梁密集，结构连接成网状，排列致密有序，粗细均匀，A.股骨湿重；B.股骨干重；C.股骨灰重。不同小写字母表示具有显著性差异（P约0.05）。图 2不同受试物对去卵巢大鼠股骨湿重、干重和灰重的影响Fig.2Effects of different drugs on the wet weight，dry weight，and ash weight of femur in ovariectomized ratsSHAMODE2SLSMSHSHAMODE2SLSMSH图 3不同受试物对去卵巢大鼠股骨形态学影响Fig.3Effects of different drugs on the morphology of femur inovariectomized rats图 4不同受试物对去卵巢大鼠胫骨形态学影响Fig.4Effects of different drugs on the morphology of tibia inovariectomized rats0.60.50.40.30.20.10SHAMODE2SLSMSHbcabcdaCc1.00.90.80.70.60.50.40.30.20.10SHAMODE2SLSMSHBbabbca基础研究ab83食品研究与开发圆园23 年 10 月第 44 卷第 19 期基本结构未见异常；MOD 组骨组织形态出现明显病理学改变，表现为骨小梁稀疏，断裂，排列紊乱，结构模糊，并可见游离末端；不同给药组胫骨骨组织形态学变化较模型组均有明显改善，可看出各给药组骨小梁无明显断裂，排列尚规则，且宽度接近正常，表明丹参各给药组和雌激素组均可以改善去卵巢大鼠胫骨骨小梁结构。3讨论与结论去卵巢模型大鼠由于体内雌激素水平降低，骨代谢呈负平衡状态，骨吸收相对增强，骨量逐渐丢失，形成骨质疏松，去卵巢动物的体质量快速增长是为抵抗去卵巢后对骨骼影响的一种自身保护性反应，可以部分抑制模型大鼠的骨量丢失。股骨干重、湿重、灰重的降低，骨小梁的断裂，也直接反映了去卵巢模型骨量的丢失21。本研究发现，与去卵巢模型组大鼠比较，不同剂量的丹参提取物均能显著降低大鼠体质量、改善大鼠的子宫系数、增加股骨湿重、干重和灰重（P约0.05），并且能够改善股骨及胫骨骨小梁结构，此外，与假手术组比较，雌激素组的子宫系数显著增加（P约0.05），而前期也有研究表明长期使用雌激素对生殖系统造成损害22，本研究结果也进一步印证了长期使用雌激素可对子宫会产生强刺激，从而导致诱发严重疾病的可能性，而丹参各组对子宫的影响要明显弱于雌激素组（P约0.05），这也就表明虽然丹参存在雌激素样作用，但对子宫的刺激明显减小。除了去卵巢动物模型外，丹参也对糖皮质激素模型引起的骨质疏松同样有效23-24，说明丹参可对不同类型的骨质疏松起到增加骨密度的作用。综上所述，丹参提取物可提高去卵巢大鼠骨质量，改善骨微结构，且对子宫刺激作用小，对缓解骨质疏松具有积极作用，对股骨湿重的增加与雌激素相当且接近于假手术组，表明丹参提取物具有增加骨密度的功效。参考文献：1马远征,王以朋,刘强,等.中国老年骨质疏松症诊疗指南(2018)J.中国骨质疏松杂志,2018,24(12):1541-1567.MA Yuanzheng,WANG Yipeng,LIU Qiang,et al.2018 China guide原line for diagnosis and treatment of senile osteoporosisJ.ChineseJournal of Osteoporosis,2018,24(12):1541-1567.2任之强,赵志强,晋大祥,等.骨质疏松症肾虚血瘀量化评分与性激素和血细胞参数关系研究J.中国骨质疏松杂志,2015,21(5):560-563.REN Zhiqiang,ZHAO Zhiqiang,JIN Daxiang,et al.Relationship a原mong quantitative evaluation of kidney deficiency and blood stasis,sexual hormones,and parameters of the blood cells in patients withosteoporosisJ.Chinese Journal of Osteoporosis,2015,21(5):560-563.3国家药典委员会.中华人民共和国药典-一部:2020 年版M.北京:中国医药科技出版社,2020.Chinese Pharmacopoeia Commission.Peoples Republic of China(PRC)pharmacopoeia-part I:2020 editionM.Beijing:China Medi原cal Science Press and Technology Press of China,2020.4阎博昭,李刚,许波,等.丹参治疗股骨头坏死的分子机制研究J.安徽中医药大学学报,2018,37(5):60-66.YAN Bozhao,LI Gang,XU Bo,et al.Molecular mechanism of Salviamiltiorrhiza in treatment of femoral head necrosisJ.Journal of An原hui University of Chinese Medicine,2018,37(5):60-66.5肖方骏,陈树东,栾继耀,等.丹参干预骨质疏松症:网络药理学解释的作用机制J.中国组织工程研究,2021,25(5):772-778.XIAO Fangjun,CHEN Shudong,LUAN Jiyao,et al.An insight intothe mechanism of Salvia miltiorrhiza intervention on osteoporosisbased on network pharmacologyJ.Chinese Journal of Tissue Engi原neering Research,2021,25(5):772-778.6曾妮,许妹萍,庄丽明.丹参素对大鼠动脉粥样硬化的作用及其机制J.免疫学杂志,2020,36(10):884-889,896.ZENG Ni,XU Meiping,ZHUANG Liming.The effect of Danshensuon atherosclerosis in rats and its mechanismsJ.Immunological Jo-urnal,2020,36(10):884-889,896.7张钰炜,张丹参,景永帅.丹参素对血管内皮细胞氧化损伤保护作用机制研究进展J.中国药理学与毒理学杂志,2021,35(10):806.ZHANG Yuwei,ZHANG Danshen,JING Yongshuai.Researchprogress on protective mechanism of Danshensu on oxidative damageof vascular endothelial cellsJ.Chinese Journal of Pharmacology andToxicology,2021,35(10):806.8闫小飞,张富军,杜小娟,等.丹参素通过激活 Wnt/茁-catenin 通路促进大鼠原代成骨细胞的分化J.西北药学杂志,2018,33(5):607-611.YAN Xiaofei,ZHANG Fujun,DU Xiaojuan,et al.Effects of tanshi原nol on osteogenic differentiation of primary cultured rat osteoblasticcells by activating Wnt/茁-catenin pathwayJ.Northwest Pharma原ceutical Journal,2018,33(5):607-611.9QIAO J T,LIU A Y,LIU J Y,et al.Salvianolic acid B(Sal B)allevi原ates the decreased activity induced by prednisolone acetate on os原teoblasts by up-regulation of bone formation and differentiationgenesJ.Food&Function,2019,10(9):6184-6192.10 史炜镔,符诗聪,杜宁,等.丹参有效部位对骨折愈合过程中胶原基因表达的影响J.中国中西医结合杂志,2000,20(4):269-271.SHI Weibin,FU Shicong,DU Ning,et al.Effect of effective fractionof Radix salviae miltiorrhizae on procollagen gene expression infracture healingJ.Chinese Journal of Integrated Traditional andWestern Medicine,2000,20(4):269-271.11 张晓,张国庆,顾伯林,等.丹参对人成骨细胞骨钙素生成及钙离子浓度的影响J.世界科学技术-中医药现代化,2013,15(2):274-277.ZHANG Xiao,ZHANG Guoqing,GU Bolin,et al.Effects of Salviamiltiorrhiza on production of osteocalcin and concentration of calci原um ion in human osteoblastsJ.Modernization of Traditional ChineseMedicine and Materia Materia-World Science and Technology,2013,15(2):274-277.12 LUO S Y,YANG Y J,CHEN J F,et al.Tanshinol stimulates boneformation and attenuates dexamethasone-induced inhibition of os原teogenesis in larval zebrafishJ.Journal of Orthopaedic Translation,2016,4:35-45.13 HAN J F,WANG W.Effects of tanshinol on markers of bone turnoverin ovariectomized rats and osteoblast culturesJ.PLoS One,2017,基础研究84食品研究与开发圆园23 年 10 月第 44 卷第 19 期12(7):e018117514 尹纪伟,赵福涛,王艳玲,等.骨髓间充质干细胞移植对胶原诱导性关节炎滑膜增殖的影响及机制J.中华临床医师杂志(电子版),2011,5(13):3828-3833.YIN Jiwei,ZHAO Futao,WANG Yanling,et al.Effect of mesenchy原mal stem cells transplantation on the proliferation of synovinm inrats with collagen 域 induced arthritisJ.Chinese Journal of Clini原cians,2011,5(13):3828-33.15 王丽丽,马如风,刘海霞,等.丹酚酸 B 通过调节 Nox4 信号通路改善高脂饮食小鼠骨代谢的实验研究J.中国药理学通报,2018,34(1):77-81.WANG Lili,MA Rufeng,LIU Haixia,et al.Salvianolic acid B regu原lates bone metabolism through Nox4 pathway in HFD miceJ.Chi原nese Pharmacological Bulletin,2018,34(1):77-81.16 CHEN G H,ZHANG X L,LIN H,et al.Tanshinol alleviates osteo原porosis and myopathy in glucocorticoid-treated ratsJ.Planta Med原ica,2017,83(16):1264-1273.17 WANG N,LI Y K,LI Z Y,et al.Sal B targets TAZ to facilitate os原teogenesis and reduce adipogenesis through MEK-ERK pathwayJ.Journal of CellularandMolecularMedicine,2019,23(5):3683-3695.18 张晓燕,崔燎,吴铁,等.丹参对去卵巢大鼠牙槽骨代谢的影响J.时珍国医国药,2011,22(6):1393-1394.ZHANG Xiaoyan,CUI Liao,WU Tie,et al.Effect of Salvia miltior原rhizaonalveolarbonemetabolisminovariectomizedratsJ.LishizhenMedicine and Materia Medica Research,2011,22(6):1393-1394.19 张晓燕,崔燎,吴铁.丹参素防治去卵巢大鼠牙槽骨骨量的丢失J.口腔医学研究,2008,24(2):148-151.ZHANG Xiaoyan,CUI Liao,WU Tie.Tanshinol prevents alveoarbone loss induced by ovariectomy in ratsJ.Journal of Oral ScienceResearch,2008,24(2):148-151.20 赵恒侠,周道成,陈叶.从 Wnt/茁-catenin 通路研究滋肾降糖丸对糖尿病大鼠骨质疏松的防治作用J.广州中医药大学学报,2018,35(6):1051-1057.ZHAO Hengxia,ZHOU Daocheng,CHEN Ye.Preventive and thera原peutic effects of zishen Jiangtang pills on diabetes mellitus ratscomplicated with osteoporosis through Wnt/茁-catenin pathwayJ.Journal of Guangzhou University of Traditional Chinese Medicine,2018,35(6):1051-1057.21 姚荣成,谢宇,张悦,等.JGYS 对大鼠去卵巢高转换型骨质疏松症的影响J.昆明医科大学学报,2015,36(1):4-11.YAO Rongcheng,XIE Yu,ZHANG Yue,et al.Effect of JGYS onovariectomy-induced rat high-turnover osteoporosisJ.Journal ofKunming Medical University,2015,36(1):4-11.22 庞晓奡,张瑶,张淑兰.绝经激素治疗与有关疾病的风险评估J.中国计划生育和妇产科,2022,14(1):13-17.PANG Xiaoao,ZHANG Yao,ZHANG Shulan.Menopausal hormonetherapy and risk assessment for related disordersJ.Chinese Journalof Family Planning&Gynecotokology,2022,14(1):13-17.23 YANG Y J,SU Y J,WANG D T,et al.Tanshinol rescues the im原paired bone formation elicited by glucocorticoid involved in KLF15pathwayJ.Oxidative Medicine and Cellular Longevity,2016,2016:1092746.24 王秉义,潘剑.丹参素拮抗氧化应激所致骨质疏松并通过 PI3k/Akt 通路减少成骨细胞的凋亡J.中国骨质疏松杂志,2017,23(1):1-5,11.WANG Bingyi,PAN Jian.Tanshinol attenuates oxidative stress-in原duced osteoporosis and reduces apoptosis of osteoblasts via PI3k/Aktsignal pathwayJ.Chinese Journal of Osteoporosis,2017,23(1):1-5,11.加工编辑：王艳收稿日期：2022-06-06基础研究85