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激素对血糖浓度的影响及血糖浓度的测定
学号:201109155017 班级:临床1101 姓名:蒋功括
【摘要】
1. 目的:掌握血糖的测定原理和方法;掌握血糖的正常范围及意义;熟悉调节血糖的激素对血糖浓度的影响。
2. 方法:家兔动物实验。获取家兔注射激素前后的血液样本并对其进行血糖测定。邻苯甲胺方法测定血糖浓度。
3. 结果:注射肾上腺素后的家兔血糖水平较注射前有明显上升。最终得出注射肾上腺素前血糖浓度=128.27mg%,注射后血糖浓度=154.52mg%。同样,注射胰岛素后的家兔血糖水平较注射前则有明显下降。注射胰岛素前家兔空腹血糖含量为137.96mg%,注射胰岛素后为75.87mg%。
4. 结论:调节血糖类激素对血糖水平有显著地影响。
【关键词】:血糖浓度,激素,测定。
实验采取前后对照的方法,对家兔注射胰岛素,并通过耳缘静脉采血,获取激素注射前后的血液样本,采用邻甲苯胺法处理样本,最终与标品比色得出结论。
【材料】:空腹15h左右2.55kg家兔一只。刀片,草酸钠,小烧杯,胰岛素(5单位/ml),碘酒,消毒酒精棉签。饱和硼酸溶液,邻甲苯胺-硼酸试剂,5%三氯醋酸溶液,饱和苯甲酸溶液,标准葡萄糖贮存液(1ml=0.1mg葡萄糖),标准葡萄糖应用液(取贮存液1ml于100ml容量瓶,用饱和苯甲酸钠加到刻度,摇匀即可)
【方法】(注射胰岛素):
1. 取健康正常家兔一只,实验前饥饿15h左右,称其体重为2.55kg。
2. 耳缘静脉采血。小刀刮去耳缘的毛,用酒精棉球擦拭使其充血,再用干棉球擦干。 刀片划开耳缘静脉,使血液滴入成有足够草酸钠的小烧杯中,注意收集期间要不断地晃动烧杯防止血液凝固。采集完毕后干棉球压迫血管止血。
3. 给家兔注射胰岛素(剂量为5单位/公斤体重),半小时后同样方法采得血液。
4. 抗凝血0.4ml,缓缓放入洁净试管内,加5%三氯醋酸3.6ml,同时摇动使之充分混匀。3000rpm离心5min,制得无蛋白血滤液(上清液)。
5. 取四支试管,分别加入2.5ml邻甲苯胺试剂。并向试管1加入1ml蒸馏水,试管2加入1ml标准葡萄糖应用液,试管3加入1ml注射激素前的血液的无蛋白滤液,试管4加入1ml注射激素后的血液的无蛋白滤液。如下表:
ml
空白管
标准管
待测管甲(药前)
待测管乙(药后)
蒸馏水
1.0
―
-
-
标准葡萄糖应用液
-
1.0
-
-
无蛋白血滤液(药前)
-
-
1.0
-
无蛋白血滤液(药后)
-
-
-
1.0
邻甲苯胺试剂
2.5
2.5
2.5
2.5
6. 混匀后沸水加热8min,取出并用自来水冲洗试管使之冷却。而后置于722型分光光度计630nm比色,空白管校正零点。
计算:血糖(mg%)=0.D测定/0.D标准*0.1*1/0.1*100=0.D测定/0.D标准*100。即血糖(mg%)=测定/标准x100
【结果】:
标准管
甲(注射胰岛素前)
乙(注射胰岛素后)
丙(注射肾上腺素前)
丁(注射肾上腺素后)
OD值
0.4881
0.6734
0.3703
0.6261
0.7542
糖浓度(mg%)
100
137.96
75.87
128.27
154.52
标准管光密度=0.4881,注射前无蛋白滤液光密度=0.6734,注射后无蛋白滤液光密度=0.3703。最终得出注射胰岛素前血糖浓度=137.96mg%,注射后血糖浓度=75.87mg%。
同理,对家兔进行肾上腺素注射(剂量为0.5mg/每只动物)并进行上述步骤,最终得出结果:
注射肾上腺素前血糖=0.6261/0.4881*100=128.27mg%
注射肾上腺素后的血糖=0.7542/0.4881*100=154.52mg%
即:注射胰岛素可降低血糖,而注射肾上腺素则有相反的作用。
【讨论】:激素对血糖浓度的影响是显著的。由实验可知,即使是很少剂量的激素即可使血糖浓度在短时间内有显著地变化。在注射胰岛素后的半个小时内,血糖的浓度即降低了45.0%,家兔的表观反应也很明显,注射激素后,其活动量明显增多,较注射前亦有很大不同。需要注意的是为什么在饥饿了15h之后家兔的血糖浓度依然在正常值范围内?这说明一段较长时间无法摄入足够糖类物质作为能量供给时,动物体内仍然可以通过糖异生等途径维持血糖浓度,从而保证了其正常的生命活动。正是这种激素之间的协同或者拮抗作用,使得生物能够在逆境中得以生存较长时间。
【参考文献】:
查锡良《生物化学(第七版)》 第四章糖代谢 第八节血糖及其调节。
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