QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法测定糌粑中15种真菌毒素的含量.pdf

1000试验与研究2023年第59 卷卷7 9PTCA(PART B:CHEM.ANAL.)理化检验-化学分册D0l:10.11973/lhjy-hx202309002QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法测定粑中15种真菌毒素的含量蒋晓宏，霍宗利?，朱峰”，周永林”，沈菲2*（1.拉萨市疾病预防控制中心，拉萨8 50 0 0 0；2.江苏省疾病预防控制中心，南京2 10 0 0 0）摘要：取1.0 0 0 g均质过的粑粉末，加入5mL水和10 mL含10%（体积分数）甲酸的乙溶液，涡旋振荡提取10 min，加入4g硫酸钠和1g氯化钠，涡旋振荡、离心。取1.5mL上清液，置于装有150 mg硫酸镁、10 0 mgCis、10 0 mg N-丙基乙二胺（PSA）的2 mL净化管中，涡旋振荡、离心。取0.8 mL上清液，氮吹至近干，用0.4mL20%（体积分数）乙睛溶液复溶，涡旋混合5min，经0.22m滤膜过滤后，采用超高效液相色谱-串联质谱法测定滤液中15种真菌毒素的含量。以ACQUITYUPLCHSST3色谱柱为固定相，以不同体积比的0.2%（体积分数）甲酸溶液和乙睛混合液为流动相进行梯度洗脱，质谱分析采用电喷雾离子（ESI）源，正负离子模式同时扫描，以多反应监测模式检测，采用基质校正标准曲线进行准确定量。结果表明，15种真菌毒素的质量浓度均在一定范围内与峰面积呈线性关系，检出限（3 S/N)为0.15.8 gkg-1。按照标准加入法进行回收试验，回收率为7 5.8%10 5%，测定值的相对标准偏差（n=6)均小于10%。方法用于分析10批实际粑样品，发现两批粑中赭曲霉毒素A（O T A)含量超标。关键词：粑；真菌毒素；QuEChERS；超高效液相色谱-串联质谱法中图分类号：0 6 57.6 3文献标志码：A文章编号：10 0 1-40 2 0（2 0 2 3)0 9-10 0 0-0 8粑是藏族人民的传统食品，它是以产于西藏、青海、甘肃等高寒地区的青稞为原料，经除杂、清洗、晾干、翻炒、磨粉等工艺制成的粉末状食物，也被称为青稞炒面门。粑拥有非常丰富的营养成分，富含蛋白质、糖、脂肪、纤维素、氨基酸和矿物质，缺少瓜果蔬菜的高寒地区的人民经常食用，可避免营养缺乏2 1。与全国其他地区的粮食产业相比，稽粑产业相对比较落后，管理、生产体系尚未规范，生产过程中可能存在产品质量风险。稽粑产品中含有约6%（质量分数）的水分，其在温度和湿度均较高的环境存放，极易吸潮结块，促进了微生物的生长，进而变质，影响粑的品质5-6 真菌毒素是真菌产生的次生代谢产物，具有致癌、致畸、致突变的特性，易导致急性或慢性中毒。收稿日期：2 0 2 2-0 7-0 8基金项目：江苏省重点研发计划-社会发展（BE2021740）；江苏省卫生健康委面上项目（M2021028）作者简介：蒋晓宏，主管技师，主要从事食品中微污染物理化检验工作*通信联系人。迄今为止，已有超过50 0 种真菌毒素被发现，研究主要聚焦于二十多种对人类和动物有明确毒性作用的化合物。根据真菌毒素的化学结构及其与人类和动物健康的相关性，可将其划分为主要真菌毒素（包括黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、单端孢霉烯族毒素、伏马菌素、棒曲霉素和玉米赤酶烯酮类毒素）、新兴真菌毒素链格孢霉毒素和新兴镰刀菌毒素（白僵菌素和恩镰孢菌素)和其他真菌毒素等7。这些毒素可通过多种方式污染食品，如直接感染谷类等农作物，污染原料导致咖啡、果汁等加工食品受到污染，饲料中的毒素迁移导致肉、蛋、奶等动物源性食品污染等8粑作为藏族独有的传统主食，在原料生长与采收、成品加工、贮藏及运输中都易受到产毒真菌的侵染，并且可能被多种产毒真菌同时侵染9，但目前鲜有相关报道，因此有必要建立粑中真菌毒素的检测方法。近年来，QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱技术由于其高效、简便和环保的特点，能够有效地提取和净化基质中多种真菌毒素，广泛应用于食品中真菌毒素的分析10-13 1001蒋晓宏，等：QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法测定粑中15种真菌毒素的含量理化检验-化学分册本工作以QuEChERS作为样品前处理方法，选取了植物源性食品中主要真菌毒素污染物脱氧雪腐镰刀菌烯醇类、黄曲霉毒素类、伏马毒素类、赭曲霉毒素A（O T A）、玉米赤霉烯酮（ZEN）、杂色曲霉毒素（ST)等作为研究对象，提出了超高效液相色谱-串联质谱法测定粑中15种真菌毒素含量的方法。1试验部分1.1仪器与试剂LC-30A型超高效液相色谱仪；QTRAP5500型三重四极杆质谱仪；2-16 KL型台式冷冻离心机；1-14型台式离心机;OA-SYS型氮吹仪；Vortex-Ge-nie2型涡旋混合器。单标准溶液：脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）、15-乙酰基脱氧雪腐镰刀菌烯醇（15-ACDON）、3-乙酰基脱氧雪腐镰刀菌烯醇（3-ACDON）、H T-2 毒素（H T-2）、T-2 毒素（T-2）、Z EN标准溶液的质量浓度均为10 0 mgL-1；伏马毒素B（FBr）、伏马毒素B（FBz）、伏马毒素Bs（FB）、ST 标准溶液的质量浓度均为50 mgL-1；O T A 为10 mgL-1,黄曲霉毒素G（A FG）、黄曲霉毒素B（A FB）标准溶液的质量浓度均为2 mgL-1，黄曲霉毒素Gz（A FG）、黄曲霉毒素Bz（A FB2）标准溶液的质量浓度均为0.5mgL-1。使用时用乙腈稀释至所需质量浓度。混合标准溶液：分别取适量的15种真菌毒素标准溶液，用乙腈稀释成DON、15-A C D O N、3-A C-DON、H T-2 的质量浓度为1mgL-1,其余真菌毒素质量浓度为0.1mgL-1的混合标准溶液，于一2 0 保存。硫酸钠、氯化钠、硫酸镁均为分析纯；乙腈、甲酸均为色谱纯；试验用水为质谱级。1.2仪器工作条件1.2.1色谱条件ACQUITY UPLCHSST3色谱柱(10 0 mmX2.1mm,1.8m)；流量0.3 mLmin-1柱温40；进样量10 L；流动相A为0.2%（体积分数，下同）甲酸溶液，B为乙腈。梯度洗脱程序：0 1.5min时，B为5%；1.54.5min时，B由5%升至2 3%；4.511.0min时，B由2 3%升至50%，保持3.0min;14.016.0min时，B由50%升至10 0%；16.016.1m i n 时，B由10 0%跳转至5%，保持0.9 min。1.2.2质谱条件电喷雾离子（ESI)源，离子源温度550，正离子（ESI+）、负离子（ESI-）模式同时扫描；多反应监测（MRM)模式；毛细管电压550 0 V（ESI+模式）/一450 0 V（ESI-模式）；气帘气流量3 1.8 Lmin-1,雾化气流量8.4Lmin-1，辅助气流量6.8Lmin-1。其他质谱参数见表1，其中“”为定量离子。表1质谱参数Tab.1MS parameters质荷比（m/z）保留时间/去簇电压/碰撞能量/化合物电离模式minVeV母离子子离子DON4.94ESI+297.0203.2*,231.112022,1815-ACDON7.05ESI+339.2137.0*,261.111615,173-ACDON7.15ESI+339.2231.1*,203.111616,20AFGI9.08ESI+328.9243.1*,214.216838,48AFG28.50ESI+331.1189.0*,244.915852,40AFB19.66ESI+313.1241.1*,284.918051,30AFB29.09ESI+315.0287.0*,258.918035,39FB19.07ESI+722.3334.3*,352.212855,47FB210.56ESI+706.3336.4*,318.212646,47FB310.02ESI+706.3336.4*,318.212646,47HT-210.37ESI+425.1169.2*,263.014027,17T-212.49ESI+484.0305.1*,185.24417,231002蒋晓宏，等：QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法测定粑中15种真菌毒素的含量理化检验-化学分册表1(续）质荷比（m/之）保留时间/去簇电压/碰撞能量/化合物电离模式min母离子子离子VeVOTA13.41ESI+403.9238.9*,357.812232,19ZEN13.42ESI317.2174.9*,131.0-180-34,-39ST14.30ESI+325.0310.0*,281.012025,311.3试验方法准确称取1g（精确至0.0 0 1g)均质过的粑粉末，置于50 mL离心管中，加入5mL水和10 mL含10%（体积分数，下同）甲酸的乙腈溶液，涡旋振荡提取10 min，加人盐析剂（4g硫酸钠，1g氯化钠），涡旋振荡10 min，以转速10 0 0 0 rmin-1离心10min。取1.5mL上清液，置于装有150 mg硫酸镁、10 0 mgCis、10 0 mg N-丙基乙二胺（PSA）的2mL净化管中，涡旋振荡5min，以转速148 0 0 rmin-1离心10 min。取0.8 mL上清液，氮吹至近干，用0.4mL20%（体积分数）乙睛溶液复溶，涡旋混合5min，过0.2 2 m滤膜后，按照仪器工作条件测定。2结果与讨论2.1仪器工作条件的选择采用针泵方式进样，将2 0 0 gL-1单标准溶液以7 Lmin-1的流量注入质谱仪，在ESI+、ESI-模式下，分别进行Q1母离子和Q3子离子扫描，ZEN在ESI模式下响应高，其他14种真菌毒素均在ESI+模式下响应较好，分别选取最合适的离子对，优化最优的去簇电压、碰撞能量等参数，得到最佳质谱参数，具体见1.2.2 节。试验考察了不同水相0.1%（体积分数）氨水、0.2%甲酸溶液、水和不同有机相（甲醇、乙腈）组合的流动相对化合物响应值和分离度的影响。结果表明，对于含有乙酰氧基团的真菌毒素，乙腈-水体系的洗脱效果和化合物的响应均好于甲醇-水体系，因为乙酰氧类化合物在甲醇溶剂中不稳定14。由于待测真菌毒素多数是ESI+模式扫描，甲酸可增强ESI+模式下大部分真菌毒素的离子化效率，提高目标化合物的响应，虽然甲酸对ESI-下ZEN的灵敏度略有影响，但是能满足检测需求。综合考虑，试验选用0.2%甲酸溶液-乙睛体系为流动相。在优化的仪器工作条件下，得到的提取离子色谱图见图1。2.2提取剂的选择试验考察了甲醇、乙腈作为提取剂时目标物的提取效率。结果表明：甲醇极性小，溶解性强，提取时基质效应较为明显，且对DON的提取效率影响较大；乙腈的选择性更好，可有效减少脂肪、色素等杂质的提取。综合考虑，试验选择乙睛作为提取剂。由于伏马毒素类和赭曲霉毒素类真菌毒素具有羧基，水溶性强，对酸具有敏感性，加入甲酸可增强其稳定性，提高提取效率，因此试验进一步比较了乙、含1%（体积分数，下同）甲酸的乙腈溶液、含5%（体积分数，下同）甲酸的乙腈溶液、含10%甲酸的乙溶液对真菌毒素回收率的影响。结果表明：使用乙睛提取时,FBI、FB2、FB3 和OTA的回收率均低于5.0%，其余真菌毒素的回收率在50.0%80.0%内；使用含1%甲酸的乙睛溶液提取时，OTA的回收率提高至3 0.0%,FB、FB2、FB，的回收率均未变化，其余真菌毒素的回收率在6 0.0%8 5.0%内；使用含5%甲酸的乙腈溶液提取时，FB1、FB2、FB：的回收率在2 5.0%45.0%内，OTA的回收率提高至9 0.0%，其余真菌毒素的回收率均在7 5.0%以上；使用含10%甲酸的乙腈溶液提取时，15种真菌毒素的回收率均大于7 5.0%。因此，试验选择含10%甲酸的乙睛溶液作为提取剂2.3净化剂及其用量的选择C18主要用于去除脂质等非极性杂质；PSA用于消除各种有机酸、色素、糖，并同时消除部分水；石墨化碳黑（GCB）可去除类留体、叶绿素等色素，但GCB具有强吸附性，在使用时部分被测物不易洗脱。试验探讨了不同用量的PSA、C i 8 和GCB对15种真菌毒素回收率的影响，每个试验重复3 次。其中，净化剂中硫酸镁的主要作用是吸附水分，对目标化合物的回收不会有影响，故此处不再讨论硫酸镁的用量。固定PSA、C i s 用量均为10 0 mg，考察了不添加GCB以及GCB用量为5，10，2 0 mg时对真菌毒素回收率的影响，如图2 所示。蒋晓宏，等：QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法测定粑中15种真菌毒素的含量理化检验-化学分册15-ACDON3-ACDONDONMoMa10246 8101214.1602468101214160246 810121416t/mint/mint/minAFG,AFG,AFB,人111024681012141602468101214160246810121416t/mint/mint/minFB,FB2AFB,FB111110246810 12141602468101214160246810121416t/mint/mint/minHT-2OTAT-211102468101214160246 8101214 160246810121416t/mint/mint/minSTZEN02468101214160 246810121416t/mint/min图115种真菌毒素的提取离子色谱图Fig.1Extracted ion chromatograms of 15 mycotoxins由图2 可知：GCB的用量对部分真菌毒素的回收率影响很大。相较于不添加GCB,GCB用量为5mg时ST的回收率下降了50%；GCB用量增加至20mg时ST的回收率低于5.0%，AFBl、A FB2、OTA的回收率也明显下降。GCB对具有平面分子结构的杂质（如留醇和叶绿素等）吸附效果好，对具1003：1004蒋晓宏，等：QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法测定稽粑中15种真菌毒素的含量理化检验-化学分册150不添加GCB5mgGCB10 mg GCB%/率外回20 mg GCB10050015-ACDONDON3-ACDONAFG,AFG,AFB,AFB,FB,FB2FB,HT-2T-2OTAZENST真菌毒素图2GCB用量对15种真菌毒素回收率的影响Fig.2Effect of GCB amount on the recovery of 15 mycotoxins有平面分子结构或不完全平面分子结构的真菌毒素也有较强的吸附作用15。ST、A FBI、A FB2 具有明显的平面结构，易被GCB吸附，因此GCB对这些真菌毒素的回收率影响较大。综合考虑，样品处理过程中不使用GCB。固定PSA用量为10 0 mg，不加人GCB，试验考察了不添加Cis以及C1s用量为50，10 0 mg时对真菌毒素回收率的影响，如图3 所示。150不添加C，50 mgC18100mgC.g%/率外回10050015-ACDONDON3-ACDONAFG,AFG,AFB,AFB,FB,FB,FB,HT-2T-2OTAZENST223真菌毒素图3（C18用量对15种真菌毒素回收率的影响Fig.3Effect of Cig amount on the recovery of 15 mycotoxins由图3 可知：不添加Cig时，FBz的回收率低于50.0%，随着C1用量的增加，FB2的回收率有明显提升;C18用量对 3-ACDON、A FG 1、H T-2、T-2、O T A 回收率的影响不大；AFG、A FB的回收率在CI8用量为50mg时最优，其余真菌毒素的回收率均在Cis用量为10 0 mg时最佳。固定Cis用量为10 0 mg，不加入GCB,考察了不添加PSA以及PSA用量为50，100mg时对真菌毒素回收率的影响，如图4所示。150不添加PSA50mgPSA100 mg PSA%/率动回10050015-ACDONDON3-ACDONAFG,AFG,AFB,AFB,FB,FB2FB,HT-2T-2OTAZENST真菌毒素图4PSA用量对15种真菌毒素回收率的影响Fig.4Effect of PSAamount on therecovery of 15 mycotoxins由图4可知：不添加PSA时，AFB和ST的回收率低于50.0%，二者回收率均随着PSA用量的增加而提高；HT-2的回收率有随着PSA用量增加而降低的趋势，AFG2、FB3、T-2、O T A 的回收率在1005蒋晓宏，等：QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法测定粑中15种真菌毒素的含量理化检验-化学分册PSA用量为50 mg时最优，其余真菌毒素的回收率在PSA用量为10 0 mg时最佳。综合考虑，试验最终优化得到的净化剂用量为PSA100mg和Ci8100mg，在此条件下各真菌毒素回收率均达到7 5.0%以上。2.4基质效应基质效应可能会导致峰形拖尾、线性差及重现性差，可利用不同浓度水平的目标化合物在空白溶剂中的标准曲线斜率和在基质溶液中的工作曲线斜率进行计算16。试验采用空白粑基质提取液和空白溶剂分别配制标准溶液系列，获得工作曲线和标准曲线（相关系数均大于0.9 9 0 0），基质效应=（工作曲线的斜率一标准曲线的斜率）/标准曲线的斜率X100%。结果表明：T-2、3-A C D O N、A FG I 的基质效应绝对值均在2 0.0%50.0%内，AFB2、FBz、Z EN的基质效应绝对值均在10.0%2 0.0%内，其余真菌毒素的基质效应绝对值均小于10.0%。说明大多数真菌毒素的基质效应较小，只有3 种真菌毒素的基质效应绝对值在2 0.0%50.0%内。使用内标和基质校正标准曲线（即工作曲线）定量是常用的去除基质效应的方法，而真菌毒素种类较多，找到对应的内标难度较大，且真菌毒素的内标价格非常昂贵，为了降低检测成本，试验采用基质校正标准曲线进行准确定量，可以消除基质效应的影响。2.5工作曲线、检出限与测定下限取阴性粑样品，按照试验方法制备空白基质提取液，用其配制混合标准溶液系列，其中DON、15-ACDON、3-A C D O N、H T-2 的质量浓度为5.0，20,50,100,200gL-1,其余真菌毒素的质量浓度为0.5，2.0,5.0，10,2 0 gL-1。以化合物的质量浓度为横坐标，其对应的峰面积为纵坐标绘制工作曲线，得到的线性范围、线性回归方程、相关系数见表2。以3 倍信噪比（S/N)确定化合物的检出限（3 S/N），以10 倍信噪比确定化合物的测定下限（10 S/N),结果见表2。表2 线性参数、检出限及测定下限Tab.2Linearity parameters,detection limits and lower limits of determination线性范围p/检出限w/测定下限w/化合物线性回归方程相关系数(g L-1)(g kg-1)(g kg-1)DON5.0200y=3.069X102x+3.995X1020.99885.819.315-ACDON5.0200y=1.372103+4.1431020.99843.812.53-ACDON5.0200y=2.542X103x-3.987X1020.99721.86.0AFG10.520y=3.654X103x+1.658X1030.99690.72.3AFG20.520y=5.471X103x+2.323X1030.99520.62.0AFB10.520y=1.431X104r+2.8901030.99670.20.7AFB20.520y=3.592X103+2.836X1030.99530.72.3FB10.520y=1.914X104+2.533X1030.99740.31.0FB20.520y=4.065X104x+3.257X1030.99940.31.0FB30.520y=2.483X104x-1.6101020.99850.31.0HT-25.0200y=2.933102x+1.280X1030.99545.016.7T-20.520y=1.456X104-7.431X1020.99970.72.3OTA0.520y=1.100X105+2.531X1040.99870.10.3ZEN0.520y=2.067X104-1.7011030.99550.41.3ST0.520y=4.820X104+1.340X1040.99810.31.02.6精密度与回收试验选取空白粑样品，按2 倍测定下限（低）、10倍测定下限（中）、2 0 倍测定下限（高）等3 个浓度水平进行加标回收试验，每个浓度水平选取6 个平行样，按照试验方法测定，计算真菌毒素的回收率和测定值的相对标准偏差（RSD),结果见表3。由表3可知，15种真菌毒素在粑中的回收率为7 5.8%105%，测定值的RSD为0.10%9.5%。1006蒋晓宏，等：QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法测定粑中15种真菌毒素的含量理化检验-化学分册表3 精密度和回收试验结果（n=6)Tab.3Results of tests for precision and recovery(n=6)低浓度水平中浓度水平高浓度水平化合物回收率/%RSD/%回收率/%RSD/%回收率/%RSD/%DON78.49.583.36.698.04.515-ACDON76.34.990.52.388.98.53-ACDON90.50.131031.692.39.5AFGI80.88.41050.101048.2AFG284.48.098.37.395.94.1AFBi76.94.479.94.378.72.4AFB277.71.898.05.079.86.4FBI75.85.492.15.476.10.42FB276.30.5183.90.5480.60.20FB385.18.090.45.486.95.5HT-21048.61030.821043.6T-299.56.51021.597.61.5OTA99.77.61041.690.98.7ZEN85.81.076.21.585.16.0ST81.66.599.94.386.56.32.7样品分析从拉萨市购买不同厂家的粑共10 批，包括粑（3 批）、黑粑（2 批）、豌豆粑（1批）、水磨粑（1批）、仲嘎粑（1批）、罗布琼孜粑（1批）、萌动粑（1批），按照试验方法进行测定。结果表明，10批粑中有7 批检出OTA，检出率高达7 0%，检出量为0.43 2.3 gkg-1，其余真菌毒素均未检出，说明OTA污染的概率较高。国家标准GB2761一2 0 17 食品安全国家标准食品中真菌毒素限量规定谷物及其制品中OTA的限量为5gkg-1，试验发现两批粑中OTA含量超标，函需重视粑中真菌毒素的安全性，并进行相关监控。本工作采用QuEChERS样品前处理方法，以超高效液相色谱-串联质谱法测定粑中15种真菌毒素的含量。方法前处理简单、灵敏度高、专属性强、精密度好、稳定可靠，可用于粑中真菌毒素的含量测定和安全性防控。参考文献：1姚莉萍，刘振东，张文会，等.粑体外模拟消化研究J.高原农业，2 0 2 0，4（2）：17 2-17 7.2何峰，卫郑霞.粑中营养成分的测定门.现代食品，2016(3):106-109.3扎西穷达，曹叶伟，朱肖翔，等.黑粑功效成分花青素及抗氧化性的分析J.现代食品，2 0 2 1（19）：18 4-18 9.4扎西穷达，刘吉爱，李姣，等.粑中风味物质研究J.食品研究与开发，2 0 19，40（5）：53-58.5赵雯玮，刘吉爱，李姣，等.粑及其研究进展门.粮食与饲料工业，2 0 17（3）：2 9-3 2.6徐婧婷，张菀坤，陈辰，等.包装方式对粑粉贮藏品质及货架期的影响J.食品工业科技，2 0 2 1，42（2 2）：321-328.7HAQUE MA,WANGY H,SHENZ Q,et al.Mycotoxin contamination and control strategy in human,domestic animal and poultry:A reviewJ.MicrobialPathogenesis,2020.142:104095.8ABREU D C P,DA SILVA OLIVEIRA F A,VARGAS E A,et al.Methodology development based ondilute and shoot and QuEChERS for determinationof multiple mycotoxins in cocoa by LC-MS/MSJJ.Analytical and Bioanalytical Chemistry,2020,412(8):1757-1767.【9 赵英莲，张梓琪，赵鑫，等.QuEChERS技术在食品真菌毒素检测中的研究进展J.中国酿造，2 0 2 0，3 9（1）：1-5.10BARBOSA A C,DA SILVA F A,DA SILVA L P,et al.Development and validation of an analyticalmethod for the extraction,identification,and quanti-fication of multi-mycotoxins in beer using a modifiedQuEChERS procedure and UHPLC-MS/MS J.1007蒋晓宏，等：QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法测定精粑中15种真菌毒素的含量理化检验-化学分册Food Additives&Contaminants:Part A,2020,37(12):2135-2148.11马帅，王蒙，韩平，等.QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法在食品真菌毒素检测中应用的研究进展J.食品安全质量检测学报，2 0 16，7（8）：3 0 2 0-3 0 2 4.12HEJ A,ZHANG B,ZHANG H A,et al.Monito-ring of 49 pesticides and 17 mycotoxins in wine byQuEChERS and UHPLC-MS/MS analysisJ.Jour-nal of Food Science,2019,84(9):2688-2697.13RAUSCH A K,BROCKMEYER R,SCHWER-DTLE T.Development and validation of a QuECh-ERS-based liquid chromatography tandem mass spec-trometry multi-method for the determination of 38native and modified mycotoxins in cerealsJJ.Journalof Agricultural and Food Chemistry，2 0 2 0,6 8(16):4657-4669.14徐子婷，郝莉花，马静，等.QuEChERS-SPE-超高效液相色谱-串联质谱法测定调味面制品中的12 种真菌毒素J.食品工业科技，2 0 2 2，43（6）：3 11-3 19.15陈建彪，董丽娜，刘娇，等.QuEChERS在食品中真菌毒素检测的研究进展J.食品科学，2 0 14，3 5（11）：286-291.16秦富，邓全道，李，等.液相色谱-串联质谱法测定月柿中18 7 种农药残留J.分析测试学报，2 0 18，3 7(8):879-886.Determination of 15 Mycotoxins in Zanba by Ultra-HighPerformance Liquid Chromatography TandemMass Spectrometry with QuEChERSJIANG Xiaohong,HUO Zongli?,ZHU Feng,ZHOU Yonglin?,SHEN Fei?*(1.Lhasa Center for Disease Control and Prevention,Lhasa 850000,China;2.Jiangsu Provincial Center for Disease Control and Prevention,Nanjing 210o00,China)Abstract:Homogenized zanba powders(1.000 g)was taken,and 5 mL of water and 10 mL of acetonitrilesolution containing 10%(volume fraction)formic acid were added.After extracting for 10 min by vortex,4 g ofsodium sulfate and 1 g of sodium chloride were added.The mixture was vortexed and centrifuged,and 1.5 mL ofsupernatant was placed in a 2 mL-purification tube flled with 150 mg of magnesium sulfate,100 mg of Cis,100 mgof N-propyl ethylenediamine(PSA).After vortex and centrifugation,0.8 mL of supernatant was blown to neardryness by nitrogen,and then the residue was redissolved with 0.4 mL of 20%(volume fraction)acetonitrilesolution.The solution was vortexed for 5 min,and filtered by 0.22 m filter membrane.15 mycotoxins in the filtratewere determined by ultra-high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry,using ACQUITYUPLC HSS T3 column as stationary phase and mixtures of 0.2%(volume fraction)formic acid solution andacetonitrile at different volume ratios as mobile phase for gradient elution.Electrospray ion(ESI)source was usedfor mass spectrometry.The target compounds were analyzed by multiple reaction monitoring(MRM)mode inpositive and negative scanning mode.Matrix calibration standard curves were used for accurate quantification.Asshown by the results,linear relationships between values of peak area and mass concentration of 15 mycotoxins werefound in definite ranges,with detection limits(3S/N)in the range of 0.1-5.8 g kg.Test for recovery wasmade by standard addition method,giving results in the range of 75.8%-105%,with RSDs(n=6)of thedetermined values less than 10%.This method was applied to the analysis of 10 batches of actual zanba samples,and it was shown that ochratoxin A(OTA)content in 2 batches of zanba samples exceeded the standard.Keywords:zanba;mycotoxin;QuEChERS;ultra-high performance liquid chromatography tandem massspectrometry