PLCL2基因多态性观察及其与大动脉粥样硬化型脑梗死发病关系分析.pdf

山东医药2023 年第 63 卷第 27 期PLCL2基因多态性观察及其与大动脉粥样硬化型脑梗死发病关系分析王晓蓓1，谢孟岐2，刘梽颍2，吴勤奋1，张明洋2，杨新玲21 新疆医科大学第二附属医院神经内科 新疆神经系统疾病研究重点实验室，乌鲁木齐830063；2 新疆医科大学摘要：目的分析磷脂酰肌醇特异的磷酸酯酶2（PLCL2）rs2014490、rs9824172、rs4685423、rs4618210位点基因多态性及其与大动脉粥样硬化（LAA）型脑梗死发病的关系。方法选取LAA 型脑梗死患者105例（病例组），同一时期体检健康者103 例（对照组）。采用飞行质谱分析技术检测两组入院外周血PLCL2基因rs2014490、rs9824172、rs4685423、rs4618210位点的基因型，计算基因型频率和相关等位基因频率，并与对照组人群的等位基因频率进行对比。基于遗传模型（共显性模型、显性模型、隐性模型、超显性模型），使用非条件 Logistic 回归模型分析PLCL2 基因的rs2014490、rs9824172、rs4685423、rs4618210位点多态性与LAA 型脑梗死发病的关系。结果经Hardy-Weinberg遗传平衡检验，本研究中纳入的人群具有良好群体代表性。PLCL2 rs2014490位点基因型为GG、AG、AA，在病例组中占比分别为29.1%、42.7%、28.2%，对照组中分别为21.5%、52%、26.5%；病例组等位基因G、A基因频率占比分别为50.5%、49.5%，对照组分别为47.5%、52.5%；两组基因型频率及等位基因频率比较，P均0.05。PLCL2 rs9824172位点基因型为GG、GT、TT，在病例组中占比分别为26.7%、40%、33.3%，对照组中分别为24.3%、50.5%、25.2%；病例组中等位基因G、T频率占比分别为46.7%、53.3%，对照组分别为49.5%、50.5%；两组基因型频率及等位基因频率比较，P均0.05。PLCL2 rs4685423位点基因型为AA、CA、CC，在病例组中占比分别为28.8%、35.6%、35.6%，对照组中分别为23.8%、51.5%、24.7%；病例组等位基因A、C频率占比分别为46.6%、53.4%，对照组分别为49.5%、50.5%；两组基因型频率及等位基因频率比较，P均0.05。PLCL2 rs4618210位点基因型为AA、GA、GG，在病例组中占比分别为16.7%、49%、34.3%，对照组分别为22.68%、45.36%、31.96%；病例组等位基因A、G频率占比分别为41.2%、58.8%，对照组分别为45.4%、54.6%；两组基因型频率及等位基因频率比较，P均0.05。基于超显性模型的分析结果显示，PLCL2 基因 rs4685423 位点与 LAA 型脑梗死发病风险具有相关性 OR=0.52，95%CI 0.300.91，P0.05）。结论LAA型脑梗死及正常健康人群PLCL2 rs2014490、rs9824172、rs4685423、rs4618210位点均以突变杂合子所占比例为最多。携带PLCL2 rs4685423 位点纯合子（CC+AA型）人群与携带杂合子（CA）人群相比更易患LAA型脑梗死。关键词：磷脂酰肌醇特异的磷酸酯酶2；基因多态性；脑梗死；大动脉粥样硬化型脑梗死；遗传模型doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2023.27.003 中图分类号：R743.33 文献标志码：A 文章编号：1002-266X（2023）27-0012-05Observation of PLCL2 gene polymorphisms and analysis of their relationships with large artery atherosclerotic strokeWANG Xiaobei1，XIE Mengqi，LIU Zhiyin，WU Qinfen，ZHAN Mingyang，YANG Xinling1 Department of Neurology，The Second Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University，Xinjiang 830063，ChinaAbstract：Objective To analyze the genetic polymorphisms of phosphatidylinositol-specific phosphodiesterase 2（PLCL2）at rs2014490，rs9824172，rs4685423，and rs4618210 loci and their relationships with large atherosclerotic artery（LAA）stroke.Methods The genotypes of PLCL2 gene（rs2014490，rs9824172，rs4685423，and rs4618210）基金项目：新疆维吾尔自治区自然科学基金青年基金项目（2021D01C376）。第一作者简介：王晓蓓（1987-），女，在读博士，副主任医师，主要研究方向为脑血管病。E-mail：通信作者简介：杨新玲（1967-），女，主任医师，主要研究方向为帕金森病、脑血管病。E-mail：开放科学（资源服务）标识码（OSID）12山东医药2023 年第 63 卷第 27 期were detected by flight mass spectrometry in 105 patients with LAA stroke（the case group）and 103 healthy subjects in the same period（the control group），and the genotype frequencies and related allele frequencies were calculated；the frequency distribution of alleles was compared with that of the control group.Based on genetic model（codominant model，dominant model，recessive model，and overdominant model），unconditional Logistic regression analysis was used to explore the relationships between rs2014490，rs9824172，rs4685423，rs4618210 polymorphisms of PLCL2 gene and LAA stroke.Results According to the Hardy-Weinberg genetic equilibrium test，the population included in this study had good population representativeness.The genotypes of PLCL2 rs2014490 locus were GG，AG，and AA，accounting for 29.1%，42.7%，and 28.2%in the case group，respectively；these three genotypes accounted for 21.5%，52%，and 26.5%in the control group，respectively.G and A gene frequencies accounted for 50.5%and 49.5%in the case group and accounted for 47.5%and 52.5%in the control group，respectively.No significant differences were found in the genotype frequencies or allele frequencies between these two groups（all P0.05）.The genotypes of the PLCL2 rs9824172 locus were GG，GT，and TT，accounting for 26.7%，40%，and 33.3%，in the case group，respectively，and 24.3%，50.5%，and 25.2%in the control group，respectively.G and T gene frequencies accounted for 46.7%，53.3%in the case group，and 49.5%，50.5%，in the control group，respectively.No significant differences were found in the genotype frequencies or allele frequencies between these two groups（all P0.05）.The genotypes of PLCL2 rs4685423 locus were AA，CA，and CC，accounting for 28.8%，35.6%，and 35.6%in the case group，respectively，and 23.8%，51.5%，and 24.7%in the control group，respectively.A and C gene frequencies accounted for 46.6%，53.4%in the case group，respectively，and 49.5%，50.5%，in the control group，respectively.No significant differences were found in the genotype frequencies and allele frequencies between these two groups（all P0.05）.The genotypes of the PLCL2 rs4618210 locus were AA，GA，and GG，accounting for 16.7%，49%，and 34.3%，in the case group，respectively，and 22.68%，45.36%，and 31.96%，in the control group，respectively.A and G gene frequencies accounted for 41.2%and 58.8%in the case group，respectively，and 45.4%and 54.6%，in the control group，respectively.No significant differences were found in the genotype frequencies and allele frequencies between these two groups（all P0.05）.The analysis results based on the overdominant mode showed that the PLCL2 gene rs4685423 locus was correlated with the risk of LAA stroke OR=0.52，95%CI（0.30-0.91），P0.05）.Conclusions The PLCL2 rs2014490，rs9824172，rs4685423，rs4618210 loci of the case group and control group all have the highest proportion of mutant heterozygotes.The individuals with PLCL2 rs4685423 locus homozygote（CC+AA type）and individuals carrying heterozygote（CA）are more likely to suffer from LAA stroke.Key words：phosphatidylinositol specific phosphatase 2；gene polymorphisms；cerebral infarction；large artery atherosclerotic stroke；genetic model缺血性脑卒中是由于脑血管动脉粥样硬化和脑血栓、脑栓塞等导致脑动脉狭窄或堵塞，引起脑血流减少，最终引发供血部位脑组织缺血、缺氧的急性脑功能障碍的疾病1。大动脉粥样硬化（LAA）型脑梗死是缺血性脑卒中常见的发病类型，病情严重，预后较差，约有3/4患者不同程度丧失劳动力或生活不能 自 理，给 社 会 及 家 庭 造 成 沉 重 的 经 济 负担2。LAA型脑梗死是多种因素共同作用的结果，动脉粥样硬化是其主要病理过程，目前发病机制尚未完全明确3。磷脂酰肌醇特异的磷酸酯酶 2（PLCL2）是一种蛋白质编码基因，可以增强-氨基丁酸的受体结合活性，参与B细胞激活、-氨基丁酸信号通路和 B 细胞受体信号通路的负调控4-5。PLCL2可间接引起CRP、IL-6 分泌水平升高，促进炎症反应并加速血管动脉粥样硬化，在 LAA 型脑梗死的发生发展中可能起作用6。既往研究发现，PLCL2基因多态性与心肌梗死、缺血性脑卒中、代谢综合征的发生有关系，但其与LAA型脑梗死的关系仍未明确。本研究收集新疆地区LAA型脑梗死患者及体检健康人群的血液样本分析PLCL2基因4个SNPs位点（依据目的基因位点要有潜在功能，并且位于内含子、启动子、5UTR区域的标签位点，最后通过综合考虑SNP 位点所在的功能区、功能预测结合已有研究文献），即PLCL2 rs2014490、rs9824172、rs4685423、rs4618210 的基因多态性，并进一步探讨PLCL2基因多态性与LAA型脑梗死的关系。1 资料与方法 1.1临床资料选取2021年7月2022年7月就13山东医药2023 年第 63 卷第 27 期诊于新疆医科大学第二附属医院诊断为LAA型脑梗死患者105例（病例组），均符合脑梗死的诊断标准，均经临床、头部CT及头部MRI扫描证实，且经颈动脉B超+头颅磁共振血管造影、头+颈部CT血管造影或脑数字剪影血管造影等证实脑血管的主干或分支50%以上的狭窄或闭塞，推测源于动脉硬化，在供血区内发生急性脑梗死，直径大于 1.5 cm，TOAST分型为 LAA型；排除多脏器功能不全、风湿免疫性疾病、感染性疾病。病例组中男65例、女40 例，年龄 4075（63.18 12.97）岁；神经功能缺损评分（NIHSS评分）440分，其中合并有吸烟史36例、饮酒史26例、糖尿病史46例、高血压史86例。对照组为本院同一时期年龄、性别、族别与病例组相匹配体检健康人群103例，排除脑血管病、风湿免疫性疾病以及近2周内发生过炎性病变的人群，其中男52例、女51例，年龄4572（61.24 11.04）岁，其中合并吸烟史23例、饮酒史20例、糖尿病史26例、高血压史66例。本研究获得新疆医科大学第二附属医院伦理委员会批准，受试者均对多态性位点基因型检测知情同意。1.2PLCL2基因多态性分析采集两组入院外周静脉血 2.0 mL，以 EDTA抗凝，用磁珠法全血 DNA 提取试剂盒（中科拜尔）抽取DNA放置于80 C保存。基于飞行质谱的分型技术（massarray SNP）针对PLCL2 rs2014490、rs9824172 rs4685423、rs4618210 SNP位点多态性进行分析，采用Agena公司的Assay Designer4.0软件进行多重 SNP 位点的引物设计评估，引物序列见表1，由北京博淼生物科技有限公司设计。PCR 扩增反应步骤：取 1.5 mL EP 管中配制PCR master mix，并振荡低速离心；每个加样孔中加入 4 L PCR master mix，最后加入 1 L 模板 DNA（20 ng/L）混匀，1 000 r/min 离心 1 min。PCR 循环：94 5 min（1 个循环），94 20 s，56 30 s，72 1 min（45个循环），72 3 min（1个循环），4，在 PCR 反应结束后，将 PCR 产物用虾碱性磷酸酶（SAP）处理，以去除体系中游离的dNTPs。在新1.5 mL EP 管中配制碱性磷酸酶处理反应液，将SAP mix 加入 384 孔 PCR 反应板，反应总体积为7 L，其中PCR产物5 L，SAP mix 2 L。瞬时离心后进行如下反应程序：37、20 min，85、5 min，4，并将384孔反应板放置于PCR仪上进行单碱基延伸反应。待检测SNP基因型互补的单碱基延伸产物进行树脂纯化，树脂纯化后的延伸产物移至点样仪上进行质谱检测及数据输出。将点样后的SpectroCHIP 芯片使用 MALDI-TOF 质谱仪分析，检测结果使用TYPER4.0软件获取原始数据及基因分型图，检查数据文件的完整性和正确性，将结果保存并分析数据。对病例组、对照组PLCL2基因分布进行Hardy-Weinberg遗传平衡检验，采用频数计数法统计受检人 群 PLCL2 rs2014490、rs9824172 rs4685423、rs4618210 位点上的基因型频率；根据基因型频率推算等位基因频率，并将推算得到的等位基因频率与对照组基因频率的分布进行比较。1.3统计学方法采用SPSS23.0统计软件。计数资料以例（%）表示，比较采用2检验，若超过1/4单元格的理论频数均5，则采用Fishers精确概率法。基于遗传模型（共显性模型、显性模型、隐性模型、超显性模型），使用非条件 Logistics 回归模型分析PLCL2 基 因 rs2014490、rs9824172、rs4685423、rs4618210位点多态性与疾病的关联，其关联强度以比值比（OR）及95%置信区间（CI）表示。P0.05）。PLCL2 rs9824172 位点GG、GT、TT基因型在受检人群中的实际频数为53、94、61例，计算得到3种基因型理论频数为 52、93.6、60.32 例，PLCL2 rs9824172位点上各基因型的实际频数和理论频数表1PLCL2基因多态性位点引物和PCR序列位点rs2014490rs9824172rs4685423rs4618210引物名称2nd-PCRP1st-PCRPUEP_SEQ2nd-PCRP1st-PCRPUEP_SEQ2nd-PCRP1st-PCRPUEP_SEQ2nd-PCRP1st-PCRPUEP_SEQPCR引物序列ACGTTGGATGACTCCTCAGTTCTGTGAACCACGTTGGATGTGTAGGAGAGCTCCACAAAGCCCTCCTAATCTCAAGTCACGTTGGATGCTCTCTCTCCATTGCAGTTCACGTTGGATGGCTACCGTGCATTATCTACCgTGCAGTTCTCTTTTTGGAGAGGACGTTGGATGCATCTAAGCCCTCAGTTAGTACGTTGGATGCCCATTAACATGGAGGTGAGccccCTAAGCCCTCAGTTAGTTGTAATACGTTGGATGCTGCCCCCTAAACAATGAGTACGTTGGATGGATTGCTTGATTGTATTTACCAATGAGTTTTGTCTTTTTCT14山东医药2023 年第 63 卷第 27 期的分布差异无统计学意义（2=0.008，P=0.9960.05）。PLCL2 rs4685423位点AA、CA、CC基因型在研究对象中的实际频数为54、89、62例，计算得到3种基因型理论频数为 47.97、102.34、55.43 例，PLCL2 rs4685423 位点上各基因型的实际频数和理论频数的分布差异无统计学意义（2=1.657，P=0.4370.05）。PLCL2 rs4618210 位点 AA、GA、GG基因型在研究对象中实际频数为39、94、66例，计算得到 3 种基因型理论频数为 36.80、97.55、64.66 例，PLCL2 rs4618210 位点上各基因型的实际频数和理论频数的分布差异无统计学意义（2=0.141，P=0.9320.05）。说 明PLCL2 rs2014490、rs9824172、rs4685423、rs4618210位点达到遗传平衡，本研究中选取的样本群体对LAA型脑梗死患者具有群体代表性。2.1两组PLCL2 rs2014490、rs9824172、rs4685423、rs4618210基因型频率、等位基因频率比较PLCL2 rs2014490位点基因型为GG、AG、AA，在病例组中占比分别为 29.1%、42.7%、28.2%，对照组中分别为21.5%、52%、26.5%；病例组等位基因 G、A 基因频率 占 比 分 别 为 50.5%、49.5%，对 照 组 分 别 为47.5%、52.5%；两组基因型频率及等位基因频率比较，2分 别 为 2.13、0.35，P 均 0.05。PLCL2 rs9824172位点基因型为GG、GT、TT，在病例组中占比分别为26.7%、40%、33.3%，对照组中分别为24.3%、50.5%、25.2%；病例组中等位基因G、T频率占比分别为46.7%、53.3%，对照组分别为49.5%、50.5%；两组基因型频率及等位基因频率比较，2值分别为2.54、0.34，P 均0.05。PLCL2 rs4685423 位点基因型为AA、CA、CC，在病例组中占比分别为28.8%、35.6%、35.6%，对照组中分别为23.8%、51.5%、24.7%；病例组等位基因A、C频率占比分别为46.6%、53.4%，对照组分别为49.5%、50.5%；两组基因型频率及等位基因频率比较，2分别为 5.48、0.34，P 均0.05。PLCL2 rs4618210位点基因型为AA、GA、GG，在病例组中占比分别为16.7%、49%、34.3%，对照组分别为22.68%、45.36%、31.96%；病例组等位基因A、G频率占比分别为41.2%、58.8%，对照组分别为45.4%、54.6%；两组基因型频率及等位基因频率比较，2值分别为1.14、0.70，P均0.05。2.2PLCL2 基因的 4 个 SNPs 与 LAA型脑梗死的关系PLCL2 基因 rs2014490 位点，A 是野生型基因、G是突变型基因，共显性模型：GG vs.AA和GT vs.AA；显性模型：AG+GG vs.AA，隐性模型：AA+AG vs.GG；超显性模型：AA+GG vs.AG。基于共显性模型、显性模型、隐性模型、超显性模型的分析结果显示，PLCL2 基因 rs2014490 位点与 LAA 型脑梗死发生风险无相关性（P均0.05）。PLCL2 基因rs9824172位点，T是野生型基因、G是突变型基因，共显性模型：GG vs.TT和GT vs.TT；显性模型：GT+GG vs.TT；隐性模型：TT+TG vs.GG；超显性模型：TT+GG vs.TG。基于共显性模型、显性模型、隐性模型、超显性模型的分析结果显示，PLCL2 基因 rs9824172 位点与 LAA 型脑梗死发生风险无相关性（P均0.05）。PLCL2 基因rs4685423位点，C是野生型基因、A是突变型基因，共显性模型：AA vs.CC 和 CA vs.CC；显性模型：CA+AA vs.CC；隐性模型：CC+CA vs.AA；超显性模型：CC+AA vs.AC。基于超显性模型的分析结果显示，PLCL2 基因 rs4685423 位点与 LAA 型脑梗死发生风险具有相关性（OR=0.52，95%CI 0.300.91，P0.05）。PLCL2 基因rs4618210位点，G是野生型基因、A是突变型基因，共显性模型：AA vs.GG 和 GA vs.GG；显性模型：GA+AA vs.GG；隐性模型：GA+GG vs.AA；超显性模型：GG+AA vs.GA。基于共显性模型、显性模型、隐性模型、超显性模型的分析结果显示，PLCL2 基因 rs4618210 位点与 LAA 型脑梗死发生风险无相关性（P均0.05）。3 讨论 LAA 型脑梗死是多个基因与环境因素共同作用的复杂疾病，越来越多的研究表明，危险因素与基因多态性的交互作用对疾病的发生具有协同效应7-10。SNP分析已经被广泛用于筛查脑梗死疾病易感基因位点。近年发现许多脑梗死的易感基因，如ZNF260 基因 rs34550124 多态性可能影响缺血性脑卒发生过程，并可能通过影响缺血性脑卒中患者的血压、血糖及凝血功能而导致临床症状不同11。LPL rs264位点基因多态性可能与老年高血压患者LAA型脑梗死的发病相关12。PLCL2基因是一种新的磷脂酶C样蛋白，位于染色体3p24.3上，缺乏磷脂酶催化活性，是B细胞受体信号转导和免疫应答的负调控因子6，13，可能在免疫系统中发挥重要作用，参与的疾病有急性心肌梗死、急性脑梗死、代谢综合征、类风湿关节炎、新型冠状病毒肺炎，并与中国人群COVID-19严重程度密切相关14-15。PLCL2缺陷小鼠的实验数据表明，PLCL2是B细胞受体信号传导和免疫应答的负调节剂，被证明间接调节成熟B细胞，从而通过FAS介导细胞凋亡，影响免疫炎症应答。PLCL2基15山东医药2023 年第 63 卷第 27 期因可使免疫系统失调，促进血管动脉粥样硬化，参与心肌梗死的慢性炎症过程。一项全基因组关联研究5发现，PLCL2是日本人心肌梗死的新易感基因。后来有伊朗的一项病例对照研究4发现，PLCL2，从而基因中的 rs4618210 AG多态性有助于心肌梗死的病因学诊断。本研究 发 现，PLCL2 rs2014490、rs9824172、rs4685423、rs4618210基因型频率、等位基因频率在两组间比较差异无统计学意义，PLCL2基因多态性位点与疾病发生的结论不一致，考虑与LAA型脑梗死的发生是个复杂的过程，是环境和基因相互作用的结果有关。HUANG 等8研究发现，PLCL2 基因 rs4685423和rs4618210 SNP可能与中国汉族人LAA型脑梗死的危险性有关。SNP-SNP 相互作用分析显示，rs4685423 是 LAA 卒中风险影响因素8。与携带PLCL2 rs4685423位点CC基因型人群相比，携带AA基因型、CA基因型的人群LAA卒中发生风险降低。本研究结果发现，PLCL2 rs4685423 位点携带纯合子（CC+AA 型）人群与携带杂合子（CA）人群相比患LAA型脑梗死的可能性大。本研究与前人的研究中均发现 PLCL2 rs4685423 位点 CA 杂合子型患LAA型脑梗死风险较其余基因型小，但是AA纯合子型研究结果不一致，考虑可能与不同人群遗传因素和生活环境不同导致的遗传表型发生变化有关。HUANG 等6，8研 究 发 现，与 携 带 PLCL2 rs 4618210位点GG基因型人群相比，携带AA基因型、GA基因型人群LAA卒中的发病风险降低。本研究发现，基于共显性模型、显性模型、隐性模型、超显性模型的分析结果显示，PLCL2 rs2014490、rs9824172、rs4618210位点与LAA型脑梗死发病风险不存在统计学意义上的关联，与文献研究结果不一致，未来需进一步扩大样本量再次验证。总之，LAA 型脑梗死及正常健康人群 PLCL2 rs2014490、rs9824172、rs4685423、rs4618210 位点均以 突 变 杂 合 子 所 占 比 例 为 最 多。携 带 PLCL2 rs4685423 位点纯合子（CC+AA型）人群与携带杂合子（CA）人群相比患 LAA 型脑梗死的可能性大。本研究也有一定的局限性，如研究对象均为新疆地区人群，由于遗传影响与种族背景密切相关，可能不符合其他种族；研究样本量小，对混杂因素调整不充分；采用了病例对照研究设计，只能揭示相关因素与LAA型缺血性脑卒中之间的潜在关联，而无法确定因果关系。参考文献：1中华医学会神经病学分会，中华医学会神经病学分会脑血管病学组.中国急性缺血性脑卒中诊治指南2018 J.中华神经科杂志，2018，51（9）：666-682.2张晓敏.大动脉粥样硬化型脑梗死患者血浆可溶性CD40L、P-选择素水平变化及其意义J.山东医药，2018，58（43）：56-58.3 中国心血管健康与疾病报告 编写组.中国心血管健康与疾病报告 2020 要点解读 J.中国心血管杂志，2021，26（3）：209-218.4RAMEZANPOUR N，NASIRI M，AKBARPOUR O R.Association of rs4618210AG variant in PLCL2 gene with myocardial infarction：a case-control study in IranJ.J Cardiovasc Thorac Res，2020，12（4）：303-306.5HIROKAWA M，MORITA H，TAJIMA T，et al.A genome-wide association study identifies PLCL2 and AP3D1-DOT1L-SF3A2 as new susceptibility loci for myocardial infarction in JapaneseJ.Eur J Hum Genet，2015，23（3）：374-380.6HUANG X，YE Q，ZHANG Y，et al.Fine-mapping of the PLCL2 gene identifies candidate variants associated with ischaemic stroke risk in metabolic syndrome patients J.Front Neurol，2021，12：743169.7张玉超，李艾帆，李永芳，等.MMP-2基因启动子区1306位点C/T多态性与河南汉族急性缺血性脑卒中的关系 J.山东医药，2019，59（20）：1-4.8HUANG X，ZHU Z，CHEN，Y，et al.Two novel SNPs in the PLCL2 gene associated with large artery atherosclerotic stroke identified by fine-mapping J.J Mol Neurosci，2020，70（4）：496-503.9范 雪，赵 冬 雪.CHI3L1 基 因 rs4950928 以 及 GP 基 因rs1671153和rs1654419多态性与中国辽宁地区汉族人群大动脉粥样硬化性卒中的相关性 J.国际脑血管病杂志，2020，28（11）：827-831.10SHIMIZU K，SHIMOMURA K，TOKUYAMA Y，et al.Association between inflammatory biomarkers and progression of intracranial large artery stenosis after ischemic stroke J.J Stroke Cerebrovasc Dis，2013，22（3）：211-217.11玄丽慧，陈应柱，闫丽丽，等.MTHFR C677T基因多态性与脑梗死CISS分型及脑侧支循环的关系 J.中南医学科学杂志，2023，51（2）：218-221.12孙一恺，张彦伟，岳毅，等.脂蛋白脂肪酶基因多态性与老年高血压患者大动脉粥样硬化型脑梗死风险的遗传关联 J.中华老年心脑血管病杂志，2023，25（1）：17-19.13WANG M，WU J，LEI S，et al.Genome-wide identification of RNA modification-related single nucleotide polymorphisms associated with rheumatoid arthritisJ.BMC Genomics，2023，24（1）：153.14YANG X，TANG W，HE Y，et al.A novel fatty-acid metabolism-based classification for triple negative breast cancerJ.Aging，2023，15（4）：1177-1198.15FAN J，LONG Q，REN J，et al.Genome-wide association study of SARS-CoV-2 infection in Chinese populationJ.Eur J Clin Microbiol Infect Dis，2022，41（9）：1155-1163.（收稿日期：2023-04-26）16