维生素C的实验.doc

创新及综合实验
化生系 10生物技术 20101052150 郭建鹏
维生素C的性质实验

（一） 实验目的
1维生素C水溶液的酸碱性
2我们日常生活中喝的饮料中维生素C含量探究
3了解维生素c对人体的作
（二）实验原理
维生素的结构中有—C（OH）=C（OH）—，烯醇式结构具有酸性和还原性。淀粉与碘分子反应的本质是生成了一种蓝色包合物(碘分子被包在了淀粉分子的螺旋结构中了。维生素C能与碘水和淀粉的溶液中的碘单质反应，使溶液褪色
（三）实验用品及材料。
市场维生素C片，石蕊，碳酸氢钠溶液，氢氧化钠，酚酞，淀粉溶液，镁条，
试管，烧杯，量筒，托盘天平，PH试纸
（四）实验步骤
1维生素C水溶液的酸碱性
（）取维生素C片研磨，配成溶液
（2）.滴加紫色石蕊，石蕊变红
（3）使用PH试纸，试纸变红
（4）滴加碳酸氢钠溶液，产生气泡
（5）取一小片镁条，滴加少许维生素C溶液
（6）取少许氢氧化钠溶液，滴加酚酞，逐滴加入维生素C溶液，红色逐渐褪去
（7）取少许维生素C溶液，滴加酚酞，逐滴加入氢氧化钠溶液， 溶液无色变为红色不同
2我们日常生活中喝的饮料中维生素C含量探究

v ①向试管中加入2mL淀粉溶液，滴入3滴碘水。
v ②分别滴加不同的饮料，记录使颜色褪去所需的滴数
v ③分析、比较、讨论不同饮料Vc的含量所用碘水滴数越多，说明饮料中维生素C含量越多
v
饮料种类
①
美汁源果粒橙
②
美汁源热带果肉
③
芬达橙汁
④
水溶C
⑤
康师傅冰红茶
所用饮料滴数

（五）实验结果及讨论

背景资料：维生素c 
维生素C又叫抗坏血酸，是一种水溶性维生素。 
英文名称：Vitamin C ，Ascorbic Acid 
性质 
分子式：C6H8O6；分子量：176.12u；CAS号：50-81-7；酸性，在溶液中会氧化分解。 
物理性质 
外观：无色晶体；熔点：190 - 192℃；沸点：（无）；紫外吸收最大值：245nm；荧光光谱：激发波长－无nm，荧光波长－无nm； 
维生素性质 
溶解性：水溶性维生素；推荐摄入量：每日5克；最高摄入量：引起腹泻之量； 
缺乏症状：坏血病；过量症状：腹泻；主要食物来源：柑桔类水果、蔬菜等 
维生素C主要生理功能 
1、 促进骨胶原的生物合成。利于组织创伤口的更快愈合； 
2、 促进氨基酸中酪氨酸和色氨酸的代谢，延长肌体寿命。 
3、 改善铁、钙和叶酸的利用。 
4、 改善脂肪和类脂特别是胆固醇的代谢，预防心血管病。 
5、 促进牙齿和骨骼的生长，防止牙床出血。； 
6、 增强肌体对外界环境的抗应激能力和免疫力。 
药物作用 
维生素C在体内参与多种反应，如参与氧化还原过程，在生物氧化和还原作用以及细胞呼吸中起重要作用。从组织水平看，维生素C的主要作用是与细胞间质的合成有关。包括胶原，牙和骨的基质，以及毛细血管内皮细胞间的接合物。因此，当维生素C缺乏所引起的坏血病时，伴有胶原合成缺陷，表现为创伤通难以愈合，牙齿形成障碍和毛细血管破损引起大量瘀血点，瘀血点融合形成瘀斑。 
维生素C和坏血病有一段很长的历史渊源。希波克拉底是第一个提到坏血病的人。他描述当时士兵牙床溃烂、牙齿脱落。。。；早期的海上旅行引起了人们对坏血病的重视，船队离开港口3—4个月，船员往往会因此患上坏血病，人们开始发现这是由于海上旅行缺乏新鲜蔬菜和水果的缘故。1932年英国军医从柠檬汁中离析出具有抗坏血病的晶状物质，1933年瑞士科学家合成了维生素C，又叫做抗坏血酸。近代研究表明VC对人体健康至关重要： 
1．胶原蛋白的合成需要维生素C参加，所以VC缺乏，胶原蛋白不能正常合成，导致细胞连接障碍。人体由细胞组成，细胞靠细胞间质把它们联系起来，细胞间质的关键成分是胶原蛋白。胶原蛋白占身体蛋白质的1/3，生成结缔组织，构成身体骨架。如骨骼、血管、韧带等，决定了皮肤的弹性，保护大脑，并且有助于人体创伤的愈合。 
2．坏血病。血管壁的强度和VC有很大关系。微血管是所有血管中最细小的，管壁可能只有一个细胞的厚度，其强度、弹性是由负责连接细胞具有胶泥作用的胶原蛋白所决定。当体内VC不足，微血管容易破裂，血液流到邻近组织。这种情况在皮肤表面发生，则产生淤血、紫癍；在体内发生则引起疼痛和关节涨痛。严重情况在胃、肠道、鼻、肾脏及骨膜下面均可有出血现象，乃至死亡。 
3．牙龈萎缩、出血。健康的牙床紧紧包住每一颗牙齿。牙龈是软组织，当缺乏蛋白质、钙、VC时易产生牙龈萎缩、出血。 
4．预防动脉硬化。可促进胆固醇的排泄，防止胆固醇在动脉内壁沉积，甚至可以使沉积的粥样斑块溶解。 
5.是一种水溶性的强有力的抗氧化剂。可以保护其它抗氧化剂，如维生素A、维生素E、不饱和脂肪酸，防止自由基对人体的伤害。 
6．治疗贫血。使难以吸收利用的三价铁还原成二价铁，促进畅道对铁的吸收，提高肝脏对铁的利用率，有助于治疗缺铁性贫血。 
7．防癌。丰富的胶原蛋白有助于防止癌细胞的扩散；VC的抗氧化作用可以抵御自由基对细胞的伤害防止细胞的变异；阻断亚硝酸盐和仲胺形成强致癌物亚硝胺。曾有人对因癌症死亡病人解剖发现病人体内的VC含量几乎为零。 
8．保护细胞、解毒，保护肝脏。在人的生命活动中，保证细胞的完整性和代谢的正常进行至关重要。为此，谷胱甘肽和酶起着重要作用。 
谷胱甘肽是由谷氨酸、胱氨酸和甘氨酸组成的短肽，在体内有氧化还原作用。它有两种存在形式，即氧化型和还原型，还原型对保证细胞膜的完整性起重要作用。VC是一种强抗氧化剂，其本身被氧化，而使氧化型谷胱甘肽还原为还原型谷胱甘肽，从而发挥抗氧化作用。 
酶是生化反应的催化剂，有些酶需要有自由的琉基（-SH）才能保持活性。VC能够使双硫键（-S-S）还原为-SH，从而提高相关酶的活性，发挥抗氧化的作用。 
从以上可知，只要VC充足，则VC、谷胱甘肽、-SH形成有力的抗氧化组合拳，清除自由基，阻止脂类过氧化及某些化学物质的毒害作用，保护肝脏的解毒能力和细胞的正常代谢。 
9．提高人体的免疫力。 
白细胞含有丰富的VC，当机体感染时白细胞内的VC急剧减少。VC可增强中性粒细胞的趋化性和变形能力，提高杀菌能力。 
促进淋巴母细胞的生成，提高机体对外来和恶变细胞的识别和杀灭。 
参与免疫球蛋白的合成。 
提高CI补体酯酶活性，增加补体CI的产生。 
促进干扰素的产生，干扰病毒mRNA的转录，抑制病毒的增生。 
10．提高机体的应急能力。人体受到异常的刺激，如剧痛、寒冷、缺氧、精神强刺激，会引发抵御异常刺激的紧张状态。该状态伴有一系列身体，包括交感神经兴奋、肾上腺髓质和皮质激素分泌增多。肾上腺髓质所分泌的肾上腺素和去甲肾上腺素是有酪氨酸转化而来，在次过程需要VC的参与。 
进入人体的维生素C很快分布于个组织器官，在正常情况下，人体维生素C库为1500毫克。多余的大部分随尿排出，少部分随大便、汗及呼吸道排出。但是在感染情况下，人体所需的为平时的20---40倍之多，而且所有的药物都会破坏体内的VC。所以在人体有状态的情况下补充VC是非常有益的。美国著名营养学家戴维斯问过对营养学有研究的医生，是否应将VC当作家中常备药品，以便任何疾病初期都可以服用。大多数医生都说：“当然比任何阿司匹林安全多了”，第一次使用足够的量比连续使用小剂量有更好的效果。 
维生素C是一种水溶性维生素（其水溶液呈酸性）化学式为C6H8O6，人体缺乏这种维生素C易得坏血症，所以维生素C又称抗坏血酸。维生素C易被空气中的氧气氧化。在新鲜的水果、蔬菜、乳制品中都含维生素C，如新鲜的橙汁中维生素C的含量在500mg/L左右 
维生素C有防病作用 
一项调查表明，每天稍增加一些水果与蔬菜的摄入，就可能起到防病作用。 
维生素C可能对若干慢性疾病有保护作用。然而，从前瞻性的研究结果来看，维生素C与心血管病或癌症的关系，并非始终如一。为了评估血浆维生素C的水平与所有原因（心血管病、缺血性心脏病和癌症）死亡率之间的关系，英国剑桥大学临床医学院Khaw等，对19496名45～79岁成人，进行了4年的前瞻性调查。(Lancet 2001,357∶657) 
纳入的研究对象填写一份健康和生活方式的问卷调查表，并接受身体检查。研究者随访4年，追踪死亡原因。这些人按性别特异的血浆维生素C5分位值加以划分。研究者采用Cox比例风险模型确定维生素C与其它危险因素对死亡率的影响。 
结果显示，血浆维生素C浓度，与男女两性所有原因（包括心血管病和缺血性心脏病等）的死亡率呈负相关。位于维生素C最高5分位组的死亡危险，为最低5分位组的一半(P< 0.0001)。整个维生素C浓度分布，与死亡率连续相关。血浆维生素C浓度每上升20μmol/L（约相当于每天增加水果或蔬菜摄入量50克），所有原因死亡危险下降约20％(P< 0.0001)，且不受年龄、收缩压、血胆固醇、吸烟习惯、糖尿病和补充剂应用等的影响。在男性中，维生素C水平与癌症死亡率呈负相关；但在女性则不然。 

发现历史 

坏血病是几百年前就知道的疾病，但是一直到1911年才确定它是因为缺乏营养而产生的。在18世纪坏血病在远洋航行的水手中非常普遍，但也流行在长期困战的陆军士兵中，长期缺乏食物的社区，被围困的城市，监狱犯人，和劳工营中。例如140年前加州的淘金工人和90年前阿拉斯加的淘金工人都有大批的坏血病病例。 

坏血病开始的时候症状是四肢无力，精神消退，烦燥不安，做任何工作都易疲惫，皮肤红肿。病人觉得肌肉疼痛，精神抑郁。然后他的脸部肿胀，牙龈出血，牙齿脱落，口臭。皮肤下大片出血看来像是严重的打伤。最后是严重疲惫、腹泻呼吸困难，骨折，肺脏或肾脏衰竭而致死亡。早年航海人员因坏血病死亡的灾难不可枚举，因为他们在航行时的食物是面饼和咸肉，含有很少的维生素C。 

1497年7月9日到1498年5月30日，葡萄牙航海家达伽马（Vasco da Gama）发现绕过非洲到达印度的航线，他的160个船员中，有100人死于坏血病。 

1519年，葡萄牙航海家麦哲伦率领的远洋船队从南美洲东岸向太平洋进发。三个月后，有的船员牙床破了，有的船员流鼻血，有的船员浑身无力，待船到达目的地时，原来的200多人，活下来的只有35人，人们对此找不出原因。 

1536年法国探险家Jacques Cartier在发现圣劳伦斯河之后，溯流而上抵达魁北克过冬。探险队中24人死于坏血病，其它多人也都病重。有一位印第安人教他们饮用一种arbor vitae（Thuja occidentalis）树叶泡的茶，就治好了这些人。后来发现这种树的叶子里每100克含有50毫克的维生素C。 

西班牙征服墨西哥的荷南·科尔蒂斯将军，在1536年占领下加州Baja California后，因为水手多数患坏血病而回师，以致没有继续侵占加州本部。1577年一艘西班牙大帆船漂流在马尾藻海海面上，发现时所有的船员都死于坏血病。 

相对于在15世纪中国明朝的郑和多次率领下西洋的事迹记载，并无发现有大量船员因长期航行而染上坏血病而死，这与当时郑和船队带备蔬菜和水果有关，亦可见蔬菜和水果内的物质（后来发现是维生素C）对防治坏血病有很大的帮助。 

1734年，在开往格陵兰的海船上，有一个船员得了严重的坏血病，当时这种病无法医治，其它船员只好把他抛弃在一个荒岛上。待他苏醒过来，用野草充饥，几天后他的坏血病竟不治而愈了。诸如此类的坏血病，曾夺去了几十万水手的生命。 

1740年冬，英国海军上将George Anson率领961水手乘6艘船远征。1741年6月抵达Juan Fernandez岛时只剩下335人，半数以上的船员死于坏血病。当时海军上将John Hawkins发现长期航海时海员发生坏血病的机会和只吃干粮的时间成正比例。如果他们能够吃到新鲜食物，包柑橘类水果，就会迅速复原。因为新鲜的蔬菜水果是在船上最难保存的食物，所以英国海军致力研究发展其代用品。 

1747年英国海军医官詹姆斯·林德在船上做了这个现在很着名的实验，12个严重的坏血病海员，大家都吃完全相同的食物，唯一不同的药物是当时传说可以治疗坏血病的药方。两个病人每天吃两个橘子和一个柠檬，另两人喝苹果汁，其它人是喝稀硫酸，酸醋，海水，或是一些其它当时人认为可治坏血病的药物。6天之后，只有吃柑橘水果的两人好转，其它人病情依然。Lind继续研究，1753年出版了《坏血病大全》（A Treatise on Scurvy）一书。 

英国的着名探险家库克船长最为人称道的是他控制了可怕的坏血病。他在1768年到1780年间三次远航太平洋，他的船员有些生病，但是没有一人丧生于坏血病。而他同时许多其它探险船队中，坏血病依然猖獗。库克防治坏血病的贡献，使得伦敦皇家学会选他为会员，并授予他Coply奖章。每次航行靠岸时，库克都命令船员上岸购买水果蔬菜及绿色植物来补充营养。有一次他在旗舰Endeavour上带了7860磅的德国酸白菜Saukerkraut，船上70人一年航程中每人每周有两磅的供给。酸白菜含有丰富的维生素C，每100克含有50毫克的维生素C。 

虽然在Hawkins上将之后有经验的航海家都知道用柠檬汁代替柑橘类水果，可以防治坏血病，但是柠檬汁价格贵，贮藏不易，船长和船公司都觉得宁信其无，可以不用就不用。对柠檬汁的效果，公众也是存疑，在医学界也是争议不断。 

1795年Lind去世，Lind人微言轻，他的实验结果也湮没无闻。但是另一位英国医生Gilbert Blane相信Lind的结果，1795年Blane因为是英王御医而被任命为英国海军医疗委员会委员，由于他的努力，英国海军部才通令每个海军官兵每天都必须饮用3/4盎斯柠檬汁。1796年英国海军中坏血病病例大幅降低。英国海军战力倍增，在1797年击败西班牙舰队，缔造了大英日不落帝国。 

虽然英国海军部采用了柠檬汁，商业部却自行其是，因而坏血病在英国商船上仍然猖獗不止。70年之后，英国商业部在1865年才规定商船上的海员也必须每天服用柠檬汁。但那时还不知柠檬中的什么物质对坏血病有抵抗作用。 

1907年Axel Holst 和Theodor Frolich发表使用天竺鼠做坏血病实验的论文。他们观察到老鼠和其它的动物都不会生坏血病，只有天竺鼠和人类相似，在禁绝新鲜蔬果后会产生坏血病。这是为什么现代的医药研究一定要用天竺鼠做实验，所得的结果才能推引到人类的疾病上。我们现在知道天竺鼠和灵长类(包括人类)都不能自己制造维他命C，其它的动物都能在肝脏或肾脏中制造维他命C。人类大多数的疾病，都很少见于其它动物。动物受伤和疾病之后都可以很快地自行复原，只有人类因为不能自行生产维他命C而需要医生的专业服务。 

1912年，波兰裔美国科学家卡西米尔·冯克，综合了以往的试验结果，发表了维生素的理论。他认定自然食物中有四种物质可以防治夜盲症，脚气病，坏血病，和佝偻病。这些物质被丰克称为 “维持生命的胺素（Vitamine）”，因为拉丁文中的vita意思是生命。冯克以为这些物质都含有氮或胺基，所以加上胺素Amine的结尾。后来发现有些物质并不含氮，所以改称为Vitamin，中文称为维生素或维他命，四种物质分别被称为维生素A，维生素B，维生素C和维生素D。中文分别称为维生素甲，维生素乙，维生素丙，和维生素丁。后来发现的就依英文字母顺序一直排到维生素K。维生素B里面又发现有许多不同成份，就有了维生素B1，B2，B3，B6及B12等名称。 

1920-1930年代，有机化学家群起研究维他命，试探在食物中分析维他命并决定它们的化学成份。 

1928年匈牙利生化学家Albert Szent-Gyorgyi在英国化学家Frederick Gowland Hopkins的实验室中成功地从牛的副肾腺中分离出1克纯粹的维他命C。他也因为维生素C和人体内氧化反应的研究获得1932年的诺贝尔医学奖。1928年他发表论文，确定维生素C的化学分子式是C6H8O6，所以称之为Hexuronic acid。1929年他到美国Rochester， Minnesota的Mayo医院做研究，附近的屠宰场免费供给他大量的牛副肾，他从中分离出25克的维他命C。他将一半提炼出纯粹的维他命C送给英国的醣类化学家Walter H. Haworth进行分析工作。可是那时技术尚不成熟，Haworth没有能决定维他命C的结构。 

1930年Szent-Gyorgyi回到匈牙利，发现匈牙利的辣椒中含有大量的维他命C。他成功地从中分离出1公斤纯粹的Hexuronic acid，并再送一批给Haworth继续分析。1932年美国匹兹堡的化学家Charles King从Szent-Gyorgyi的学生Joe Svirbely知道他鉴定Hexuronic acid就是维他命C，就抢先在Nature杂志上发表这个结果。但是1937年的诺贝尔医学奖还是颁给Szent-Gyorgyi，因为他对维他命C和人体内氧化反应的研究。Haworth决定了维他命C的正确化学构造。并且用不同的方法制造出维他命C，而获得了1937年的诺贝尔化学奖。Szent- Gyorgyi和Haworth最后决定将维他命C命名为抗坏血酸ascorbic acid。 

1933年瑞士化学家Tadeus Reichstein发明了维生素C的工业生产法。此法是先将葡萄糖还原成为山梨醇，经过细菌发酵成为山梨糖，山梨糖加丙酮制成二丙酮山梨糖(Di-acetone sorbose)， 然后再用氯及氢氧化钠氧化成为二丙酮古龙酸DAKS（Di-acetone-ketogulonic acid）。DAKS溶解在混合的有机溶液中，经过酸的催化剂重组成为维生素C。这个方法的专利权在1934年被罗氏公司购得，成为50余年来工业生产维生素C的主要方法。罗氏公司也因此独占了维生素C的市场。 

1948年美国东部流行非典型肺炎，1949年全世界流行小儿麻痹症，各国各地医师束手无策，只能隔离病人，防止传染。美国南卡洛林纳州的Fred R. Klenner医师用静脉注射维生素C治愈了许多这两种病人。Klenner发现静脉注射维生素C可以治疗所有病毒感染的疾病，如肝炎，脑炎，流行性感冒以及许多其它急性和慢性的病症。他的经验和许多其它使用维生素治病的报告都被医药界忽略。医药界追求的是高利润的专利药物及疫苗，没有专利权的维生素都受到排斥和压制。 

1959年美国生化学家J. J. Burns发现人类和灵长类动物会得坏血病，是因为他们的肝脏中缺乏一种酶L-gulonolactone oxidase，它是将葡萄糖转化为维生素C的四种必要酶之一。因此人必须从食物中摄取维生素C，才能推持健康。其它的哺乳动物都在肝脏中自行制造维生素C，两栖动物及鱼类则在肾脏中制造维生素C。许多人类特有的疾病，如伤风，感冒，流行性感冒，肝炎，心脏病及癌症，在动物中都少见，这些疾病都是因为人体不能自行制造维生素而产生的。 

1970年两次获得诺贝尔奖的化学家莱纳斯·鲍林出版<维生素C治感冒>(Vitamin C and Common Cold）一书。提出高剂量（远远超过0）的维生素C可以预防和治疗感冒。虽然医药界激烈反对他的论点，但是鲍林的研究的确引起了学术界对应用超过RDA剂量维生素C的重视，带动了世界各地大量的同类研究。这本书畅销美国，民众抢购维生素C以致造成世界性缺货。奇怪的是1970年之后，美国人因心脏病死亡率显着下降，而同样是开发国家的西欧人和日本人的心脏病死亡率却持平。许多人认为这是维生素C预防心脏病的有力左证。 

1976年纽约星期六晚邮的主编卡增兹Norman Cousins在新英格兰医学期刊上发表《疾病的解剖》（Anatomy of an Illness）一文。新英格兰医学期刊绝少刊登外行人的文章。在此文中卡增兹详述他在1964年与非常痛苦的关节性脊椎炎搏斗的经验。他观看喜剧电影，大笑10分钟后得到两小时无痛的安眠，这样他就停止服用阿司匹林等止痛剂。他又坚持每天静脉注射25克维生素C来修复他的关节和联结组织。不久他就恢复到可以回星期六晚邮上班工作。此文震动美国医界，三千多位医师写信给卡增兹，支持他的论点。 

1979年Ewan Cameron医师和鲍林出版《癌症和维生素》（Cancer and Vitamin C）一书。提出高剂量的维生素C可以帮助癌症患者及治疗一些癌症，再度挑起医药界激烈的反对。美国国家卫生院NIH特别商请着名的Mayo医院的癌症医师C. G. Moertel做两次双盲实验证明高剂量维生素C不能治疗癌症。但是两次实验的过程有许多问题，其结果并没有平息维生素C治疗癌症的争议。 

1980年在中国科学院北京微生物研究所的研究员尹光琳发明 “维生素C二步发酵新工艺”，大幅改进了Reichstein的一步发酵法，减低维生素C的生产成本。此法先将葡萄糖还原成为山梨醇，经过第一次细菌发酵成为山梨糖，再经过第二次细菌发酵转化为KGA（2-keto-gulonic acid），最后异化成为维生素C。这项专利的国际使用权于1985年出售给瑞士罗氏公司，是当时中国对外技术转让中最大的项目。罗氏得到了专利但是并不使用，仍然沿用旧有的Reichstein的一步发酵法。它的目的是要防止其它外国公司使用新法与其竞争。这项专利在中国的国内使用权并没有卖断给罗氏公司，到了1990初期中国国内成立了26家药厂用二步发酵法生产维生素 C。 

1981年凯斯卡特Robert Cathcart医师发现用腹泻测定人体的维生素C饱和量的方法。口服过量维生素C会产生腹泻。腹泻显示人体所有器官的维生素C到达饱和。正常的人维生素C饱和量是每天4-15克。有病的人维生素C饱和量大幅增加，病情越严重，维生素C饱和量越高，甚至可以高到每天200克。每天口服略低于饱和量的维生素C，是治疗各种感染疾病的验方。凯斯卡特医师用饱和量维生素C的方法，成功治愈7000综感冒、流行性感冒、非典型肺炎、急性单核血球病（昏睡症Acute Mononucleosis）、急性肝炎、干草热、气喘病、外伤Trauma、手术创伤、烧伤、背痛、关节炎、猩红热、泡疹、带状泡疹等症。这个方法解决了60年来使用维生素C治病的争议，就是维生素C治病的剂量问题。以前许多实验显示维生素C无效，是因为剂量没有达到维生素C饱和量的原故。 

1990年代大众也体认到西方医药的限制和缺陷，而寻求另类医药（Alternative Medicine）。中医、中药、传统草药、针灸、喻咖等渐渐流行，各种维生素销量也都大幅增加。国际几家大维生素生产商为了长期垄断维生素市场，获得高额利润，曾违反市场竞争规则，达成秘密的价格联盟，划分市场范围，以期控制市场价格。维生素C的三大药厂瑞士的罗氏公司，德国的巴斯夫和日本的武田制药形成维生素C垄断集团，维生素C价格从1973年的4美元每千克提高到1994年的18美元每千克。 

在维生素C的国际高价的引诱之下，中国的许多药厂纷纷采用二步发酵法试图打入国际市场。1996年国际维生素C垄断集团就为打击中国药厂开始降价竞争，每个月降价10％。到1997年时维生素C价格跌到4美元每千克，迫使中国的26家维生素C药厂关闭了22家，只剩下四巨头东北制药、石药维生药业、华药维尔康药业和江苏江山药业苦撑。到2002年，价格跌到谷底2.3美元。有趣的事是国际维生素C垄断集团自食恶果，不堪亏损而全部倒闭或解体，武田制药的维生素C厂卖给巴斯夫并且停产，罗氏公司的维生素C厂卖给荷兰的DSM。 

1992年Mathias Rath医师和鲍林发表《根绝心脏病宣言》（Call to Abolish Heart Diseases），宣称维生素C可以治疗心脏和血管的各种病症。他们并且推广治疗心脏病的鲍林药方(Pauling Recipe)，其中的成分是维生素C与两种氨基酸赖氨酸和脯氨酸。他们认为这三种化合物同服可以防止及清除冠状动脉的阻塞。 

1994年十月，美国克林顿总统签署《膳食补充剂健康教育法》（Dietary Supplement Health and Education Act, DSHEA）明定民众有权利贩卖和选用各种营养添加剂，政府不得禁止或干涉。此法案的起因是美国的医药集团及美国食品药物管理局游说国会，促请通过法令将维生素等营养剂划归为需要医师处方的药品。一旦维生素成为处方药，民众不准随意购买，药厂就可以提高价格，增加利润。但是消息传出后举国哗然，国会为民意所驱，反而无异议通过DSHEA法案，保障民众服用营养剂的权利。 

医药集团在美国的挫败促使他们改弦更张，试图在联合国的营养管理委员会Codex Alimentarius架构下控制维生素药物的销售管道。营养管理委员会是德国药厂控制下的组织，从1996年就设法通过将维生素等营养剂划归为需要医师处方药品的议案。此议案如果通过，世界各国（包括美国）都必须遵守，否则会遭受世界贸易组织的制裁。Rath医师每年趁Codex Alimentarius在德国开会期间，都号召群众在会场前游行示威，反对此议案。致使此案迄今仍未能通过。 

1999年5月，美国司法部的反托拉斯小组控诉获胜，令当时世界最有实力的维生素厂商自食苦果，为他们的价格操纵行为支付了9.9亿美元的罚金。由于世界上最大的9家维生素生产企业操纵维生素C的销售价格，涉案金额高达50亿美元，不但增加了可口可乐、宝洁等大用户的生产成本，而且严重损害了消费者的利益。美国司法部指控瑞士罗氏公司是价格卡特尔的始作俑者，对其罚款5亿美元，德国BASF被罚2.25亿美元，其它被罚款者分别是比利时、德国、法国和日本的维生素生产企业。罗氏公司最高级主管承认罪行并进入美国监狱服刑。2001年11月，欧盟也对上述维生素制造商处以高达8.55亿欧元的罚款，其中罗氏公司为4.62亿欧元，BASF为2.96亿欧元。 

2000年全球维生素C的产量为8万吨，2001年猛增到10万吨，而这两年国际市场的需求量也就在8.5万吨左右徘徊，突出的供需矛盾是2001年国际维生素C原料市场竞争最激烈的根本原因，期间维生素C原料每公斤的市场价最低曾降到每公斤2.3美元。2002年初，随着国际两大巨头罗氏公司以及德国巴斯夫的战略调整，罗氏公司将维生素C业务出售给荷兰的DSM，巴斯夫收购日本武田的维生素C生产线并停止生产。国外企业的产量减少，中国出口的维生素C占了世界市场的80％。 
2001年中国政府维他命C为协调低价无序竞争局面，在中国医药保健品进出口商会的牵头下，包括四巨头在内的国内维他命C企业召开了一次行业会议，讨论发展问题，以及协商各自的出口量，并且后来形成了每年的例会。2002 年5 月1 日开始，维他命C被列为海关审价、商会预核签章的管制出口商品。 
2002年的严重急性呼吸系统综合症(SARS)危机时，赖斯Rath医师在香港和新加坡刊登巨幅广告，忠告华人大众非典不是绝症，是可以用维生素C治疗的。非典的阴霾引起亚洲的维生素C抢购风潮，维生素C价格飙到16美元每千克。在非典流行时期，上海罗氏公司生产的“力度伸维C泡腾片”被抢购一空，除国内生产线连续运转生产外，还从阿根廷紧急调运10万盒100万支“力度伸”，法国、澳大利亚以及阿根廷的“力度伸”生产基地也全部三班轮转、夜以继日生产，供给中国市场。但是危机一过，维生素C价格又跌回到4美元每千克。2004年石药集团维生药业一条15000吨的维他命C生产在线线，总产量达到每年3万吨。其它的维他命C药厂都在等待另一波的削价兢争。
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