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柔红霉素脂质体的制备

作者：高琨，冯安吉，万明习，王素品

【关键词】柔红霉素;脂质体;冰冻熔融法

1 材料和方法

1.1 材料 ZFQ85A 旋转蒸发仪（上海医械专机厂） SHZ 型循环水真 ；

空泵（河南巩义英峪仪器厂） ；电热恒温水浴锅（江苏东台电器厂） ；

752C 型可见紫外分光光度计（上海第三分析仪器厂） AE240 电子天平 ；

（瑞士 METTLER） SB3200 水浴式超声仪（上海必能信超声有限公司）
； ；

柔红霉素（daunorubicine，DNR 意大利爱宝药厂）
；注射用蛋黄卵磷

脂 （ Phosphatidylcholine,PC 上 海 太 伟 药 业 有 限 公 司 ） 胆 固 醇 ；

（Cholesterol,CH 美国 Sigma 公司） SephadexG50（瑞典）
； ；其余试

剂均为分析纯.

1． 方法脂质体的制备： 用 2mmol/L 磷酸盐缓冲液 PBSpH7.4）
2 DNR （

溶解.应用改良冻融法［1］制备柔红霉素脂质体

（liposomeencapsulateddaunorubicine,LDNR）取适量 PC 及 CH 溶于 ：

三氯甲烷后通过氮气冷风吹干成膜，加入所需浓度的 DNR 溶液，浸泡

数小时后用超声粉碎机超声震荡 5min，得到初制脂质体混悬液，将上

述混悬液分装于 5mL 试管中置于-15℃低温冰箱快速冷冻并维持 24h，

取出后室温下快速冻融并用螺旋混合器震荡 20min，得最终所需脂质

体混悬液.用 SephadexG50 葡聚糖凝胶层析分离游离药物.测定 DNR 浓

1

度， 用标准溶液制定标准曲线.计算包封率按公式： 包封率＝ 1-Cf/Ct） （

×100％（注：Cf 为游离药物浓度，Ct 为脂质体包裹的总药物浓度）.

2 结果

DNR 曲线吸收峰在波长 481nm 为最高，测定此波长 A 值，并

将结果回归.药物在此波长处的 A 值与药物浓度 C mg/L）
（ 的回归方程：

A＝0.036＋0.049C（r＝0.9996） ，线性范围：2.52～15.17mg/L.经前

期单因素实验预试，确定了正交实验的因素和水平数：按 L9（34）正

交实验表进行正交实验［2-3］ ，以药物的包封率为评价指标.

影响药物包封率的各影响因素的重要性依次递减为：水合介质的

种类（因素 D）>冷冻温度（因素 C）>PC 与药物的比例（因素 A）

>PC 与 CH 的比例（因素 B） 各因素的组合以 A3B2C1D3 为最佳，即 ，

PC 与药物的质量比为 30∶1，PC 与 CH 的质量比为 5∶1，冷冻温度为

-15℃，水合介质为 pH7.4PBS，可制得具有高包封率的脂质体.按优选

处方,制备 3 批脂质体,DNR 包封率分别为 78.84%,76.31%和 75.22%.

3 讨论

本实验采用高纯度 PC 和 CH 为包封材料,采用冰冻熔融法制得

LDNR,方法简单、可行［1-3］.通过预试验和正交试验,确定冰冻熔融

法制备 LDNR 制备的最优组合 PC 与药物的质量比为 30∶1，PC 与 CH

的质量比为 5∶1， 冷冻温度为-15℃， 水合介质为 pH7.4PBS， 得 LDNR 所

的包封率>70%.

【参考文献】

［1］吴明星，利华明，李绍珍，等.柔红霉素脂质体的制备及兔

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房水中柔红霉素及其脂质体浓度的测定［J］.眼科学

报,1998,14(4):232-235.

［2］吴骏，朱家壁.阿昔洛韦脂质体的制备和稳定性的初步考察

［J］.药学学报,2003,38(7):552-554.

［3］陈荣义，张新申，谢君.茶多酚脂质体制备的研究［J］.中

草药,2005,36(6):856-857.

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