过敏原血清学检测专家讲座.pptx

Klicken Sie,um das Titelformat zu bearbeiten,Klicken Sie,um die Formate des Vorlagentextes zu bearbeiten,Zweite Ebene,Dritte Ebene,Vierte Ebene,Fnfte Ebene,EUROIMMUN,过敏原血清学检测,过敏原血清学检测专家讲座,第1页,目录,一,.,过敏原概述,二,.,过敏原常见方法学比较,三,.,欧蒙过敏原产品特征及印迹法特点,四,.,过敏原体外检测常见问题及解答,过敏原血清学检测专家讲座,第2页,一、过敏原概述,1906,年,von Piguet,提出了,allergy,一词。其概念为：机体反抗原刺激产生一个“改变了反应性”状态。这种状态可能是保护性，即产生了免疫力；也可能是破坏性，即产生了超敏反应。,超敏反应是机体对某抗原首次应答后，再次接收相同抗原刺激时，发生一个以机体生理功效紊乱或组织细胞损伤为主特异性免疫应答。,过敏原血清学检测专家讲座,第3页,过敏原,吸入过敏原,食物过敏原,接触过敏原,输注过敏原,空气中吸入过敏原(比如,.,植物花粉,动物毛发,室内灰尘或虫螨等),过敏原血清学检测专家讲座,第4页,过敏原,经过胃肠道吸收(比如.鱼、肉、蛋、,坚果和蔬菜等,),吸入过敏原,食物过敏原,接触过敏原,输注过敏原,过敏原血清学检测专家讲座,第5页,过敏原,皮肤接触（比如：金属饰品、化装品和生活日用具等）,吸入过敏原,食物过敏原,接触过敏原,输注过敏原,过敏原血清学检测专家讲座,第6页,过敏原,直接输入体内(比如：昆虫或动物毒液,注射类药品等),吸入过敏原,食物过敏原,接触过敏原,输注过敏原,过敏原血清学检测专家讲座,第7页,过敏损害,过敏是以损害粘膜为主要表现,过敏性结膜炎（眼粘膜）,过敏性鼻炎（鼻粘膜）,过敏性哮喘（气管粘膜）,过敏性紫癜（皮肤粘膜）,过敏性肠绞痛（肠粘膜）,过敏性紫癜肾炎（肾内粘膜）,心脏有粘膜组织，心脏是必定会受到损,。心肌酶升高，尤其是特异性,CK-MB,（肌酸激酶同工酶）。,CK-MB,分布在心肌和结缔组织。心电图表现主要是心肌膜损害，表现为传导阻滞。,过敏原血清学检测专家讲座,第8页,1.,皮肤科,（,30,）：急慢性荨麻疹、异位性皮炎等,2.,耳鼻咽喉科,（,30,）：以过敏性鼻炎为主,3.,内科,（,25,）：以哮喘、过敏性肺泡炎为主,4.,小儿科,（,15,）：儿童变态反应病诊治,5.,变态反应专科,（,参考范围,可能存在过敏反应,16,岁,100 IU/ml,过敏原血清学检测专家讲座,第26页,总,IgE ELISA:,结果解释,总,IgE,超出参考范围大多数是因为过敏反应造成,例外:寄生虫病;免疫抑制;,HIV;,重度烧伤,临床相关特异性,IgE,结果,与总,IgE,相关特异性,IgE,浓度越高，患者临床过敏反应可能性就越大,.,过敏原血清学检测专家讲座,第27页,总,IgE ELISA:,结果解释举例,特异性,IgE,总,IgE,特异性,IgE5 IU/ml(kU/l),总,IgE 200 IU/ml,患者1,特异性,IgE5 IU/ml(kU/l),总,IgE 25 IU/ml,患者2,过敏原血清学检测专家讲座,第28页,总,IgE ELISA:,总结,简单和快捷试验操作,低检出限,(1IU/ml),高重复性,(,批内试验:5%),经过4份标准品计算定量结果,标准品采取,WHO,标准,经过,ELISA,工作站实现自动分析,过敏原血清学检测专家讲座,第29页,特异性,IgE,EUROLINE,ALLERCOAT,TM,6,DP 3713 E,吸入性及食物性过敏原,过敏原血清学检测专家讲座,第30页,特异性,IgE,EUROLINE,简便和快捷试验操作,仅需少许样本,(,过夜温育),结果基于广泛应用,EAST,分级系统,与,Pharmacia CAP,含有良好相关性,自动温育,经过,EUROLineScan,程序实现结果自动判读,过敏原血清学检测专家讲座,第31页,类别,浓度,kU/l,sIgE,水平,临床意义,0,100,特高（,+,）,特重,特异性,IgE,分级标准及临床意义,过敏原血清学检测专家讲座,第32页,特异性,IgE,EUROLINE,血清温育,颜色反应,色原,底物,膜条,抗原提取物,温育,60 min,二抗反应,10 min,底物温育,AP,标识二抗,AKP,清洗 3,x 5min,清洗 3,x 5min,自动化判读或肉眼观察,60 min,未稀释,过夜,1:11,稀释,过敏原血清学检测专家讲座,第33页,EUROLINE,检测系统,过敏原血清学检测专家讲座,第34页,结果判读,:,EUROLineScan,特异性,IgE,欧蒙印迹法自动化,过敏原血清学检测专家讲座,第35页,过敏原血清学检测专家讲座,第36页,欧蒙印迹法过敏原谱,中欧,吸入,儿童吸入,食物,特应性,交叉反应,儿童,昆虫毒液,亚洲,中国吸入,中国食物,中国特应性,韩国吸入,1+2,韩国食物,1+2,东南亚吸入,东南亚食物,地中海,中东,地中海吸入,中东吸入,中东食物,Inhal.Screen AE,Food Screen AE,海湾吸入,海湾食物,过敏原血清学检测专家讲座,第37页,特异性,IgE,欧蒙印迹法各种组合,为不一样过敏原组合提供可能,:,在一条膜条上包被36种以上过敏原,大约170种以上过敏原,满足新过敏原组合需要,:,市场信息反馈,目标过敏原定位和其它参数确认,提供特殊过敏原原材料,提供阳性血清,过敏原血清学检测专家讲座,第38页,二、,过敏原常见方法学比较,既往病史,皮试,:刺试,抓试,皮外试,皮内试,试验室检验,:,IgE,检测,CAST(,细胞抗原刺激试验,),激发试验,:(金标准)-鼻腔激发试验,-,双盲稳定剂控制食物刺激试验,(DBPCFC),过敏原血清学检测专家讲座,第39页,二、,过敏原常见方法学比较,过敏原血清学检测专家讲座,第40页,二、,过敏原常见方法学比较,类别,方法,特点,体内,皮肤针刺试验,强烈反应时轻易相互混同结果,（皮内试验点、刺试验或,价格廉价、快速，但对过敏原质量控制有严格要求，患者痛苦，,刺痕试验）,无法防止对于高过敏体质患者含有一定生命危险性问题,同时试验各种抗原时，轻易不一样抗原液交叉混合,斑贴试验,斑贴试验主要是检测,型变态反应，敏感程度不太高。,鼻粘膜激发试验（,SNPT,）,患者试验过程较痛苦,无法防止对于高过敏体质患者含有一定生命危险性问题,操作等较繁琐,食物激发试验,食物过敏检测金标准,（,DBPCFC,）,对于食物过敏反应严重患者较危险,操作麻烦，需要病床观察,患者试验过程较痛苦,体外,血清学检验,对患者来说使用安全，适合儿童，可防止强烈皮肤反应,防止其它皮肤病造成误判,使用方面，少许血清一次即可完成数十种种过敏原检测,适适用于对食物过敏患者，效应器官不在皮肤,适适用于用抗组胺类或激素类治疗而不能停药者,生物共振,无创、快速、检测范围广、无创伤性、但该技术缺乏科学依据，,轻易受到人为信号干扰，难以建立严格标准,过敏原血清学检测专家讲座,第41页,体外诊疗优势,对患者来说不存在风险,尤其适合,5,岁以下儿童，可防止强烈皮肤反应,与其它皮肤病区分,不需附加其它药品,适合无法进行皮试食物过敏原检验,过敏原血清学检测专家讲座,第42页,二、欧蒙过敏原产品特征及印迹法特点,同类产品中单一膜条内过敏原数量最多,不添加任何增效剂,针对中国人设计过敏原,对患者来说不存在风险,不需停顿服用抗组胺药品,独家包被有,CCD,指示带，解释交叉反应假阳性结果,全部厂家中样本使用体积最小（,100ul,）,快速测试过敏原，整个试验完成仅需要,2.5-3,小时,欧蒙过敏原体外诊疗优势,过敏原血清学检测专家讲座,第43页,同类产品中单一膜条内过敏原数量最多,可一次检测,20,大项，,30,小项过敏原,过敏原血清学检测专家讲座,第44页,不添加任何增效剂,现在有些产品为了增大反应强度，在产品中添加增效剂，加大了反应强度。造成了判定结果与临床有不符现象。,欧蒙产品不添加任何增效剂，本着科学、实事求是精神真实、准确判定试验结果。,过敏原血清学检测专家讲座,第45页,针对中国人设计过敏原,过敏原采集于中国，提升特异性检出率,DP3713-1601E,（中国组合）针对中国人设计组合,过敏原血清学检测专家讲座,第46页,对患者来说不存在风险,无痛检测：经过血清中,IgE,抗体与过敏原结合，测试过敏反应,防止了人体与过敏原直接反应造成风险,用点刺针穿过液滴，轻轻刺入皮内,将可疑致敏物质敷贴于患者皮肤上,斑贴试验,点刺试验,过敏原血清学检测专家讲座,第47页,不需停顿服用抗组胺药品,以往过敏原检测需要患者体检停顿服用抗组胺药品。方便提升试验准确性。,欧蒙过敏原检测试剂无需患者停顿服用抗组胺药品。（,惯用有苯海拉明、异丙臻、扑尔敏、赛庚啶、息斯敏、特非拉丁等）,过敏原血清学检测专家讲座,第48页,独家包被有,CCD,指示带,独家包被有,CCD,指示带，解释交叉反应假阳性结果,CCD,是“交叉反应性碳水化合物决定因子”,CCD,存在于各种植物性或动物源性过敏原中，因为结果相同性造成一些独特交叉反应出现,CCD,检测对于患者提醒：即使对于一些过敏原没有临床症状，不过在过敏进程中对有些含有交叉反应过敏原可能会有改变，所以对于患者又针对性预防交叉过敏反应，有着主要临床指导意义。,过敏原血清学检测专家讲座,第49页,欧蒙印迹法特点,一次能够检测多项过敏原,8-20,项，常见食物及吸入组合，如葎草，艾蒿，豚草，常见树花粉，霉菌，尘螨，猫毛，狗毛，蟑螂，鸡蛋，牛奶，鱼，虾，蟹，花生，大豆等。,适合体检筛查。,采血量少,100-1000,微升血清能够检测多项，,尤其适合儿童患者。,性价比高,一次可得到各种过敏原信息谱。,适合各类人群,一定范围内脂血、溶血、黄疸血清或血浆样本对检测结果无影响。,过敏原血清学检测专家讲座,第50页,有配套仪器软件能够省时省力,全自动操作，判读软件，,2.5h,出结果。,无需暗室孵育。,半定量能够直接取得结果,能够直接用肉眼判读，也能够用欧蒙配套软 件判读。,EAST,分级并有数字及单位结果。,易于保留原始数据,结果样式可灵活设计。,结果可转为,excel,表，方便科研。,欧蒙印迹法特点,过敏原血清学检测专家讲座,第51页,四、过敏原体外检测常见问题及解答,过敏原血清学检测专家讲座,第52页,Q1:,为何患者,sIgE,结果阳性与临床表现不符,过敏原血清学检测专家讲座,第53页,过敏原,-,特异性,IgE,EUROLINE,产品调整,提供,CCD,检测指标,过敏原血清学检测专家讲座,第54页,何谓,CCDs?,CCD,是“,C,rossreactive,C,arbohydrate,D,eterminants,（交叉反应性碳水化合物决定子）,”,英文缩写,.,该结构为结合于糖蛋白,N,末端多聚糖。依据糖基化作用不一样而产生不一样结构。,举例,:MMXF,(Man1-6(Man1-3)(Xyl1-2)Man1-4GlcNAc1-4(Fuc1-3)GlcNAc),过敏原血清学检测专家讲座,第55页,CCDs,在自然界中存在,?,CCDs,存在于各种植物性或动物源性过敏原中。因为结构相同性造成一些独特交叉反应出现。,经典含,CCD,结构过敏原,:,植物花粉,植物性食物,植物乳胶,昆虫毒液,过敏原血清学检测专家讲座,第56页,抗,CCD IgE,结果临床价值,?,大部分糖蛋白仅含有一个,IgE,结合多聚糖，所以无法促进结合有,IgE,抗体肥大细胞表面受体形成二聚体化，进而无法活化肥大细胞发生脱核及释放组胺作用，所以对于仅为抗,CCD IgE,抗体阳性患者而言往往无临床症状表现。,过敏原血清学检测专家讲座,第57页,在何种情况下应排除抗,CCD IgE,干扰,?,当体外试验结果与临床症状或皮试结果不符情况下,.,当某一患者出现多个特异性,IgE,结果阳性时,举例,:,花生,:,特异性,IgE,阳性但并不表现出临床症状,出现多个食物相关阳性结果但缺乏临床症状表现,.,植物乳胶,:,针对花粉敏感患者抗植物乳胶阳性，但无相关接触史。,昆虫毒液,:,针对蜜蜂和马蜂特异性,IgE,阳性患者可能存在交叉反应。,过敏原血清学检测专家讲座,第58页,Q2:,怎样解释总,IgE,结果与,sIgE,结果不符,过敏原血清学检测专家讲座,第59页,解释,1:,总,IgE,浓度与,sIgE,水平,并不存在必定相关性,约,20-30%,超敏疾病患者特异性,IgE,可能较高，但总,IgE,可维持正常，甚至低于几何均值。,如患者仅对牛奶高度过敏，其特异性,IgE,为,18kU/L,。对于特异性,IgE,而言，该结果已属于严重过敏（,IV,级）范围。从理论上讲，该患者总,IgE,也应该为,18kU/L,。而对于总,IgE,来说，这个结果是很低；,总,IgE,升高并不一定是超敏反应，而过敏患者总,IgE,也不总是一定升高。这一关键点在评价总,IgE,检测结果时非常主要。,过敏原血清学检测专家讲座,第60页,结果解释,1,、不一样批号产品所使用过敏原提取物成份可能不一样；,2,、针对过敏原检测阳性结果,若临床存在显著过敏症状，则应明确判断阳性；,Q3:,针对同一过敏原检测，为何出现吸入和食物组合结果差异,过敏原血清学检测专家讲座,第61页,Q4:,未温育膜条为何出现浅色条带,过敏原血清学检测专家讲座,第62页,血清温育前,血清温育前，在膜条特定过敏原区域出现浅色条带,过敏原血清学检测专家讲座,第63页,血清温育后,血清温育后，浅色条带消失,结果解释：,1,、温育前浅色条带是因为过敏原天然提取物含少许色素；,2,、温育后，浅色条带即可消失,3,、浅色条带不会影响试验检测结果,过敏原血清学检测专家讲座,第64页,