线栓大鼠大脑中动脉缺血模型制作方法的改进.doc

线栓大鼠大脑中动脉缺血模型制作方法的改
进

作者：吴培要, 王 静, 谢丽芬, 张贵林, 任光友

【关键词】 大脑中动脉，脑缺血； 模型，动物； 大鼠，

Sprague-Dauley； 改良线栓法

缺血性脑血管病的基础研究需要建立简便有效的动物模型，制备

局灶性脑缺血模型的方法有很多种，常用的有经颞下或经眶入路夹闭

或电凝大脑中动脉(MCA)、光化学诱导血栓形成等。目前，国内外广泛

应用的另一种方法是颈内动脉(ICA)线栓法。 可逆性线栓大鼠大脑中动

脉缺血模型适于脑梗死缺血半暗区病理生理研究、影像学研究、缺血

再灌注损伤机制和脑保护药物研究。但是，据国外文献报道，可逆性

线栓大鼠大脑中动脉缺血模型制作成功率不高（为 30%～70%） 且模 ，

型的神经功能评分变异较大[1]。鉴于此，在经多次预试验的实践基础

上，对可逆性线栓大鼠大脑中动脉缺血模型制作进行改进，以图提高

其成功率和稳定性，增加实验结果的可靠性。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1

显微镊、手术刀、止血钳、微动脉夹、尼龙线、开口器、大

鼠固定器、油性记号笔、直尺等。水合氯醛 （AR，天津市大茂化学试

剂厂，批号：20070403） SPF 级 SD 大鼠 60 只，雌雄兼用，体重 280～ ；

320 g，由重庆市中药研究院动物中心提供，许可证号：SCXK（渝）

2007-0006[2]。

1.2 实验方法

1.2.1 栓子制作 将尼龙线剪成长 4~5 cm 线段，一端加热呈圆

球状（直径 0.28 mm 左右）制成栓子[1，3]。用黑色油性记号笔在圆

球头端及距离圆球头端 1.8~2.0 处各作一记号备用。

1.2.2 动物分组 将 60 只大鼠随机分成传统方法组和改良方法

组，每组 30 只。

1.2.3 模型制作 传统方法制作模型（传统组） 大鼠麻醉（腹腔 ：

注射 10% 水合氯醛，0.35 ml/100 g[4])，取颈正中切口，撕裂胸骨

舌骨肌并暴露气管， 从气管右侧分离颈总动脉 CCA） 颈外动脉 ECA）
（ 、 （ 、

颈内动脉（ICA） 枕动脉；结扎枕动脉，分离颈内动脉（ICA）及颅外 、

分支翼腭动脉。在 ECA 下穿线两根，线一离 CCA 分叉处 3 mm 结扎不剪

断，线二不打结以供牵拉备用；动脉夹分别夹闭 CCA、ICA，于两线之

间的 ECA 剪一切口，将栓子由此口插入，松开 ICA 上动脉夹，栓子分

2

别经 CCA 分叉处、ICA、大脑前动脉（ACA） ，终至大脑中动脉（MCA） ，

以阻断 MCA 血流。自 ICA 起始部算，栓子插入深度约为 18~20 mm。用

线一结扎固定栓子后，松开 CCA 上的动脉夹；缝合肌肉和皮肤（腹腔

注射青霉素，4 万单位/只，预防术后感染） ，动物回笼饲养，保持大

鼠肛温 37.5 ℃[1，3，5~11]。见图 1。

改良方法制作模型（改良组） ：大鼠麻醉，于颈正中偏右 2 mm

切开，沿胸骨乳突肌和胸骨舌骨肌肌间隙钝性分离出右侧 CCA，再分

离出右侧 ECA，穿线后轻轻提起，分离 ICA 和枕动脉；烧灼法离断枕

动脉，在 ECA 下穿线 2 根，线一离 CCA 分叉处 3 mm 结扎不剪断，线二

不打结以供牵拉备用；动脉夹夹闭 CCA、ICA。于 2 根线之间的 ECA 剪

一切口，将栓子由此口插入，进入 ICA 约 5 mm，轻轻提起 CCA 上动脉

夹并往鼠尾方向稍牵拉，用显微镊轻轻往鼠头方向拨动 ICA，栓子继

续前行至 MCA。余操作步骤同传统方法。

手术操作采用 1 只传统组大鼠完成后接着 1 只改良组大鼠，

如此依次循环。

1.3 观察指标

1.3.1 动物模型神经功能评分 制模成功的标准是动物出现明确

的右侧大脑中动脉缺血的神经功能症状，按 Longa 的 5 分法进行评

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