苯并[a]芘的测定.ppt

食品中苯并a芘的测定一、苯并a芘的结构与性质 简称为BaP 针状结晶，沸点310320 溶解特性：水中溶解度为0.0040.012mg/L 易溶于石油醚、环已烷、已烷、苯、甲苯、二甲苯、丙酮 稍溶于乙醇、甲醇 化学性质：稳定，常温下不与硫酸作用，能与硝酸、高氯酸 反应 碱性条件下稳定 荧光特性：紫外线（360nm）下产生典型紫色荧光二、食品中苯并a芘的来源 BaP是含碳燃料及有机化合物热解过程中的产物，是煤、石油、天然气、木材等不完全燃烧的产物。空气中BaP含量为0.01100g/m3;地表水中BaP含量为0.030.1g/L;土壤中BaP含量为0400g/kg在熏烤、烘烤过程中形成 燃烧产物与食品的直接接触、烟尘与食品的直接接触 粮食烘干 高温下脂肪、胆固醇等成分的热解或热聚（1070倍）高温下食品的焦化或炭化 淀粉390时产生 0.7g/kg 650 时产生17g/kg 650 下葡萄糖产生7mg/kg、脂肪酸产生88mg/kg加工环节的污染 设备管道 酱油、醋、酒、饮料 包装材料 糖果、面包、冷饮包装用蜡纸 润滑油等工业废水、废气的污染 三废的排放 沥青的利用（沥青中苯并芘含量为2.53.5%）细菌、原生生物、淡水藻类及某些高等植物的组织内合成 藻类、水生植物BaP含量为0.005 g/kg 植物BaP含量0.010.02g/kg部分食品中的Bap含量（g/kg）种类种类含量含量种类种类含量含量熏奶酪熏奶酪0.015.6腊肉腊肉0.8627.6熏鱼熏鱼1.315.2烤牛肉烤牛肉0.411.58熏香肠熏香肠0.82.5烤羊肉串烤羊肉串12.84熏火腿熏火腿3.2烤鸭皮烤鸭皮0.752.39熏排骨熏排骨0.345.0烤鸭烤鸭0.06炸油条炸油条1.411香肠香肠0.30.5烘大饼烘大饼3.07.0蛋清肠蛋清肠0.180.3三、BaP的危害 BaP为致癌、致突变化学物质，可致多种癌症，并具有致畸性和遗传毒性。四、限量标准1、国家标准允许限量标准品种品种指标指标品种品种指标指标肉肉制制品品烧烤猪肉、禽肉烧烤猪肉、禽肉5植植物物油油豆油、花生油豆油、花生油植物油植物油10叉烧肉、羊肉串叉烧肉、羊肉串5茶油茶油10火腿、板鸭火腿、板鸭5其它油其它油10烟熏鱼烟熏鱼5粮粮食食稻谷稻谷5熏鸡、熏马肉熏鸡、熏马肉5小麦小麦5熏红肠、香肠熏红肠、香肠5大麦大麦52、其它一些国家、地区标准 欧共体 调料 0.03ug/kg 德国 肉及肉制品 1.0ug/kg 意大利 食品及饮料 0.03ug/kg 荷兰 肉制品 1.0ug/kg 北欧国家 肉制品 1.0ug/kg3、一些国家的每日允许摄入量(ug)美国 0.161.6 英国 0.48 德国 0.020.14 荷兰 0.120.42 意大利 0.10.3 奥地利 0.36五、防治措施加强环境治理改变生产方式改进烹调和加工方法改变饮食习惯去毒处理六、测定方法（一）分配柱层析净化荧光测定法1.原理 样品先用有机溶剂提取，或经皂化后提取，再将提取液经液液分配或色谱柱净化，然后在乙酰化滤纸上分离苯并(a)芘，因苯并(a)芘在紫外光照射下呈蓝紫色荧光斑点，将分离后有苯并(a)芘的滤纸部分剪下，用溶剂浸出后，用荧光分光光度计测荧光强度与标准比较定量。样品样品皂化提取皂化提取溶剂提取溶剂提取柱层析柱层析液液分配液液分配荧光分析荧光分析纸层析纸层析2、试剂 试剂需重蒸，并检查其荧光特性 吸附剂：硅镁型吸附剂 水洗并活化，加5%水减活 中性氧化铝 活化（120 4h）乙酰化滤纸制备：滤纸（30cm4cm）乙酰化（180mL苯：130mL乙酸酐：0.1mL硫酸）6h,并浸泡过夜取出风干 苯并a芘标准液 苯并a芘标准贮备液：100ug/mL 苯并a芘标准使用液：1ug/mL,0.1ug/mL3、仪器 脂肪抽提器 层析柱（10cm350cm）层析缸 K-D浓缩器 紫外灯 荧光分光光度计4、操作方法（1）样品提取 粮食及低水分含量食品 回流抽提，碱皂化68h（90下）皂化液趁热转移至分液滤斗 洗涤接收瓶（50mL95%乙醇）加水（100mL）振摇提取 静置分层 下层二次提取（70mL环已烷）合并环已烷 洗涤环已烷层（水，100mL3）洗涤水环已烷提取（30mL2）浓缩至40mL（60 水浴中）植物油称样称样20g分液滤斗分液滤斗环已烷环已烷100mL提取提取DMF40mL3环已烷层环已烷层DMF层层DMF层层提取提取环已烷环已烷40mL环已烷层环已烷层DMF层层弃去分液滤斗分液滤斗2%硫酸钠硫酸钠240mL混匀混匀提取提取环已烷环已烷100mL2鱼、肉及其制品 称样，加无水硫酸钠（1：1或1：2）搅拌 环已烷抽提取蔬菜 称样、晾干、加丙酮（150mL）捣碎，过滤至分液滤斗 加水、环已烷提取 环已烷重复提取 环已烷层洗涤（水，125mL2）浓缩至25mL （2）净化 装柱 加样吸附 洗脱（苯30mL）减压浓缩至0.10.5mL（3）分离 点样 展开（95%乙醇：二氯甲烷=2：1）观察（紫外灯照射）剪下斑点，加苯浸泡溶解。（4）测定 测定标准斑点及样品斑点的荧光激发光谱和发射光谱 读取F401nm、F406nm、F411nm（）计算相对荧光强度（二）HPLC法、原理用KOH-甲醇水（1:1）溶液皂化样品中脂肪，环已烷提取多环芳烃（PAH），再经60%硫酸净化，Sephadex LH-20色谱柱富集样品中PAH，用高效液相色谱仪检测。、操作方法（）皂化 称取100g样品直接皂化（）提取、净化环已烷萃取，甲醇水洗涤、水洗涤浓缩60%硫酸洗涤、水洗涤过滤（过硅胶、无水硫酸钠）、滤液浓缩（）富集 加样于Sephadex LH-20柱上，异丙醇洗脱浓缩至干甲醇溶解、定容（mL）（）测定色谱条件：流动相甲醇：水（75:25）流速1.5mL/min 色谱柱ODS 4.6mm250mm柱温30 紫外检测器（287nm）进样测定峰面积，比较定量。