CA-7000全自动凝血分析仪妊娠期女性凝血指标参考区间的建立.pdf

中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 44 CA-7000 全自动凝血分析仪妊娠期女性凝血指标参考区间的建立 任梦予 广州市中西医结合医院，广东 广州 510800 摘要摘要：全自动凝血分析仪有着准确性稳定高效、操作便捷等特征，本研究所用 CA-7000 型号的全自动凝血分析仪的原理较为多样，包括发色底物法、凝固法、免疫法，可随机组合进行应用，目前已在临床广泛应用，其性能也有越来越多学者研究。凝血分析为临床上常规的检测手段，可有效筛选、诊断出血性病症，对患者血栓病症、血栓前状态、应用抗凝药疗效进行评估，以改善预后。正常机体中凝血系统经较多复杂的反应，最后使得纤溶系统及凝血系统实现较为平衡的状态，且妊娠属于女性较为独特的生理过程，机体中纤溶、抗凝、凝血均可能发生改变，血液内的纤维蛋白原及凝血相关因子水平显著上升，造成妊娠期血液表现出高凝的情况，故监测妊娠期女性体内的凝血功能水平的变化，及时观察凝血系统障碍的变化，对于临床降低血栓性病症、出血等病症发生，避免妊娠不良结局发生具有积极的临床意义。关键词关键词：全自动凝血分析仪；妊娠期；凝血指标；参考区间 中图分类号：中图分类号：R446.1 0 引言 妊娠是较特殊的一个生理过程，妊娠期血液会呈现为高凝状态，可有效降低分娩过程中的胎盘剥离、产后大出血等症状出现，导致发生血栓概率升高，近年来临床对于妊娠相关的纤维蛋白溶解及凝血指标的正常水平尚未清晰，故在妊娠期凝血相关指标与纤维蛋白溶解酶的作用无法得到有效应用，导致临床评估、改善孕妇血栓异常有关的疾病及止血异常受阻1-2。凝血指标纤维蛋白原（FIB）、活化部分凝血酶时间（APTT）、凝血酶时间（TT）、凝血酶原时间（PT）可作为临床评估、监测凝血异常疾病的主要标志物指标，为观察筛查内/外源凝血系统及抗凝相关药物疗效的主要指标，也是止血剂及抗凝药物疗效有效评估的重要指标3。CA-7000 全自动凝血分析仪为临床测定血小板及凝血功能的一类仪器，为精准诊疗效果提供了有效参考，临床上主要用于对患者机体中凝血指标给予检测，评估患者的凝血状况，有助于合理进服抗凝药物，对凝血性病症有较高的诊断意义4。因此，建立适用于健康妊娠女性常规凝血试验的参考区间是极为重要的。1 参考区间的验证 参照 CLSI C28-A2 的临床实验参考值范围的定义与确认5，从体检中选出 20 例健康体检者予以检测，考虑年龄、性别的分布，观察 APTT、PT、TT 及 FIB的水平，选取和预期上限较相似的高浓度样品（H=7.1g/L），按比例 2、4、8、16 倍稀释的对各稀释样本予以检测，测定共 3 次，取平均值，算出 R 值，R值=落在参考范围内的标本数/总试验标本数，并算出0.81.2 之间的 R 值稀释最大的倍数，再经稀释最大倍数高浓度样品=最高值，即为检测 CA-7000 报告的最大范围。2 线性范围评估 分别应用线性范围上下限的低值（L=1.1g/L）及高值（H=6.32g/L）的标本，再依据比例 H，3H+L，2H+2L，H+3L，L 给予稀释，各个稀释度检测 2 次，2 次实测的均值和理论值实施相关回归分析，以此评估CA-7000检测 Fg 的线性范围，合格标准为=10.05，R 值0.975，观察高值与低值浓度之间能否呈现线性关系。3 正常妊娠时凝血系统变化 妊娠正常期间，凝血系统主要包括羊水循环、母体血液循环、母胎界面等内容，在妊娠时期凝血系统的变化主要可妊娠进行适应，能更加促进娩出胎儿时胎盘着床及过度出血有效改善，保证绒毛间隙的血液速度，避免羊水的渗漏，减少产后出血6。受妊娠的刺激，母体循环内凝血相关的物质的变中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 45 化相对较大，凝血酶过度产生，血小板表现出积聚等状况，且相较于孕前，妊娠时期的 FIB 水平明显上升 23 倍，凝血因子表达上升约为 201000%，足月时能够升高至最高表达，分娩时血管性血友病因子（vWF）水平通常处于约 400%；而在妊娠时期凝血因子 V、促凝血酶水平无显著变化，凝血因子 XI、XIII 水平明显降低7。妊娠期可溶性纤维蛋白原聚合物、凝血酶-抗凝血酶（TAT）复合物、抗凝血酶（AT）、促凝血酶碎片及等水平明显升高，说明母体的凝血酶、纤维蛋白表达较低、慢性的一个升高的过程。妊娠期女性可能会伴有活化蛋白 C 水平显著升高的状况，致使纤溶酶原激活物抑制因子（PAI-1）水平明显提高34倍，妊娠前血浆的含量相对较少的 PAI-2 分子发生明显上升，分娩期间处于 160mg/L。正常的妊娠时，母体血浆内的内蛋白 Z 水平显著提升，是补偿凝血因子 X 提升的主要作用机制，且妊娠可促使母体中凝血能力显著加强，而纤溶物质、抗凝蛋白有所下降，母体中这一凝血状况属于是生理性高凝状态，妊娠期这一变化对整个妊娠过程都有着重要意义8。AT 为抗凝血系统相关指标，为人体最重要的一种抗凝血酶，通过对纤溶酶及凝血系统进行灭活以降低血小板积聚，致使纤溶系统及凝血系统之后互相影响，直至维持动态稳定。研究显示9，妊娠并发高血压及系统性红斑狼疮等症状时，AT 活性显著下降，极易引发胎儿生长受限、产后出血、血栓症等状况，故而妊娠期建立 AT 的参考区间，有利于及时检测出异常。在动脉、子宫子宫壁及胎盘绒毛期间凝血系统的变化可使纤维蛋白予以沉积，改善胎盘及完成剥离，以引发血栓，使分娩期及产后显著止血，上述改变相较于生理水平上升时，可造成产科出现较多的病理症状，尤其会引发出血-血栓相关病症及妊娠结局不良。上述变化可使得临床评估产科并发症难度加大，故在妊娠整个时期动态检测凝血功能，及时检测凝血能力的异常改变是极为重要的。4 凝血指标与妊娠期的关系 研究显示10，妊娠期女性极容易引起凝血-纤溶机制发生显著变化，监测妊娠期孕妇体内的血小板指标、凝血指标表达情况变化，发现重度及轻度子痫前期、子痫前期组、子痫组的 TT、APTT、PT 水平显著减少；子痫组、轻度组、重度组的空腹血糖（Fbg）表水平相比于健康对照组显著升高；子痫组、轻度组、重度组的 PLT水平明显上升。故探究妊娠期时凝血指标及血小板指标表达的改变，对于缓轻妊娠出现并发症有一定的临床意义。纤溶系统指标主要为 FDP、D-二聚体（D-D），在纤溶酶刺激下，纤维蛋白原被降解产生 FDP、D-D 等指标，其中，D-D 是继发性纤溶亢进的主要指标，FDP属于为纤溶亢进的重要标志物11。随着妊娠期的不断增加，FDP、D-D 呈显著升高的趋势，预示着机体中纤溶及高凝的双重激活状况，说明妊娠晚期女性机体中伴有轻度的血栓生成，但超一定水平时需避免 DIC 产生，临床需给予有效干预，仍需深一步研究。妊娠期出现不良并发症主要由于患者呈高凝状态所引起，机体中凝血功能与纤溶、抗凝及抗纤溶后的平衡性受到严重损害，体内凝血指标、纤溶指标伴有显著变化，而在纤维蛋白降解可能会引起 D-D 产生，对血栓及发生继发性纤溶有效表达，可对 D-D 水平提升有效反映，进而使机体中凝血、纤溶活性提升。研究显示12，探究凝血相关指标（APTT、FIB、PT、TT），显示子痫前期重度患者机体中的凝血水平较高，监测 D-D 水平可有效对血栓前状态评估。FIB 水平改变与凝血酶活性有一定的关联，易引发血栓，FIB 水平升高说明凝血酶活性显著升高，致使体内发生血栓的风险上升，FIB 水平越高，妊娠期的不良并发症会越加重，证实 FIB 水平能有效预估妊娠期是否存在并发症，TT能有效反映凝血功能可否维持正常的水平，分析机体可否为正常状况。APTT 及 PT 评估外/内源性凝血的指标。研究显示13，通过观察妊娠期女性，发现与近期实验室所选取的参考区间对比，TT、APTT 以及 PT 的区间改变较少，而随着妊娠进展 D-D、FIB 的上限值逐渐上升，认为孕妇体内的抗凝能力未能被激活，有效维持凝血系统、纤溶系统的动态平衡。研究发现14，FIB 及 D-D 表达随着孕期的进展明显上升，妊娠不同时期 AT 表达相对稳定，可能与分组、地域等有一定关系。研究发现，随着孕期的增加 FIB 及 D-D 表达会显著升高，APTT、TT、PT 表达会明显下降，各项指标参考值的上、下限有着较大的差异，可能与研究对象自身的不同密切相关。研究发现15，随着孕周的上升，FIB 水平在妊娠晚期时呈降低的趋势，可能主要与继发性纤溶上升致使FIB分解提升有关，当达到一定孕周后，可有效抑制FIB表达上升，FIB 水平处于孕晚期时与孕周呈现为负相关。D-D、FIB 水平改变与研究中的变化的趋势相较一致，中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 46 其表达上升可能因机体避免出现血栓性病症而引起继发性纤溶。与近期实验室所用的参考区间相比较，本研究中随着不断进展的孕期所创建的 AT、TT 的上限参考数值有所下降，D-D、FIB、FDP 的上限数值有所提升，但 PT、APTT 参考值的不显著改变，若继续应用非孕群体相关的参考区间，可促使妊娠期的假阳性率显著提升，导致漏诊及误诊的风险升高。5 小结 妊娠时期各项凝血指标均出现一定变化，且凝血指标和各类妊娠期相关病症有关，为增强妊娠期中凝血指标的实用性，避免假阳性的发生，因此各实验室应构建相对应的妊娠期凝血相关的指标有效的参考区间，虽有学者提出妊娠时期部分凝血指标的参考区间，但因仪器、操作流程、地域、试剂使用等有一定的不同，研究学者所参考也会有所差异，虽检测结果较为一致，但取得的数据还是存在一定的误差，因此需按实验室实际状况建立合适自己研究的参考区间。参考文献 1Osinga JAJ,Derakhshan A,Palomaki GE,et al.TSH and FT4 Reference Intervals in Pregnancy:A Systematic Review and Individual Participant Data Meta-AnalysisJ.J Clin Endocrinol Metab,2022,107(10):2925-2933.2Yin M,Qin X.Meta-Analysis of the Efficacy of Low Molecular Weight Heparin and Aspirin in the Treatment of Thrombosis During Pregnancy and Effects on Coagulation FunctionJ.Discov Med,2023,35(175):104-115.3Zhang Y,Li H,Guo W,et al.Predictive value of coagulation function and D-dimer for pregnancy outcome in pregnancy-induced hypertensionJ.Am J Transl 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