酶类药物专题知识讲座.pptx

,单击此处编辑母版标题样式,#,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,酶类药物专题知识讲座,酶类药物专题知识讲座,第1页,第一节 酶类药品原料起源,一、原料选择,选取原料应,注意以下几点,:,（,1,）不一样酶用料选择：哪里有，含量高，选哪。,（,2,）注意不一样生长发育情况及营养情况,用微生物,制酶，故需测其活力来决定取酶阶段。,用动物器官,提取酶，则与动物年纪及喂养条件相关。,酶类药物专题知识讲座,第2页,（,3,）从原料起源是否丰富考虑,；,从简化提纯步骤着手,。,（,4,）如用动物组织作原料,，则此动物,宰杀后应马上取材。,从动物或植物中提取酶受到原料,限制,，伴随酶应用日益广泛和需求量增加，工业生产重点已逐步转向,微生物,。用微生物发酵法生产,药用酶,，不受,季节,、,气候,和,地域,限制，生产,周期短,，,产量高,，成本低，能大规模生产。,酶类药物专题知识讲座,第3页,二、微生物酶制剂高产菌株选育,菌种,是工业发酵生产酶制剂主要条件。与,增加品种,、缩短生产,周期,、改进发,酵和提炼工艺条件,等亲密相关。,优良菌种取得有三条路径：,是从自然界,分离筛选,：,是用物理域化学方法处理、,诱变,；,是用,基因重组,与,细胞融合技术,。所以微生物,分离筛选,是一切工作基础。,酶类药物专题知识讲座,第4页,三、微生物酶制剂生产发酵技术,首先要合理选择,培养方法,、,培养基,、,培养温度,、,pH,和,通气量,等。还要研究酶分离提纯技术和制备工艺。,（,）原料,利用微生物生产酶制剂主要原料为,碳源,和,氮源,，另外还有,无机盐,、,生长原因,和,产酶促进剂,等。,酶类药物专题知识讲座,第5页,假如添加少许某种物质就能显著增加酶产量时，这类物质通称为,产酶促进剂,。它们大多属于酶,诱导物,或,表面活性剂,。,1,、固体培养法,固体培养法亦称,麸曲培养法,，该法是利用,麸皮或米糠,为主要原料，另外视需要添加其它谷糠、豆饼等，加水拌成,含水适度,半固态物料,作为培养基。,2,、液体培养法,液体培养法是利用液体培养进行微生物生长繁殖和产酶。依据通气（供氧）方法不一样，又分为,液体表面培养,和,液体深层培养,两种。,酶类药物专题知识讲座,第6页,3,、影响酶产量原因,菌种,产酶,性能,是,决定,发酵效果主要原因，不过发酵工艺条件对产酶影响也是十分显著。,（,1,）温度,普通发酵温度比种子培养时,略高些,，这么对产酶有利。,（,2,）,pH,可用糖或淀粉调整，,pH,低则可用氨来调整。,酶类药物专题知识讲座,第7页,（,3,）通气（供氧）,临界氧浓度。氧必须是溶解于培养基中氧。,（,4,）搅拌 增加液体湍流速度,，,降低气泡周围液膜厚度,。,有利于促进细胞新陈代谢,。,（,5,）泡沫和消沫剂,因为培养基中蛋白质分子排在气泡表面形成一层,吸附膜，,聚集成,泡沫层,之故。,（,6,）添加诱导剂和抑制剂,诱导酶诱导酶合成，诱导酶是该酶作用底物或者是其,类似物,。抑制剂促进酶形成。加入适量,表面活性剂,。,酶类药物专题知识讲座,第8页,第二节 酶类药品提取和纯化,一、生物材料预处理,（一）动物材料预处理,1,、机械处理,用绞肉机绞，普通细胞并不破碎。有酶,必须细胞破碎,后才能有效地提取，在试验室常见是,玻璃匀浆器和组织捣碎器。,2,、重复冻融,冷到,-10,左右,，再迟缓溶解至室温，如此重复屡次。因为细胞中冰晶形成，及,剩下液体中盐浓度增高,，能使细胞中颗粒及整个细胞破碎，从而使一些,酶释放出来,。,酶类药物专题知识讲座,第9页,3,、丙酮粉,组织经丙酮快速脱水干燥制成,丙酮粉,，不但可,降低酶变性,，同时因,细胞结组成份破碎,使,蛋白质与脂质结合,一些,化学键打开,，促使一些,结合酶,释放到溶液中，常见方法是将组织糜或匀浆悬浮于,0.0lmol,L,，,pH6.5,磷酸缓冲液,中，在,0,下,一边搅拌，一边渐渐倒入,10,倍体积,-15,无水丙酮,内，,10,分钟后，离心过滤取其沉淀物，重复用冷丙酮洗几次，真空干燥即得丙酮粉。,丙酮粉在低温下可保留数年,。,酶类药物专题知识讲座,第10页,（二）微生物预处理,要是酶是,胞外酶,，则可除去菌体后再直接从发酵液中,吸附提取酶,。但对,胞内酶,则需将菌体细胞破壁，制成,无细胞,悬液后再行提取。,菌体用生理盐水洗涤除去培养基后，应,深冻保留,。,1,、干燥法：,干燥,常能造成,细胞自溶,，增加酶释放，从而在后处理中破壁无须太猛烈就能到达预期目标。,空气干燥,25,30,真空干燥还 原剂作保护剂,冷冻干燥对较敏感酶,宜用此法。,2,、机械法：,常见方法有研磨法，组织匀浆法，超声波法，高压匀浆法等。,酶类药物专题知识讲座,第11页,3,、酶法处理,用得最多是,溶菌酶,，如在,37,，,pH8.0,下对小球菌进行破壁处理，历时,15,分钟，即可提取,核酸酶,。也有用,脱氧核糖核酸酶,处理，操作与,溶菌酶,同。,二、酶提取,1,、水溶液法,常见,稀盐溶液或缓冲液提取,。普通在,低温下操作,。在酸性条件下稳定酶要在酸性条件下提取。,普通来说,，,碱性蛋白酶用酸性溶液提取,，,酸性蛋白酶用碱性溶液提取。,酶类药物专题知识讲座,第12页,盐浓度,普通以,等渗为好,，相当于,0.15mol,L NaCl,离子强度是最适宜于酶提取。,2,、有机溶剂法,一些,结合酶,如,微粒体和线粒体膜酶,，因为,和脂质牢靠结合,，为此必须除去结合脂质，且不能使酶变性，最常见,有机溶剂是丁醇,。,3,、表面活性剂法,表面活性剂能与蛋白质结含而分散在溶液中，故可用于提取结合酶。,酶类药物专题知识讲座,第13页,三、酶制剂工业提取法,（一）发酵液预处理及过滤,微生物发酵液,分离,，,过滤,，发酵液中加,絮凝剂或凝固剂,。,絮凝剂,有,聚丙烯酰胺、右旋糖酐和聚谷氨酸,。,（二）酶液脱色,活性炭、脱色树脂,。,（三）盐析法,用得最多是（,NH,4,）,2,SO,4,，,在常温下不会造成酶失活,，若,分级沉淀,应用得当，杂蛋白杂质也较少。,酶类药物专题知识讲座,第14页,（四）有机溶剂法,有机溶剂沉淀蛋白质能力,为,丙酮异丙醇乙醇甲醇,。,工业上通常采取乙醇作为沉淀剂,。,（五）喷雾干燥直接制备粉末酶制剂,喷雾干燥用于,干燥菌体,，药用酶常见冷冻干燥。,四、酶纯化,评价纯化工艺主要看二个指标，一是,酶比活,，,二是总活力,回收。,酶类药物专题知识讲座,第15页,酶在纯化过程中一些技术难点：,（一）杂质除去,酶提取液中，除所需酶外，还含有大量,杂蛋白,、,多糖、脂类和核酸,等。,（,1,）,pH,和加热沉淀法,（,2,）蛋白质表面变性法,利用蛋白质,表面变性,性质差异，也可,除去杂蛋白,，加入,氯仿和乙醇进行震荡,，能够除去杂蛋白。,酶类药物专题知识讲座,第16页,（,3,）选择性变性法,利用蛋白质稳定性不一样，除去杂蛋白。,甚至可用,2.5%,三氯乙酸,处理。,（,4,）核酸沉淀剂法,用,核酸酶,，,将核酸降解成核苷酸，使粘度下降便于离心分离,。,用,核酸沉淀剂,如,三甲基十六烷基溴化铵,、,硫酸链霉素,、,聚乙烯亚胺、鱼精蛋白和二氯化锰,等。,（,5,）将酶与底物结合,酶和底物结合或竞争性抑制剂结合后，热稳定性大大提升，这么就可用加热法除去杂蛋白。,酶类药物专题知识讲座,第17页,（二）脱盐和浓缩,1,、脱盐,脱盐方法是,透析和凝胶过滤,。,2,、浓缩,酶,浓缩方法,很多，有冷冻干燥、,离子交换、超滤,、,凝胶吸水,、,聚乙二醇吸水,等。,（三）酶结晶,把,酶提纯,到一定纯度以后（通常,纯度应达,50%,以上,），可使其结晶，酶纯度经常有,一定程度提升,。为研究蛋白质空间结构提供,X,射线衍射样品,。,酶类药物专题知识讲座,第18页,1,、酶结晶方法,酶结晶方法主要是,迟缓地改变酶蛋白溶解度,，使其略处于过饱和状态。,（,1,）盐析法,操作要在,低温下进行,，加盐，,缓冲液,pH,要靠近酶等电点。多数酶就可形成结晶,。有时也可,交替置在,4,冰箱中和室温下,来形成结晶。,（,2,）有机溶剂法,酶液中滴加有机溶剂，有时也能使酶形成结晶。,普通要含少许无机盐情况下，选择使酶稳定,pH,，迟缓地滴加,有机溶剂,。,使用缓冲液,普通,不用磷酸盐,，而用,氯化物或乙酸盐,。,酶类药物专题知识讲座,第19页,（,3,）复合结晶法,有时能够利用一些酶与,有机化合物,或,金属离子形成复合物或盐性质,来结晶。,（,4,）透析平衡法,（,5,）等电点法,2,、结晶条件选择,（,1,）酶纯度,酶纯度越高，结晶越轻易，长成大单晶可能性也越大。结晶对酶有显著,纯化作用,。,（,2,）酶浓度,（,3,）温度,结晶温度通常在,4,下或室温,25,下,，,低温条件下酶不但溶解度低，而且不易变性,。,酶类药物专题知识讲座,第20页,（,4,）时间,结晶形成时间,数小时到几个月,，有甚至需要,1,年,或更长时间。普通来说，较大而性能好结晶是在生长慢情况下得到。普通希望使微晶形成快些，然后慢慢地改变沉淀条件，再使微晶慢慢长大。,（,5,）,pH,调整,pH,可使结晶长到,最正确大小,，也可,改变晶形,。结晶溶液,pH,普通选择在,被结晶酶等电点附近。,（,6,）金属离子,许多金属离子能,引发或有利于酶结晶,，在酶结晶过程中常见金属离子有,Ca,2+,、,Zn,2,、,Co,2,、,Cu,2,、,Mg,2,、,Mn,2,、,Ni,2,等,。,酶类药物专题知识讲座,第21页,（,7,）晶种,不易结晶,蛋白质和酶，有需,加入微量晶种才能结晶,，,（,8,）结晶器皿处理,结晶用器皿要充分,清洗、烘干,。使用前用结晶母液,再冲洗,一次。结晶玻璃器皿，可用,硅涂料,进行表面处理，以使表面,光滑且不润湿,。这么可,降低晶核数目，形成大结晶。,（四）酶分离和纯化工作注意事项,1,、预防酶蛋白变性,2,、预防辅因子流失,3,、预防酶被蛋白水解酶降解,酶类药物专题知识讲座,第22页,第三节 酶类药品,一、药用酶类概述,早期酶制剂主要用于治疗,消化道疾病,，烧伤及感染引发,炎症疾病,，现在我国外己广泛应用于各种疾病治疗，其制剂品种已超出,700,余种。,（一）促进消化酶类,（二）消炎酶类,（三）与纤维蛋白溶解作用相关酶类,（四）抗肿瘤酶,（五）与生物氧化还原电子传递相关酶,(,六）其它药用酶,酶类药物专题知识讲座,第23页,（一）胃蛋白酶（,Pepsin,，,EC3.4.4.1,）,胃蛋白酶,广泛存在于哺乳类动物,胃液,中，药用胃蛋白酶系从猪、牛、羊等家畜,胃粘膜中提取,。,1,、组成（结构）、性质,药用胃蛋白酶是胃液中,各种蛋白水解酶,混合物,，含有,胃蛋白酶,、,组织蛋白酶,、,胶原酶,等，为粗制酶制剂。水溶液呈,酸性,，难溶于乙醇、氯仿等有机溶剂。,pI,为,pH1.0,，,最适,pH1.5,2.0,。,可溶于,70,乙醇和,pH4,20,乙醇中。,胃蛋白酶能,水解大多数天然,蛋白质底物。,酶类药物专题知识讲座,第24页,2,、生产工艺,（,1,）工艺路线：,胃蛋白酶原盐酸催化激活,成胃蛋白酶。,常见,脱脂剂,有,乙醚,、,氯仿,、,四氯化碳,。,酶类药物专题知识讲座,第25页,（,2,）工艺过程：,（,3,）胃膜素和胃蛋白酶联产工艺,：向经,消化,、,提取,、,脱脂,、,分层,、,浓缩,及,60,丙酮沉淀分离胃膜素,母液中，边搅拌边加,冷丙酮,，至,比重为,0.91,，即有淡黄色胃蛋白酶沉出，静放过夜，去上清液，沉淀真空干燥，即得胃蛋白酶。,（,4,）结晶胃蛋白酶制备,：药用胃蛋白酶原粉，溶于,20,酒精,中，加,H,2,SO,4,调,pH3.0,，,5,静置,20h,后过滤，加,硫酸镁,至饱和，进行,盐析,。盐析物再在,pH3.8,4.0,乙醇中溶解，过滤，滤液用,硫酸调,pH,至,1.8,2.0,，即析出针状胃蛋白酶。沉淀再溶于,20%pH4,乙醇,中，过滤，滤液用硫酸调,pH,至,1.8,，在,20,放置，可得板状或针状结晶。,酶类药物专题知识讲座,第26页,（二）胰蛋白酶,胰蛋白酶是从,牛、羊胰脏,提取、结晶冻干制剂。,易溶于水,，,不溶于氯仿、乙醇、乙醚等有机溶剂,。在,pH1.8,时，短时煮沸几乎不失活；在碱溶液中加热则变性沉淀，,Ca,2+,有保护和激活作用,，胰蛋白酶,pI,为,10.1,。,牛胰蛋白酶在,肠激酶,或,本身,催化下，释放出,6,肽，变成,有活性胰蛋白酶,。胰蛋白酶,分子量,24000,，由,223,个氨基酸残基组成。,胰蛋白酶,专一作用于由,碱性氨基酸精氨酸及亮氨酸羧基所组成肽键,。酶本身,很轻易自溶,。,酶类药物专题知识讲座,第27页,2,、生产工艺,（,1,）工艺路线：,酶类药物专题知识讲座,第28页,（三）糜蛋白酶（,Chymotrypsin,，,EC3.4.4.5,）,胰蛋白酶可激活糜蛋白酶原成,-,糜蛋白酶,。,2,、生产工艺,（,1,）工艺路线：,（,2,）工艺过程：,酶原加少许胰蛋白酶,，,pH7.6,酶类药物专题知识讲座,第29页,（四）尿激酶（,Urokinase,，,EC3.4.99.26,）,尿激酶，是一个,碱性蛋白酶,。由,肾脏,产生，主要存在于人及哺乳动物,尿中,。人尿平均含量,5,6,国际单位,m1,。,1,、组成（结构）性质,（,1,）尿激酶有各种分子量形式。尿中尿胃蛋白酶原，在,酸性条件下,能够激活生成,尿胃蛋白酶，,把天然尿激酶,降解,成为,尿激酶,。,（,2,）尿激酶是专一性很强,蛋白水解酶,，血纤维蛋白溶酶原是它,唯一,天然蛋白质底物，它作用于,精氨酸,-,缬氨酸键使纤溶酶原,转为纤溶酶。尿激酶也含有,酯酶活力,。,酶类药物专题知识讲座,第30页,（,3,）尿激酶,pI,为,pH8,9,，主要个别在,pH8.6,左右,。,溶液状态不稳定,，冻干状态可,稳定数年,。加入,1,EDTA,、,人血白蛋白或明胶,可预防酶,表面变性,作用。,2,、生产工艺,（,1,）工艺路线：,酶类药物专题知识讲座,第31页,（,2,）工艺过程：,硅藻土吸附，,0.02,氨水加,0.1mol,L,氯化钠洗脱。,QAE-Sephadex,层析柱 去热原、色素。,CMC,浓缩。,酶类药物专题知识讲座,第32页,（五）细胞色素,C,（,Cytochrome C,）,细胞色素,C,存在于自然界中一切生物细胞里，其含量与组织,活动强度成正比,。以哺乳动物,心肌,、鸟类,胸肌,和昆虫,翼肌,含量最多，,肝、肾,次之，皮肤和肺中最少。,1,、组成（结构）、性质,细胞色素,C,是,含铁卟啉,结合蛋白质,，,铁卟啉环,与蛋白质个别,百分比为,11,。猪心细胞色素,C,分子量,12200,。,pI,为,pH10.2,10.8,。,酶类药物专题知识讲座,第33页,细胞色素,C,对,干燥、热和酸,都较稳定。,氧化型,呈水溶液深红色，在饱和硫酸铵中可溶解。,还原型,水溶液呈桃红色，溶解度较小。,2,、生产工艺,（,1,）工艺路线：,酶类药物专题知识讲座,第34页,人造沸石,pH7.5,吸附,，蒸馏水和氯化钠溶液重复洗涤，,25,硫酸铵溶液洗脱,。,20,三氯醋酸沉淀细胞色素,C,，,Amberlite IRC,50,（,NH4,）树脂柱吸附。,酶类药物专题知识讲座,第35页,（六）溶菌酶（,Lysozyme,）,溶菌酶,，又称,胞壁质酶,或,N-,乙酰胞壁质聚糖水解酶,。它广泛存在于,鸟类和家禽,蛋清,、哺乳动物,泪、唾液、血浆、尿、乳汁、白细胞和组织（如肝、肾）细胞内,，其中以,蛋清含量最丰富,。,溶菌酶是一个含有,杀菌作用天然抗感染物质,，含有,抗菌、抗病毒、抗炎症,。,1,、组成（结构）和性质,溶菌酶是一,碱性球蛋白,，分子中,碱性氨基酸,、,酰氨残基,及,芳香族氨基酸,（如色氨酸）百分比很高。,酶类药物专题知识讲座,第36页,溶菌酶能催化,粘多糖,或,甲壳素,中,N-,乙酰胞壁酸和,N-,乙酰氨基葡萄糖之间,-1,，,4,糖苷键,。,溶菌酶是一个罕见,稳定蛋白质,。在,pH5.5,加热,4h,后，酶变得更活泼。,低浓度,Mn,（,10,-7,mol,L,）在,中性和碱性条件下,能使酶免受热失活作用。,酶类药物专题知识讲座,第37页,2,、生产工艺,（,1,）工艺路线,酶类药物专题知识讲座,第38页,（七）,L-,天门冬酰胺酶（,L-asparaginase,）,1,、组成（结构）、性质,L-,天门冬酰胺酶,是,酰胺基水解酶,，是从,大肠杆菌,菌体中提取分离酶类药品，用于治疗白血病。,性状呈白色粉末状，微有湿性，,溶于水,，不溶于,丙酮,、,氯仿,、,乙醚及甲醇,。,最适,pH8.5,，,最适温度,37,。,L-,天门冬酰胺酶产生菌是,霉菌和细菌,，故可作制造酶原料。,酶类药物专题知识讲座,第39页,2,、生产工艺,（,1,）工艺路线：,酶类药物专题知识讲座,第40页,（八）激肽释放酶（,Kallikrein,）,激肽释放酶,是一个,蛋白酶,。哺乳动物激肽释放酶有两大类：,血液激肽释放酶,和,组织激肽释放酶,。药用激肽释放酶又称,血管舒缓素,，主要来自,颌下腺或胰腺。,酶类药物专题知识讲座,第41页,猪胰激肽释放酶是一个,糖蛋白,，,含有唾液酸,，在腺体中以,酶原形式,存在。,唾液酸除去并不影响酶活性,。,（,1,）专一性,激肽释放酶是一个,内切蛋白水解酶,，当它作用于蛋白质底物,激肽原,后释放出,激肽,。激肽释放酶只作用于,天然激肽原,。,（,2,）稳定性,普通说，激肽释放酶,纯度越高,，,稳定性越差,。,在水溶液中不稳定，但在,pH8.0,水或缓冲液中，可在冷冻状态下保留相当长时间不失活。,酶类药物专题知识讲座,第42页,2,、生产工艺,（,1,）工艺路线：,（,2,）工艺过程：,冷丙酮,33,、,70,，用丙酮、乙醚,脱脂、脱水,。,40%,、,60%,冷丙酮 分级沉淀。,弱酸性阳树脂,Amberlite CG,50,（钠型）,酶类药物专题知识讲座,第43页,（九）超氧化物歧化酶（,Superoxide dismutase SOD,）,超氧化物歧化酶是一个主要氧,自由基去除剂,，作为药用酶在美国、德国、澳大利亚等国有产品，此酶属,金属酶,，它催化化学反应是：,因为,SOD,能专一去除,超氧阴离子自由基（,O,2,-,）,；故引发我国外生化界和医药界极大关注。当前,SOD,临床应用集中在本身免疫性疾病上如类风湿关节炎、红斑性狼疮、皮肌炎、肺气肿等；也用抗辐射，抗肿瘤、治疗氧中毒、心肌缺氧与缺血再灌注综合征以及一些心血管疾病。,酶类药物专题知识讲座,第44页,1,、组成（结构）、性质,(1)SOD,属金属酶,，,其性质不但取决于蛋白质个别，还取决于活性中心金属离子存在,。按金属离子种类不一样，,SOD,有,Cu,，,Zn-SOD,、,Mn-SOD,和,Fe-SOD,。三种酶都催化同一反应，但其性质有所不一样，其中,Cu,，,Zn-SOD,与其它两种,SOD,差异较大，而,Mn-SOD,与,Fe-SOD,之间差异较小。,（,2,）,SOD,活性中心和构象比较特殊，,金属辅基,Cu,和,Zn,与必需基团,His,等形成咪唑桥,。,（,3,）,SOD,理化性质,SOD,是一个金属蛋白，,所以它对热、对,pH,及在一些性质上表现出异常稳定性,。,酶类药物专题知识讲座,第45页,对热稳定性,SOD,对热稳定。但,SOD,对热稳定性与溶液,离子强度,相关，假如离子强度非常,低,，即使,加热到,95,，,SOD,活性损失亦极少。,pH,对,SOD,影响,SOD,在,pH5.3,10.5,范围,内其催化速度不受影响。如,pH3.6,时,SOD,中,Zn,要脱落,95,，,pH12.2,时,，,SOD,构象会发生,不可逆转变,，造成酶活性丧失。,吸收光谱,金属辅基与酶活性,SOD,是金属酶，,Cu,与,Zn,作用是不一样，,Zn,仅与酶分子结构相关,，而与催化,活性无关,，,而,Cu,与催化活性相关,，,透析去除,Cu,则酶活性全部丧失,，,一旦重新加入,Cu,，酶活性又可恢复,。一样，,Mn,和,Fe,与,Cu,一样，对酶活性是必需,。,酶类药物专题知识讲座,第46页,2,、生产工艺,（,1,）牛红细胞提取,Cu,，,Zn-SOD,生产工艺：,DEAE,SephadexA50,柱层析,酶类药物专题知识讲座,第47页,（十）弹性蛋白酶（,Elastase,）,弹性蛋白酶，又称,胰肽酶,，是一个,肽链内切酶,，广泛存在于哺乳动物,胰脏,。依据它,水解弹性蛋白,专一性,又称为,弹性水解酶,。,胰弹性酶原,合成于胰脏腺泡组织，经,胰蛋白酶,或,肠激酶,激活后才成为活性酶。,弹性蛋白酶有,降血脂,，预防,动脉斑块,形成，降血压，增加心肌血流量和提升血中,cAMP,含量等功效。,酶类药物专题知识讲座,第48页,1,、组成（结构）、性质,弹性蛋白酶为白色针状结晶，,分子量为,25000,，,pI,为,pH9.5,，其,最适,pH,通常为,7.4,10.3,。,结晶,弹性酶,难溶于水,，,电泳纯,弹性酶,易溶于水和稀盐溶液,（可达,50mg,ml,），在,pH4.5,以下,溶解度较小,，增加,pH,能够增加溶解度。,弹性酶在,pH4.0,10.5,，于,2,较稳定，,pH,6.0,稳定性有所增加，冻干粉于,5,可保留,6,12,个月。,在,-10,保留更为稳定。,弹性蛋白唯有,弹性酶才能水解。弹性酶除能水解,弹性蛋白,外还可水解,血红蛋白,、,血纤维蛋白,等。,酶类药物专题知识讲座,第49页,2,、生产工艺,（,1,）工艺路线：,（,2,）工艺过程：,Amberlite CG-50,树脂，,pH6.4,吸附，,pH9.3,，,0.5mol,L,氯化铵缓冲液洗脱。,酶类药物专题知识讲座,第50页,