17种精油对褶皱臂尾轮虫的杀灭效果试验.pdf

水产养殖 2023 年第 10 期研 究 与 综 述doi:10.3969/j.issn.1004-2091.2023.10.001轮虫（Rotifer），属水生多细胞原生动物，富含幼苗必需的氨基酸和不饱和脂肪酸，是鱼、虾、蟹类苗期的天然饵料。但轮虫大量繁殖并摄食藻类，会导致水体达不到“肥、活、嫩、爽”的养殖标准，其代谢产生大量有机物，引起水中氨氮、亚硝酸盐氮升高；轮虫大量死亡后分解，滋生的细菌和真菌会污染水体，其泛滥极易发生翻塘事件，在我国黄河流域的精养塘危害比较严重1，部分鱼塘因此荒废。目前水产养殖中主要使用化学药品防治轮虫，但药品往往具有广谱性，对微藻和其他水生生物亦会产生毒性，不适于浮游动物污染控制2-4。植物成分的杀虫剂，具有低毒、低残留、易降解、与环境兼容性好的特点，一般被认为是化学药品的潜在替代品5。现以褶皱臂尾轮虫（Brachionus plicatilis）（以下简称轮虫）为研究对象，探究 17 种植物精油对其杀灭效果，筛选出安全高效、纯天然的轮虫防控药物，为生产中防治轮虫技术提供参考。1材料与方法1.1时间与地点2022 年 8 月，试验地位于郑州某实验室。1.2材料1.2.1轮虫试验用轮虫购自上海某微生物培养机构，由单个孤雌生殖雌体驯化培养 2 个月后，大量培养并诱导其种群产生休眠卵孵化而来6。1.2.2试剂及仪器丁 香 酚（98%，20220603）、柠 檬 醛（94.5%，资助项目：国家重点研发计划（2018YFD0502100）作者简介：岳治光（1987），男，兽医师，学士，研究方向为寄生虫病防控.E-mail：*通信作者：刘喜恒（1974），男，高级畜牧师，学士，研究方向为寄生虫病防控.E-mail：17 种精油对褶皱臂尾轮虫的杀灭效果试验岳治光1，赵聪1，温俊奇1，孙小帅1，许新春1，刘喜恒2*（1.河南安进生物工程有限公司，河南驻马店463800；2援上蔡县农业综合行政执法大队，河南驻马店463800）摘要：为了解 17 种植物精油对褶皱臂尾轮虫的杀灭效果，设置精油浓度分别为 1，10，100 和 1 000 mg/L 时，对褶皱臂尾轮虫的杀灭活性进行初筛，并选取杀灭效果较好的精油，对轮虫进行急性毒性试验，研究这几种精油对褶皱臂尾轮虫的杀灭效果（24 h 内）和对轮虫种群增长的抑制作用（7 d 内）。结果表明，在 17 种植物精油的初筛中，丁香酚、薄荷醇、柠檬烯、香芹酚、肉桂醛、大蒜素显示出了对褶皱臂尾轮虫高毒性；在急性毒性试验中，测得这 6 种精油的在 24 h 时的半致死浓度分别为 0.462，0.548，0.600，0.680，0.720 和 0.841 mg/L；在 24 h 杀灭试验中，几种精油在绝对致死浓度下，对轮虫的杀灭率随时间的增加而上升，其中丁香酚、薄荷醇精油可在 6 h 内杀灭所有供试轮虫，显著优于同时间其他处理组（P约0.05）；在 12 h 时，柠檬烯和辛硫磷的杀灭率达到 100%，直至 24 h 时，所有处理组的供试轮虫均死亡。在抑制轮虫群体增长试验中，精油组的轮虫数量增长均小于对照组，其中丁香酚、薄荷醇组的轮虫数量增长缓慢，在第 7 d 时轮虫密度分别为（12依1.52）和（19.33依1.2）ind/mL，显著小于其他精油组。指出，在 17 种植物精油中，薄荷醇、丁香酚显示出较强的轮虫杀灭活性，其杀灭效果优于传统杀虫剂辛硫磷，可作为水产养殖中具有潜力的植物源轮虫防控药物。关键词：植物精油；褶皱臂尾轮虫；杀灭活性；轮虫防治中图分类号：S852.7文献标志码：B文章编号：1004-2091(2023)10-0001-071水产养殖 2023 年第 10 期研 究 与 综 述20220522）、侧柏酮（92%，20220603）、香叶醇（98%，20220603）、薄荷醇（20220211）购自江西新森化工有限公司；石竹烯（87%，D887045）、柠檬烯（98%，E809010）、桉叶素（96%，E879023）、百部碱（88%，B807765）、松油醇（98%，E595432）、香芹酚（99%，C234255）、肉桂醛（99%，B328976）、香茅醛（98%，B234432）、水杨酸甲酯（99%，D998355）、广藿香醇（90%，Z228482）、姜辣素（84%，B223552）、大蒜素（Allicin）（82%，B225112）购自广州安奈生物科技有限公司。除癞灵（含辛硫磷 10%）购自河南安进生物技术股份有限公司；三苯乙烯基苯酚聚氧乙烯醚（分析纯）、正丁醇（分析纯）均购自天津恒兴化学试剂制造有限公司；体式显微镜（ZX500TR）购自深圳市众寻光学仪器有限公司；分析天平（AuW120D）购自日本 SHIMADZU 仪器有限公司。1.3方法1.3.117 种植物精油对轮虫的杀灭效果预试验精确称取相应植物精油 500 mg 置于 100 mL容量瓶中，后加入 4 mL 三苯乙烯基苯酚聚氧乙烯醚（乳化剂）及 1 mL 正丁醇（助剂），加去离子水定容至 100 mL，即得到 5 g/L 浓度的相应精油微乳液母液（设不添加精油成分的溶剂对照组）。取各相应精油微乳液母液加入去离子水，将其稀释（溶剂对照组同比例稀释），每个处理组分别稀释到1，10，100 和 1 000 mg/L 4 个梯度。吸取 1 mL 相应梯度的精油测试液，于细胞培养板（12 孔板）中，每孔中放入 30 只龄长在 4 h 以内的轮虫幼体，每组每个浓度均设 3 个重复，设置相同浓度梯度的辛硫磷溶液为化药对照，去离子水为空白对照。试验在（25依1）益无光的恒温培养箱中进行，24 h 后于体视显微镜下观察，并记录每孔中轮虫死亡数，以轮虫头冠纤毛和个体运动停止作为死亡标准。1.3.2精油急性毒性试验根据 1.3.1 预试验中杀灭效果较好的精油，取其母液分别 稀释至 0.1，0.3，0.6，1.0，2.0，6.0 和10.0 mg/L 共 7 个梯度，吸取 1 mL 相应浓度梯度的精油测试液于细胞培养板（12 孔板）中，每孔中放入 30 只龄长在 4 h 以内的轮虫幼体，每组每个浓度均设 3 个重复，设置相同浓度梯度的辛硫磷溶液为化药对照，去离子水为空白对照。试验在（25依1）益无光的恒温培养箱中进行，24 h 后于体视显微镜下观察，并记录每孔中轮虫死亡数，采用 SPSS 17.0 软件中 Probit 法，计算各精油对轮虫24 h 的半致死浓度（LC50）。1.3.3复筛精油应用后轮虫在 24 h 内死亡情况根据 1.3.2 的试验结果，使用相应精油微乳液母液，将其稀释至其绝对致死浓度（LC100），吸取1 mL 相应浓度梯度的精油测试液于细胞培养板（12 孔板）中，每孔中放入 30 只龄长在 4 h 以内的轮虫幼体，每组每个浓度均设 3 个重复，设置绝对致死浓度的辛硫磷溶液为化药对照，去离子水为空白对照，在（25依1）益无光的恒温培养箱中培养，并分别于 5 min、2 h、6 h、12 h、24 h 时，观察轮虫死亡情况，记录死亡数。1.3.4复筛精油对轮虫群体增长防控效果评价取对数生长期小球藻，接种至灭菌后的培养基内，接种密度为 3.0伊106cells/mL。用孔径为 0.075 mm筛绢过滤扩大培养的轮虫，过滤水冲洗 3 遍后添加至 3 L 藻液中，轮虫接种密度为 36 尾/mL。之后于光照培养箱内培养，培养温度（25依1）益，光照条件L颐D=12 h颐12 h，待轮虫适应 2 d 后，分别添加 1.3.2经过初筛的各植物精油至有轮虫的培养液中，使各精油在其培养液中达到 LC50，设未添加精油的轮虫培养液作为空白对照组，LC50的辛硫磷为化药对照组，每个处理设 3 个重复。精油添加后，分别在1、3、5、7 d 时，取供试水体 1 mL，使用浮游动物计数板统计轮虫密度。1.4数据处理使用 SPSS软件进行方差分析（one-way ANOVA），对于有统计学意义组与对照组相比较，进行 Dun原nett s 分析。2结果与分析2.117 种植物精油对轮虫的杀灭活性17 种植物精油 4 种浓度时对褶皱臂尾轮虫的杀灭活性见表 1。由表 1 可见，随着浓度的降低，植物精油对轮虫的杀灭活性也出现了不同程度的下降。为 1 000 和 100 mg/L 时，除对照组外，所有处2水产养殖 2023 年第 10 期研 究 与 综 述理组均表现出 100%对轮虫杀灭活性；为 10 mg/L时，百部碱、香叶醇、石竹烯、松油醇对轮虫的杀灭率分别为（51.1依1.1）%，（42.2依2.2）%，（36.7依3.8）%和（34.5依2.2）%，而其他 13 种精油对褶皱臂尾轮虫的杀灭效果均达到 100%；在 1 mg/L 下，不同种类精油对褶皱臂尾轮虫的杀灭效果存在差异。其中，丁香酚、薄荷醇、柠檬烯、辛硫磷、香芹酚、大蒜素、肉桂醛对褶皱臂尾轮虫的杀灭活性较强，其杀灭率分别为（93.3依1.9）%，（87.8依2.2）%，（85.5依2.2）%，（78.9依2.9）%，（78.9依4.0）%，（75.6依2.9）%和（71.1依2.2）%，均达到 70%以上，高于同浓度下其他处理组，存在统计学差异（P约0.05）。其次为侧柏酮（44.5依4.0）%、广藿香醇（43.3依3.3）%、水杨酸甲酯（40.0依3.3）%，而柠檬醛、桉叶素、香茅醛及姜辣素对轮虫杀灭率较弱，均不足 40%，仅高于对照组，存在统计学意义（P约0.05）。另外，香叶醇、石竹烯、百部碱、松油醇在该浓度下未表现出对轮虫的杀灭活性。同时2 个对照组在试验中，褶皱臂尾轮虫均未出现死亡。因此，选取抗轮虫效果较好的丁香酚、薄荷醇、柠檬烯、香芹酚、肉桂醛、大蒜素进入下一步试验。淤同列数据肩标不同字母表示组间差异显著（P约0援05），相同字母表示组间差异不显著（P跃0援05）。处理组籽/（mg L-1）1 000100101丁香酚100.0依0.0a100.0依0.0a100.0依0.0a93.3依1.9a柠檬醛100.0依0.0a100.0依0.0a100.0依0.0a30.0依3.3e侧柏酮（艾叶）100.0依0.0a100.0依0.0a100.0依0.0a44.5依4.0d香叶醇100.0依0.0a100.0依0.0a42.2依2.2c0.0依0.0f薄荷醇100.0依0.0a100.0依0.0a100.0依0.0a87.8依2.2ab石竹烯100.0依0.0a100.0依0.0a36.7依3.8cd0.0依0.0f柠檬烯（甜橙）100.0依0.0a100.0依0.0a100.0依0.0a85.5依2.2ab桉叶素100.0依0.0a100.0依0.0a100.0依0.0a36.7依3.8de百部碱100.0依0.0a100.0依0.0a51.1依1.1b0.0依0.0f松油醇100.0依0.0a100.0依0.0a34.5依2.2d0.0依0.0f香芹酚（牛至）100.0依0.0a100.0依0.0a100.0依0.0a78.9依4.0bc肉桂醛100.0依0.0a100.0依0.0a100.0依0.0a71.1依2.2c香茅醛100.0依0.0a100.0依0.0a100.0依0.0a27.8依4.9e水杨酸甲酯（冬青）100.0依0.0a100.0依0.0a100.0依0.0a40.0依3.3de广藿香醇100.0依0.0a100.0依0.0a100.0依0.0a43.3依3.3d姜辣素100.0依0.0a100.0依0.0a100.0依0.0a27.8依4.9e大蒜素100.0依0.0a100.0依0.0a100.0依0.0a75.6依2.9c辛硫磷（化药对照）100.0依0.0a100.0依0.0a100.0依0.0a78.9依2.9bc对照组（去离子水）0.0依0.0b0.0依0.0b0.0依0.0e0.0依0.0f对照组（无精油乳化剂溶液）0.0依0.0b0.0依0.0b0.0依0.0e0.0依0.0f表 1 17 种植物精油 4 种浓度时对褶皱臂尾轮虫的杀灭活性淤%2.26 种精油对轮虫的灭杀效果在 2.1 试验结果中，丁香酚、薄荷醇、柠檬烯、香芹酚、肉桂醛、大蒜素具有较强的对轮虫的杀灭活性，因此以该 6 种精油开展急性毒性试验，结果见表 2。由表 2 可见，通过对 6 种植物精油微乳液在24 h 时的致死中浓度进行比较，发现丁香酚、薄荷3水产养殖 2023 年第 10 期醇精油微乳液对供试轮虫具有较强的毒力，其 LC50分别为 0.462 和 0.548 mg/L，其杀灭活性均超过辛硫磷，毒力分别为辛硫磷的 1.294 和 1.091 倍；柠檬烯、香芹酚、大蒜素、肉桂醛精油微乳液的 LC50分别为 0.600、0.680，0.720 和 0.841 mg/L，均高于辛硫磷（0.598 mg/L），毒力分别为辛硫磷的 0.997、0.879、0.831 和 0.711 倍。2.36 种精油应用后轮虫在 24 h 内死亡情况绝对致死浓度（LC100）下植物精油微乳液在24 h内对褶皱臂尾轮虫的杀灭效果见表 3。由表 3 可见，不同处理组对轮虫的杀灭率随时间的增加而增加，在用药后 5 min 时，所有处理组供试轮虫未发现死亡；到 2 h 时，丁香酚、薄荷醇、柠檬烯、辛硫磷组轮虫开始出现死亡，死亡率分别为（40.0依3.3）%，（37.8依1.1）%，（28.9依2.9）%和（17.8依2.9）%，其中丁香酚、薄荷醇对轮虫的杀灭率高于柠檬烯和辛硫磷，存在统计学差异（P约0.05）；在 6 h 时，所有处理组轮虫均不同程度死亡，其中丁香酚、薄荷醇精油微乳液供试轮虫死亡率达 100%，杀灭率显著大于同时期其他处理组，差异有统计学意义（P约0.05），其次为柠檬烯、辛硫磷、香芹酚处理组，轮虫死亡率分别为（84.5依2.2）%，（65.5依2.2）%和（55.6依4.8）%，高于大蒜素（43.3依3.3）%和肉桂醛（42.2依2.2）%处理组，存在显著差异（P约0.05）；12 h 时，柠檬烯、辛硫磷处理组的轮虫死亡率达到 100%，而其他处理组的轮虫死亡率也均高于 70%，直至 24 h 时，所有处理组供试轮虫均全部死亡。2.46 种精油对轮虫的群体增长的防控效果轮虫在不同精油处理后不同时间下的种群密度变化见表 4。由表 4 可见，各精油在其 LC50时，处理组毒力回归直线LC50/（mg L-1）95%置信区间95%CI相对辛硫磷毒力倍数丁香酚y=-1.27+2.74x0.4620.3630.5621.294薄荷醇y=-1.45+2.65x0.5480.4490.6571.091柠檬烯y=-1.57+2.62x0.6000.5010.7150.997香芹酚y=-1.81+2.66x0.6800.5800.8040.879大蒜素y=-1.92+2.66x0.7200.6180.8500.831肉桂醛y=-1.51+1.79x0.8410.7031.0110.711辛硫磷（化药对照）y=-1.74+2.90 x0.5980.5050.703表 2 复筛精油为 0.110.0 g/L 时对褶皱臂尾轮虫的杀灭效果5 min2 h6 h12 h24 h0.0依0.0a40.0依3.3a100.0依0.0a100.0依0.0a100.0依0.0a0.0依0.0a37.8依1.1a100.0依0.0a100.0依0.0a100.0依0.0a0.0依0.0a28.9依2.9b84.5依2.2b100.0依0.0a100.0依0.0a0.0依0.0a0.0依0.055.6依4.8cd82.2依4.0b100.0依0.0a0.0依0.0a0.0依0.043.3依3.3d78.9依2.2b100.0依0.0a0.0依0.0a0.0依0.042.2依2.2d75.6依2.9b100.0依0.0a0.0依0.0a17.8依2.9b65.5依2.2c100.0依0.0a100.0依0.0a处理组LC100/（mg L-1）丁香酚1.37薄荷醇1.43柠檬烯1.49香芹酚1.56大蒜素1.59肉桂醛2.14辛硫磷（化药对照）1.53处理时间淤同列数据肩标不同字母表示组间差异显著（P约0援05），相同字母表示组间差异不显著（P跃0援05）。表 3 绝对致死浓度（LC100）下植物精油微乳液在 24 h 内对褶皱臂尾轮虫的杀灭效果淤%研 究 与 综 述4水产养殖 2023 年第 10 期处理组平均轮虫密度/（ind mL-1）1 d3 d5 d7 d丁香酚0.67依0.33a1.67依0.67a6.33依0.67a12.00依1.52a薄荷醇0.33依0.33a2.33依0.88a7.33依0.88a19.33依1.20b柠檬烯1.00依0.58a3.33依0.88ab8.67依0.88ab33.67依3.48c香芹酚1.33依0.33a7.33依1.20b13.33依1.45bc49.33依2.73d大蒜素1.67依1.33a8.33依0.67b17.67依1.76c56.33依5.45d肉桂醛1.33依0.33a8.67依0.88b29.33依2.72d67.67依5.21d辛硫磷（化药对照）1.33依0.67a8.33依0.88b15.67依1.76c29.00依4.36c空白对照6.67依1.20b19.00依1.20c73.33依5.78e144.33依12.14e表 4 轮虫在不同精油处理后不同时间下的种群密度变化淤淤同列数据肩标不同字母表示组间差异显著（P约0援05），相同字母表示组间差异不显著（P跃0援05）。随着培养时间的延长，其体系内的轮虫密度均出现了不同程度的增加，其中以对照组增加幅度最大，从 1 d 时的（6.67依1.20）ind/mL，增加至 7 d时的（144.33依12.14）ind/mL。在用药后 1 d，所有精油处理组及化药对照的轮虫密度均小于空白对照组，存在统计学意义（P约0.05）；除空白对照组外，其他处理组的轮虫密度均为 0.5耀1.5 ind/mL，相互之间没有显著差异；在第 3 d 时，丁香酚、薄荷醇处理组的轮虫密度分别为（1.67依0.67）和（2.33依0.88）ind/mL，小于香芹酚、大蒜素、肉桂醛、辛硫磷处理组及空白对照组，存在统计学意义（P约0.05）；在第 5 d 时，丁香酚、薄荷醇、柠檬烯处理组的轮虫密度分别为（6.33依0.67），（7.33依0.88）和（8.67依0.88）ind/mL，小于大蒜素、肉桂醛、辛硫磷处理组及空白对照组；在第 7 d 时，丁香酚处理组的轮虫密度最小，为（12.0依1.52）ind/mL，小于其他处理组且存在统计学意义（P约0.05），其次为薄荷醇，轮虫密度为（19.33依1.20）ind/mL，小于香芹酚、大蒜素、肉桂醛、辛硫磷处理组及空白对照组，存在统计学意义（P约0.05）。3讨论轮虫是单细胞藻类的重要敌害生物，由于藻细胞生长繁殖速度快，如果轮虫的数量不多，吞食量不大，影响并不严重；但当轮虫繁殖数量增多时，吞食量也增大，便会对藻类及鱼虾产生严重的危害。目前，化学防治被认为是消灭轮虫的可行且有效的方法，一些试剂如甲苯、己烷和二甲苯，被证明对萼花臂尾轮虫和褶皱臂尾轮虫有高毒性7，但它们具有广谱性，也可能伤害藻类和其他水生生物；一些抗生素对轮虫也具有一定杀灭效果。孙帆等8采用盐酸四环素对萼花臂尾轮虫进行了急性毒性试验，将其在质量浓度为 2.5，5.0，10.0，20.0，40.0 和 80.0 mg/L 的环境下培养，结果表明，盐酸四环素的 LC50为 120.055 mg/L；朱韩等9研究发现，畜禽常用的抗生素诺氟沙星在不同藻密度下，对萼花臂尾轮虫表现出不同的杀灭活性诺氟沙星在 1.0伊106、2.0伊106和 4.0伊106cells/mL 藻密度下的LC50分别为 452.873，525.146 和 526.650 mg/L；翟盼等10研究了质量浓度为 10.0，15.0，20.0，25.0，30.0 和 35.0 mg/L 的利福平，对萼花臂尾轮虫的急性毒性，当藻的密度为 1.0伊106cells/mL 时，其LC50为 18.000 mg/L。大部分抗生素本身成本较高，不适合大规模使用。合成化学农药如有机磷和拟除虫菊酯，常被用来防治轮虫，甲基对硫磷和二嗪农可以降低轮虫物种的种群增长率11-14，其他合成化学农药如噻吩甲甲基，甲胺磷和杀螟松对萼花臂尾轮虫的种群生长和产卵则表现出抑制作用15-17。化学控制剂虽然方便、成本低，但也存在弊端，所使用的化学物质有可能被藻类吸收，同时化药成分可持续存在于养殖水体中污染水体。由于化学杀研 究 与 综 述5水产养殖 2023 年第 10 期虫剂的种种局限性，从植物中寻找环境友好、安全性高、残留量低、使用经济的轮虫防控药物的研究与开发具有广阔前景，但目前关于植物源轮虫杀灭药物的研究相对较少。黄园18研究了苦皮藤素、印楝素、苦参碱和川楝素对褶皱臂尾轮虫的杀灭活性，结果显示，苦皮藤素和苦参碱表现出了对褶皱臂尾轮虫的高毒性，其 LC50分别为 0.175、0.061 mg/L，而 印 楝 素（18.386 mg/L）和 川 楝 素（2.132 mg/L）的毒力要明显弱于前者。4结论采用不同浓度的 17 种植物精油，对轮虫的杀灭活性进行了试验。结果表明，柠檬烯、丁香酚、大蒜素、香芹酚、肉桂醛、薄荷醇对轮虫的杀灭效果优于其他精油，其中薄荷醇和丁香酚，对轮虫具有急性毒性，当浓度为 LC100时，可在 12 h 内杀灭全部供试轮虫，其毒力高于辛硫磷，在实验室条件下，可以有效抑制轮虫的种群增长。参考文献：1 张忙友.黄河滩涂池塘养鱼轮虫泛滥治疗一例J.水产养殖，2012，33（9）：55.2 徐瑞邹，王远新.轮虫对成鱼的危害及防治方法J.科学养鱼，2010，26（6）：53.3 YUAN H,GUO J,LING L,et al.Efficacy of binary combi原nations of botanical pesticides for rotifer elimination in mi原croalgal cultivationJ.Bioresource Technology,2014,154(7):67-73.4 ZHANG A,WEN X,WANG K,et al.Using surfactants for con原trolling rotifer contamination in mass cultivation of ChlorellapyrenoidosaJ.Algal Research,2021,53(4):102-111.5 HUANG Y,LI L,LIU J,et al.Botanical pesticides as po原tential rotifer-controlagents in microalgal mass culture J.Algal Research,2014,4(2):62-69.6 陆正和，阎斌伦，杨家新.双酚 A 对萼花臂尾轮虫生殖的影响J.中国环境科学，2013，33（10）：1850-18557 FERRANDO M D,ANDREU-MOLINER E.Acute toxicity oftoluene,hexane,xylene,and benzene to the rotifers Bra原chionus calyciflorus and Brachionus plicatilisJ.Bulletin ofEnvironmental Contamination and Toxicology,1992,49:266-271.8 孙帆，葛乐乐，白琰，等.亚致死浓度的盐酸四环素对萼花臂尾轮虫存活、生殖和种群增长的影响J.动物学杂志，2021，56（3）：377-383.9 朱韩，席贻龙，徐秋磊，等.不同藻密度下诺氟沙星对萼花臂尾轮虫生命表统计学参数的影响J.生态毒理学报，2019，14（3）：163-173.10 翟盼，温新利，陈治文，等.抗生素利福平对萼花臂尾轮虫生命表参数的影响J.中国环境科学，2016，36（6）：1886-1894.11 SARMA S S S,NANDINI S,FLORES J L G.Effect of methylparathion on the population growth of the rotifer Brachionuspatulus(O.F.M俟ller)under different algal food(Chlorellavulgaris)densitiesJ.Ecotoxicology and Environmental Safe原ty,2001,48(2):190-195.12 GAMA FLORES J L,SARMA S S S,FERNANDEZ ARAIZAM A.Combined effects of density and methyl parathionconcentration on the population growth of Brachionus caly原ciflorus(Rotifera),BullJ.Bulletin of Environmental Con原tamination and Toxicology,1999,62(11):769-775.13 MARCIAL H 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黄园.微藻培养过程中轮虫污染防治研究D.北京：中国科学院研究生院，2014.（收稿日期：2023-02-13）研 究 与 综 述6水产养殖 2023 年第 10 期研 究 与 综 述Study on Killing Effect of 17 Essential Oilson Brachionus PlicatilisYUE Zhiguang1,ZHAO Cong1,WEN Junqi1,SUN Xiaoshuai1,XU Xinchun1,LIU Xiheng2*(1.Anjin Bioengineering Co.,Ltd,Zhumadian,Henan 463800,China;2.Shangcai County AgriculturalComprehensive Administrative Law Enforcement Brigade,Zhumadian,Henan 463800,China)Abstract:In order to study the killing effect of 17 kinds of essential oils on Brachionus plicatilis,the con原centrations of essential oils at 1,10,100 and 1 000 mg/L were first screened according to their killing activityagainst Brachionus plicatilis,and the essential oils with good killing effect were selected for acute toxicity test onrotifers.The killing effect of these essential oils on Brachionus plicatilis(within 24 h)and the inhibitory effect onrotifer population growth(within 7 d)were studied.The results showed that eugenol,menthol,limonene,carvol,cinnamaldehyde and allicin showed high toxicity to Brachionus plicatilis in the preliminary screening of 17 plantessential oils;The LC50of the six essential oils measured in the acute toxicity test were 0.462,0.548,0.600,0.680,0.720 and 0.841 mg/L,respectively.In the 24 h killing test,the killing rate of several essential oils to ro原tifers increased with the increase of time at the concentration of LC100.Among them,eugenol and menthol essen原tial oils could kill all the rotifers tested within 6 hours,which was significantly better than other treatment groupsat the same time(P0.05).At 12 hours,the killing rate of limonene and phoxim reached 100%,until 24 hours,all the rotifers tested in all treatment groups died;In the experiment of inhibiting rotifer population growth,thenumber of rotifers in the essential oil group increased less than that in the control group,and the number of ro原tifers in the eugenol and menthol group increased slowly.At the 7th day,the rotifer density was(12.00依1.52)and(19.33依1.20)ind/mL,respectively,significantly lower than that in the other essential oil groups.Among 17 kindsof plant essential oils,menthol and eugenol showed strong rotifer killing activity,and their killing effect was betterthan that of traditional insecticide phoxim,which could be used as potential botanical rotifer control aquaculture.Key words:Plant essential oil;Brachionus plicatilis;Killing activity;Rotifer control7