淋巴瘤知识入门ppt课件.ppt

单击此处编辑母版标题样式,*,淋巴瘤知识入门,本幻灯片大部分图片内容,来自陈国璋教授的慷慨馈赠,特此致谢！,诊断的客观条件,诊断外部条件,制作精良的,HE,切片,质控良好的免疫组化染色,临床病史,分子生物学检测（可选）,流式细胞光度术（可选）,正常淋巴结结构,淋巴结结构,皮质区,副皮质区,髓质,包膜和纤维分隔,窦区,流入淋巴管,纤维包膜,边缘窦,次级滤泡,套区,生发中心,初级滤泡,纤维分隔,皮质区,流入淋巴管,髓质及淋巴窦,肥胖内皮的小静脉,门区淋巴窦,静脉,动脉,流出淋巴管,副皮质区,髓索,皮质区,:B,细胞区,初级淋巴滤泡,初始,B,细胞和成熟,B,细胞,滤泡树突细胞,CD21,皮质区：淋巴结的,B,细胞区,次级淋巴滤泡,中心母细胞,中心细胞,(,滤泡中心,B,细胞,;CD10+),滤泡树突细胞,T,细胞,(CD10,强,+;,常,CD4+/T,辅助及,CD57+),吞噬碎片的巨嗜细胞,套区,B,细胞,(IgM+D),次级滤泡结构示意图,边缘区细胞,(IgM),套区细胞,(IgM+D),生发中心细胞,(IgM,IgG,IgA or IgE,not,IgD),CD20,CD21,CD10,CD20,皮质区：淋巴结的,B,细胞区,边缘区,B,细胞,多数淋巴结中不明显,在腹腔淋巴结容易见到，即在套区外侧，淡白色区域，胞浆较丰富、透明,Mantle zone,Marginal zone,CD20,皮质反应性增生改变,反应性滤泡增生,对,T,细胞依赖抗原反应而发生,生发中心有极性：亮区及暗区，扁桃体最明显,可伴有浆细胞增多,抗原流入的方向,套细胞在顶端较厚“帽子”,生发中心的亮区（中心细胞较多）,生发中心的暗区,(,中心母细胞较多,),Dark zone,Light zone,Ki67,副皮质区：淋巴结的,T,区,T,细胞为主,(CD4CD8):,小淋巴细胞，偶有较大的,T,细胞,(,一些散在于副皮质区的大细胞是激活的,B,细胞,),高度增生内皮的小静脉,(,淋巴细胞在其内流通,),S100+,的细胞,(,指突状树突状细胞,),Cytokeratin+,树突细胞,(,纤维母细胞性树突细胞,?),IDC,CD3,CD20,副皮质区的反应性增生,最常见原因,:,病毒感染,过敏反应,肿瘤引流淋巴,皮质增宽,有时形成结节,.T,结节紧邻,B,滤泡，有时融合,高度增生内皮细胞的血管,;,混合性小细胞和免疫母细胞,髓索,有较多浆细胞,可显著或不明显,B,细胞反应时可显著,如反应性滤泡增生、浆细胞性,Castleman,病时,窦,流入淋巴管,边缘窦,淋巴内窦,髓质淋巴窦,流出淋巴管,淋巴窦被覆窦内衬细胞,(,有桥粒,).,窦内有一些组织细胞和淋巴细胞,腹腔内淋巴结淋巴窦常明显扩张,结缔组织网架,纤维包膜以及向淋巴结内伸出的纤维小梁构成网架,正常情况下不明显,反应性增生及周围淋巴结肿大时较明显,Any Question?Take a break!,免疫组化的一般问题,免疫组化的重要性,鉴别淋巴瘤,VS,反应性增生,鉴别淋巴瘤,VS,其他恶性肿瘤,淋巴瘤的分类,淋巴瘤的预后及临床分期,治疗靶标,没有高质量的免疫组化,就不能很好地进行淋巴瘤诊断,染色结果的判定,正确的染色结果判定，比免疫组化染色本身一样重要,染色的判断,必须紧密结合组织学,，必须确定究竟应该是哪一种细胞着色，哪一种成分不应着色,CD20,染色结果的判断,必须申明哪种细胞为阳性，尤其是病变含有多种细胞成分时,如果病理报告如下,:CD20+,CD3+,CD5+,Bcl2+,CD10-,Bcl6-,，没有价值,正确的表述,:,大细胞,CD20+,CD3-,CD5-,CD10-,背景的小淋巴细胞：,CD3+CD5+CD8+,有散在的网格状,CD21+,滤泡树突细胞,染色结果的判断,阳性比阴性更有价值，因为阴性可能由于：,抗原丢失,抗原修复不足,敏感性不足,抗体过期,加错抗体或试剂添加步骤错误,染色结果的判断,必须,有阳性的内对照和外对照，证明染色结果可信,染色应得到正确的预期结果,大多数白细胞的标记为膜阳性,TdT,S100,及转录因子类抗体均为核阳性,Cyclin D1,CD20,TdT,淋巴细胞的表型,B,T,NK,紧密相关,淋巴系统的形成,胸腺,?,骨髓,?Peyer,结,淋巴结、脾、粘膜组织,中心淋巴组织,:,“,前驱”细胞的贮存库,;,由此细胞发育成熟,外周淋巴组织,:,成熟细胞的贮存库,准备对抗原产生反应,T,B,NK,?,前前,B,细胞,前,B,细胞,不成熟,B,细胞,成熟,B,细胞,激活的,B,细胞,浆细胞,前驱细胞，非抗体依赖,初始（,Virgin,）,B,细胞，非抗体依赖,中心细胞,&,中心后细胞,;,抗体依赖,TdT,CD20,CD22,CD19,PAX5,CD79a,CD10,Bcl-6,CD138,Cytoplasmic CD22,前胸腺细胞,包膜下胸腺细胞,皮质胸腺细胞,髓质胸腺细胞,外周,T,细胞,前驱细胞,成熟,T,细胞,Cytoplasmic,Surface,CD4,CD8,CD1,CD4,CD8,CD3,CD2,CD7,TdT,淋巴瘤,VS,其他恶性肿瘤,?,有时淋巴瘤与分化差的癌、恶性黑色素瘤、肉瘤鉴别非常困难,淋巴瘤也可有各种形态,(,如小梁状排列、粘液变性、菊形团、梭形细胞,),免疫组化对于鉴别很有帮助,对于分化差的肿瘤,LCA,Cytokeratin,S100 protein,淋巴瘤,/,白血病,+*,-,-,癌,-,+,-/+,恶性黑色素瘤,-,-,+,肉瘤,-,-,-/+,*,大细胞间变淋巴瘤和淋巴母细胞淋巴瘤可以,LCA,阴性,需要加染其他标志,(,如,CD30),Cytokeratin,CAM5.2,白细胞共同抗原,CD45(CD45RB):,Leukocyte common antigen,除浆细胞之外的所有正常淋巴细胞,(B,T,或,NK,系,),Reed-Sternberg,细胞,(Hodgkin lymphoma)CD45-,通常对于淋巴瘤，不必染,LCA,:,直接染,CD20,和,CD3,扁桃体,LCA/CD45,免疫组化对淋巴瘤分类有多重要,?,只有极少数淋巴瘤不做免疫组化，可明确诊断,:,滤泡性淋巴瘤,边缘区,B,细胞淋巴瘤,粘膜相关淋巴组织类,小淋巴细胞淋巴瘤,绝大多数其他类型均需要免疫组化，尤其是,:,套细胞淋巴瘤,弥漫大,B,细胞淋巴瘤,各种,T,细胞淋巴瘤,B,系细胞标记,CD20(e.g.L26):,非常敏感,(95%B,细胞淋巴瘤阳性,),有时,B,小淋巴细胞淋巴瘤染色不佳，,B,细胞淋巴母细胞淋巴瘤可为阴性,浆细胞、浆细胞瘤和浆母细胞淋巴瘤阴性,(,对于这类肿瘤，,CD20,阴性是一诊断线索,),核阳性不能判定为阳性，任何细胞过度热修复均可核阳性,CD20,B,系细胞标志,CD79a(mb-1):,B cell receptor complex:sensitive and specific B cell marker(normal plasma cells are positive;germinal center cells are stained weakly),50%plasmacytomas are positive,But can be positive in T-lymphoblastic lymphoma/leukemia,Antibody expensive:Use as back-up,Immunoglobulin(cytoplasmic and/or surface Ig),CD79a,CD79a,Plasmacytoma,New B-lineage marker,PAX-5,Oct-2,Bob.1,PAX-5,PAX-5,PAX-5,Oct-2,Bob.1,Oct-2,Bob.1,T-,系细胞标志,胞浆,CD3(polyclonal against CD3,e,monoclonal also available,e.g.PS1):,T,系细胞高度敏感和特异,核周或核皱折处染色深,组织细胞有时弱浆阳性，但无核周浓聚,90%T,和,NK,细胞淋巴瘤阳性,合并使用其他,T,细胞标志,(e.g.CD45RO,CD2),CD3,CD3,T,系细胞标志,表面,CD3(e.g.Leu4,T3,OKT3):,需要冰冻切片染色,大部分,T,细胞淋巴瘤表面,CD3,阳性,NK,细胞表面,CD3-,胞浆,CD3+,T,系细胞标志,CD45RO(e.g.UCHL1,A6):,高度敏感的,T,细胞标志，一些,T,细胞淋巴瘤,CD3-CD45RO+,但组织细胞和髓系细胞及其肿瘤也阳性,CD43(e.g.MT1,DFT1,Leu22):,高度敏感的,T,细胞标志，但不特异,组织细胞和髓系细胞及其肿瘤也阳性,EBV,感染时，,B,细胞也表达,小,B,细胞淋巴瘤时也为阳性,T,系细胞标志,CD4,CD8:,诊断,T,细胞淋巴瘤时并不常用,CD2:,敏感而特异的全,T,细胞标志,比,CD3,贵，备用标志,CD7:,T,细胞发育早期阶段表达,尤其在诊断,T,淋巴母细胞淋巴瘤时有用,(,一些病例,CD3-),一个新的,T,细胞标志,:LAT,当一个,“,淋巴瘤,”,仅,CD43,阳性时,可能是一个真正的,T,细胞淋巴瘤,/,白血病,一定要考虑到,:,髓系白血病,/,粒细胞肉瘤,组织细胞肿瘤,i.e.the specific T and B,markers negative,CD43+:T cell lymphoma?,No:See myeloperoxidase,NK,细胞标志,CD56(e.g.123C3):,NK,细胞淋巴瘤的最好标志,不完全是,NK,细胞特异性标志,;,一些表达,gd,T,细胞受体的,T,细胞淋巴瘤也阳性,CD56,在神经细胞和神经内分泌细胞也阳性，诊断,NK,细胞淋巴瘤时必须有其他白细胞标志,CD56,(NK/T cell lymphoma),小结,:B,或者,T,细胞淋巴瘤？,CD20,CD3,CD20+,B,细胞淋巴瘤,;,加其他分类标志,CD3+,T,或,NK,细胞淋巴瘤,;,加其他标志,(CD56,CD30),CD20-,CD3-,非造血组织肿瘤,?,浆细胞瘤,?,浆母细胞性淋巴瘤,?,T,细胞淋巴瘤,?,淋巴母细胞淋巴瘤,?,淋巴瘤进一步分类,小,B,细胞淋巴瘤,CD5,CD23,IgD,Cyclin D1,bcl-6 or CD10,淋巴瘤进一步分类,Bcl-2:,仅区别反应性增生和滤泡性淋巴瘤,诊断浆细胞瘤,:,LCA,L26(-),CD79a(+/-),CD138(+),Oct-2(+),Bob.1(+),Ig(+),CD138(syndecan-1),CD138,在浆细胞、浆母细胞和一些免疫母细胞的胞膜阳性表达,用于诊断浆细胞瘤,单独的,CD138,阳性不足以诊断浆细胞瘤，必须加,LCA(CD45),等,CD138,LCA/CD45,淋巴瘤进一步分类,CD10,CD10,急性淋巴母细胞白血病标志,也表达于正常的生发中心,B,细胞和中心,T,细胞,价值,:,滤泡中心细胞分化,(,滤泡性淋巴瘤、,Burkitt,淋巴瘤、一些大,B,细胞淋巴瘤,),血管免疫母,T,细胞淋巴瘤,CD10,Strongly positive cells are T cells,RFH,FL,淋巴瘤进一步分类,Bcl-6,核阳性,正常表达于滤泡中心,B,细胞、滤泡周围的,CD30+,细胞和少数,T,细胞,以下淋巴瘤阳性,:,滤泡性淋巴瘤,一些大,B,细胞淋巴瘤,Burkitt,淋巴瘤,一些大细胞间变性淋巴瘤,Bcl-6,Bcl-6,淋巴瘤进一步分类,滤泡树突细胞标志,(CD21,CD35,clusterin),助于诊断,滤泡性淋巴瘤,套细胞淋巴瘤,(,疏松散在网格,),血管免疫母,T,细胞淋巴瘤,大细胞间变性淋巴瘤,CD30,ALK1,Mantle cell lymphoma:CD21,Angioimmunoblastic T-cell lymphoma,Tonsil:Clusterin,Follicular lymphoma with diffuse component:Clusterin,CD30,激活淋巴细胞标志,淋巴结反应性增生时,CD30+,细胞增多,必须是膜,+/-,高尔基区阳性、弥漫浆着色不应判定为阳性,CD30,经典的何杰金,间变性大细胞淋巴瘤,其他一些大细胞淋巴瘤,CD30,CD30,淋巴瘤进一步分类,Ki67,:,帮助诊断,Burkitt,淋巴瘤,(100%),细胞毒性标志,e.g.,TIA1,granzyme B,NK/T,细胞性淋巴瘤、脂膜炎样,T,细胞淋巴瘤,淋巴母细胞淋巴瘤,:,TdT,Burkitt lymphoma,TIA-1,TdT(terminal deoxynucleotidyl transferase),TdT(thymoma),TdT(tonsil),T-lymphoblastic lymphoma,淋巴瘤的分期和预后,套细胞淋巴瘤中，高,Ki67 index,与预后不良有关,ZAP-70,表达是,B-CLL,预后不良的标志,大细胞间变淋巴瘤,:ALK+,比,ALK-,预后要好,ALK1,原发系统性,ALCL,的总生存期,(Falini et al,1999,),0,5,10,Years,ALCL,t(2;5)or ALK+,100%,50%,ALCL,t(2;5)or ALK-,淋巴瘤的预后与分期,累及其他部位的淋巴瘤，如骨髓等，可以用一些标志检测出来,ALK,、,CD30,：大细胞间变淋巴瘤,Cyclin D1,：套细胞淋巴瘤,CD56,：,NK,细胞淋巴瘤,ALK1,治疗靶标,治疗性抗体的靶标,:,anti-CD20(Rituximab,，美洛华,),anti-CD22,anti-CD52,淋巴瘤的治疗过程中，临床大夫会要求病理大夫染一些抗体标志,治疗后的淋巴瘤细胞有时会失去抗原,e.g.CD20,小结,:,有用的分类标志,B,系细胞,CD20,(,可选,:CD79a,PAX-5),T,系细胞,CD3,(,可选,:CD45RO,CD2),NK,系细胞,CD56,髓质细胞,Myeloperoxidase,滤泡中心细胞,CD10(or bcl-6),小结,:,有用的分类标志,套区细胞,IgD,不成熟的前驱细胞,TdT,浆细胞,CD20-,CD138+,(,可选,:Oct-2,Bob.1),组织细胞,CD68(PGM1 KP1),滤泡树突细胞,CD21+CD35,Langerhans,细胞,S100,CD1a,小结,:,重要的淋巴瘤分类标志,淋巴母细胞淋巴瘤,:,TdT,、,CD99,、,CD34,B-CLL:,CD5,CD23,套细胞淋巴瘤,:,Cyclin D1,滤泡性淋巴瘤,:,CD10(or bcl-6),Burkitt,淋巴瘤,:,Ki67 index(100%),血管免疫母细胞,T,细胞淋巴瘤,:,CD10,滤泡树突细胞标志,(CD21,，,CD35),间变性大细胞淋巴瘤,:,CD30,ALK,Thank you for Attention!,