HPV DNA和HPV E6_E7 mRNA在宫颈细胞学诊断分流中的应用.pdf

浙江实用医学 2023 年 2 月第 28 卷第 1 期 Zhejiang Practical Medicine February袁2023袁Vol.28袁No.1HPV DNA 和 HPV E6/E7 mRNA 在宫颈细胞学诊断分流中的应用过华蕾袁陈豪袁王文慧袁尹晓娜袁龚仪棠渊杭州市妇产科医院袁浙江 杭州 310007冤揖摘要铱目的比较人乳头瘤病毒渊human papillomavirus曰 HPV冤E6和E7 mRNA渊E6/E7 mRNA冤和HPV DNA检测在分流宫颈细胞学检查结果为意义不明确的非典型鳞状上皮细胞渊ASCUS冤患者中的应用价值遥方法选取2021年3月2022年1月浙江省杭州市妇产科医院共300例液基细胞学诊断为ASCUS的就诊患者作为研究对象遥其中150例ASCUS患者行HPV DNA二代杂交捕获渊HC2冤检测袁另外150例ASCUS患者行HPV E6/E7 mRNA检测遥300例均接受阴道镜活检和病理学检查袁并以阴道镜活检的病理结果作为金标准袁分析HPV DNA HC2检测以及HPVE6/E7 mRNA检测结果与宫颈病变病理分级的相关性遥结果150例ASCUS患者中HPV E6/E7 mRNA检测阳性122例袁HPV DNA HC2检测阳性136例遥 HPV E6/E7 mRNA在ASCUS患者宫颈脱落细胞中的阳性率随宫颈病变程度增加而增加袁且与宫颈病变病理结果密切相关渊字2=12.5袁P=0.002冤遥与HPV DNA HC2检测相比袁HPV E6/E7 mRNA检测具有较高的敏感度渊95.0%冤尧特异度渊27.8%冤尧阳性预测值渊46.7%冤尧阴性预测值渊89.3%冤和诊断符合率渊53.3%冤遥结论HPV E6/E7 mRNA检测阳性率与宫颈病变程度密切相关遥 HPV E6/E7 mRNA检测对ASCUS人群的分流效果优于HPV DNA HC2检测袁可作为细胞学ASCUS人群的有效分流手段袁降低阴道镜转诊率的同时有效降低宫颈病变的漏诊率遥揖关键词铱宫颈细胞学曰高危型人乳头瘤病毒曰E6/E7 mRNA曰HPV DNAThe application of HPV DNA and HPV E6/E7 mRNA in cervical cytology dignostic triageGUO Hualei袁 CHEN Hao袁WANG Wenhui袁YIN Xiaona袁GONG Yitang渊Hangzhou Women爷s Hospital袁Hangzhou 310007袁China冤揖Abstract铱 ObjectiveTo compare the application value of HPV DNA and HPV E6/E7 mRNA detection in triagingwomen with atypical squamous cells of undetermined significance.Methods From March 2021 to January 2022袁a total of300 patients diagnosed as ASCUS based on liquid-based cytologic test were selected as the research objects in HangzhouWomen爷s Hospital.Among them袁150 patients received HPV DNA detection and the other 150 patients received HPV E6/E7mRNA detection.Cervical biopsy under colposcopy and histopathological examination were performed for all patients.Thepathological results of colposcopy biopsy were used as the gold standard to analyze the correlation between the results ofHPV DNA HC2 and HPVE6/E7 mRNA detection with pathological grading of cervical lesions.ResultsThere are 122 casespositive in HPV E6/E7 mRNA detection袁while 136 cases positive in HPV DNA HC2 detection among 150 patients diag鄄nosed as ASCUS separately.The positive rates of HPV E6/E7 mRNA increased with aggravation of cervical lesion.HPVE6/E7 mRNA positive was positively correlated with pathological results of cervical lesions渊字2=12.5袁P=0.002冤.Compared withHPV DNA HC2 detection袁HPV E6/E7 mRNA detection had higher sensitivity渊95%冤袁specificity渊27.8%冤袁positive predictivevalue渊46.7%冤袁negative predictive value渊89.3%冤and diagnostic accordance rate渊53.3%冤.ConclusionThe positive rates of5窑窑浙江实用医学 2023 年 2 月第 28 卷第 1 期 Zhejiang Practical Medicine February袁2023袁Vol.28袁No.1宫颈癌的发生与多种因素有关袁其中高危型人乳头瘤病毒 渊high risk human papillomavirus袁 HR-HPV冤持续感染是引发宫颈癌前病变的重要因素1遥目前已经发现了 100 多种 HPV袁 可能导致宫颈病变的 HPV 高达 40 多种2遥宫颈液基细胞学和 HPVDNA 二代杂交捕获检测 渊hybrid capture 2袁 HC2冤联合检测是目前临床筛查宫颈病变的主要方式袁但这两种方法特异性较低袁 不能准确地评估患者的病变程度和预后袁容易导致过度治疗3遥 高危型HPV 整合宿主染色体袁启动致癌过程袁导致癌基因E6尧E7 的转录表达袁 其表达产物 E6尧E7 蛋白是导致宫颈上皮内瘤变渊cervical intraepithelial neopla鄄sia袁CIN冤和宫颈癌发生的关键4遥 本研究通过对比宫颈 ASCUS 渊atypical squamous cells of undeter鄄mined significance冤 患者的 HPV E6/E7 mRNA 与HPV DNA HC2 检测结果袁并结合阴道镜活检组织病理结果进行分析袁 探讨 HPV E6/E7 mRNA 检测在宫颈病变筛查中的价值袁 以寻求更精准的宫颈癌筛查策略遥1资料与方法1.1一般资料选取 2021 年 3 月2022 年 1 月本院共 300 例液基细胞学诊断为 ASCUS 的患者作为研究对象袁 其中 150 例行 HPV DNA HC2 检测袁另外 150 例行 HPV E6/E7 mRNA 检测遥 纳入标准院渊1冤有性生活史曰渊2冤在本院行 HPV DNA HC2 或HR-HPV E6/E7 mRNA 检测曰渊3冤在本院行液基细胞学检测袁诊断结果为 ASCUS曰渊4冤在本院行宫颈活检袁有病理结果遥排除标准院渊1冤有子宫切除病史曰渊2冤接受过抗 HPV 药物治疗曰渊3冤已确诊宫颈病变治疗后复查遥 本研究经本院伦理委员会批准渊伦理审批号院揖2022铱医伦审 K 第渊3冤号-02袁且患者知情同意冤遥1.2方法所有患者均接受阴道镜活检袁 并以阴道镜活检病理结果作为金标准遥1.2.1阴道镜活检根据临床医师的判断袁在可疑病变部位取组织进行活检和宫颈搔刮遥至少由两名病理医师对活检结果进行判读袁 结果包括以下几种院淤正常或炎症曰于低级别宫颈鳞状上皮内瘤变渊LSIL/CIN 玉/湿疣冤曰 盂高级别宫颈鳞状上皮内病变渊HSIL/CIN 域/CIN 芋冤曰榆宫颈浸润性鳞状细胞癌渊SCC冤遥 淤为病理活检结果阴性袁于盂榆为病理活检结果阳性遥1.2.2HPV DNA 检测通过 HPV 专用取样刷在宫颈处采取相关标本袁将标本置于保存液中袁应用HC2 系统渊美国 BD冤袁二代杂交捕获方法定性检测宫颈样本中的 14 种高危型 HPV渊HPV16尧HPV18尧HPV31尧HPV33尧HPV35尧HPV39尧HPV45尧HPV51尧HPV52尧HPV56尧HPV58尧HPV59尧HPV66尧HPV68冤病毒袁检查结果逸1.0ng/L 为阳性遥1.2.3HR-HPVE6/E7 mRNA 检测通过转录介导的等温扩增法渊transcription mediated amplification曰TMA冤 技术对 14 种高危亚型的 HPV E6/E7 mRNA进行定性检测袁可以分出 16尧18/45 病毒亚型遥 检测过程严格按照操作说明书进行遥1.3观察指标渊1冤不同宫颈病变 HPV E6/E7mRNA 及 HPV DNA HC2 阳性率曰渊2冤分别分析HPV DNA HC2 阳性及 HPV E6/E7 mRNA 阳性与宫颈病变病理分级的相关性曰渊3冤通过灵敏度尧特异度尧阳性预测值尧阴性预测值和诊断符合率分析对比 HPV DNA HC2 与 HPV E6/E7 mRNA 检测的诊断效能遥HPV E6/E7 mRNA detection were closely correlated with the severity of cervical lesion.Compared with HPV DNA HC2 de鄄tection袁HPV E6/E7 mRNA detection can be used as a better method of ASCUS stratification management袁to avoid unneces鄄sary colposcopy referral and reduce the missed diagnosis of cervical lesions.揖Key words铱 cervical cytology曰 high-risk human papillomavirus曰 E6/E7mRNA曰 HPV DNA6窑窑浙江实用医学 2023 年 2 月第 28 卷第 1 期 Zhejiang Practical Medicine February袁2023袁Vol.28袁No.11.4统计学处理通过 SPSS 22.0 统计软件进行数据分析袁计数资料以百分率渊%冤表示袁采用 字2检验曰进行 HPV DNA HC2 阳性及 HPVE6/E7 mRNA阳性与宫颈病变病理分级相关性分析遥2结果2.1不同检测方法 HPV 阳性率比较150 例 AS鄄CUS 患者的 HPVE6/E7 mRNA 检测阳性 122 例渊81.3%冤袁阴性 28 例渊18.7%冤遥 HPV E6/E7 mRNA在 ASCUS 患者宫颈脱落细胞中的阳性率随宫颈病变程度增加而增加遥对 HPVE6/E7 mRNA 检测结果与病理活检诊断结果相关性进行卡方检验渊字2=12.5冤袁差异有统计学意义渊P=0.002冤遥150 例 ASCUS患者的 DNA HC2 检测阳性 136 例渊90.7%冤袁阴性14 例渊9.3%冤遥 对 HPV DNA HC2 检测结果与病理活检诊断结果相关性进行卡方检验渊字2=0.27冤袁差异无统计学意义渊P=0.965冤遥 详见表 1遥2.2诊断效能HPVE6/E7 mRNA 检测的灵敏度尧特异度尧阳性预测值尧阴性预测值和诊断符合率均高于 HPV DNA HC2 检测遥 详见表 2遥3讨论HPV 感染是宫颈癌发生的主要原因袁HPV 感染宿主细胞后将 E6/E7 DNA 整合入宿主细胞DNA遥 E6/E7 基因结合肿瘤抑制因子袁阻断细胞凋亡过程袁延长细胞生命周期袁导致宫颈细胞无限增殖发展为癌5遥 E6/E7 基因的转录尧翻译是 HPV 感染宫颈后宫颈细胞发生恶性转化的重要过程袁所以HPV E6/E7 mRNA 的水平是判断宫颈癌是否会发生的主要标志物6-8遥宫颈癌是一种可以早期诊断发现并阻断进程的恶性肿瘤袁 对无症状人群的早筛早治至关重要遥宫颈液基细胞学检测联合 HPV DNA 筛查有利于提高宫颈病变筛查的准确率袁是临床降低宫颈癌发病率的重要途径袁目前袁HPV DNA 筛查以分型检测为主9遥 HPV DNA 分型检测虽然灵敏度较高袁但女性 HPV 感染的发生率较高袁且多数患者会自愈袁若单纯依靠 HPV DNA 分型检测袁会提高阴道镜转诊率袁导致过度医疗的发生10遥 宫颈细胞学检测的结果会受到取样尧 制片因素及病理医师阅片主观性的影响袁 可能遗漏一些病变细胞较少的高级别病变遥 HPV E6/E7 mRNA 的水平能够预测 HPV 病毒活性及癌变风险袁 可以区分一过性感染和宫颈病变11-12遥本研究结果显示袁 在细胞学诊断为 ASCUS 的患者中袁HPV DNA HC2 检测总阳性率渊90.7%冤高于HPV E6/E7 mRNA 检测总阳性率渊81.3%冤曰在宫颈组织学活检结果为黏膜慢性炎的患者中袁HPVDNA HC2 检测阳性率渊90.5%冤高于 HPV E6/E7mRNA 检测阳性率渊72.2%冤袁提示在细胞学为 AS鄄CUS 和活检为黏膜慢性炎的患者中袁HPV DNA 易出现阳性结果遥 HPV 病毒可能以游离状态存在袁感染为一过性袁并未开始致癌基因的转录袁感染后大概率将被自身清除治愈袁 并不会导致宫颈癌的发生13-14遥在本研究中袁HPV E6/E7 mRNA 和 HPV DNA检测阳性率均随宫颈病变级别增高而升高遥在组织表1不同宫颈病变两种检测方法阳性率比较n渊%冤病理结果E6/E7 mRNA渊n=150冤HC2渊n=150冤阴性阳性阴性阳性黏膜慢性炎25渊27.8冤65渊72.2冤9渊9.5冤86渊90.5冤LSIL渊湿疣/CIN玉冤3渊6.0冤47渊94.0冤4渊10.3冤35渊89.7冤HSIL渊CIN 域/芋冤0渊0冤10渊100.0冤1渊6.7冤14渊93.3冤鳞癌渊SCC冤0渊0冤0渊0冤0渊0冤1渊100冤检测方法灵敏度 特异度 阳性预测值 阴性预测值 诊断符合率E6/E7 mRNA95.027.846.789.353.3HC290.99.536.864.339.3表2两种检测方法对宫颈病变的诊断效能渊%冤7窑窑浙江实用医学 2023 年 2 月第 28 卷第 1 期 Zhejiang Practical Medicine February袁2023袁Vol.28袁No.1学结果为 HSIL 的患者中袁HPV E6/E7 mRNA 阳性检出率渊100%冤高于 HPV DNA 检测渊93.3%冤遥HPVE6/E7 mRNA 阳性提示 HPV 癌基因的活化状态袁与 HPV DNA 检测相比袁HPV E6/E7 mRNA 检测可减少一过性 HPV 感染的干扰袁 更准确地预测宫颈病变进展为高级别病变的风险15-16遥以组织病理学结果为金标准袁HPV E6/E7mRNA 检测对于宫颈活检结果阳性患者的诊断效能优于 HPV DNA 检测袁其敏感度尧特异度尧阳性预测值尧阴性预测值及诊断符合率均较高遥 临床医生将 HPV 感染的患者直接进行阴道镜检查有可能造成过度医疗遥 E6/E7 mRNA 水平能够预测宫颈 HPV 感染进展为宫颈高级别病变和癌的风险袁从而对 ASCUS 患者进行精准分流袁降低阴道镜转诊率遥 对于 HPV E6/E7 mRNA 阳性的ASCUS 患者进行阴道镜和宫颈活检袁可提早发现宫颈高级别病变袁并提早临床干预袁以改善患者结局遥参考文献1Zetola NM袁Grover S袁Modongo C袁et al.Collision of ThreePandemics院The Coexistence of Cervical Cancer袁HIV Infec鄄tion袁and Prior Tuberculosis in the Sub-Saharan Country ofBotswana.J Glob 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